للبدء ، قم بتشغيل برنامج تحليل البيانات على كمبيوتر سطح المكتب. انقر فوق ملف ، متبوعا بالمتصفح واختر تحديد مجلد لفتح المجلد الذي يحتوي على بيانات التصوير المكتسبة. حدد صفوفا متعددة متعلقة بالصور المختارة، بما في ذلك عناصر التحكم غير المصابة واستبعاد الصور فائقة التشبع.
اكتب معرف الصورة في دفتر ملاحظات المختبر مع المعلومات المسجلة أثناء جلسة التصوير الثانية. انقر فوق تحميل كمجموعة لتجميع الصور المحددة. انقر الآن على أيقونة الحفظ لحفظ صورة التسلسل الجديدة في مجلد جديد لإعادة تحليل البيانات الأولية إذا لزم الأمر.
بعد ذلك ، انقر فوق الخيارات متبوعة بالعرض وحدد عامل binning لتحديد binning المستخدم لكل صورة. سيتم عرض عامل binning المكتسب في الجزء العلوي من كل صورة في التسلسل. لتصحيح جميع عوامل binning إلى نفس القيمة ، أولا ، انقر نقرا مزدوجا فوق الصورة المراد ضبطها.
في نافذة الأداة ، انقر فوق خيار ضبط الصورة ، ثم اختر عامل التجميع المناسب. انقر نقرا مزدوجا فوق صورة الفئران غير المصابة ، ثم حدد عدد الخيارات في حقل الوحدة. اضبط مقياس اللون إلى قيمة لا تقل عن 600.
اختر خيارات السطوع في حقل الوحدات لعرض إشراق الصورة الناتجة. مع تنشيط نافذة التسلسل، اختر خيار الإشعاع في حقل الوحدات. قم بتعطيل المربع المنفرد في مساحة حدود مقياس اللون لضبط مقياس اللون وجدول الألوان في لوح الأداة.
ضع علامة على المقياس اللوغاريتمي والمربعات اليدوية ، ثم قم بتعيين الحد الأقصى لأرقام المقياس وفقا لعنصر التحكم غير المصاب والمنطقة ذات الإشارة الأعلى كحد أقصى. بعد تعيين نفس المقياس لجميع الصور ، انقر نقرا مزدوجا فوق كل صورة ، وقم بتكبير النافذة ، واستخدم خيار تصدير الرسومات لتصدير عرض الصورة بتنسيق صورة. قم بتسمية الملفات حسب العلاج ، متبوعا بمعرف الفئران والنقطة الزمنية.
انقر نقرا مزدوجا فوق في الصورة من التسلسل. في نافذة لوحة الأدوات ، انقر فوق قسم أداة ROI ، ثم اضغط على أيقونة المربع. ارسم مستطيلا فوق الماوس بأكمله.
انقر فوق حدود عائد الاستثمار الذي تم إنشاؤه وانسخ والصق نفس عائد الاستثمار لكل ماوس. بعد ذلك ، قم بتسمية عائد الاستثمار المراد تسجيله. ثم انقر فوق رمز الحفظ في قسم أداة عائد الاستثمار.
حدد المربع ، تنطبق على التسلسل. ثم قم بتطبيق عائد الاستثمار المحفوظ لجميع الصور بالنقر فوق تحميل. اضبط موضع عائد الاستثمار لكل ماوس لتناسبه بشكل أفضل في منطقة القياس.
عندما يتم تصنيف جميع الفئران ، انقر فوق خيار قياس عائد الاستثمار. يجب أن يظهر جدول قياسات عائد الاستثمار. اضبط أنواع القياس على الإشراق ، وتنسب الصورة إلى كل القيمة الممكنة وأبعاد عائد الاستثمار إلى السنتيمترات.
ثم انقر فوق خيار تحديد الكل متبوعا بنسخة. الصق البيانات مباشرة في برنامج تحليل الجدول. تنظيم أعمدة البيانات لفرز المجموعات بشكل صحيح.
بعد ذلك ، قم بترميز البيانات حسب المجموعات في جدول البيانات. رتب قيم التدفق الكلي لمطابقة قيم التدفق الكلي البطني والظهري لنفس الماوس. ثم اجمعهم للحصول على التلألؤ الحيوي لجسم كل فأر.
احسب المتوسط والانحراف المعياري للقيم المجمعة لكل مجموعة. ارسم البيانات في برنامج إحصائي لإنشاء رسوم بيانية. أخيرا ، قم بإنشاء لوحة بها صور مضيئة بيولوجيا.
ضع كل ماوس في أعمدة والنقاط الزمنية في صفوف لبناء مصفوفة فعالية الدواء. عندما يتم تطبيق طريقة التلألؤ الحيوي لتقييم العوامل المضادة للطفيليات ، يتم بناء مصفوفة فعالية الدواء لمقارنة مركبات الاختبار ، والتي يمثلها هنا بوساكونازول مقابل العلاج الدوائي القياسي المستخدم لمرض شاغاس ، البنزنيدازول بمعدل 100 ملليغرام لكل كيلوغرام يعطى مرة واحدة يوميا. في هذه الدراسة الطولية ، يتم توضيح المسار الزمني للعدوى من خلال مقارنة مجموعة غير معالجة مع المجموعة المعالجة.
تظهر النتائج إما انخفاضا في عبء الطفيليات كما يتضح من انخفاض التلألؤ البيولوجي ، أو الانتكاس الذي أظهرته زيادة حمل الطفيليات وما يترتب على ذلك من اكتشاف الضوء ، مما يشير إلى وجود مركب أو نظام علاج غير فعال. يتم تمثيل الضوء الكمي بمجموع التدفق الكلي البطني والظهري في الفوتونات في الثانية كدالة لوقت العدوى.
