الفحص المجهري داخل الفوتون ثنائي الفوتون في نموذج الماوس للورم الأرومي الدبقي

ابدأ بحقن خلايا الورم الدبقي C6 في مناطق الدماغ السطحية للفئران لإنشاء نموذج فأر للورم الأرومي الدبقي. ثم قم بإصلاح شريط الرأس في نافذة الجمجمة والسماح للفئران بالتعافي. بعد ذلك ، قم بحقن الجسيمات النانوية الفلورية في الوريد في الماوس لإجراء تصويرين للفوتون في الدماغ.

قم بتشغيل ليزر Ti: sapphire على الفور ومفتاح النظام الرئيسي. ثم قم بتشغيل برنامج عرض البراري. الآن شل حركة الماوس تحت مجهر الفوتون اثنين في مرحلة مخصصة.

ضع في وضع عرضة على وسادة ساخنة وقم بتثبيته بالشريط دون تضييق الصدر. أضف قطرة ماء إلى نافذة الجمجمة واضبط التركيز. لمراقبة معدل ضربات قلب وأكسجة الدم ، ضع المستشعر على مخلب الخلفي.

اضبط موضع الرأس. باستخدام مرشح RFP ، حدد مجال التصوير المطلوب. بمجرد تحديد اتجاه العينة ومجال العرض ، قم بتبديل المجهر من وضع المجال الواسع إلى وضع الفحص المجهري للضوء.

تأكد من قفل ليزر Ti: sapphire عند 920 نانومتر وافتح جميع المصاريع. اضبط الفولتية PMT اللهاث على 500 إلى 600 فولت. اضغط على الصورة الحية في البرنامج لبدء التصوير.

بعد الحصول على صورة واضحة ، استخدم البرنامج والمرحلة الآلية لتعيين الجزء العلوي والسفلي من مكدس الصور في البرنامج. قم بزيادة الثقوب أو كسب PMT ببطء للتعويض عن الظلام في الأعماق المتزايدة. قم بتعيين مسار حفظ وابدأ سلسلة Z.

بمجرد اكتمال المكدس ، استخدم التشغيل لمراجعة المكدس للتأكد من جودته. بمجرد الانتهاء من التصوير ، انقل إلى قفص التعافي. اخرج من عرض Prairie ، وتأكد من حفظ جميع البيانات ونقلها ، ثم قم بإيقاف تشغيل الكمبيوتر وجميع الأجهزة.

خضع عدد محدود من الجسيمات للتسرب وأصبح مرئيا بالقرب من الخلايا السرطانية بعد 10 دقائق من إعطاء الجسيمات النانوية. ومع ذلك ، بعد 24 ساعة من إعطاء الجسيمات النانوية ، تظهر وفرة من الجسيمات في الورم الأرومي الدبقي ، مما يشير إلى التسرب.