للبدء ، قم بإعداد جميع المواد المطلوبة للفحص. بالنسبة لمعايير GSH ، أضف 40 ميكرولترا من إجمالي محلول الجلوتاثيون إلى كل بئر. بعد ذلك ، قم باستنشاق الوسائط من كل بئر من صفيحة تحتوي على حبيبات الخلية واغسل الخلية ثلاث مرات باستخدام برنامج تلفزيوني بارد مثلج.
قم بإعداد نطاق المعايرة ب 10 ميكرولتر من الجلوتاثيون والماء المقطر المزدوج فارغا في ثلاث نسخ. للقياس الكمي المستهدف المطلوب ، احتضان الخلايا المغسولة بالخلائط المناسبة في شاكر مداري عند 300 دورة في الدقيقة لمدة دقيقتين. ثم أضف خمسة ميكرولترات من 0.01 تريس مولار ، محلول 2-كربوكسي إيثيل فوسفين لكل بئر ، واحتضان مرة أخرى لمدة 10 دقائق.
بعد ذلك ، قم بطرد مركزي اللوحة عند 200 جرام لمدة خمس دقائق ونقل 25 ميكرولترا من كل بئر عينة إلى صفيحة منفصلة صافية من 96 بئرا لقياس كمية البروتين. ثم أضف 170 ميكرولترا من محلول أورثو فثالدهيد العامل إلى كل بئر يحتوي على 30 ميكرولتر من العينات. لحماية اللوحة من الضوء ، قم بتغطيتها جيدا بورق واحتضانها في شاكر المداري لمدة 15 دقيقة.
أخيرا ، اقرأ التألق باستخدام قارئ الألواح عند إثارة 340 نانومتر وانبعاث 450 نانومتر. أظهرت خلايا A549 المعالجة بمواد نانوية مختلفة نسب ثاني كبريتيد الجلوتاثيون مختلفة في هذا الفحص ، ولوحظت أعلى قيمة للخلايا المعالجة ب 125 ميكروغرام لكل ملليلتر من الفضة.
