تحضير وتحليل عينات كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة من رهوديولا كرينولاتا والمركبات المرجعية

للبدء ، قم بوزن ثلاثة جرامات من مسحوق رهوديولا كرينولاتا وانقله إلى زجاجة مخروطية سعة 100 ملليلتر. باستخدام ماصة وعاء كبيرة ، أضف 25 ملليلترا من الميثانول في الزجاجة. ضع الزجاجة في أداة الموجات فوق الصوتية.

اضبط الطاقة على 250 واط ، والتردد على 40 كيلو هرتز ، والوقت على 30 دقيقة ، وابدأ الموجات فوق الصوتية. بعد ذلك ، اشطف الجزء الخارجي من الزجاجة تحت الماء الجاري حتى تصل إلى درجة حرارة الغرفة. قم بتصفية المحلول من خلال غشاء ميكروبوروس 0.22 ميكرون.

باستخدام حقنة سعة ملليلتر واحد ، قم بشفط 800 ميكرولتر من السائل من الزجاجة واجمع 400 ميكرولتر من محلول منتصف الطريق في زجاجة عينة كروماتوغرافية. قم بقياس وإضافة ملليغرام واحد من الساليدروسيد ، و 0.5 ملليغرام من التيروسول ، و 0.5 ملليغرام من حمض الغال في ثلاث قوارير حجمية منفصلة سعة ملليلتر واحد. ثم املأ كل قارورة بالمقياس المميز بالميثانول.

قم بفحص العينات في أداة الموجات فوق الصوتية باستخدام الشروط الموضحة سابقا. بعد الموجات فوق الصوتية ، نضح 800 ميكرولتر من السائل من القارورة. قم بتصفية المحلول من خلال غشاء صغير يسهل اختراقه بحجم 0.22 ميكرومتر وجمع 400 ميكرولتر من الترشيح في الزجاجة.

أضف ثلاثي كلورو ميثان وخلات الإيثيل والميثانول وحمض الفورميك على جانب واحد من أسطوانة كروماتوغرافيا الخزان المزدوجة. رج الأسطوانة لخلط المحتويات بالتساوي وقم بتغطية رأس الأسطوانة العلوي. رتب محاليل حمض الغال والساليدروسيد والتيروسول القياسية ومحلول الكرينولاتا الخاص بنا على رف العينة في المواضع من A1 إلى A4. ضع ورقة سيليكون 5 × 10 سم على طاولة أخذ العينات.

قم بتشغيل آلة أخذ العينات الأوتوماتيكية وافتح صمام التحكم في الهواء. اضغط على زر متابعة لأخذ العينات تلقائيا. بعد أخذ العينات ، قم بإيقاف تشغيل الجهاز وصمام الهواء.

قم بإزالة ورقة السيليكون من الجهاز. ضع ورقة السيليكون في الجانب الآخر من أسطوانة كروماتوغرافيا الخزان المزدوجة. قم بتغطية رأس الأسطوانة العلوي وتشبعه مسبقا لمدة 20 دقيقة.

بعد ذلك ، استخدم ملقط لتثبيت الطرف العلوي من لوحة الطبقة الرقيقة ووضع ورقة السيليكون بسرعة في عامل التطوير. بمجرد أن يتبخر المذيب العضوي ، قم برش ورقة السيليكون بمحلول كروموجينيك. أظهر التحليل الكروماتوغرافي للطبقة الرقيقة أن عينة R.crenulata ظهرت في بقع من نفس اللون ، تتوافق مع معايير حمض الغال والساليدروسيد والتيروسول.