ابدأ بفتح صور الميتوكوندريا ذات الفاصل الزمني في الصورة J2.1.0. افصل مكدسات المواضع بناء على المجال المرئي بالانتقال إلى شريط القائمة والنقر فوق صورة. ثم انتقل إلى تكرار أو إدخال شريحة أو رقم الإطار وانقر فوق موافق. بعد ذلك ، ارسم منطقة اهتمام حول الخلية باستخدام أداة التحديد المجانية.
لتشغيل الماكرو ، افتح Image J ، وانتقل إلى شريط القائمة وانقر على المكونات الإضافية ووحدات الماكرو والتشغيل. ثم حدد مسح الخلفية واحفظ ماكرو الصورة. لتحديد حجم البيكسل وعمق الفوكسل، افتح Image J وحدد صورة.
قم بالوصول إلى شريط القائمة ، وحدد صورة ، وانقر فوق خصائص. بعد تحديد حجم البكسل وعمق الفوكسل ، ارسم منطقة اهتمام تشمل الخلية بأكملها باستخدام أداة التحديد الحر لتضمين الخلية بأكملها في جميع الإطارات ال 15. انتقل إلى شريط القائمة ، وانقر فوق المكونات الإضافية ووحدات الماكرو وحدد مسح الخلفية ، واحفظ ماكرو الصورة.
اختر مجلد الحفظ المطلوب ، وانقر فوق حفظ لتخزين الملف بتنسيق TIFF. بعد ذلك ، قم بإنشاء ثلاثة مجلدات رئيسية بعنوان جميع المسارات والمسارات المحيطة بالنواة والمسارات النووية عن بعد. قم بإنشاء مجلد فرعي مرقم لكل صورة لمعالجتها داخل كل مجلد رئيسي ، بدءا من مجلد واحد.
أضف نسخة من الملفين التكميليين للتحسين الروتيني إلى كل مجلد صورة. لتحديد إصدار ملف mat الافتراضي أو تغييره ، انتقل إلى علامة التبويب الصفحة الرئيسية في قسم البيئة وانقر فوق التفضيلات. ثم حدد MATLAB.
افتح برنامج MATLAB على الكمبيوتر ، وانتقل إلى شريط القوائم ، وحدد التطبيقات ، وافتح Mitometer. حدد Start 3D واضبط حجم البكسل على 0.1395089 ميكرومتر ، والوقت بين الإطارات إلى 15 ثانية ، وعدد المستويات z إلى 8 ، والمسافة المحورية بين طائرات z إلى 0.418809 ميكرومتر. حدد الصور لإدخالها.
الآن ، انتقل إلى القائمة الجانبية لمقياس Mitometer ، وحدد صورة ، وانقر فوق تحديد مميز. انتقل إلى شريط قوائم Mitometer ، واختر تحديد المسارات متبوعا بمشاهدات المسار. ثم اختر من بين جميع المسارات أو النواة عن بعد أو الخيارات المحيطة بالنواة.
احفظ النتائج في ملف نصي عن طريق تحديد حفظ إلى txt، واستخرج ملفات النتائج إلى المجلدات التي تم إنشاؤها. قم بإعداد ملف xlsx العشوائي ، والذي يحتوي على مفتاح ترميز الصورة. أدخل سلسلة من الأعداد الصحيحة المتتالية ، بدءا من واحد ، في العمود A ، املأ العمود B بأحرف أبجدية رقمية ، والتي تشكل المتغيرات التحليلية.
انقر نقرا مزدوجا فوق mlx القابل للتنفيذ ، وأدخل عدد المجلدات ، وانقر فوق تحديد دليل المجلد ، وحدد حفظ الدليل. حدد اسم جدول البيانات في ملف الإخراج وانقر فوق تشغيل. بعد ذلك ، قم بإجراء التحليل الإحصائي اللازم.
يتم تقديم صور تمثيلية للميتوكوندريا بعد العلاج ، ومخططات السطح ذات الصلة ، والتجزئة الآلية. لوحظ انخفاض كبير في متوسط طول الميتوكوندريا في الخلايا المعالجة ب AM580. انخفضت مساحة سطح الميتوكوندريا بشكل ملحوظ في الخلايا المعالجة ب AM580 و BMS493.
أظهرت كثافة TMRM الطبيعية لحجم الميتوكوندريا انخفاضا كبيرا في الخلايا المعالجة بحمض الريتينويك و CH55.
