3D إعداد نموذج الغدة الصعترية البشرية العضوية لدراسة بيولوجيا الخلايا التائية

للبدء ، قم بإذابة الثرومبين والأبروتينين على الجليد ، وضع قارورة الفيبرينوجين في حمام مائي 37 درجة مئوية. باستخدام ماصة ، تجانسها تحت غطاء محرك السيارة. ثم باستخدام كماشة معقمة ، ضع الإدخالات في آبار الاستزراع ، مع ترك عمود أو صف واحد على الأقل فارغا على اللوحة.

إلى أنبوب 0.25 ملليلتر ، أضف أولا الكميات المطلوبة من الفيبرينوجين والأبروتينين. بعد ذلك ، أضف الثرومبين في الأنبوب واغسله بسرعة مرتين دون إنشاء فقاعات. ارسم محتوى الأنبوب بالكامل.

ضع الماصة عموديا فوق مركز الملحق واغسل مزيج الكاشف برفق دون توليد فقاعات. احتضن لمدة ساعة واحدة على الأقل عند 37 درجة مئوية للتصلب حتى يتحول المزيج إلى اللون الأبيض غير الشفاف. بالنسبة للبذر العضوي ، تأكد تحت المجهر من أن الكتل الدقيقة تشكل كتل خلايا كروية ، مع جوقة مدمجة محاطة بهالة منخفضة الكثافة من أسلاف الغدة الصعترية المبكرة.

قطع طرف مخروط P200 وغسله بمحلول مضاد للالتصاق. قم بإمالة اللوحة إلى وضع عمودي تقريبا واستنشاق كتل الخلايا من قاع البئر. قم بإيداع الكتلة بدقة في الجزء العلوي من الهلاميات المائية دون لمس الجل.

تحقق تحت المجهر من عدم ترك أي عضوي في آبار اللوحة. ثم أضف ببطء ربع حجم وسط الاستزراع في الجزء العلوي من الهيدروجيل دون لمسه ، وأضف 3/4 المتبقية في قاع البئر. أضف ملليلترا واحدا من PBS إلى آبار الاستزراع الفارغة للحفاظ على الرطوبة في اللوحة واحتضانها عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون.

تشكل الكائنات العضوية هياكل كروية إلى مستطيلة وتندمج أحيانا لتشكيل هياكل أكبر في الهلاميات المائية.