إعداد وجمع أجنة ذبابة الفاكهة ل Transgenesis

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

139 Views

•

01:39 min

•

June 7th, 2024

DOI :

10.3791/201790-v

June 7th, 2024

•

Guang Chen*¹^,², Xinyi Zhang*¹^,³, Si Xu¹^,⁴, Xiaotao Zhou¹, Wen Xue¹, Xuelian Liu¹, Jialong Yan¹, Nana Zhang¹, Jiwu Wang¹^,²^,⁴

¹Clinical Research Institute, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School, University of South China, ²Department of Clinical Laboratory, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School, University of South China, ³Institute of Biochemistry and Molecular Biology, Hengyang Medical School, University of South China, ⁴Department of Neurology, The Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School, University of South China

* These authors contributed equally

Transcript

للبدء ، بلل قطعة قماش بمحلول طحن. ثبت قطعة القماش على مطحنة الإبرة ، ثم قم بتوصيل إبرة بمضخة هواء القدم باستخدام أنبوب شعري من السيليكون. قم بتركيب الإبرة على حامل إبرة المطحنة.

اضبط زاوية الإبرة بحيث تنحني 35 درجة على لوحة الطحن. استخدم مقبض التحكم الخشن أسفل المجهر لضبط موضع طرف الإبرة حتى يتم وضعه فوق سطح الطحن مباشرة. بعد ذلك ، استخدم مضخة هواء القدم للحفاظ على الضغط الداخلي للإبرة عند 40 رطلا لكل بوصة مربعة.

بعد ذلك ، استخدم مقبض التحكم الدقيق لجعل طرف الإبرة يلمس لوحة الطحن. بعد الطحن لمدة ثلاث إلى خمس ثوان ، قم بتفريغ الإبرة عندما تبدأ فقاعات الهواء في الخروج من الحافة. بعد ذلك ، قم بتسخين ماصة سعة 200 ميكرولتر مع اللهب الخارجي لموقد الكحول.

عندما يبدأ طرف الماصة في الذوبان ، قم بتمديده. قطع نهاية مختومة من طرف ماصة مع مقص. لإزالة الكلور من أجنة ذبابة الفاكهة ، قم بإزالة الذباب من ألواح أجار عصير العنب بفرشاة.

شطف الأجنة التي تم جمعها في مصفاة الخلية بالماء المقطر المزدوج. تجفيف مصفاة الخلية مع المناديل الورقية. ثم ضعي المصفاة المجففة في طبق بتري يحتوي على 30٪ مبيض.

حرك مصفاة الخلية يدويا لضمان الخلط المتساوي. شطف الأجنة في ماء مقطر مزدوج لمدة دقيقتين قبل التقاط الأجنة العائمة بفرشاة الرسم لعمل تشكيلة لمزيد من الجينات المحورة.

Explore More Videos

From the series