ويدعم هذا العمل من قبل مختبر جاكسون سرطان المنح الرائدة ومركز للسرطان مؤسسة ولاية ماين.

1. بروتوكول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الماوس مع الكيتامين وزيلازين بجرعة الكيتامين ملغ 0.1 و 0.01 ملجم من زيلازين في 1 غرام من وزن الجسم. يستخدم كاربروفين (0.005 ملغ لكل 1 غرام من وزن الجسم) لتسكين ويدار قبل الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جميع الأدوات الجراحية، بما في ذلك قمة الحفر الأسنان، وبخار تعقيم الأوتوكلاف في. إذا العمليات الجراحية هي الدفعة التي يتعين القيام بها، لا بد من نصائح من الأدوات الجراحية إعادة تعقيمها مع حبة تعقيم الزجاج (أدوات العلوم الجميلة FST 250) قبل كل عملية جراحية لاحقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة الماوس قد وصلت إلى الطائرة من التخدير الجراحي، المقررة من قبل عدم وجود استجابة لقرصة أخمص القدمين، يتم وضعها على وسادة من القطن التي يتم وضعها على وسادة ثم ساخنة للحفاظ على درجة حرارة الجسم من ~ 37 ° C. ويتم رصد عمق التخدير أثناء الجراحة في كثير من الأحيان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تتم إزالة الفراء من رئيس الظهرية في منطقة الثلاثي تقريبا 3 مم ~ الذيلية إلى فتحتي الأنف وتمتد إلى نحو caudally مrvical فقرات. يتم تطبيق مرهم للعين للعيون لحمايتهم من الجفاف والاحمرار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع الماوس في recumbancy بطني وتطهير الجلد مع جراحية اليود، والإيثانول 70٪، ومسحات معقمة. تتم إزالة A الطول 0.8 * 1.0 من رفرف الجلد الذي يغطي الجانب الظهري الأمامي من عظام والجداري من الجمجمة باستخدام مقص غرامة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق مسكن موضعي، يدوكائين 0.5٪، محليا إلى السمحاق والأنسجة في محيط يتعرض للجرح. تتم إزالة السمحاق عن طريق كشط بلطف الجمجمة بشفرة مشرط، وهذا سوف يساعد الغراء CYANOACRYLATE التمسك العظام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويرد في المنطقة القشرية من الفائدة على الجمجمة مع علامة. يجب أن لا مجال الاهتمام يكون موجودا على خطوط خياطة الجمجمة، لتجنب الأضرار التي لحقت السفن الكبيرة الكامنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق طبقة رقيقة من مادة لاصقة CYANOACRYLATE على هامش الجرح، لمنع تسرب السوائل من serosanguinous، والجمجمة إلا فيومجال الاهتمام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستخدم ضوء تنشيط الاسمنت الأسنان في بروتوكول لدينا لاغلاق الجمجمة. قبل تطبيق الاسمنت الأسنان، يتم معاملة جميع الجمجمة يتعرض باستثناء المنطقة المخصصة لترقق مع الاشعال في وقت لاحق مع وكيل الرابطة من عدة ضوء تنشيط الاسمنت الأسنان. مرة واحدة يتم تجفيف كيل الرابطة، يتم تطبيق الاسمنت ضوء تنشيط الأسنان لتغطية الجمجمة. لتحقيق الاستقرار في الرأس من الفأرة لعملية جراحية لاحقة والتصوير، وجزءا لا يتجزأ من معقمة عرافة الجوز # 00-90 في الاسمنت الأسنان على مسافة من المنطقة المراد ضعيفة. استخدام ضوء تنشيط الاسمنت الأسنان يتيح لنا إعداد الجمجمة دون الحاجة إلى التسرع في إنهاء الإجراء بأكمله. بمجرد الانتهاء من إعداد الاسمنت الأسنان على الجمجمة، وخلوه من الاسمنت الأسنان مع الضوء المرئي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الشفاء من الاسمنت الأسنان، هي التي شنت حامل خوذة من الجهاز المجسم إلى عرافة الجوز على رأسه باستخدام الماوس المسمار # 00-90. