للبدء ، خذ شبكية العين المعزولة في طبق 24 بئر مملوء بالماء المقطر المزدوج. بعد ذلك ، استبدل الماء المقطر المزدوج ب 800 ميكرولتر من محلول YL Trypsin واحتضانه عند 37 درجة مئوية مع رج لطيف أو بدون رج لمدة 4 ساعات و 15 دقيقة. باستخدام ماصة نقل الزجاج المغموسة في محلول YL Trypsin ، انقل شبكية العين إلى طبق بتري 35 ملم يحتوي على ماء مقطر مزدوج خال من النسالة.
لإزالة الطبقة النووية الخارجية ، اقلب نصف كرة الشبكية لأسفل واستخدم فرشاة شعر واحدة مستقيمة للضغط عليها برفق في قاع الطبق. استخدم فرشاة حلقية لإزالة المستقبلات الضوئية لشبكية العين برفق. بعد ذلك ، لإزالة الجسم الزجاجي ، اقلب نصف كرة الشبكية لأعلى.
استخدم ملقط منحني للإمساك بالجسم الزجاجي تحت مجهر تشريح. باستخدام ملقط منحني آخر ، أمسك نهاية الجسم الزجاجي حيث يربط العصب البصري. اسحب الملقطين بعيدا عن بعضهما البعض لإزالة الجسم الزجاجي والتخلص منه.
ثم اقلب شبكية العين لأسفل مرة أخرى واستخدم الفرشاة المستقيمة للضغط عليها برفق في قاع الطبق. بعد ذلك ، استخدم فرشاة الحلقة لتنظيف الأوعية الدموية من رأس العصب البصري باتجاه المحيط لإزالة الأنسجة العصبية المتبقية. أدر الشبكية ببطء باستخدام الفرشاة المستقيمة واستخدم الفرشاة الحلقية لإزالة جميع الأجزاء الصغيرة من الأنسجة العصبية حتى تصبح شبكة الأوعية الدموية نظيفة.
لتركيب الأوعية الدموية في الشبكية ، استخدم الفرشاة الحلقية لقلب نصف كرة الشبكية المتجهة لأعلى وادفع الأوعية الدموية برفق لأسفل على الشريحة الزجاجية. ثم استخدمي الشعر للصق الأوعية الدموية المفتوحة على وسط الشريحة. قم بتنظيف وعاء الشبكية على شكل وعاء من العصب البصري إلى المحيط لتركيب الأوعية الدموية بشكل مسطح.
كرر تنظيف الأسنان بالفرشاة في جميع الاتجاهات حتى تلتصق الأوعية الدموية بالشريحة تماما.
