وقد تم تمويل هذا العمل من قبل على جائزة مؤسسة العلوم الوطنية التوظيف (CBET - 0846395) ، وقسم الطب المقارن ، جامعة تولين.

1. الحيوانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم التحقق من الإناث C57BL/6J الفئران (المصحف العضلة) خالية من الطفيليات الخارجية المعدية ، endoparasites الديدان الطفيلية ، والأجسام المضادة للفيروسات 17 الفئران من قبل البائع قبل الشحن. إيواء الفئران في منشأة الحيوان AAALAC المعتمدة من جامعة تولين وفقا لدليل لرعاية واستخدام الحيوانات في المختبر. 1 </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على وجه التحديد ، والفئران ويضم مجموعة (4-5 الفئران / القفص) في تهوية منفردة قمم البولي microisolation cageswith تصفية على الفراش الصلبة. تقدم لهم الطعام بالمال وبالشهرة أيضا الإعلان القوارض ومكعبات مياه الحنفية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويسمح للفئران 7 أيام للتأقلم قبل بدء الدراسة. </li></ol> 2. الخلايا <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم استخدام الفئران سرطان الخلايا الانتقالية MB49 خط الخلية لإنتاج أورام المثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تربيتها في الخلايا المتوسطة Dulbecco لتعديل النسر تستكمل مع مصل بقري جنيني من 10 ٪ ، 100 وحدة / مل البنسلين ، ووحدات / 100 مل الستربتوميسين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم المحافظة على الثقافات عند 37 درجة مئوية و 5 ٪ CO 2 مع وسائل الاعلام يتغير كل يومين أو ثلاثة أيام. </li></ol> 3. نموذج حيواني ورم مثلي وتقطير المثانة ورم نموذج الموصوفة هنا هو تعديل للإجراءات التي وصفها آخرون غونتر 2 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبفعل التخدير مع 2 ٪ isoflurane (MWI / VetOne ، ميريديان ، ID ، القط # 501017) في الأوكسجين والحفاظ على 0،75-1،25 ٪. (ويمكن علاج الحيوانات متعددة في وقت واحد ، الأمر الذي يتطلب زيادة في مستويات isoflurane) لمنع جفاف القرنية ، ومشحم مع مرهم عيون اصطناعية العيون بالدموع. المحافظة على حرارة الجسم مع وسادة ساخنة تحت ثنى الورق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم قص الفراء من أسفل الظهر لتعزيز الاتصال مع صفيحة معدنية التأريض ، والمغلفة منطقة حلق مع هلام electroconduction. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومن ثم وضعت كل على حدة في الماوس recumbancy الظهرية على لوحة معدنية التأريض ، ومقسطر المثانة باستخدام transurethrally a مشحم قياس 24 ، 3 / 4 بوصة ، والقسطرة رابعا الافراط في إبرة مع مرود إزالتها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تصريف البول من المثانة البول ، ويتم إدخال سلك البلاتين عن طريق قسطرة في المثانة البولية ترك سلك تعرض على كل طرف من القسطرة -- 2 مم تقريبا على نهاية lumenal من القسطرة. يتكون سلك من البلاتين بسبب المقاومة للمواد للأكسدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم تطبيق تيار W 2.5 إلى المثانة لحوالي 0.5 ثانية عن طريق لمس الجزء الخارجي من الأسلاك مع وحدة كاو كهربي لتعيين التخثر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومن ثم انتقل إلى السلك الموقع الثاني في المثانة وتهمة اخرى W 2.5 التطبيقية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الأسلاك ، و 100 ميكرولتر من MB49 الخلايا في تركيز خلايا 1x10 6 / مل وتغرس من خلال قسطرة في المثانة عن طريق حقنة 1ml. