ابدأ بإعداد عينة بمركب بروتين يجند. ثم ، باستخدام ماصة ، انقل بعناية 0.6 ملليلتر من المحلول المحضر إلى أنبوب NMR سعة خمسة ملليلترات. لإعداد أداة الرنين المغناطيسي النووي إلى درجة الحرارة المطلوبة ، استخدم الأمر EDT لفتح شاشة التحكم في درجة الحرارة وضبط درجة الحرارة المطلوبة.
ثم ضع العينة عند مبدل العينة. استخدم جهاز أخذ العينات التلقائي لإدخال العينة في المغناطيس وتشغيل الأمر sx ، متبوعا برقم الموضع ، N ، المقابل لموضع أنبوب الرنين المغناطيسي النووي في درج أخذ العينات التلقائي. بعد ذلك ، تدخل العينة مغناطيس الرنين المغناطيسي النووي.
لقفل إشارة المذيب ، اكتب أمر القفل وحدد المذيب المناسب من القائمة. استخدم إما الوحدة التلقائية ، atma ، أو الوحدة اليدوية ، atmm ، لإكمال عملية الضبط والمطابقة. الآن ، باستخدام الأمر topshim ، ابدأ اللمعان التلقائي ، ثم نفذ الأمر النبضي لتحديد نبضة البروتون 90 درجة.
بعد ذلك ، قم بإنشاء مجموعة بيانات جديدة وتحميل تسلسل نبض STD NMR. حدد ترددات الرنين وإيقاف التشغيل لتجربة الرنين المغناطيسي النووي STD ضمن إدخال FQLIST في نافذة ACQUPARS. اضبط تردد الرنين في منطقة لا تحتوي على أي إشارات بروتون يجند أو بروتين.
ثم اختر تردد الرنين في منطقة طيفية خالية من إشارات الجليكان. حدد النبضة المشكلة التي سيتم استخدامها أثناء وقت التشبع في معلمات ACQUPARS لنافذة ASED. بعد ذلك ، اضبط طول نبضة البروتون 90 درجة ، واضبط إجمالي وقت التشبع وتأخير الاسترخاء إلى ثلاث ثوان.
اضبط عدد عمليات الفحص على مضاعف ثمانية وعمليات الفحص الوهمية على ثمانية. بعد ذلك ، قم بتعيين عدد النقاط في F2 إلى 16K أو 32K أو 64K و F1 إلى اثنين. الآن ، باستخدام الأمر التلقائي rga ، اضبط كسب جهاز الاستقبال لتجنب تجاوز السعة.
احسب إجمالي وقت التجربة باستخدام أمر التجربة. أخيرا ، استخدم الأمر zg لإرسال التجربة للاكتساب. بعد التجربة ، قم بإجراء تحويل فورييه لأول FID ، وحدد وجهة الأطياف المعالجة.
ثم ، باستخدام الأمر lb ، اضبط عامل توسيع الخط. لتقسيم الطيف يدويا، قم بالوصول إلى علامة تبويب العملية، ثم القائمة الفرعية ضبط المرحلة. انقر واسحب الزر المقابل لإجراء تصحيحات صفرية ومن الدرجة الأولى وحفظ نتائج المراحل.
بعد إجراء تحويل فورييه للتجربة الثانية ، احفظ الطيف المعالج برمز مختلف. قم بتحميل الطيفين المعالجين بالوظائف المتعددة ، وباستخدام زر الطرح المتاح في التصور المتعدد ، اطرحهما. بعد ذلك ، افتح طيف الرنين المطفأ وقم بتنفيذ الأمر MD لبدء نافذة العرض المتعددة.
بعد ذلك ، قم بتحميل طيف الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. بعد ذلك ، قم بإجراء تحليل مقارن لترددات وشدة الإشارات الموجودة في طيف الرنين المغناطيسي النووي STD. في تجربة إيقاف الرنين ، قم بقياس شدة الإشارة.
انتقل عبر القائمة لتحديد العملية ، ثم التكامل. حدد بعناية مناطق الاهتمام وسجل التكاملات في ملف. وبالمثل ، قم بقياس الشدة في تجربة الرنين المغناطيسي النووي STD ، مع التأكد من استخدام معلمات متطابقة ، وتوثيق هذه التكاملات في ملف منفصل.
بدلا من ذلك ، يمكن تحديد قيم الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي من خلال مقارنة شدة الإشارة بين أطياف الأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي والرنين. لحساب الأمراض المنقولة جنسيا النسبية كنسبة مئوية ، قم بتعيين قيمة 100٪ للبروتون الذي يظهر أقصى كثافة للأمراض المنقولة بالاتصال الجنسي. أظهر طيف البروتون STD NMR لتفاعل أمين اللاكتوز N-acetyl ، مع galectin 7 البشري ، إشارات STD NMR تشير إلى الارتباط.
علاوة على ذلك ، ظهرت إشارات تنتمي إلى البروتونات على اتصال وثيق بالبروتين ، مما يسمح بتحديد حاتمة الربط.
