Isolation of CNS Cell Types Using Magnetic Beads in Naive and EAE Mice

للبدء ، قسم تعليق خلايا الجهاز العصبي المركزي المنقى وغير المخفف إلى جزأين لمزيد من عزل الخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا قليلة التغصن. ثم أضف الميكروبيدات المسماة مغناطيسيا الخاصة بالمستضد السطحي لأنواع خلايا الجهاز العصبي المركزي المختلفة إلى تعليق الخلية المعني. ضع العمود في المجال المغناطيسي ، وقم بمساواة العمود ، ثم أضف تعليق الخلية الناتج على العمود.

سيتم الاحتفاظ بالخلايا ذات العلامات المغناطيسية داخل العمود ، وسيتم تشغيل الخلايا غير المسماة. بعد إزالة العمود من المجال المغناطيسي ، اغسل الخلايا ذات العلامات المغناطيسية من العمود إلى أنبوب باعتباره جزء الخلية المختار إيجابيا. قسم التدفق السالب من الخلايا قليلة التغصن إلى جزأين لمزيد من عزلة الخلايا العصبية والخلايا النجمية.

أدى تحليل قياس التدفق الخلوي باستخدام علامات محددة لنوع الخلية جنبا إلى جنب مع تمييز الخلايا الحية أو الميتة إلى الخلايا الدبقية الصغيرة ، والخلايا قليلة التغصن ، والخلايا النجمية ، والخلايا العصبية. أثبت التوصيف الظاهري لمجموعات الخلايا المختلفة أنه تم الحصول على معلقات خلية واحدة بنقاوة وصلاحية بنسبة 90٪ تقريبا لجميع أنواع الخلايا المقيمة الرئيسية في الجهاز العصبي المركزي.