للبدء ، قم بتصوير PDOs ذات العلامات الفلورية باستخدام نظام تصوير الخلايا الحية Cytation 5. ثم قم بتشغيل برنامج Gen5. انتقل إلى التجارب وانقر على فتح في إدارة المهام.
افتح التجربة المطلوبة وحدد Plate ، متبوعا ب View في شريط الأدوات. بعد ذلك ، قم بتبديل القائمة المنسدلة للبيانات إلى Z Projection. انقر نقرا مزدوجا فوق البئر المختار.
حدد تحليل. انقر ، أريد إعداد خطوة جديدة لتقليل بيانات تحليل الصور ، وانقر فوق OK.In إعدادات التحليل ، واضبط النوع على التحليل الخلوي وقناة الكشف إلى Z Projection المحول TSF Brightfield. انقر فوق خيارات لفتح صفحة القناع الأساسي والعدد.
تحقق تلقائي في مربع العتبة ، وانقر فوق "موافق" لإغلاق النافذة المنبثقة. ضمن تحديد الكائن، حدد الحد الأدنى والحد الأقصى لأحجام الكائنات لتصفية الحطام الخلوي أو الخلايا المفردة، وحدد معالم أخرى حسب الرغبة. بعد ذلك ، انقر فوق تطبيق وسيتم تمييز الكائنات المقنعة.
لإعداد تحليل مجموعة سكانية فرعية في شريط أدوات التحليل الخلوي ، انقر فوق المقاييس المحسوبة. بعد ذلك، انقر على تحديد أو إنشاء مقاييس على مستوى الكائن موضع الاهتمام في الزاوية السفلية اليسرى. من مقاييس الكائن المتاحة، اختر المقاييس المطلوبة، مثل الدائرية، وانقر على إدراج.
انقر فوق موافق للتأكيد. بعد ذلك، حدد تحليل السكان الفرعيين في شريط أدوات التحليل الخلوي، وانقر فوق إضافة لإنشاء مجموعة سكانية فرعية جديدة. أدخل اسما للسكان الفرعي.
في مقاييس الكائن، انقر على إضافة شرط لإضافة مقياس مختار. أدخل المعلمات المطلوبة في نافذة تحرير الشرط، وانقر فوق موافق. حدد النتائج المرجوة في الجدول أسفل النافذة وانقر فوق موافق ، متبوعا بتطبيق. ضمن تفاصيل الكائن، حدد المجتمع الفرعي المعين لعرض التقنيع.
إذا كنت راضيا، انقر فوق موافق في نافذة التحليل الخلوي، وانقر فوق إضافة خطوة لتطبيق التحليل على جميع الآبار.