وقد تم تمويل هذه البحوث من خلال منحة لا. 0723341 (لKGL) من مؤسسة العلوم الوطنية. ونحن ممتنون أيضا للمساهمات التي قدمتها البحوث الجامعية شابيرو برنامج زمالة وقسم علم النفس في كلية راندولف ماكون -. أخيرا ، ونحن نقدر المساهمات كريغ كينسلي والتعاونية في هذا البحث ومساعدة اماندا Rzucidlo في إعداد المختبر R - MC على هذا المقال الفيديو.

1. تحديد نموذج حيواني <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الماوس دير كاليفورنيا (Peromyscus californicus) هو النموذج المثالي لاستكشاف ردود الأب. كما ترون ، هذا الفأر العرسان الجراء تماما كما تفعل الأمهات -- هم يجثم فوقها حتى بحيث يبدو مثل الجراء والتمريض. مقارنة بين سلوك الفئران كاليفورنيا إلى أنواع من جنس نفسه ، الماوس الغزلان المشتركة (Peromyscus maniculatus) الذي يسلك القليل من الاهتمام في الجراء ، في محاولة للهروب كثير من الأحيان ، أو حتى الاعتداء عليهم. (انظر الشكل 1 للحصول على صور من هذه الأنواع التفاعل مع الجراء). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة وقد تم التعرف على الأنواع ثم نموذج مختلف المجموعات التي ستنشأ الحاجة. في هذه الدراسة ، تستخدم الآباء البيولوجية ، وعذارى بلا خبرة الأبوة والأمومة ، والعذارى مع التعرض الجرو محدودة (الجرو المعرضة للآباء أو تعزيز) من كلا النوعين بحيث يمكن تقييم خصائص كل من الأب وميالا المكتسبة. في هذه الدراسة ولا سيما أننا يتعرض أيضا لجميع الفئات ماوس لعبة الجرو أن أؤكد أن التفاعلات الاجتماعية ومحددة لاستجابة الجرو وليس ممثلا لشيء وضعها في قفص (انظر الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل التحقيق العوامل العصبية الحيوية ، فمن المهم للتأكد من أن الأنواع المختارة يحمل اختلافات واضحة في سلوك الفائدة. في هذه الدراسة ، يتم وضعها في قفص الذكور مع الجرو لمدة خمس دقائق وethogram السلوك الأبوي (انظر الجدول رقم 1 على سبيل المثال من ethogram) يستخدم لدرجة السلوكيات مثل الكمون من الاقتراب من الجرو ومقدار الوقت الذي يقضيه في الاتصال مع الجرو. إذا لاحظ الاستجابات العدوانية ، ويتم إزالة الجرو فورا. غالبا ما يتم تصويرها بالفيديو هذه الدورات حتى يمكن إجراء تحليل دقيق السلوكية التي أجريت في وقت لاحق. </li></ol> 2. إعداد أنسجة المخ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد نضح القياسية لكل الماوس (البروتوكول المرفق) ، تتم إزالة العقول بحيث يمكن مقطوع في منطقة محددة من الفائدة (الدماغ تظهر). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستخدم معيار دماغ الفأر الأطلس (اعرض أطلس) لتحديد موقع مجاور للبطين في النواة تحت المهاد ، وهي منطقة معروفة لتكون غنية في الخلايا المنتجة للneuropeptide من الاهتمام في هذه الدراسة -- فاسوبريسين (AVP). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم حظر المخ وتركيبه على تجميد تشوك بحيث الأنسجة ستجمد قبل مقطوع مع مشراح. الدماغ هو مقطوع في وضع تقليم حتى يتم تحديد معالم محددة ، ثم يتم تعيين سمك الدماغ محددة ، و 30 ميكرون في هذه الحالة ، لأقسام المخ تستخدم للتحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توضع بعناية أقسام المخ جيدا في لوحات مليئة المالحة العازلة الفوسفات (PBS) ، (بروتوكول لبرنامج تلفزيوني المرفق ؛ يرجى ملاحظة أن هذا ليس سوى مثال واحد على بروتوكول كيمياء سيتولوجية مناعية قياسي). </li></ol> 3. كيمياء سيتولوجية مناعية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> طوال مختلف مراحل هذه العملية (انظر البروتوكول المرفق) ، فمن المهم أن تكون دقيقة pipetting المهارات لضمان قياسات دقيقة للمواد الكيميائية وغيرها من المكونات الهامة لهذه التقنية (اعرض pipetting طالب). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الخطوة الأولى في هذه العملية هو غسل أدمغة الذي ينطوي على الاستعاضة عن برنامج تلفزيوني في لوحات بكثير عن ثلاثة إلى خمسة أضعاف ، وبين كل تغسل وتوضع على لوحات جيدا على الكرسي الهزاز لمدة 10 دقيقة (PBS تظهر الطالب استبدال لوحات ووضع جيد على الروك) . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتعرض شرائح الدماغ إلى حل الضد الأولية وتخزينها في 4 درجات مئوية خلال الليل على الكرسي الهزاز (عملية عرض). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد غسل آخر ، يتعرض للشرائح الدماغ إلى الضد الثانوية لمدة ساعة على مغني الروك في درجة حرارة الغرفة ، ثم غسلها مرة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> القادم يتعرض لها العقل لإيجاد حل Avitin - البيوتين مجمع للتحضير للتصور من الخلايا الكيميائية العصبية إيجابية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للخطوة التصور النهائي ، يتعرض لها العقل لDAB. هذا هو منتج الخطرة ويجب دائما أن يكون التعامل معها بحذر. كما يتضح هنا ، شرائح الدماغ تبدأ في الحصول على أكثر قتامة أمام عينيك (اعرض العملية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد التعرض DAB ، والعقول تذهب من خلال سلسلة من الماضي ويغسل ثم وضعت بعناية على شرائح المجهر SUBBED وسمح لتجف بين عشية وضحاها (اعرض موضع شريحة الدماغ على شريحة ، انظر المرفقات للبروتوكول الشرائح SUBBED). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتم مسح الشرائح من خلال سلسلة من يغسل الماء المقطر والكحول ، وأخيرا يجري المغمورة في Citrosolv قبل coverslipped وتخزينها في slidebox لحفظها في مكان آمن (إظهار الجوانب المختلفة لهذه العملية ، انظر المرفق لعملية تبادل المعلومات). </li></ol> 4. Neuroquantification <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الشرائح قد جفت ، ويمكن تقييمهم مع برنامج neuroquantification المتخصصة. وتستخدم البرمجيات Bioquant هنا لتحديد الخلايا فاسوبريسين ايجابية والألياف في نواة مجاور للبطين من أدمغة فئران (عرض البرنامج على الشاشة... والمجهر). