قياسات المسافة البادئة القائمة على الفحص المجهري للقوة الذرية لتحليل تصلب الأنسجة في أقسام أطراف قنافذ البحر

قبل الفحص المجهري للقوة الذرية أو قياسات AFM ، قم بتركيب الكابولي على كتلة زجاجية. أدخل طبق بتري مملوء ب PBS في حامل مرحلة المحرك وأدخل الكتلة الزجاجية في رأس AFM. ثم ضع رأس AFM فوق طبق Petri بحيث يتم غمر الكابول في المخزن المؤقت ومحاذاة الليزر يدويا.

في برنامج JPK ، اضغط على زر الاقتراب والاكتساب لدفع الكابولي إلى سطح صلب. بمجرد الحصول على منحنى قوة المسافة الفردي ، افتح مدير المعايرة وتحت الطريقة ، حدد المستند إلى الاتصال. ثم اضبط درجة حرارة الغرفة على 20 درجة مئوية.

الآن قم بتكبير المنحنى وحدد الجزء الخطي لملاءمة الحساسية. انقر فوق خانة الاختيار حساسية واسحب الكابول 200 ميكرومتر من السطح. ثم حدد خانة الاختيار رمز اللانهاية وانقر فوق تشغيل الضوضاء الحرارية.

بعد ذلك ، قم بتكبير الرسم البياني للتردد الناتج وحدد نطاقا باستخدام زر النقر بزر النقر بزر الماوس الأيمن. حدد خانة الاختيار Spring Constant وأغلق مدير المعايرة. أدخل طبق بتري الذي يحتوي على طرف قنافذ البحر المتجدد المضمن في كتلة الأنسجة ووسط الثقافة في حامل أطباق AFM.

احصل على صورة نظرة عامة على كتلة الأنسجة في وضع المجال الساطع. قم بتكبير منطقة الاهتمام واضبط وقت التعرض والتركيز. قم بإعداد معلمات الشبكة لقياسات المسافة البادئة وسجل مصفوفة من منحنيات مسافة القوة.

لمعالجة البيانات في برنامج PyJibe ، افتح الملف الذي يحتوي على منحنى إزاحة القوة. حدد علامة التبويب المعالجة المسبقة وتحت تقدير نقطة الاتصال ، حدد الملاءمة المجزأة مع الخط وكثير الحدود. ثم حدد علامة التبويب الملاءمة وتحت النموذج ، حدد المسافة البادئة الكروية ، ضمن الطريقة ، حدد nelder.

لتحليل اللزوجة المرنة في برنامج PyJibe ، افتح الملف الذي يحتوي على منحنى مسافة القوة. حدد علامة التبويب المعالجة المسبقة وتحت تقدير نقطة الاتصال ، حدد الملاءمة المجزأة مع الخط وكثير الحدود. ثم حدد علامة التبويب الملاءمة وتحت النموذج ، حدد نموذج Hertz المصحح لمرونة اللزوجة باستخدام نموذج KVM.

ضمن الطريقة ، حدد leastsq. اضبط نصف قطر المسافة البادئة الدقيقة على 10 ميكرومتر وسرعة الاقتراب على 7.5 ميكرومتر في الثانية. اضغط على تطبيق النموذج وتناسب الجميع للحصول على وحدات يونغ الظاهرة وغير المسترخية ، واللزوجة الظاهرة ، ووقت استرخاء عنصر ماكسويل.

لم تظهر قياسات معامل يونغ الظاهرة لنصف القطر والزند في الأطراف السليمة أي فرق كبير. خلال مرحلة الانحلال النسيجي ، انخفضت وحدات يونغ الظاهرة لنصف القطر والزند بشكل كبير إلى 0.03 و 0.13 كيلو باسكال على التوالي. كانت وحدات يونغ الظاهرة في وسط الغضروف السليم أعلى منها في المحيط.

في مرحلة الانحلال النسيجي ، لم تظهر قياسات معامل يونغ الظاهرة فرقا كبيرا بين مركز الغضروف والمحيط. أثناء تكثيف الغضروف ، زادت معاملات يونغ الظاهرة بشكل كبير إلى 0.77 كيلو باسكال تمثل قيم صلابة متوسطة. أظهرت الموديلات غير المسترخية اختلافات جوهرية عبر الأنسجة السليمة أثناء التحلل النسيجي وفي الغضروف المتكثيف.

كانت وحدات يونغ الظاهرة مشابهة إلى حد كبير للوحدات غير المسترخية ، مما يشير إلى استجابة مرنة في الغالب. كانت اللزوجة الظاهرة أقل بكثير أثناء الانحلال النسيجي مقارنة بالأنسجة السليمة والغضاريف التكثيف.