للبدء ، قم بتنزيل برامج نبض الرنين المغناطيسي النووي إلى الدليل الموجود على الكمبيوتر الذي يقوم بتشغيل مطياف الرنين المغناطيسي النووي واضبط إصدار TopSpin. قم بتنزيل نبضات الرنين المغناطيسي النووي على الدليل وتحقق من تحديث إصدار TopSpin وفقا لذلك. بعد تحديد العروض الطيفية وأوقات الاستحواذ المناسبة ، اكتب edc في برنامج TopSpin إلى دليل جديد لنسخ تجربة HSQC.
لفتح نوع معلمات تسلسل النبض ased ، انقر فوق النقاط الثلاث بجوار معلمة PULPROG لتغيير برنامج النبض إلى تجربة النيتروجين -15 R1 rho. انقر نقرا مزدوجا فوق برنامج النبض ، وانقر فوق تعيين PULPROG على مجموعة البيانات وقم بالتأكيد باستخدام موافق. اكتب ased لفتح معلمات تسلسل النبض. أدخل جميع نقاط قوة التدرج وأطوال التدرج المفقودة كما هو موضح في تسلسل النبض.
بعد ذلك ، أدخل عداد الحلقة L3 نصف إدخال النيتروجين -15 TD في نافذة معلمة الاستحواذ. أدخل في عداد الحلقة L6 عدد نقاط بيانات الاسترخاء المسجلة لتركيب منحنى الاسترخاء. اضبط TanhTan_half الثابت للسداد.
نبض nl على شكل نبضة النيتروجين -15 SP8. ثم اضبط TanhTan_half2nd الثابت للسداد. نبض nl على شكل نبضة النيتروجين -15 SP9.
تأكد من أن أطوال النبضة طويلة بما يكفي للسمنة مع ضبط P8 على 3 ، 000 ميكروثانية. ثم اضبط تأخير الاسترداد بين المسح ، D1 ، على ثانيتين على الأقل أو أكثر. اضبط عمليات المسح الوهمية على 64 على الأقل.
كنقطة انطلاق ، اضبط عدد عمليات المسح على أربعة واستخدم مضاعفات أربعة إذا كانت نسبة الإشارة إلى الضوضاء منخفضة جدا. اضبط O1 على تردد الموجة الحاملة المعايرة ، O2P على 176 جزءا في المليون ، وانسخ O3P من تجربة بروتون النيتروجين -15 HSQC. الآن ، اضبط طول النبضة P7 على طول النبضة 90 درجة الذي تمت معايرته مسبقا.
ثم انسخ مستوى طاقة النبضة للنبضة 90 درجة إلى PLW3 و PLW7. بعد ذلك ، اضبط أطوال النبضة P1 و P19 على طول نبضة البروتون 90 درجة. اضبط عدد الزيادات في البعد غير المباشر ، TD يساوي L3 بمقدار اثنين في L6. بعد ذلك ، اضبط النبضة SP5 على شكل I-BURP2 وطول النبضة P15 إلى 2 ، 000 ميكروثانية.
ثم افتح شاشة Shape Tool بالنقر فوق E بجوار النبضة على شكل I-BURP2 في نافذة معلمة تسلسل نبض TopSpin. لمحاكاة النبضة المشكلة، انقر فوق الزر بدء محاكاة الرنين المغناطيسي النووي. تحقق من طول النبضة على شكل وزاوية الدوران في نافذة المحاكاة وانقر فوق بدء تشغيل بطاقة SIM بالرنين المغناطيسي النووي للمتابعة.
تحقق من نطاق الإثارة في المحاكاة وحدد طول نبضة I-BURP2 المناسب لتغطية التشتت الطيفي للبروتون مع تجنب إثارة الماء. اضبط P15 على طول النبضة على شكل من نافذة المحاكاة بأفضل نبضة I-BURP2. الآن ، اضبط SPOFFS5 لضبط تردد الموجة الحاملة لنبضة I-BURP2 ، وتحويل نطاق الإثارة إلى اليسار أو اليمين لتجنب اضطراب مغنطة الماء.
ثم افتح أداة Bruker Shape Tool وانقر فوق Start NMR Simulation لتحديد مستوى الطاقة المناسب للنبضة المشكلة. اضبط طول نبضة I-BURP2 على طول النبضة المشكل ، ولاحظ طول نبضة البروتون المستطيل الناعم بزاوية 90 درجة الموضح في نافذة المحاكاة. اكتب calcpowlev لحساب فرق مستوى الطاقة بالديسيبل بين نبضة البروتون الصلبة 90 درجة ونبضة البروتون المستطيلة الناعمة بزاوية 90 درجة.
انسخ مستوى طاقة نبضة البروتون الصلبة 90 درجة إلى SPW5 واضبطها بإضافة الفرق المحفوظ بالديسيبل. لتحديد مستوى طاقة قفل الدوران ، احسب طول نبضة النيتروجين -15 المقابل 90 درجة. استخدم calcpowlev لحساب فرق الطاقة بالديسيبل بين قوة قفل الدوران ونبضة النيتروجين الصلبة 90 درجة -15.
انسخ مستوى الطاقة لنبضة النيتروجين الصلبة 90 درجة -15 إلى PLW7 واضبط مستوى طاقة قفل الدوران PLW8 عن طريق إضافة فرق الطاقة المحسوب. انسخ مستوى الطاقة لقفل الدوران PLW8 إلى مستويات الطاقة SPW8 و SPW9. لتحديد مستوى طاقة فصل النيتروجين -15 ، استخدم calcpowlev لحساب فرق القدرة بين قوة نبضة فصل النيتروجين 90 درجة -15 والنبضة الصلبة 90 درجة من النيتروجين -15.
انسخ مستوى الطاقة للنبضة الصلبة 90 درجة من النيتروجين -15 PLW7 إلى مستوى طاقة الفصل PLW31 واضبطه بإضافة فرق الطاقة المحسوب بالديسيبل. لتعويض درجة الحرارة ، قم بتضمين TEMP_ تعريف الخط في برنامج النبض. اضبط P18 على المدة القصوى لقفل الدوران المستخدم في تجربة النيتروجين -15 R1 rho.
في حالة النيتروجين -15 ، تتضمن العينات المسماة بالكربون-13 خط تعريف LABEL_CN في برنامج النبض. اضبط P4 على طول النبضة المحسوب. استخدم calcpowlev لحساب فرق القدرة بالديسيبل بين P4 والنبضة الصلبة الكربون 13.
انسخ مستوى طاقة النبضة الصلبة الكربون-13 إلى PLW4 وأضف فرق الطاقة المحسوب بالديسيبل. انسخ PLW4 إلى PLW2. لتحديد تأخيرات الاسترخاء المناسبة لأخذ العينات ، قم بتشغيل أول ثمانية تحللات تحريضية مجانية ، أو FIDs ، وقم بمعالجتها.
اختر إدخالات vplist حيث تنخفض كثافة الذروة لأطول تجربة تأخير إلى واحدة على الأقل على e، ولكن ليس أقل من 25٪ مقارنة بتجربة التأخير الأقصر. اكتب rga في سطر الأوامر لتحديد كسب جهاز الاستقبال. ابدأ تشغيل تجريبي لتجربة النيتروجين-15 R1 rho عن طريق كتابة zg في سطر الأوامر.
تأكد من كتم إشارة المياه لجميع التأخير. تحقق أيضا من الزيادة التاسعة، وهي الزيادة الثانية لمخطط الكشف عن التربيع.