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تم تحديد منطقة معينة من الاهتمام باستخدام خيارات القياسمن البرنامج لإنشاء المجال البصري للneuroquantification. من المهم أن يتم كميا متناسقة حجم الحقل البصري لكل حيوان (طالب تظهر القيام بذلك). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هنا ملطخة بحزن أجسام الخلايا فاسوبريسين مناعيا ، والألياف واضحة. لأنه من الصعب الاعتماد أو تتبع هذا النسيج ، وهي ميزة خاصة من هذا البرنامج يستخدم لتحديد thresholding ضوء المبلغ الإجمالي للنسيج ملون إيجابيا داخل منطقة محددة من الفائدة. هذا thresholding يخبرنا كم من المنطقة المحددة الواردة فاسوبريسين إيجابية الأنسجة (تظهر قيمة البيانات على شاشة الكمبيوتر). </li></ol> 5. التحليل السلوكي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان أكثر من مراقب واحد وسيتم تسجيله أشرطة الفيديو ، فمن المهم وضع التصنيفات بين الموثوقية للتأكد من أن المراقبين أن يحرز السلوك بطريقة متناسقة. سجل للدورة الفعلية ، ينبغي إعداد ورقة تسجيل السلوك للسماح لتسجيل سهل للسلوك أثناء جلسات المراقبة (انظر الجدول رقم 2 على سبيل المثال من التهديف ورقة انتشار). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عن السلوكيات التي لا توجد ردود العرضية السريعة ، يمكن تحليل microsequencing تكشف الخفايا حول تطور ردود محددة. على سبيل المثال ، والاستمالة السلوك يتكون من سلسلة من ردود سريعة جدا. على الرغم من خيار واحد هو لمجرد تسجيل حضور ومدتها من الاستمالة ، وآخر هو وثيقة في سلسلة من الفعاليات المصاحبة لهذا الرد. باستخدام هذا البرنامج microsequencing والمراقبين نتيجة وجود سلوك معين في كل ثانية ، كما دفعت بواسطة برنامج (برامج العرض والفيديو). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد جمع البيانات ، وتتحدد معالم الفائدة ويتم تحليل الدرجات المناسبة السلوكية. قد تكون المدة الإجمالية أمثلة من الوقت الذي يقضيه في الاتصال مع الجرو ، أو اضطرابات في عدد من تسلسل الاستمالة (اعرض كمبيوتر مع انتشار ورقة مع البيانات المدخلة عن كل حيوان). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة وسجل سلوك من المهم أن أؤكد أن هذين النوعين معارضها استراتيجيات استجابة مختلفة للسلوك الفائدة في الدراسة. في هذه الحالة يجب أن الفئران الغزلان كاليفورنيا يحمل سلوك الأب أكثر من الفئران الغزلان المشترك. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن ترتبط تدابير سلوكية مختلفة مع التدابير المخ للحصول على عرض أكثر استنارة من التأثيرات ذات الصلة. </li></ol> 6. ممثل النتائج : <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتحقق من صحة النموذج ، وينبغي أن البيانات تشير بوضوح إلى أن تنفيذ هذين النوعين بشكل مختلف في ما يتعلق بسلوك الفائدة. هنا ترى أن P. قضى وقتا أطول من الذكور californicus الاستمالة والرابض على الجراء ، واثنين من السمات المميزة لردود الأب (انظر الشكل 4). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل تحديد ما إذا كان المتغير neurobiologial الاهتمام المهم في ردود الأب ، وكان كميا مبلغ فاسوبريسين (AVP) إيجابية الأنسجة لعدة مناطق الدماغ ذات الصلة ؛ كما يمكن أن يرى ، والأب P. وكان أكثر الحيوانات californicus الأنسجة المناعية إيجابية في العديد من هذه المناطق في الدماغ. (انظر الشكل 5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في دراسة تتعلق باستخدام تحليل microsequencing ، كان الافتراض بأن الأب الفئران كاليفورنيا سوف يحمل القلق أقل من نظرائهم من عذراء ، وبالتالي ، فإن الآباء عندما تتعرض لرائحة الحيوانات المفترسة ، وعرض عدد أقل من انقطاع في تسلسل الاستمالة من الحيوانات البكر (انظر الشكل 6). </li></ol><img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig1.jpg" /> الشكل 1 : (أ) ذكر الفئران كاليفورنيا اظهار ردود الأب تجاه الجرو مناوع الغريبة. (ب) ذكر الفأر الغزلان العارضة نهجا حذرا (التمدد الحضور) والاستجابة في تجنب وجود الغريبة مناوع الجرو. ملاحظة : في هذه التقييمات التفاعل الاجتماعي ، وإذا كان الذكور المعارض الاستجابات العدوانية تجاه الجرو ، والمجربون على الفور ضرب الجزء العلوي من القفص لإلهاء الذكور. في هذا الوقت يتم إنهاء الدورة ويتم إزالة الجرو ، وكشف عن أي إصابات ، وعاد إلى أمه. في المختبر لدينا ، وهذا نادرا ما يلاحظ مع P. ويلاحظ في بعض الأحيان ولكن مع الذكور californicus P. maniculatus ؛ مراقبة وثيقة والتدخل الفوري ، ولكن ، ومنع الأذى عن تطرأ على الحيوانات. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig2.jpg" /> الشكل 2 : فأر كاليفورنيا التفاعل مع ماوس لعبة ، ومعظم حاولت مضغه على هذه المحفزات. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig3.jpg" /> الشكل 3 : التصميم التجريبي للدراسة ، وهناك ما يقرب من 6 حيوانات في كل مجموعة عن كل الأنواع. <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig4.jpg" /> الشكل 4 : رسم عملية كيمياء سيتولوجية مناعية. <img alt="الشكل 5" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig5.jpg" /> تينوقد لوحظت استجابات أكثر الأب (العريس ، كراوتش ، وأسرع النهج) في فئران كاليفورنيا ؛ لدى عودتهم 5 ردود الأبوية في ولاية كاليفورنيا والغزلان الفئران. وقد لوحظت أكثر تمتد يحضر (الاستجابة للضغط النفسي) في الفئران الغزلان. <img alt="الشكل 6" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig6.jpg" /> الشكل 6. تفاعلية مناعية فاسوبريسين في مناطق الدماغ المختلفة لكلا النوعين. كانت الفئران كاليفورنيا أكثر تلطيخ في الخلايا PVN والألياف. <img alt="الشكل 7" src="/files/ftp_upload/3173/3173fig7.jpg" /> الشكل 7 : الأبوية الفئران أظهرت كاليفورنيا أقل انقطاع في تسلسل هذه الاستمالة في وجود رائحة حيوان مفترس من المجموعات المعرضة للالجرو وعذراء.

