Preparing Grid-Sized MMA-Coated CVD Graphene Squares for Attaching to CryoEM Grids

ابدأ بقطع مربعات الجرافين المطلية بميثيل ميثاكريلات أو MMA إلى قطع بحجم الشبكة. للقيام بذلك ، استخدم مجموعتين من ملقط الحركة العكسية لدعم مربع الجرافين CVD ، مع التأكد من أن جانب MMA مواجه لأعلى أثناء ربطه بالملقط. لتقطيع الجرافين إلى مربعات صغيرة ، استخدم مجموعتين من ملقط الحركة العكسية لتثبيت الجانب الأيمن من الجرافين لأعلى ، وتثبيته في موضعه ، وكذلك لتثبيت حافة المربع الصغير بعد قطعه بعيدا عن بقية المربع الكبير.

قم بإمالة الكأس الزجاجية التي تحتوي على الأمونيوم لكل كبريتات ، أو APS ، لوضع المربعات فيها بزاوية ضحلة دون غرق. ثم اختر مربعا واجعله يلامس سطح APS الحل قبل إطلاقه. بعد تغطية الدورق بورق الألمنيوم، احتضنه طوال الليل عند 25 درجة سلزية.

بعد ذلك ، لإزالة أفلام الجرافين MMA من APS الحل ، أولا ، قم بغمر غطاء زجاجي ينزلق عموديا في المحلول ثم حركه بشكل جانبي بحيث يلامس مربعا عائما. ثم قم بإزالة زلة الغطاء بعناية مع التأكد من أن الفيلم يلتصق تماما بجانب انزلاق الغطاء عند الإزالة. اغمس الغطاء عموديا في الماء الجزيئي في دورق سعة 50 ملليلتر لإزاحة الفيلم المرفق في الماء.

بطريقة مماثلة ، انقل جميع الأفلام إلى الدورق. اترك الأفلام تبقى في الدورق لمدة 20 دقيقة قبل أن تصبح جاهزة للالتصاق بشبكات التبريد EM.