الاستخراج الكيميائي لكالس الجزر المعالج بالمبيدات لتقييم السمية الخلوية لمستقلبات المبيدات

للبدء ، قم بخلط 0.2 جرام من مسحوق الأرض لكل عينة من الجزر المجففة بالمبيدات الحشرية ، مع ثلاثة ملليلتر من الأسيتونيتريل في أنبوب طرد مركزي سعة 10 ملليلتر. دوامة أنبوب الطرد المركزي لمدة ثماني دقائق ، ثم صوتنة لمدة خمس دقائق في 150 واط و 40 كيلو هرتز. بعد ذلك ، قم بطرد الأنبوب عند 8،000 جرام وأربع درجات مئوية لمدة 10 دقائق ، قبل جمع المادة الطافية عن طريق الماصة.

باستخدام مكثف نفخ النيتروجين عند 40 درجة مئوية ، ركز المستخلصات المجمعة حتى تجف. إعادة إذابة بقايا المستخلص في ملليلتر واحد من DMEM ، يحتوي على 0.3٪ DMSO للحصول على محلول التعرض لمستقلب المبيدات. بطريقة مماثلة ، قم بإعادة إذابة بقايا المستخلص الذي تم الحصول عليه من العينات القاسية الفارغة.

في ملليلتر واحد من DMEM ، يحتوي على 0.3٪ DMSO. بعد ذلك ، قم بإذابة ملليغرام واحد من كل مبيد آفات يستخدم في أنابيب مختلفة تحتوي على محلول بقايا العينة الفارغة للحصول على محاليل واضحة للتعرض للمبيدات.