للبدء ، اجمع الكريات البرازية من الفئران المستعمرة الأحادية الملقحة بالإشريكية القولونية الملقحة T4 في أنبوب طرد مركزي صغير معقم قبل وزنه. سجل الوزن النهائي للأنبوب واحسب وزن العينة بطرح وزن الأنبوب الأولي. أضف ملليلتر واحد من المخزن المؤقت SM المعقم إلى الأنبوب والدوامة بأقصى سرعة لتجانس الكريات البرازية.
سجل حجم المخزن المؤقت SM المضاف إلى كل عينة لوحدات تشكيل المستعمرة أو حسابات CFU أو PFU لكل جرام. قم بإعداد سلسلة من ثمانية تخفيفات تسلسلية من 20 ميكرولتر من كل عينة في 180 ميكرولتر SM buffer. حدد خمسة ميكرولترات من كل تخفيف على لوحة أجار LB تحتوي على E.coli أو ألواح أجار LB فقط لتحديد تركيز T4 phage و E.coli.
اترك كل بقعة تجف قبل قلب الألواح واحتضانها طوال الليل عند 37 درجة مئوية. في اليوم التالي ، حدد التخفيف بثلاث إلى 30 لوحة قابلة للعد لكل بقعة. عد وسجل عدد اللويحات والتخفيفات المستخدمة.
قسم عدد اللويحات على الحجم المطلي في كل بقعة لإعطاء PFU لكل ميكرولتر. اضرب هذا في عامل التخفيف وحجم المخزن المؤقت SM المضاف إلى كل عينة ل PFU لكل عينة. أخيرا ، اقسم على وزن العينة للحصول على PFU لكل جرام من العينة.
أظهرت مستويات T4 phage و E.coli المكتشفة في الفئران ، والتي تم حقنها باثنين في 10 إلى PFU السادس من T4 phage أو محللة مركبة التعايش بين T4 phage و E.Coli دون استنفاد أي من السكان على مدى أربعة أسابيع. لم تؤثر الجرعات المنخفضة من T 4 phage على الاستعمار مقارنة باثنين في 10 إلى PFU السادس ولم يلاحظ أي تأثير يعتمد على الجرعة على مستويات E.coli.