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> A الدكتورالمرجع درجة الحرارة داخل الغرفة، يتم تطبيق ملحي معقم بنسبة 0.9٪ إلى منطقة الجمجمة التي ضعفت. مع المعونة من stereomicroscope، يتم استخدام عالي السرعة الحفر الصغيرة لمنطقة دائرية رقيقة من الجمجمة (عادة ~ مم 4-5 في القطر) على المنطقة من الفائدة. يتم تنفيذ الحفر وتطبيق المالحة إلى منطقة حفر بشكل متقطع أثناء إجراء رقيق لتجنب الإصابة الحرارية للأنسجة الدماغية الكامنة. المالحة يمتص الحرارة ويساعد ايضا على تخفيف العظام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجمجمة الماوس تضم اثنين من طبقات رقيقة من العظم المضغوط، يقحم طبقة سميكة من العظم الإسفنجي. يتم إزالة الطبقة الخارجية من العظم المضغوط ومعظم العظم الإسفنجي باستخدام الحفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد إزالة الغالبية العظمى من العظم الإسفنجي، يمكن أن ينظر تجاويف المتبقية داخل العظم الإسفنجي تحت المجهر تشريح، مشيرا إلى أن الحفر تقترب من طبقة داخلية العظم المضغوط. في هذه المرحلة، يجب أن يكون لا يزال سمك الجمجمة أكثر من 50 ميكرومتر. يجب أن يكون رقيق الجمجمةواصلت بعناية للحصول على إعداد رقيقة جدا (~ 20 ميكرون) وسلس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمجرد تحقيق سمك المطلوب من الجمجمة (~ 20 ميكرون)، ومصقول لأول مرة الجمجمة باستخدام سوط سيليكون حسب الطلب مع معجون الماس (6-15 ميكرون) لحوالي 10 دقيقة. وتلميع الماس معجون يخدم غرضين. أولا، يخفف المزيد من الجمجمة دون ممارسة الضغط على الجمجمة ضعيفة، وبالتالي تجنب تلف عرضي لأنسجة المخ الأساسية. الثاني، أنها بمثابة خطوة أولية لتلميع الجمجمة ضعيفة قبل استخدام أكسيد القصدير غرامة الحبيبات لتلميع الجمجمة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تلميع الماس لصق، ومصقول الجمجمة ضعيفة مع أكسيد القصدير لحوالي 10 دقيقة. مرة واحدة الجمجمة هو مصقول، يتم مسح بعيدا أكسيد القصدير مع المالحة حتى الجمجمة ضعيفة يبدو نظيفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في هذه الخطوة، إذا كان إطار الجمجمة هي لاستخدامها في التصوير في الجسم الحي طولية، وجفت تنظيف منطقة الجمجمة رقيقة. قطرة صغيرة من الواضحيتم تطبيق الغراء CYANOACRYLATE لاغلاق النافذة في الجمجمة. يجب طبقة من الغراء CYANOACRYLATE بين الجمجمة ضعيفة وساترة لتكون رقيقة قدر الإمكان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان الحقن هو المراد تنفيذها بعد إنشاء نافذة الموانئ الجمجمة، في هذه الخطوة، يتم استخدام إبرة حقنة 26-مقياس لخلق فتحة صغيرة على جانب واحد من الإطار رقيقة الجمجمة المصقول. ويستخدم هذا الانفتاح لحقن الخلايا GBM. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم سحبها ماصة زجاجية معقمة مع طرف فتح ما يقرب من 50 ميكرومتر في القطر باستخدام مجتذب ماصة. وسوف تستخدم هذه ماصة للحقن الخلايا GBM، وتحميلها على مياداة مجهرية. يتم تحميل ماصة بزاوية 30 درجة بحيث حقن الخلايا GBM الموقع سيكون بعيدا عن موقع التصوير النهائي. تتم إزالة غيض من ماصة تحت المجهر تشريح. تعليق خلية GBM هو الأمامية تحميلها في ماصة عن طريق الشفط باستخدام مضخة الحقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم تحميل ماصة حقن الخلايا مع الخليج للحاسبات الآلية، يتم نقل الماوس مرة أخرى تحت اله المجهر. وخفضت ماصة حقن نحو فتحة صغيرة في الجمجمة وإدراج نافذة أخيرا إلى الدماغ من خلال فتح باستخدام مياداة مجهرية. يتم حقن 1 ميكرولتر من تعليق خلية GBM في الدماغ 100-200 ميكرون من سطح الدماغ (السرعة: 0.1 ميكرولتر / دقيقة، المدة: 10 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجفف الجمجمة، يتم تطبيق قطرة صغيرة من الغراء واضحة لCYANOACRYLATE الجمجمة المجفف، وانضمت قطعة من 3 ملم حجم رقم 1 ساترة لمنطقة الجمجمة رقيقة ومصقولة. وختم ساترة مسافة بين الأسنان المجاورة والأسمنت الغراء مع CYANOACRYLATE. