التلقيح في الجسم الحي لمسببات الأمراض الجذعية في أوراق الحور لاختبار مقاومة مرض التقرح

للبدء ، قم بإعداد ثقافة فطرية لمسببات الأمراض آفة ومواد الحور لتلقيح الأوراق. بالنسبة للأوراق الصغيرة ، قم بتلقيح مكعبين من الفطريات الفطرية المربعة المعدة مسبقا ومكعبات PDA على السطح العلوي للأوراق الخامسة إلى السابعة من استنساخ الحور. تأكد من أن الفطريات تواجه الأوراق وتقع مواقع التلقيح في وسط نصف الأوراق.

قم بتلقيح أربعة مكعبات فطرية مربعة وأربعة مكعبات PDA على السطح العلوي للأوراق الخامسة إلى السابعة من أوراق الحور الكبيرة. ثم لف الأوراق الملقحة بشريط لاصق شفاف. اضغط برفق على الشريط لجعله يلتصق بالأوراق ، مما يمنع حركة مكعبات الفطريات وفقدانها للماء أثناء التجربة.

بعد ذلك ، باستخدام إبرة حقنة سعة خمسة ملليلتر ، اخترق الأوراق ومكعبات الفطريات في خمسة مواقع حتى تخترق الإبرة المكعبات من السطح العلوي إلى السطح السفلي لأوراق الحور. ضع موقعا واحدا للثقب في المركز والأربعة الأخرى من واحد إلى ملليمترين بالقرب من الرؤوس الأربعة للمكعبات. افحص الأوراق الملقحة في غضون ثلاثة أيام بحثا عن أي نوبات في الموقع أو فقدان الماء للقاحات الفطريات.

لاحظ ظهور آفات نخرية حول مواقع الجرح الثاقبة على السطح السفلي للأوراق. في نهاية التجربة ، التقط جميع الأوراق الملقحة وضعها في أكياس عينات بلاستيكية.