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم ترك المحاقن التي تعلق على القسطرة لمنع هروب رأس المال من الايقاف الخلية ، ويتم الحفاظ على الفئران مقسطر تحت التخدير لمدة 90 دقيقة للسماح للخلايا لتعلقها على مواقع الحرق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يدار 100-200 ميكرولتر من المياه المالحة عن طريق الحقن المعقمة العادية IP لكل الماوس قبل الانتعاش. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في نهاية فترة الحضانة يتم إزالة القسطرة وغير مسموح للحيوانات لاسترداد على لوحة ساخنة حتى تصحيح ردود الفعل المقابل ، وعند هذه النقطة يتم إرجاع الفئران لأقفاص وطنهم. </li></ol> 4. الموجات فوق الصوتية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويسمح للنمو الأورام لمدة 3-5 أيام قبل الفحص بالموجات فوق الصوتية الفئران من المثانة البولية لمراقبة نمو الورم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الموجات فوق الصوتية لفحص الأولي ، يتم تخدير الحيوانات كما هو موضح أعلاه. يتم وضع الفئران في recumbancy الظهرية ، وهي على استعداد لقطة جلد البطن بواسطة الفراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إدخال القسطرة رابعا قياس 24 transurethrally في المثانة البولية. عند هذه النقطة ، يمكن أن ينضب المثانة والبول التي جمعت لمزيد من التحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وتغرس 100 ميكرولتر من الطبيعي المالحة عقيمة في المثانة عن طريق القسطرة لتحسين الرؤية على المثانة بالموجات فوق الصوتية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق الموجات فوق الصوتية هلام التوصيل في البطن ، ويتم تنفيذ التصوير بالموجات فوق الصوتية لتقييم جدار المثانة والتجويف. </li></ol> 5. ممثل النتائج : سوف الأنسجة السرطانية تبدأ في الظهور بعد 3-5 أيام innoculation. في تجربتنا ، في مجموعة من الفئران 12 ، 50 ٪ أو أكثر بشكل روتيني لديك كتلة النسيج للكشف داخل المثانة (0،5-1،0 ميكرولتر ، وذلك باستخدام V = π / 6 · ° W L * ح) من قبل خمسة أيام. عند استخدام 49 ميغابايت خلايا الأورام سوف تستمر في النمو ، وسوف يكون مطلوبا من قبل يوم 24 القتل الرحيم إذا كانت الفئران تذهب دون علاج. ينصح القتل الرحيم عندما تصبح الفئران السبات العميق أو مدنف ، وعرض الفراء تكدرت ، hunching ، والسلوك غير متجاوبة ، أو عندما يفقد 20 ٪ من وزن الجسم الأولية &lt;/ P&gt; الأورام تنمو بسرعة وسيكون لها مراكز نخرية بعد وصولها إلى كتلة من 200 ملغ أو أكثر ، 3 ظاهريا لأن الخلايا في الورم تتكاثر بمعدل أسرع من تطوير ما يمكن أن تخدمها إمدادات الدم عائية. يمكن للمرء أيضا أن ترصد بشكل غير مباشر عن طريق تطور الورم على مستوى hematurea ، والتي يفترض أن يرتبط السريع الأوعية الدموية داخل الأورام النامية. وقد لوحظ باستمرار أن البول من الفئران الحاملة للورم غير المعالجة الواردة في الدم عن طريق 14 يوما. وبدا تركيز خلايا الدم الحمراء لزيادة مع مرور الوقت في هذه الفئران ، وكميات من البول التي جمعت في تضاؤل ​​مستمر. ويمكن أيضا الأورام في أكثر من 50 ملغ من متلمس بسهولة نسبية ، وعادة بنسبة 14 innoculation آخر أيام.