<ol>
	<li>Tada, N., Sato, M., Yamanoi, J., Mizorogi, T., Kasai, K., Ogawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryopreservation+of+mouse+spermatozoa+in+the+presence+of+raffinose+and+glycerol.">Cryopreservation of mouse spermatozoa in the presence of raffinose and glycerol.</a> J. Reprod. Fertil. 89, 511-516 (1990).</li><li>Yokoyama, M., Akiba, H., Katsuki, M., Nomura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+normal+young+following+transfer+of+mouse+embryos+obtained+by+in+vitro+fertilization+using+cryopreserved+spermatozoa.">Production of normal young following transfer of mouse embryos obtained by in vitro fertilization using cryopreserved spermatozoa.</a> Jikken Dobutsu. 39, 125-128 (1990).</li><li>Sztein, J. M., Farley, J. S., Young, A. F., Mobraaten, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motility+of+cryopreserved+mouse+spermatozoa+affected+by+temperature+of+collection+and+rate+of+thawing.">Motility of cryopreserved mouse spermatozoa affected by temperature of collection and rate of thawing.</a> Cryobiology. 35, 46-52 (1997).</li><li>Thornton, C. E., Brown, S. D., Glenister, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+numbers+of+mice+established+by+in+vitro+fertilization+with+cryopreserved+spermatozoa:+implications+and+applications+for+genetic+resource+banks,+mutagenesis+screens,+and+mouse+backcrosses.">Large numbers of mice established by in vitro fertilization with cryopreserved spermatozoa: implications and applications for genetic resource banks, mutagenesis screens, and mouse backcrosses.</a> Mamm. Genome. 10, 987-992 (1999).</li><li>Sztein, J. M., Farley, J. S., Mobraaten, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+fertilization+with+cryopreserved+inbred+mouse+sperm.">In vitro fertilization with cryopreserved inbred mouse sperm.</a> Biol. Reprod. 63, 1774-1780 (2000).</li><li>Liu, L., Nutter, L. M., Law, N., McKerlie, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+freezing+and+in+vitro+fertilization+in+three+substrains+of+C57BL/6+mice.">Sperm freezing and in vitro fertilization in three substrains of C57BL/6 mice.</a> J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 48, 39-43 (2009).</li><li>Nakagata, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryopreservation+of+mouse+spermatozoa+and+in+vitro+fertilization.">Cryopreservation of mouse spermatozoa and in vitro fertilization.</a> Methods. Mol. Biol. 693, 57-73 (2011).</li><li>Mazur, P., Koshimoto, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+intracellular+ice+formation+the+cause+of+death+of+mouse+sperm+frozen+at+high+cooling+rates.">Is intracellular ice formation the cause of death of mouse sperm frozen at high cooling rates.</a> Biol. Reprod. 66, 1485-1490 (2002).</li><li>Jin, B., Yamasaki, C., Yamada, N., Seki, S., Valdez, D. M., Kasai, M., Edashige, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanism+by+which+mouse+spermatozoa+are+injured+during+freezing.">The mechanism by which mouse spermatozoa are injured during freezing.</a> J. Reprod. Dev. 54, 265-269 (2008).</li><li>Visconti, P. E., Westbrook, V. A., Chertihin, O., Demarco, I., Sleight, S., Diekman, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+signaling+pathways+involved+in+sperm+acquisition+of+fertilizing+capacity.">Novel signaling pathways involved in sperm acquisition of fertilizing capacity.</a> J. Reprod. Immunol. 53, 133-150 (2002).</li><li>Ostermeier, G. C., Wiles, M. V., Farley, J. S., Taft, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conserving,+distributing+and+managing+genetically+modified+mouse+lines+by+sperm+cryopreservation.">Conserving, distributing and managing genetically modified mouse lines by sperm cryopreservation.</a> PLoS ONE. 3, e2792-e2792 (2008).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

