تمايز الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للفأر للبحوث العلاجية

لإجراء التوصيف الوظيفي للخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للفأر عن طريق التمايز العظمي ، قم أولا بفصل الخلايا باستخدام التربسين EDTA. جمع الخلايا التربسينية في أنبوب مخروطي. بعد ذلك ، ضع الخلايا في آبار لوحة جدارية سداسية ذات وسط قاعدي.

احتضان الألواح عند 37 درجة مئوية تحت مكملات ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5٪. بعد 24 ساعة ، استبدل الوسط بوسط عظمي. ثم تلطيخ الخلايا مع وصمة عار فون كوسا لتقييم العقيدات المعدنية.

اغسل الخلايا مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني بعد استنشاق الوسط. إصلاح الخلايا في ملليلتر من 70 ٪ من الإيثانول بين عشية وضحاها في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك ، أضف ملليلتر من محلول نترات الفضة بنسبة 5٪ في الآبار.

بعد غسل الخلايا بالماء المقطر ، احتضان الخلايا في ملليلتر من 5 ٪ ثيوسلفات الصوديوم لمدة خمس دقائق. قم بتلطيخ الخلايا المغسولة بملليلتر من اليوزين لمدة 40 ثانية. بعد غسل البقعة ، ضع اللوحة تحت المجهر الضوئي لعرض خلايا البقعة.

أظهرت الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية قدرة متعددة على التمايز إلى بانيات العظم والأرومة الشحمية والأرومات الغضروفية. أظهرت صبغة فون كوسا وجود عقيدات معدنية مميزة لبانيات العظم. أظهرت الخلايا الشحمية وجود فجوات دهنية في سيتوبلازم الخلايا الجذعية بينما كشف تلطيخ ألسيان الأزرق عن وجود الجليكوزامينوجليكان في المصفوفة خارج الخلية.