الهوموسيستين في البلازما (Hcy) قياس ELISA للدم من الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم من النوع H المعالجة ب Huotan Jiedu Tongluo Decoction

للبدء ، أجهزة الطرد المركزي الأنابيب المحتوية على الدم المتخثر في 626 إلى 1،409 G لمدة 20 دقيقة عند درجتين إلى ثماني درجات مئوية. ثم جمع بعناية طاف في أنبوب جديد. قم بتخزين المادة الطافية عند درجة حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر.

بعد ذلك ، قم بإعداد آبار قياسية فارغة وعينات. ماصة 50 ميكرولتر من المعايير المخففة في لوحة ELISA. ثم انقل 40 ميكرولترا من العينات المخففة إلى آبار العينة.

أضف 10 ميكرولتر من المصل إلى آبار العينة. الآن ، ختم اللوحة مع فيلم الختم. ضع اللوحة المختومة في حاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

قم بتخفيف محلول الغسيل المركز 30 مرة بالماء المقطر للحصول على محلول غسيل واحد قوي. بعد ذلك ، قم بإزالة فيلم الختم من اللوحة وتجاهل السائل. الآن ، املأ كل بئر ب 200 ميكرولتر من محلول الغسيل خمس مرات.

بعد التخلص من المادة الطافية للمرة الأخيرة ، اضغط على الطبق حتى يجف. ماصة 50 ميكرولتر من كاشف الإنزيم في جميع الآبار بخلاف الآبار الفارغة. ثم أغلق اللوحة بغشاء مانع للتسرب قبل وضعها في حاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

بعد غسل اللوحة خمس مرات أخرى ، أضف 50 ميكرولترا من كل من مطوري الألوان ، A و B.هز اللوحة برفق لتخلط جيدا. ثم احتضان اللوحة عند 37 درجة مئوية في الإضاءة المنخفضة لمدة 10 دقائق. الآن ، ماصة 50 ميكرولتر من محلول التوقف في كل بئر لإنهاء التفاعل.

قم بقياس امتصاص كل بئر بالتتابع عند 450 نانومتر. كان تركيز الهوموسيستين في البلازما في مجموعة الميثيونين أكبر بمرتين منه في المجموعة الضابطة. كانت تركيزات الهوموسيستين في البلازما أقل نسبيا في مجموعات العلاج.