للبدء ، أدخل الجزء السفلي من طرف ماصة مقطوع سعة 200 ميكرولتر في جهاز محاصرة الموائع الدقيقة المصنوع مسبقا. ماصة ، باستخدام حقنة مجهزة بفلتر 0.2 ميكرومتر ، لحقن 400 ميكرولتر من محلول بيتا كازين في خزان مدخل الرقاقة. أجهزة الطرد المركزي رقاقة في 900 غرام لمدة ست دقائق.
يجب أن يكون مستوى السائل الآن متساويا في كل من المدخل والمخرج. ارسم مخططا للفاصل على شريحتين موضوعيتين. نظف الشرائح ببلازما عالية الأكسجين لمدة دقيقة واحدة لجعلها محبة للماء.
أضف أغاروز بدرجة حرارة التبلور المنخفضة أعلى الشريحة حتى يتم تغطيتها بالكامل بالأغاروز. ثم قم بإمالة الشريحة بزاوية 90 درجة واستنزاف الأغاروز الزائد على منديل. ضع الشرائح على حرارة 50 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
مع صوتنة مسبار محمول باليد ، ومجهزة بمسبار ملليمتر واحد ، صوتنة البروتينات المعدة. احتفظ بسيارات الدفع الرباعي البروتينية على الجليد لمدة 30 ثانية قبل تكرار الصوتنة خمس مرات. باستخدام حقنة سعة 100 ميكرولتر ، قم بإيداع قطرات 0.5 ميكرولتر من سيارات الدفع الرباعي البروتينية على هلام أغاروز معد.
استخدم تدفق النيتروجين لمدة 10 دقائق لتجفيف القطرات. باستخدام حقنة وإبرة ، قم بامتصاص محلول التورم في غرفة محضرة من خلال ثقب صغير في الجانب ، واترك الحويصلات تنتفخ عند 22 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة على الأقل. اضغط على الحجرة على سطح صلب لحصاد GUVs من الجل.
لاحتجاز GUVs للفحص المجهري ، قم بتركيب شريحة الموائع الدقيقة المخملة على المجهر. بعد التحقق من وجود عيوب ، قم بتوصيل الأنبوب بإبرة منحنية بمخرج الخزان. بعد توصيل الطرف الآخر بحقنة ملليلتر واحد ، قم بتركيب المحقنة على مضخة بمعدل تدفق أقصى يبلغ 10 ميكرولتر في الدقيقة.
استبدل المخزن المؤقت للغسيل في الخزان بوسط جديد. اغسل بما لا يقل عن 80 ميكرولتر من المخزن المؤقت P.بعد إزالة المخزن المؤقت الزائد ، أضف البروتيو GUVs إلى الخزان. راقب الشريحة بمرور الوقت حتى يتم احتجاز عدد كاف من GUVs في الشريحة.
ماصة من محلول GUV الزائد. ثم أضف المخزن المؤقت للغسيل P بمعدل تدفق 0.1 إلى ميكرولتر واحد في الدقيقة. أخيرا ، قم بتوطين الفخاخ بكمية كافية من الحويصلات.
بعد تطبيق الإعدادات على المجهر ، أضف المخزن المؤقت R إلى الخزان بمعدل تدفق 0.5 ميكرولتر في الدقيقة. أدت معالجة الجفاف للبروتيو المجفف LUVs على هلام الأغاروز بدرجة حرارة منخفضة إلى تكوين حويصلات بحجم ميكرومتر. تم حصاد GUVs واحتجازها في جهاز الموائع الدقيقة المخمل بيتا كازين.
