لإعداد الاختبار الحركي لببتيدات RBPR2 و STRA6 ، قم بتخفيف ببتيدات RBPR2 و RBPR2 و STRA6 المتبادلة بشكل متسلسل في تشغيل المخزن المؤقت. افتح برنامج التحكم وحدد معالج تقارب SOAR الحركي. في مربع حوار تسلسل الحقن، حدد مسار التدفق 2.1 مع خلية التدفق 2 كنشطة وخلية التدفق 1 كمرجع.
في مربع حوار الإعداد، تحقق من خيار تشغيل دورات بدء التشغيل، وأدخل الحل كمخزن مؤقت، وحدد عدد الدورات وانقر فوق التالي. انتقل الآن إلى مربع حوار معلمات الحقن وأدخل معلمات العينة مثل وقت التلامس البالغ 120 ثانية ، ومعدل التدفق 30 ميكرولتر في الدقيقة ، ووقت التفكك 300 ثانية. للحصول على معلمات التجديد ، اضبط محلول التجديد على حمض الهيدروكلوريك الجلايسين مع وقت تلامس يبلغ 30 ثانية ومعدل تدفق 30 ميكرولتر في الدقيقة ، ثم انقر فوق التالي.
في مربع حوار العينات ، أدخل أسماء الببتيدات والأوزان الجزيئية والتركيزات ، ثم انقر فوق التالي. في حوار موضع الحامل ، قم بتعيين الببتيدات المخففة كعينة فردية سعة 120 ميكرولتر بتركيزات مختلفة من واحد إلى 100 ميكرومولار إلى المواضع المحددة على الحامل. انقر فوق رف الإخراج وأدخل جميع القوارير.
بعد ذلك ، انقر فوق التالي ثم في مربع حوار إعداد بروتوكول التشغيل انقر فوق ابدأ. أدخل اسم الملف وانقر فوق حفظ. الآن في البرنامج ، انقر فوق قائمة ابدأ وحدد تقييما.
افتح الملف ثم من قائمة التحديد المنسدلة ، اختر FC-2.1 لتحليل مستشعر الخلية المرجعية الفارغة المطروحة لمراحل الاقتران والتفكك لببتيدات msRBP4 و msRBPR2 الطافرة و msSTRA6. بعد ذلك ، انقر فوق القائمة المنسدلة Kinetics أو Affinity زر واختر Surface bound. في مربع الحوار تحديد المنحنيات، حدد تضمين العمود في الجدول، وانقر فوق التالي.
انتقل الآن إلى مربع حوار تحديد البيانات ، واعرض المخططات الاستشعارية المطروحة الفارغة. انقر على الحركية والتقارب. احتفظ بالمعلمات الافتراضية وانقر فوق ملاءمة لتركيب المنحنى.
افحص علامة تبويب التقرير بحثا عن ثابت تفكك التوازن Kd ومعدل الاقتران Ka أو Kon ومعدل التفكك Kd أو Koff. احفظ مخطط مستشعر بيانات Kinetics في علامة تبويب النص بتنسيق محدود واستخدم القيم لرسم الرسوم البيانية.