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الجراحة، ويتم حقن تحت الجلد الماوس مع 1 مل العقيمة المالحة الدافئة، وقدمت مع الحرارة تكميلية للحفاظ على درجة حرارة الجسم حتى تعافى تماما من التخدير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التصوير، والفئران هي تخدير مع الكيتامين وزيلازين في جرعة الكيتامين ملغ 0.1 و 0.01 ملجم من زيلازين في 1 غرام من وزن الجسم. ويجمد الفئران باستخدام إطار المجسم مخصصتحت المجهر. إذا يتم تنفيذ المتكررة في التصوير المجراة على أساس يومي، وسوف isofluorane يكون خيارا أفضل، والفئران سوف تظهر علامات الاعتماد مع استخدام المتكررة من الكيتامين. </li></ol> 2. ممثل النتائج A ناجحة الموانئ جراحة الجمجمة يسمح نافذة نافذة الجمجمة أن تبقى واضحة لأسابيع أو أشهر. ويبين الشكل 1 الأوعية الدموية تحت الجمجمة نافذة الموانئ وتصور باستخدام الضوء المرتدة. واستخدمت هذه الصور الأوعية الدموية ومعالم لتحديد مكان وجود مناطق الدماغ نفسه للتصوير المتكررة. لتصور كل من خلايا الأوعية الدموية وخلايا بطانة الأوعية الدموية GBM، عبرنا عن B6.Cg-TG (تك، لجنة المساواة العرقية) 1Ywa / J الماوس، التي تصف خلايا بطانة الأوعية الدموية مع 26Sor (ROSA) B6.Cg GT-tm9 (CAG-tdTomato ) Hze / J الماوس، والفئران ولدت مع خلايا بطانة الأوعية الدموية المسمى مع بروتين فلوري الأحمر tdTomato. نفذنا ثم إجراء حج القحف المنافذ على هذه ميلم، وحقن الخلايا GFP المسمى-GBM في أدمغتهم من خلال فتحة صغيرة على جانب نافذة في الجمجمة. ثم نفذنا في الجسم الحي ثنائي الفوتون التصوير طوليا على الفئران المحقونة. تم تعيين الطول الموجي الإثارة الليزر بمبلغ 910 نانومتر، مما أدى إلى إثارة كلا GFP وtdTomato. تم تنفيذ اثنين من الفوتون التصوير على المجهر مبنية خصيصا الليزر المسح الضوئي ثنائي الفوتون مع اثنين من أجهزة إنذار لللفي وقت واحد الخضراء / الحمراء القدرة على الكشف مضان. الشكل 2 يظهر في الجسم الحي المثال من بدء دبقي من خلايا GBM حقن بالقرب من الأوعية الدموية. نافذة الموانئ الجمجمة أيضا اختيارا ممتازا للالمزمنة الوقت الفاصل بين التصوير في الجسم الحي. ويبين الشكل 3 تلطيخ GFAP من أقسام القشرية من الماوس دون جراحة الموانئ والفأر 7 أيام بعد الجراحة والموانئ، وماوس 7 أيام بعد الجراحة والموانئ المالحة الحقن. ويتضح من الصور التي الماوس دون جراحة والفأر مع البرتغالTS جراحة لم يكن لديك دباق، في حين حقن المياه المالحة بعد، ويلاحظ دباق في أنسجة المخ من الفأرة، وذلك بسبب تغلغل ماصة وحقن محلول ملحي في الدماغ. هذه النتيجة تبين أن دباق لا تحدث تحت النافذة الموانئ الجمجمة، وتوفير التحقق من صحة المستقلة أن منفذي نافذة الجمجمة وصفها هنا لا يؤدي إلى دباق التي ترتبط عادة مع نافذة &quot;الجمجمة مفتوحة&quot; الجمجمة المزمن. ويبين الشكل 4 عالية الدقة تصوير العمود الفقري شجيري من الماوس نفس يوم الجراحة (يوم 0) وبعد 32 يوما من إنشاء نافذة منافذ (يوم 32)، مما يدل على أن الإطار الموانئ أيضا اختيارا ممتازا للذات الدقة العالية في التصوير المجراة. <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig1.jpg" /> الشكل 1. التصور من الأوعية الدموية تحت نافذة مصقول المقوى