<ol>
	<li>Institute of Laboratory Animal Resources. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (1996).</li><li>Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimizing+syngeneic+orthotopic+murine+bladder+cancer+(MB49).">Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49).</a> Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).</li><li>Zhang, X., Atala, A., Godbey, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression-targeted+gene+therapy+for+the+treatment+of+transitional+cell+carcinoma.">Expression-targeted gene therapy for the treatment of transitional cell carcinoma.</a> Cancer Gene Ther. 15, 543-552 (2008).</li></ol>

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها لجنة رعاية المؤسسية واستخدم في جامعة تولين.

كما يمكن هذا الأسلوب مينيملي إنشاء أورام المثانة مثلي في إناث الفئران يمكن تطبيقها لأنواع الخلايا الأخرى من MB49 ، وإن كان ينبغي توقع نتائج مختلفة. عندما تستخدم الخلايا السرطانية أقل عدوانية ، وزيادة القوة الكهربائية قليلا (0.5 باستخدام زيادات W الأمثل لتأسيس جديد) العا...

<table><tbody><tr><td>C57Bl/6J mice</td><td>Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td>3-5-wk-old</td></tr><tr><td>Polycarbonate cages and ventilated rack</td><td>Lab Products</td><td>Super Mouse 750</td><td>327mm x&lt;br/&gt;190mm x&lt;br/&gt;143mm</td></tr><tr><td>Hardwood Bedding</td><td>Harlan Laboratories</td><td>Laboratory &amp;#8211;grade SaniChips</td><td></td></tr><tr><td>Rodent diet</td><td>Harlan Laboratories</td><td>Rodent Diet 2019</td><td></td></tr><tr><td>IV Catheter</td><td>MWI Veterinary Supply</td><td>009231</td><td>24 G x &amp;#190; in. </td></tr><tr><td>Electrocautery unit</td><td>Bovie Medical Corporation</td><td>Aaron 900</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound unit</td><td>Sonosite</td><td>180 Plus (Vet)</td><td></td></tr><tr><td>MB49 cell line</td><td>Wake Forest University Baptist Medical Center</td><td>N.A.</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>21063-029</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Gemini Bio Products</td><td>100106 500A57B</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Invitrogen</td><td>15140-163</td><td></td></tr></tbody></table>

an orthotopic model of murine bladder cancer

في هذا الإجراء واضحة ، وضعت أورام المثانة لدى الفئران الإناث C57 عن طريق استخدام قسطرة ، الكي المحلية ، وبعد التصاق الخلية. بعد مقسطر transurethrally قربة وتصريفها ، ومرة ​​أخرى مقسطر الحيوانات للسماح بإدخال سلك البلاتين في قربة دون الإضرار مجرى البول أو المثانة. يتم إجراء القسطرة من التفلون لتكون بمثابة عازل عن السلك ، والتي سوف تجري التيار الكهربائي في المثانة لإنشاء إصابات الحروق. وتستخدم وحدة كاو كهربي لتسليم 2.5W إلى نهاية المكشوفة من الأسلاك ، وحرق بعيدا طبقات خارج الخلية ، وتوفير مواقع للخلايا سرطان مرفق التي يتم تسليمها في تعليق إلى المثانة عن طريق القسطرة لاحقة. الخلايا تبقى في المثانة لمدة 90 دقيقة ، وبعد ذلك تتم إزالة القسطرة وقربة يسمح لاستنزاف طبيعي. ويتم رصد تطور الورم عن طريق الموجات فوق الصوتية. ويولى اهتمام محدد لتقنية القسطرة في شريط الفيديو المرافق له.

Watch this Scientific Journal Video about An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer at JoVE.com

An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

تنشأ أورام المثانة في إناث الفئران بطريقة مينيملي من خلال قسطرة ، الكي المحلية ، والتصاق الخلايا السرطانية لاحقا الى مواقع الحرق.

نموذج مثلي من سرطان المثانة الفئران

In this straightforward procedure, bladder tumors are established in female C57 mice through the use of catheterization, local cauterization, and ...

an-orthotopic-model-of-murine-bladder-cancer

Research

JoVE Journal

Medicine

15.8K Views.  Tulane University. تنشأ أورام المثانة في إناث الفئران بطريقة مينيملي من خلال قسطرة ، الكي المحلية ، والتصاق الخلايا السرطانية لاحقا الى مواقع الحرق.

Video: An Orthotopic Model of Murine Bladder Cancer

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified to secrete human Prostate Specific Antigen (PSA), and the procedure for the confirmation of tumor implantation. In brief, mice are anesthetized using injectable drugs and are made to lay in the dorsal position. Urine is vacated from the bladder and 50 &#181;L of poly-L-lysine (PLL) is slowly instilled at a rate of 10 &#181;L/20 s using a 24 G IV catheter. It is left in the bladder for 20 min by stoppering the catheter. The catheter is removed and PLL is vacated by gentle pressure on the bladder. This is followed by instillation of the murine bladder cancer cell line (1 x 105 cells/50 &#181;L) at a rate of 10 &#181;L/20 s. The catheter is stoppered to prevent premature evacuation. After 1 h, the mice are revived with a reversal drug, and the bladder is vacated. The slow instillation rate is important, as it reduces vesico-ureteral reflux, which can cause tumors to occur in the upper urinary tract and in the kidneys. The cell line should be well re-suspended to reduce clumping of cells, as this can lead to uneven tumor sizes after implantation.
This technique induces tumors with high efficiency. Tumor growth is monitored by urinary PSA secretion. PSA marker monitoring is more reliable than ultrasound or fluorescence imaging for the detection of the presence of tumors in the bladder. Tumors in mice generally reach a maximum size that negatively impacts health by about 3 - 4 weeks if left untreated. By monitoring tumor growth, it is possible to differentiate mice that were cured from those that were not successfully implanted with tumors. With only end-point analysis, the latter may be mistakenly assumed to have been cured by therapy.