تناقش هذه المقالة ثلاثة مكونات أساسية يعتقد أن يكون حاسما للتنفيذ الناجح للتحقيقات علم الأعصاب السلوكي : (1) نموذج حيواني ممثل وصحيحة ؛ (2) بروتوكول كيمياء سيتولوجية مناعية دقيقة وحساسة ، و (3) معظم التحليل (الرصد والإحصائية ) من البيانات على حد سواء السلوكية والدماغ. وسوف أخطاء في فئة واحدة بالتأكيد تسوية نتائج الدراسة بأكملها. وبالتالي ، وبعد اختيار دقيق للنموذج حيواني المناسبة ، ينبغي توجيه الجهد الكبير تجاه الاختبار التجريبي الإجراءات السلوكية والنسيجية أن أؤكد أن لاحظ سلوك بشكل صحيح في هذه الدراسة ، تليها المعالجة الناجحة للأدمغة. كما ذكر سابقا ، فإن استخدام أنواع المقارنة لتحديد الآليات العصبية للاستجابة خاص هو نهج قيمة المنهجية لأن هذا الأسلوب لا يتطلب الهندسة الوراثية أو التلاعب جراحية مؤلمة. وبالتالي ، فإن هذا الأسلوب المنهجي يستخدم أقل تهديد ، حيوانات سليمة. استخدام التغيرات الطبيعية للحيوانات ، ولكن ، من خلال تعزيز إدماج مثل البيئات الطبيعية حتى لو كان يتم إيواء الحيوانات في المختبر. كذلك ، إذا كان من الممكن توسيع نطاق الدراسات المعملية إلى الميدان للتحقق من صحة مزيد من الاختلافات بين الأنواع في سلوك الفائدة ، وهذا هو الموصى به الخطوة التالية. على الرغم من أن نهج توفر العديد من المزايا النسبية ، وتحديد طبيعة المترابطة للبيانات ، وبالتالي يجب استخدام تقنيات إضافية مثل التلاعب الدوائية للتحقق من زيادة دور نظم العصبية المستهدفة في سلوك الفائدة. بمجرد أن تشعر بالثقة المجربون حول الإجراءات السلوكية ، والنسيجية والإحصائية ، ينبغي توخي الحذر بحيث ظروف معيشة الحيوانات تظل ثابتة لجميع الفئات ما عدا ، بالطبع ، للتلاعب التجريبية. يمكن أن التغيرات في المتغيرات مثل جداول الضوء ، ومستويات الضوضاء ، ومقدمي الرعاية ، ومستويات الرطوبة والروائح في المختبر يكون لها تأثيرات هامة على استجابات الحيوانات العصبية الحيوية. في هذه المقالة تم استخدام الأجسام المضادة الأولية للكشف عن فاسوبريسين لكن يمكن استخدام الأجسام المضادة الأولية الأخرى لمجموعة كبيرة من neurochemicals مختلفة من الاهتمام. إذا كان مجرب يعمل مع الأجسام المضادة الجديدة ، من المهم إجراء دراسات لتحديد المعايرة تخفيف الأمثل للجسم جديدة. ويستخدم كثير من الأوقات الكثير من الأجسام المضادة (كما اقترح من قبل البائع) ، مما أدى إلى الأنسجة التي هي مظلمة جدا لتمييز الإشارات ؛ مزيد من الاستخدام المفرط للأجسام المضادة أمر مكلف جدا. أخيرا ، إذا كان يمكن استخدام أكثر من التحليل الإحصائي واحد لتقديم آراء وتفسيرات بديلة للبيانات ، ينبغي الاستفادة منها. في هذه الدراسة بصفة خاصة ، وقد استخدمت النماذج الخطية العامة ، علائقية ، وتوسيع نطاق التحليلات متعددة الأبعاد لتوفير أكبر قدر من المعلومات وجهات النظر للبيانات.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> رقم كتالوج </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> مجهر مجهر مركب </td><td> Motic </td><td> BA400 </td><td></td></tr><tr><td> BIOQUANT برامج علوم الحياة </td><td> BioQuant مؤسسة تحليل صورة </td><td> الإصدار 8.40.20 </td><td></td></tr><tr><td> ناظم البرد </td><td> Microm </td><td> HM525 </td><td></td></tr><tr><td> محرك وحدة التحكم Masterflex سهلة الحمل L / S (مضخة الإرواء) </td><td> كول - Parmer آلات الشركة </td><td> 7518-00 </td><td></td></tr><tr><td> 24 خلية ثقافة حسنا الكتلة (زراعة الأنسجة المعالجة ؛ غير مولد للحمى البوليسترين ؛ العقيمة) </td><td> كورنينج Costar </td><td> 3526 </td><td></td></tr><tr><td> مجهر الشرائح 25x75x1mm </td><td> العالم والعلم ، وشركة </td><td> 1324W </td><td></td></tr><tr><td> 22x50mm زلة غطاء NO.1 </td><td> العالم والعلم ، وشركة </td><td> 1414-1410 </td><td></td></tr><tr><td> تخرج غير معقمة 3mL الماصات نقل كبيرة لمبة </td><td> الإلكترون المجهر العلوم </td><td> 70962-9 </td><td> &amp;nbps؛ </td></tr><tr><td> Alconox منظفات بودرة </td><td> Alconox </td><td> 1104 </td><td></td></tr><tr><td> كلوريد الصوديوم </td><td> سيغما الدريخ </td><td> S9888 - 1kg </td><td> CAS 7647-14-5 </td></tr><tr><td> أحادي القاعدة فوسفات الصوديوم </td><td> طيف </td><td> SO130 </td><td> CAS 10049-21-5 </td></tr><tr><td> ثنائي الهيدرات فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة </td><td> سيغما الدريخ </td><td> 30412 </td><td> CAS 10028-24-7 </td></tr><tr><td> تريتون X </td><td> طيف </td><td> TR135 </td><td> CAS 9002-93-1 </td></tr><tr><td> Permount </td><td> الصياد </td><td> SP15 - 500 </td><td> CAS 108-88-3 </td></tr><tr><td> الكروم كبريتات البوتاسيوم </td><td> سيغما </td><td> C - 5926 </td><td> CAS 7788-99-0 </td></tr><tr><td> CitriSolv </td><td> فيشر العلمية </td><td> 22-143975 </td><td></td></tr><tr><td> الإيثانول ، زجاجات Den.Poly السامية ، 200 البرهان ، 24 × 1 لتر </td><td> Pharmco - AAPER </td><td> 111000200CSPP </td><td></td></tr><tr><td> مصل طبيعي عنزة </td><td> النواقل </td><td> S - 1000 </td><td></td></tr><tr><td> الأرنب الحليلة فاسوبريسين المضادة كاشف محددة </td><td> Immunostar ، وشركة </td><td> 20069 </td><td></td></tr><tr><td> Biotinylated المضادة للأرنب مفتش (H + L) تقارب - المنقى </td><td> النواقل </td><td> BA - 1000 </td><td></td></tr><tr><td> النخبة النموذجية Vectastain ABC كيت </td><td> النواقل </td><td> PK - 6100 </td><td></td></tr><tr><td> DAB كيت البيروكسيداز الركيزة </td><td> النواقل </td><td> SK - 4100 </td><td></td></tr><tr><td> غير منكه الجيلاتين الأصلي (4 - عدد المغلفات) 1 أوقية مربع </td><td> نوكس </td><td></td><td> شراء في متجر بقالة محلي </td></tr><tr><td> 3 ٪ بيروكسيد الهيدروجين </td><td> CareOne </td><td></td><td> الشراء في الصيدليات المحلية </td></tr><tr><td> مبيض </td><td> كلوروكس </td><td></td><td> شراء في متجر بقالة محلي </td></tr></tbody></table>

