إصلاح ومنع 2D مزارع الخلايا البطانية الوريد السري البشري (HUVEC) للتحليل الكيميائي المناعي

للبدء ، أضف 30 ملليلترا من هيدروكسيد البوتاسيوم 5٪ في الميثانول إلى أنبوب 50 ملليلتر. احتضان 100 زلة غطاء بقطر 12 ملم في الأنبوب لمدة 30 دقيقة تحت التحريض المستمر. بعد ذلك ، اغسل انزلاق الغطاء في الماء منزوع المعادن لمدة 30 دقيقة.

بمجرد اكتمال الغسيل ، انقل انزلاق الغطاء إلى محلول أيزوبروبيل بنسبة 70٪ للتخزين. لطلاء زلات الغطاء ، قم أولا بإمالتها بشكل فردي على جدار طبق بتري مربع. عندما يتبخر كحول الأيزوبروبيل ، انقله إلى صفيحة بئر 24.

ماصة ملليلتر واحد من الكولاجين في برنامج تلفزيوني في كل بئر واحتضان. بعد ذلك ، اغسل الغطاء حوالي 4 إلى 5 مرات لمدة خمس دقائق لكل منها ملليلتر واحد من برنامج تلفزيوني. ماصة استزراع HUVECs في الآبار مع زلات الغطاء المغلفة.

بعد زراعة الخلايا لفترة زمنية مرغوبة ، اغسل الخلايا في ملليلتر واحد من برنامج تلفزيوني لمدة خمس دقائق. إصلاح الخلايا في ملليلتر واحد من 2 ٪ بارافورمالدهيد لمدة 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. الآن ، شطف الخلايا في ملليلتر واحد من PBS لمدة 3 إلى 4 دورات غسيل كل منها خمس دقائق.

أخيرا ، ماصة ملليلتر واحد من المخزن المؤقت المانع في لوحة البئر قبل تلطيخها.