This protocol describes the generation of murine orthotopic bladder tumors in female C57BL/6J mice and the monitoring of tumor growth.

والفئران مثلي المثانة نموذج ورم والورم نظام لكشف

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

Cancer Research

Mouse Bladder Wall Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. Before starting injections, the surgical area must be cleaned with soap and water and antiseptic solution. Surgical equipment must be sterilized before use and between each animal. Each mouse is placed under inhaled isoflurane anesthesia (2-5% for induction, 1-3% for maintenance) and its bladder exposed by making a midline abdominal incision with scissors. If the bladder is full, it is partially decompressed by gentle squeezing between two fingers. The cell suspension of interest is intramurally injected into the wall of the bladder dome using a 29 or 30 gauge needle and 1 cc or smaller syringe. The wound is then closed using wound clips and the mouse allowed to recover on a warming pad. Bladder wall injection is a delicate microsurgical technique that can be mastered with practice.

Mouse bladder wall injection is a useful approach to orthotopically study bladder stem cell and cancer biology. This delicate microsurgical method can be mastered with careful technique and practice.

حقن المثانة الماوس الجدار

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

An Orthotopic Bladder Tumor Model and the Evaluation of Intravesical saRNA Treatment

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder tumor model. The mouse model is established by urethral catheterization under inhaled general anesthetic. Chemical burn is then introduced to the bladder mucosa using intravesical silver nitrate solution to disrupt the bladder glycosaminoglycan layer and allows cells to attach. Following several washes with sterile water, human bladder cancer KU-7-luc2-GFP cells are instilled through the catheter into the bladder to dwell for 2 hours. Subsequent growth of bladder tumors is confirmed and monitored by in vivo bladder ultrasound and bioluminescent imaging. The tumors are then treated intravesically with saRNA formulated in lipid nanoparticles (LNPs). Tumor growth is monitored with ultrasound and bioluminescence. All steps of this procedure are demonstrated in the accompanying video.

Establishing an orthotopic bladder tumor model to evaluate antitumor effects of intravesically delivered saRNA and monitoring tumor growth by ultrasound and bioluminescent imaging.

ورم في المثانة Orthotopic النموذجي وتقييم المعالجة سارنا داخل المثانة

We present a novel method for treating bladder cancer with intravesically delivered small activating RNA (saRNA) in an orthotopic xenograft mouse bladder ...

Culture, Manipulation, and Orthotopic Transplantation of Mouse Bladder Tumor Organoids

The development of advanced tumor models has long been encouraged because current cancer models have shown limitations such as lack of three-dimensional (3D) tumor architecture and low relevance to human cancer. Researchers have recently developed a 3D in vitro cancer model referred to as tumor organoids that can mimic the characteristics of a native tumor in a culture dish. Here, experimental procedures are described in detail for the establishment of bladder tumor organoids from a carcinogen-induced murine bladder tumor, including culture, passage, and maintenance of the resulting 3D tumor organoids in vitro. In addition, protocols to manipulate the established bladder tumor organoid lines for genetic engineering using lentivirus-mediated transduction are described, including optimized conditions for the efficient introduction of new genetic elements into tumor organoids. Finally, the procedure for orthotopic transplantation of bladder tumor organoids into the wall of the murine bladder for further analysis is laid out. The methods described in this article can facilitate the establishment of an in vitro model for bladder cancer for the development of better therapeutic options.

This protocol provides detailed experimental steps to establish a three-dimensional in vitro culture of bladder tumor organoids derived from carcinogen-induced murine bladder cancer. Culture methods including passaging, genetic engineering, and orthotopic transplantation of tumor organoids are described.

الثقافة والتلاعب وزرع تقويم العظام من ورم المثانة الماوس Organoids

The development of advanced tumor models has long been encouraged because current cancer models have shown limitations such as lack of three-dimensional ...