using a comparative species approach to investigate the neurobiology of paternal responses

والهدف من علم الأعصاب السلوكي هو تحديد العوامل الكامنة وراء العصبية الحيوية التي تنظم سلوكيات معينة. باستخدام نماذج حيوانية لتحقيق هذا الهدف ، والاستراتيجيات المنهجية تتطلب الكثير من التقنيات الغازية لمعالجة شدة السلوك من الفائدة (على سبيل المثال ، وأساليب الآفة ، التلاعب الدوائي ، والتقنيات microdialysis ، النماذج الحيوانية المهندسة وراثيا). استخدام منهج المقارنة الأنواع يسمح للباحثين للاستفادة من الخلافات التي تحدث بشكل طبيعي في استراتيجيات الاستجابة الموجودة في الأنواع ذات صلة وثيقة. في المختبر ، ونحن استخدام نوعين من جنس Peromyscus التي تختلف في ردود الأب. يسلك الماوس الغزلان المشتركة (Peromyscus maniculatus) الأيل كاليفورنيا الذكور الماوس (Peromyscus californicus) يسلك نفس الاستجابات الوالدية والأنثى في حين ابن عم لها ، يكاد لا توجد ردود تغذية / الأبوية في وجود الجراء. من مصلحة محددة في هذه المقالة هو استكشاف العوامل العصبية الحيوية المرتبطة ردود affiliative الاجتماعية التي أظهرتها الماوس الأب الغزلان ولاية كاليفورنيا. لأن منهج علم الأعصاب السلوكي متعدد الأوجه ، وسوف تكون المكونات الرئيسية التالية من الدراسة تناولها بإيجاز هي : تحديد الأنواع المناسبة لهذا النوع من البحوث ؛ جمع البيانات لأغراض التحليل السلوكي ، وإعداد وsectioning للأدمغة ؛ الخطوات الأساسية لتشارك في كيمياء سيتولوجية مناعية القياس الكمي للتفاعلية مناعية ، فاسوبريسين ، واستخدام البرمجيات لتصوير الأعصاب قياس أنسجة المخ ، واستخدام تحليل الفيديو microsequencing ليسجل السلوك ، وأخيرا ، فإن التحليلات الإحصائية المناسبة لتوفير أكثر التفسيرات المستنيرة للنتائج البحوث.

Watch this Scientific Journal Video about Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses at JoVE.com

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

نهج المقارنة الأنواع يسمح علماء الأعصاب السلوكي لاستكشاف العوامل العصبية الحيوية المختلفة المرتبطة سلوكيات محددة تعتبر من سمات نموذج حيواني محدد. الاستفادة من الخلافات التي تحدث بشكل طبيعي في السلوك يرتبط ارتباطا وثيقا بين الأنواع ، هذه التقنية لا تتطلب تقنيات الغازية لمعالجة التعبير عن السلوك.

