تشذيب وقطع وتضمين عقدة الجذر الظهرية للزراعة في جهاز متعدد الحجرات (MC)

للبدء ، خذ العقد الجذرية الظهرية المحصودة. على مقعد نظيف ، املأ طبق بتري 60 ملم بوسائط التشذيب. رتب نطاق التشريح ومعقم الخرز الزجاجي ، وضع صندوق أدوات الأوتوكلاف مع أدوات التشذيب بجوار المنظار.

باستخدام منظار التشريح ، قم بإزالة أي أنسجة زائدة حول عقدة الجذر الظهرية ، وقم بقص جذور الأعصاب بالقرب من جسم العقدة الجذرية الظهرية. الآن ، املأ طبق بتري الثاني 60 ملم بالوسائط الطازجة. باستخدام نطاق التشريح ، قم بقطع العقد الجذرية الظهرية المشذبة إلى حوالي 0.5 ملم.

انقل العقد الجذرية الظهرية المقطوعة إلى صفيحة جديدة مكونة من 24 بئرا تحتوي على وسائط على الجليد. ثم ، ماصة 65.1 و 52.8 ميكرولتر من هيدروجيل مسبق الخلط في مقصورات سوما و neurite ، على التوالي. قم بتضمين العقد الجذرية الظهرية المقطوعة بعناية في حجرة سوما.

قم بربط الهيدروجيل حراريا في الحاضنة عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم ، تقوم الأشعة فوق البنفسجية بربط الهيدروجيل لمدة 90 ثانية. بعد ذلك ، أضف وسائط نمو العقد الجذرية الظهرية إلى الهيدروجيل والعقد الجذرية الظهرية.

قم بإجراء تغيير كامل للوسائط بعد ساعة واحدة لإزالة أي بادئ صور غير متفاعل أو متبقي في الوسائط.