An Orthotopic Bladder Cancer Model for Gene Delivery Studies

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are needed. The tumor microenvironment can significantly influence tumor development and therapy response. It is therefore often desirable to grow tumor cells in the organ from which they originated. This protocol describes an orthotopic model of bladder cancer, in which MB49 murine bladder carcinoma cells are instilled into the bladder via catheterization. Successful tumor cell implantation in this model requires disruption of the protective glycosaminoglycan layer, which can be accomplished by physical or chemical means. In our protocol the bladder is treated with trypsin prior to cell instillation. Catheterization of the bladder can also be used to deliver therapeutics once the tumors are established. This protocol describes the delivery of an adenoviral construct that expresses a luciferase reporter gene. While our protocol has been optimized for short-term studies and focuses on gene delivery, the methodology of mouse bladder catheterization has broad applications.

Implantation of cancer cells into the organ of origin can serve as a useful preclinical model to evaluate novel therapies. MB49 bladder carcinoma cells can be grown within the bladder following intravesical instillation. This protocol demonstrates catheterization of the mouse bladder for the purpose of tumor implantation and adenoviral delivery.

وسرطان المثانة نموذج مثلي للدراسات توصيل الجينات

Bladder cancer is the second most common cancer of the urogenital tract and novel therapeutic approaches that can reduce recurrence and progression are ...

Induction of Invasive Transitional Cell Bladder Carcinoma in Immune Intact Human MUC1 Transgenic Mice:  A Model for Immunotherapy Development

A preclinical model of invasive bladder cancer was developed in human mucin 1 (MUC1) transgenic (MUC1.Tg) mice for the purpose of evaluating immunotherapy and/or cytotoxic chemotherapy. To induce bladder cancer, C57BL/6 mice (MUC1.Tg and wild type) were treated orally with the carcinogen N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine (OH-BBN) at 3.0 mg/day, 5 days/week for 12 weeks. To assess the effects of OH-BBN on serum cytokine profile during tumor development, whole blood was collected via submandibular bleeds prior to treatment and every four weeks. In addition, a MUC1-targeted peptide vaccine and placebo were administered to groups of mice weekly for eight weeks. Multiplex fluorometric microbead immunoanalyses of serum cytokines during tumor development and following vaccination were performed. At termination, interferon gamma (IFN-&#947;)/interleukin-4 (IL-4) ELISpot analysis for MUC1 specific T-cell immune response and histopathological evaluations of tumor type and grade were performed. The results showed that: (1) the incidence of bladder cancer in both MUC1.Tg and wild type mice was 67%; (2) transitional cell carcinomas (TCC) developed at a 2:1 ratio compared to squamous cell carcinomas (SCC); (3) inflammatory cytokines increased with time during tumor development; and (4) administration of the peptide vaccine induces a Th1-polarized serum cytokine profile and a MUC1 specific T-cell response. All tumors in MUC1.Tg mice were positive for MUC1 expression, and half of all tumors in MUC1.Tg and wild type mice were invasive. In conclusion, using a team approach through the coordination of the efforts of pharmacologists, immunologists, pathologists and molecular biologists, we have developed an immune intact transgenic mouse model of bladder cancer that expresses hMUC1.

An N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine-induced bladder cancer model was developed in human mucin 1 (MUC1) transgenic mice for the purpose of testing MUC1-directed immunotherapy. After administering a MUC1-targeted peptide vaccine, a cytotoxic T lymphocyte response to MUC1 was confirmed by measuring serum cytokine levels and T-cell specific activity.

تحريض الغازية سرطان المثانة الانتقالية الخليوي في المناعة السليمة الإنسان MUC1 الفئران المعدلة وراثيا: نموذج للتنمية الخلايا الجذعية

A preclinical model of invasive bladder cancer was developed in human mucin 1 (MUC1) transgenic (MUC1.Tg) mice for the purpose of evaluating immunotherapy ...

Minimally Invasive Establishment of Murine Orthotopic Bladder Xenografts

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable cell lines are inoculated either by intravesical instillation (model of nonmuscle invasive growth) or intramural injection into the bladder wall (model of invasive growth). Both procedures are complex and highly time-consuming. Additionally, the superficial model has its shortcomings due to the lack of cell lines that are tumorigenic following instillation. Intramural injection, on the other hand, is marred by the invasiveness of the procedure and the associated morbidity for the host mouse.
With these shortcomings in mind, we modified previous methods to develop a minimally invasive approach for creating orthotopic bladder cancer xenografts. Using ultrasound guidance we have successfully performed percutaneous inoculation of the bladder cancer cell lines UM-UC1, UM-UC3 and UM-UC13 into 50 athymic nude. We have been able to demonstrate that this approach is time efficient, precise and safe. With this technique, initially a space is created under the bladder mucosa with PBS, and tumor cells are then injected into this space in a second step. Tumor growth is monitored at regular intervals with bioluminescence imaging and ultrasound. The average tumor volumes increased steadily in in all but one of our 50 mice over the study period.
In our institution, this novel approach, which allows bladder cancer xenograft inoculation in a minimally-invasive, rapid and highly precise way, has replaced the traditional model.