باستخدام المنهج المقارن الأنواع المعنية بالتحقيق في البيولوجيا العصبية للردود الأبوية

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

using-comparative-species-approach-to-investigate-neurobiology

Research

JoVE Journal

Neuroscience

12.5K Views.  Randolph-Macon College. نهج المقارنة الأنواع يسمح علماء الأعصاب السلوكي لاستكشاف العوامل العصبية الحيوية المختلفة المرتبطة سلوكيات محددة تعتبر من سمات نموذج حيواني محدد. الاستفادة من الخلافات التي تحدث بشكل طبيعي في السلوك يرتبط ارتباطا وثيقا بين الأنواع ، هذه التقنية لا تتطلب تقني?...

Video: Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium

Understanding neural circuits requires methods to record from many neurons simultaneously. For in vitro studies, one currently available technology is planar multielectrode array (MEA) recording. Here we document the use of MEAs to study the mouse vomeronasal organ (VNO), which plays an essential role in the detection of pheromones and social cues via a diverse population of sensory neurons expressing hundreds of types of receptors. Combining MEA recording with a robotic liquid handler to deliver chemical stimuli, the sensory responses of a large and diverse population of neurons can be recorded. The preparation allows us to remove the intact neuroepithelium of the VNO from the mouse and stimulate with a battery of chemicals or potential ligands while monitoring the electrical activity of the neurons for several hours. Therefore, this technique serves as a useful method for assessing ligand activity as well as exploring the properties of receptor neurons. We present the techniques needed to prepare the vomeronasal epithelium, MEA recording, and chemical stimulation.

Multielectrode array (MEA) recordings provide a method for studying the electrical activity of large populations of neurons. Here, we present the details of a MEA preparation to record from the mouse vomeronasal epithelium while simultaneously stimulating the tissue.

تسجيلات صفيف Multielectrode من الطلائية الميكعي

Understanding neural circuits requires methods to record from many neurons simultaneously. For in vitro studies, one currently available technology is ...

Recording Behavioral Responses to Reflection in Crayfish

Social behavior depends on sensory input from the visual, mechanical and olfactory systems. One important issue concerns the relative roles of each sensory modality in guiding behavior. The role of visual inputs has been examined by isolating visual stimuli from mechanical and chemosensory stimuli. In some studies (Bruski &amp; Dunham, 1987: Delgado-Morales et al., 2004) visual inputs have been removed with blindfolds or low light intensity, and effects of remaining sensory modalities have been elucidated. An alternative approach is to study the effects of visual inputs in the absence of any appropriate mechanical and chemosensory cues. This approach aims to identify the exclusive role of visual inputs. 
We have used two methods to provide visual stimuli to crayfish without providing chemical and mechanical cues. In one method, crayfish are videotaped in an aquarium where half of the walls are covered in mirrors to provide a reflective environment, and the other half are covered in a non-reflective (matte finish) plastic. This gives the crayfish a choice between reflective and non-reflective environments. The reflective environment provides visual cues in the form of reflected images of the crayfish as it moves throughout half of the tank; these visual cues are missing from the non-reflective half of the tank. An alternative method is to videotape the behavior of crayfish in an aquarium separated by a smaller chamber at each end, with a crayfish in one small chamber providing visual cues and an inert object in the opposite small chamber providing visual input from a non-moving, non-crayfish source. 
Our published results indicate that responses of crayfish to the reflective environment depend on socialization and dominance rank. Socialized crayfish spent more time in the reflective environment and exhibited certain behaviors more frequently there than in the non-reflective environment; isolated crayfish showed no such differences. Crayfish that were housed in same-sex pairs developed a social rank of either dominant or subordinate. Responses to reflection differed between dominant and subordinate crayfish (May &amp; Mercier, 2006; May &amp; Mercier, 2007). Dominant crayfish spent more time on the reflective side, entered reflective corners more frequently and spent more time in reflective corners compared to the non-reflective side. Subordinate crayfish walked in reverse more often on the reflective side than on the non-reflective side. Preliminary data suggest similar effects from visual cues provided by a crayfish in a small adjoining chamber (May et al., 2008).

We have developed two methods for studying effects of visual cues on behavior in the absence of tactile and chemical cues. One method involves videotaping responses of crayfish to reflective walls in an aquarium; the other examines effects of visual inputs provided by a live crayfish behind a transparent partition.

تسجيل الاستجابات السلوكية للتفكير في جراد البحر

Social behavior depends on sensory input from the visual, mechanical and olfactory systems.  One important issue concerns the relative roles of each ...

Chronic Imaging of Mouse Visual Cortex Using a Thinned-skull Preparation

In vivo imaging using two-photon laser scanning microscopy (2PLSM) allows the study of living cells and neuronal processes in the intact brain. The technique presented here allows the imaging of the same area of the brain at several time points (chronic imaging) with microscopic resolution allowing the tracking of dendritic spines which are the small structures that represent the majority of postsynaptic excitatory sites in the CNS. The ability to clearly resolve fine cortical structures over several time points has many advantages, specifically in the study of brain plasticity in which morphological changes at synapses and circuit remodeling may help explain underlying mechanisms. In this video and supplementary material, we show a protocol for chronic in vivo imaging of the intact brain using a thinned-skull preparation. The thinned-skull preparation is a minimally invasive approach, which avoids potential damage to the dura and/or cortex, thus reducing the onset of an inflammatory response. When this protocol is performed correctly, it is possible to clearly monitor changes in dendritic spine characteristics in the intact brain over a prolonged period of time.

In this video and supplemental material, we show a protocol for chronic in vivo imaging of the intact brain using a thinned-skull preparation.

مزمنة التصوير ماوس القشرة البصرية باستخدام إعداد ضعفت - الجمجمة

In vivo imaging using two-photon laser scanning microscopy (2PLSM) allows the study of living cells and neuronal processes in the intact brain. The ...

