اكتساب النمط المرضي للأوراق وتقييم مقاومة الحور لأمراض التقرح الجذعية في المختبر

للبدء ، خذ أوراق الحور الملقحة بالتقرح المحفوظة في أكياس بلاستيكية. قم بإزالة الأفلام الواقية البلاستيكية بعناية من الأوراق وقم بإزالة الفطريات برفق من أسطح الأوراق. مراقبة وتحديد الأنماط المرضية للأوراق لكل استنساخ حور من خلال فحص شكل ولون البقع الميتة.

ثم ضع الأوراق في المسطرة على خلفية سوداء. قم بتصوير السطح السفلي للأوراق بكاميرا ، أو قم بمسحها ضوئيا باستخدام ماسح ضوئي للحصول على صور بدقة تزيد عن 300 نقطة في البوصة. افتح صور الأوراق المريضة في برنامج ImageJ ، 1.54G.

اضبط المقياس في ImageJ طبقا للمسطرة المرئية في صور الورق. ثم باستخدام أداة العصا في ImageJ ، حدد الآفات الموجودة على الأوراق وقم بقياس مساحة كل بقعة نخرية. بعد قياس جميع البقع الميتة ، قم بتسجيل قيم المنطقة وتصدير هذه القيم كجدول بيانات لمزيد من التحليل.

إذا كانت الآفات حول مواقع الأقران المغطاة بالفطريات أكبر بكثير من تلك الموجودة حول المواقع المغطاة بالقناة الشريانية السالكة ، فقم بتصنيفها على أنها مواقع مرضية. إذا أظهرت مواقع الأقران المغطاة بالفطريات تغييرات مثل لون الآفة ، والهياكل الشبيهة بالخيوط pycnidia و conidia ، فحددها على أنها مواقع مرض. احسب متوسط مساحة بقع آفة القناة الشريانية السالكة الفعالة لكل استنساخ هجين من الحور.

قسم البقع الملقحة بالفطريات إلى فئتين ، بداية وغير بداية. ثم احسب معدل الإصابة بمرض استنساخ أشجار الحور التي تم اختبارها. احسب متوسط مساحة البقع المريضة على الأوراق.

استنادا إلى متوسط مناطق البقع المريضة عبر جميع استنساخ الحور الذي تم اختباره ، ضع معيارا لتصنيف الأمراض من خمسة مستويات. احسب مؤشر المرض لكل استنساخ حور باستخدام معيار تصنيف المرض المكون من خمسة مستويات. بعد ذلك ، باستخدام اختبار Shapiro-Wilk ، تحقق من التوزيع الطبيعي لأعداد استنساخ الحور عبر مستويات المقاومة المختلفة.

بناء على مؤشر المرض ، صنف جميع استنساخ الحور الذي تم اختباره إلى خمس أو سبع مجموعات مقاومة. مقاومة عالية جدا ، مقاومة عالية ، مقاومة ، لا مقاومة ، ولا حساسية ، قابلية ، حساسية عالية ، وحساسية عالية جدا. تسبب تلقيح مسببات الأمراض في تقرح الساق في آفات نخرية ، وحتى هياكل تشبه البيكنيديا على أوراق الحور.

علاوة على ذلك ، تؤثر مواضع الأوراق وظروف الإضاءة للأوراق على شدة مرض الأوراق.