The established technique to inoculate primary invasive orthotopic bladder cancer xenografts requires laparotomy and mobilization of the bladder. This procedure inflicts significant morbidity on the mice, is technically challenging and time-consuming. We therefore developed a high-precision, percutaneous approach utilizing ultrasound guidance.

مؤسسة المناظير الفئران مثلي المثانة Xenografts

Orthotopic bladder cancer xenografts are the gold standard to study molecular cellular manipulations and new therapeutic agents&#160;in vivo. Suitable ...

Establishing a Murine Superficial Bladder Cancer Model via an Intravesical Cell Administration Technique

This study presents an innovative method for establishing an orthotopic murine bladder tumor model with high efficiency and precise tumor localization. After anesthetizing female C57BL/6J mice in a supine position, a 24 G intravenous needle is inserted into the bladder to evacuate its contents. A 34 G dispensing needle is then introduced through the catheter, rotated five times to create a focal injury to the bladder dome mucosa, and subsequently removed. The MB49 cell suspension is aspirated and connected to a 30 G dispensing needle, which is inserted into the bladder via the catheter. Tumor cells are injected submucosally into the bladder under pressure. This technique results in minimal trauma to the mice, a high tumor take rate, and a fixed tumor location. It is characterized by simplicity and excellent reproducibility. This model provides an ideal experimental platform for developing intravesical therapies for bladder cancer, facilitating the advancement and optimization of treatment strategies for this malignancy.

This protocol describes a unique method for constructing an orthotopic model of superficial bladder cancer.

This study presents an innovative method for establishing an orthotopic murine bladder tumor model with high efficiency and precise tumor localization. ...

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold standard treatment for the high-grade non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC). However, since the treatment-related side effects are relevant, newer biological response modifiers with a better benefit/side effects ratio are needed.
The tumour microenvironment can influence both tumour development and therapy efficacy. In order to obtain a good model, it is desirable to implant tumour cells in the organ from which the cancer originates.
In this protocol, we describe a method for establishing a tumour in the bladder cavity of female mice and subsequent delivery of therapeutic agents; the latter are exemplified by our use of Helicobacter pylori neutrophil activating protein (HP-NAP). A preliminary chemical burn of the mucosa, followed by the injection of mouse urothelial carcinoma cell line MB49 via urethral catheterization, enables the cells to attach to the bladder mucosa. After a period, required to allow an initial proliferation of the cells, mice are treated with HP-NAP, administrated again via catheterization. The anti-tumour activity of HP-NAP is evaluated comparing the tumour volume, the extent of necrosis and the degree of vascularization between vehicle- and HP-NAP-treated animals.

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Here the method to establish a syngeneic mouse model of orthotopic bladder tumour to evaluate the anti-tumour efficacy of the bacterial protein HP-NAP is described.

تقييم فعالية<em&gt; H. بيلوري</em&gt; البروتين HP-NAP كأداة علاجية لعلاج سرطان المثانة في مثلي فأري موديل

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold ...

Bladder Tumor Organoid Model: A Method for Orthotopic Transplantation of Bladder Organoids into Recipient Murine Bladder

Source: Kim, Y. et al. <a href="https://www.jove.com/video/60469" target="_blank">Culture, Manipulation, and Orthotopic Transplantation of Mouse Bladder Tumor Organoids.</a>&#160;J. Vis. Exp.&#160;(2020)
In this video, we describe the orthotopic transplantation of cultured bladder tumor organoids into the murine bladder to study the role of the organ environment on developing tumors.

النموذج العضوي لورم المثانة: طريقة لزرع عضيات المثانة في مثانة الفئران المتلقية

Source: Kim, Y. et al. Culture, Manipulation, and Orthotopic Transplantation of Mouse Bladder Tumor Organoids.&#160;J. Vis. Exp.&#160;(2020)
In this ...