Measuring the Subjective Value of Risky and Ambiguous Options using Experimental Economics and Functional MRI Methods

Most of the choices we make have uncertain consequences. In some cases the probabilities for different possible outcomes are precisely known, a condition termed "risky". In other cases when probabilities cannot be estimated, this is a condition described as "ambiguous". While most people are averse to both risk and ambiguity1,2, the degree of those aversions vary substantially across individuals, such that the subjective value of the same risky or ambiguous option can be very different for different individuals. We combine functional MRI (fMRI) with an experimental economics-based method3 to assess the neural representation of the subjective values of risky and ambiguous options4. This technique can be now used to study these neural representations in different populations, such as different age groups and different patient populations.
In our experiment, subjects make consequential choices between two alternatives while their neural activation is tracked using fMRI. On each trial subjects choose between lotteries that vary in their monetary amount and in either the probability of winning that amount or the ambiguity level associated with winning. Our parametric design allows us to use each individual's choice behavior to estimate their attitudes towards risk and ambiguity, and thus to estimate the subjective values that each option held for them. Another important feature of the design is that the outcome of the chosen lottery is not revealed during the experiment, so that no learning can take place, and thus the ambiguous options remain ambiguous and risk attitudes are stable. Instead, at the end of the scanning session one or few trials are randomly selected and played for real money. Since subjects do not know beforehand which trials will be selected, they must treat each and every trial as if it and it alone was the one trial on which they will be paid. This design ensures that we can estimate the true subjective value of each option to each subject. We then look for areas in the brain whose activation is correlated with the subjective value of risky options and for areas whose activation is correlated with the subjective value of ambiguous options.

Using functional MRI and behavioral methods to determine the neural representation of the subjective value of risky and ambiguous options in the human brain.

قياس القيمة الذاتية من خيارات محفوفة بالمخاطر والغموض باستخدام طرق التجريبية والاقتصاد التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي

Most of the choices we make have uncertain consequences. In some cases the probabilities for different possible outcomes are precisely known, a condition ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of the dendritic tree, which eventually leads to neuronal output of action potentials at the axon. The influence of diverse spatial and temporal parameters of specific synaptic input on neuronal output is currently under investigation, e.g. the distance-dependent attenuation of dendritic inputs, the location-dependent interaction of spatially segregated inputs, the influence of GABAergig inhibition on excitatory integration, linear and non-linear integration modes, and many more.
With fast micro-iontophoresis of glutamate and GABA it is possible to precisely investigate the spatial and temporal integration of glutamatergic excitation and GABAergic inhibition. Critical technical requirements are either a triggered fluorescent lamp, light-emitting diode (LED), or a two-photon scanning microscope to visualize dendritic branches without introducing significant photo-damage of the tissue. Furthermore, it is very important to have a micro-iontophoresis amplifier that allows for fast capacitance compensation of high resistance pipettes. Another crucial point is that no transmitter is involuntarily released by the pipette during the experiment.
Once established, this technique will give reliable and reproducible signals with a high neurotransmitter and location specificity. Compared to glutamate and GABA uncaging, fast iontophoresis allows using both transmitters at the same time but at very distant locations without limitation to the field of view. There are also advantages compared to focal electrical stimulation of axons: with micro-iontophoresis the location of the input site is definitely known and it is sure that only the neurotransmitter of interest is released. However it has to be considered that with micro-iontophoresis only the postsynapse is activated and presynaptic aspects of neurotransmitter release are not resolved. In this article we demonstrate how to set up micro-iontophoresis in brain slice experiments.

In this article we introduce fast micro-iontophoresis of neurotransmitters as a technique to investigate integration of postsynaptic signals with high spatial and temporal precision.

سريع الصغرى، الرحلان الشاردي من الغلوتامات وGABA: أداة مفيدة لبحث تكامل متشابك

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

Laser-scanning Photostimulation of Optogenetically Targeted Forebrain Circuits

The sensory forebrain is composed of intricately connected cell types, of which functional properties have yet to be fully elucidated. Understanding the interactions of these forebrain circuits has been aided recently by the development of optogenetic methods for light-mediated modulation of neuronal activity. Here, we describe a protocol for examining the functional organization of forebrain circuits&#160;in vitro using laser-scanning photostimulation of channelrhodopsin, expressed optogenetically via viral-mediated transfection. This approach also exploits the utility of cre-lox recombination in transgenic mice to target expression in specific neuronal cell types. Following transfection, neurons are physiologically recorded in slice preparations using whole-cell patch clamp to measure their evoked responses to laser-scanning photostimulation of channelrhodopsin expressing fibers. This approach enables an assessment of functional topography and synaptic properties. Morphological correlates can be obtained by imaging the neuroanatomical expression of channelrhodopsin expressing fibers using confocal microscopy of the live slice or post-fixed tissue. These methods enable functional investigations of forebrain circuits that expand upon more conventional approaches.

We describe a method for characterizing the functional topography and synaptic properties of forebrain circuits using an optogenetic approach to photostimulate neuronal populations&#160;in vitro.

