اقتران ACE2 والأجسام المضادة للتحكم في الكريات المجهرية المغناطيسية لالتقاط الجسيمات الفيروسية من الخلايا المصابة بفيروس SARS-CoV-2

للبدء ، قم بإعداد محلول العمل ل NeutrAvidin في مخزن MES المؤقت في أنبوب microfuge منخفض البروتين سعة 1.5 ملليلتر. ثم قم بإعداد محلول العمل للجلوبيولين المناعي G للتحكم في الجسم المضاد للماعز في المخزن المؤقت MES. دوامة محلول الأجسام المضادة المخفف ، وأجهزة الطرد المركزي الأنبوب.

بعد ذلك ، خذ لوحة Microtiter التي تحتوي على حبات نشطة وضعها على فاصل لوحة مغناطيسية لمدة 30 ثانية لشل حركة الخرز. مع استمرار وضع لوحة Microtiter على الفاصل المغناطيسي ، قم بنضح المادة الطافية من حبات المغناطيس الثابتة. ثم أضف 100 ميكرولتر من محلول NeutrAvidin ومحلول الأجسام المضادة ومخزن MES المؤقت إلى الآبار المناسبة التي تحتوي على الخرز.

أغلق لوحة Microtiter واحتضانها لمدة ساعتين على شاكر مداري عند 650 دورة في الدقيقة في الظلام في درجة حرارة الغرفة. ثم اغسل الخرز باستخدام PBST باستخدام غسالة آلية. بعد الحضانة بين عشية وضحاها ، قم بإعداد محلول عمل ACE2 و biotinylated البشري المؤتلف في 10 مللي مولار PBS.

شل حركة الكريات المجهرية على فاصل اللوحة المغناطيسية لمدة 30 ثانية ، واستنشاق المادة الطافية من الكريات المجهرية المغناطيسية ، كما هو موضح سابقا. قم بإزالة لوحة Microtiter من الفاصل المغناطيسي ، وأضف 50 ميكرولترا من 10 مللي مولار PBS إلى كل بئر. ثم أضف 100 ميكرولتر من محلول عمل ACE2 والبيوتين إلى الآبار المناسبة التي تحتوي على كريات مجهرية مترافقة من NeutrAvidin.

أغلق لوحة Microtiter ، واحتضانها لمدة ساعة واحدة على شاكر مداري ، كما هو موضح سابقا. بعد غسل الكريات المجهرية ، قم بتخزين الكريات المجهرية المترافقة ACE2 والبيوتين.