الليزر مسح ضوئي للدوائر الدماغ الأمامي المستهدفة Optogenetically

The sensory forebrain is composed of intricately connected cell types, of which functional properties have yet to be fully elucidated. Understanding the ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This complex behavior is influenced by genetic, hormonal and environmental factors. As in many organisms, previous fighting experience influences the fighting strategy of flies and the outcome of later contests: losing a fight increases the probability of losing later contests, revealing &#34;loser&#34; effects that likely involve learning and memory 2-4. The learning and memory that accompanies expression of complex social behaviors like aggression, is sensitive to pre-test handling of animals 5,6. Many experimental procedures are used in different laboratories to study aggression 7-9, however, no routinely used protocol that excludes handling of flies is currently available. Here, we report a new behavioral apparatus that eliminates handling of flies, using instead their innate negative geotactic responses to move animals into or out of fighting chambers. In this protocol, small circular fight arenas containing a food cup are divided into two equal halves by a removable plastic slider prior to introduction of flies. Flies enter chambers from their home isolation vials via sliding chamber doors and geotaxis. Upon removal of plastic sliders, flies are free to interact. After specified time periods, flies are separated again by sliders for subsequent experimentation. All of this is done easily without handling of individual flies. This apparatus offers a novel approach to study aggression and the associated learning and memory, including the formation of &#34;loser&#34; effects in fly fights. In addition, this new general-purpose behavioral apparatus can be employed to study other social behaviors of flies and should, in general, be of interest for investigating experience-related changes in fundamental behavioral processes.

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the &quot;Loser&quot; Effect in Drosophila melanogaster

During fruit fly fights, the behavioral patterns observed, fight dynamics, and associated learning and memory are influenced by experimental conditions. The protocol presented here describes a novel procedure that entirely eliminates handling of flies during experiments. This improves fight dynamics and allows formation of strong &#34;loser&#34; effects.

نهج جديد يقضي على مناولة لدراسة العدوان و &quot;الخاسر&quot; تأثير في<em&gt; ذبابة الفاكهة السوداء البطن</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

Optical Control of a Neuronal Protein Using a Genetically Encoded Unnatural Amino Acid in Neurons

Photostimulation is a noninvasive way to control biological events with excellent spatial and temporal resolution. New methods are desired to photo-regulate endogenous proteins expressed in their native environment. Here, we present an approach to optically control the function of a neuronal protein directly in neurons using a genetically encoded unnatural amino acid (Uaa). By using an orthogonal tRNA/aminoacyl-tRNA synthetase pair to suppress the amber codon, a photo-reactive Uaa 4,5-dimethoxy-2-nitrobenzyl-cysteine (Cmn) is site-specifically incorporated in the pore of a neuronal protein Kir2.1, an inwardly rectifying potassium channel. The bulky Cmn physically blocks the channel pore, rendering Kir2.1 non-conducting. Light illumination instantaneously converts Cmn into a smaller natural amino acid Cys, activating Kir2.1 channel function. We express these photo-inducible inwardly rectifying potassium (PIRK) channels in rat hippocampal primary neurons, and demonstrate that light-activation of PIRK ceases the neuronal firing due to the outflux of K+ current through the activated Kir2.1 channels. Using in utero electroporation, we also express PIRK in the embryonic mouse neocortex in vivo, showing the light-activation of PIRK in neocortical neurons. Genetically encoding Uaa imposes no restrictions on target protein type or cellular location, and a family of photoreactive Uaas is available for modulating different natural amino acid residues. This technique thus has the potential to be generally applied to many neuronal proteins to achieve optical regulation of different processes in brains. The current protocol presents an accessible procedure for intricate Uaa incorporation in neurons in vitro and in vivo to achieve photo control of neuronal protein activity on the molecular level.

Here, a procedure to selectively activate a neuronal protein with a short pulse of light by genetically encoding a photo-reactive unnatural amino acid into a target neuronal protein expressed in neurons in culture or in vivo is presented.

مراقبة البصرية من البروتين العصبية باستخدام حمض أميني مصطنعة مشفرة وراثيا في الخلايا العصبية

Photostimulation is a noninvasive way to control biological events with excellent spatial and temporal resolution. New methods are desired to ...

Stripe Assay to Study the Attractive or Repulsive Activity of a Protein Substrate Using Dissociated Hippocampal Neurons

Growing axons develop a highly motile structure at their tip, termed the growth cone. The growth cone contacts extracellular environmental cues to navigate axonal growth. Netrin, slit, semaphorin, and ephrins are known guidance molecules that can attract or repel axons upon binding to receptors and co-receptors on the axon. The activated receptors initiate various signaling molecules in the growth cone that alter the structure and movement of the neuron. Here, we describe the detailed protocol for a stripe assay to assess the ability of a guidance molecule to attract or repel neurons. In this method, dissociated hippocampal neurons from E15.5 mice are cultured on laminin-coated dishes processed with alternating stripes of ectodomain of fibronectin and leucine-rich transmembrane protein-2 (FLRT2) and control immunoglobulin G (IgG) fragment crystallizable region (Fc) protein. Both axons and cell bodies were strongly repelled from the FLRT2-coated stripe regions after 24 h of culture. Immunostaining with tau1 showed that ~90% of the neurons were distributed on the Fc-coated stripes compared to the FLRT2-Fc-coated stripes (~10%). This result indicates that FLRT2 has a strong repulsive effect on these neurons. This powerful method is applicable not only for primary cultured neurons but also for a variety of other cells, such as neuroblasts.

Axon guidance molecules regulate neuronal migration and targeted growth-cone navigation. We present a powerful method, the stripe assay, to assess the ability of guidance molecules to attract or repulse neurons. In this protocol, we demonstrate the stripe assay by showing FLRT2's ability to repel cultured hippocampal neurons.

شريط الفحص لدراسة آخر جذاب أو مثيرة للاشمئزاز من الركيزة البروتين عن طريق فصل الخلايا العصبية الحصين

Growing axons develop a highly motile structure at their tip, termed the growth cone. The growth cone contacts extracellular environmental cues to ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

رواية السلوكية الفحص المعنية بالتحقيق في الردود ذوقي الفردي، بحرية يتحرك النحل تلعثم (<em&gt; Bombus تيريستريس</em&gt;)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...