والجمجمة الجمجمة ضعيفة باستخدام الضوء المرتدة. تمثل أيام ر<html> تم التقاط صور اعتبارا من اليوم لعملية جراحية على الفور بعد الانتهاء من حقن الخلايا GBM، وأنه عدد الأيام بعد الجراحة. شريط النطاق: 0.5 مم <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig1large.jpg" target="_blank">اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية</a> . <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig2.jpg" /> الشكل 2. التصور من الخلايا والأوعية الدموية GBM حقن في الجسم الحي. واستخدمت كل من الفئران تحمل تك لجنة المساواة العرقية، وROSA26 CAG-tdTomato للحقن الخلايا GBM. وصفت الخلايا البطانية الوعائية مع tdTomato (الحمراء)، وخلايا وصفت GBM مع GFP (الخضراء). صور تم الحصول عليها يبدأ في 24 ساعة بعد حقن الخلايا GBM. أخذت ما مجموعه الحقول المجاورة من 10-12 النظر وتم تجميعها بالقرب من بعضها البعض، مع الخلايا التي تم تحديدها GBM حقن في وسط الميدان المجموع، لإنتاج الصور النهائية. أيام تمثل عدد أيام بعد الجراحة. مقياس بار: 100 ميكرومتر.أ href = &quot;http://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig2large.jpg&quot; الهدف = &quot;_blank&quot;&gt; اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر الرقم. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig3.jpg" /> الشكل 3. دباق لا تحدث بعد الجراحة الموانئ النافذة في الجمجمة. العلوي لوحات: الفأر القسم الدماغ الاكليلية تحت التكبير أقل. ويلاحظ أي التنشيط GFAP في أنسجة المخ؛ ماوس دون أي عملية جراحية في الجمجمة نافذة: اللوحة اليمنى. ويلاحظ أي التنشيط GFAP في أنسجة المخ؛ ماوس مع نافذة الموانئ الجمجمة ولدت في الجانب الأيمن من الدماغ: لوحة الأوسط. اللوحة اليمنى: ماوس مع نافذة الموانئ الجمجمة وحقن المياه المالحة من الجانب من النافذة الموانئ. ويلاحظ GFAP تفعيل على جانب الإطار الموانئ، ولكن ليس على جانب أنسجة المخ سليمة. مقياس بار: 1 مم. اللوحة السفلى: أعلى سلطة صور أنسجة المخ في المناطق كما هو مبين في المربع الأبيض من الصور العلوية لوحة. مقياس بار: 100 ميكرومتر. <aأ href = &quot;http://www.jove.com/files/ftp_upload/4201/4201fig3large.jpg&quot; الهدف = &quot;_blank&quot;&gt; اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر الرقم. <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/4201/4201fig4.jpg" /> الشكل 4. التصوير عالية الدقة في العمود الفقري شجيري من خاصتك-1 YFPH الفئران. صور تم الحصول عليها في يوم الجراحة الموانئ، وبعد 32 يوما الموانئ الجراحة. من الواضح من الصور أن معظم أشواك موجودة على يوم 0 مرئية بوضوح 32 يوما بعد الجراحة الموانئ. مقياس بار: 2 ميكرومتر.

<ol>
	<li>Paulino, A. C., Teh, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+brain+tumors.">Treatment of brain tumors.</a> N. Engl. J. Med. 352, 2350-2353 (2005).</li><li>Stupp, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N. Engl. J. Med. 352, 987-996 (2005).</li><li>Singh, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+human+brain+tumour+initiating+cells.">Identification of human brain tumour initiating cells.</a> Nature. 432, 396-401 (2004).</li><li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hallmarks+of+cancer:+the+next+generation.">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144, 646-674 (2011).</li><li>Cheng, L., Bao, S., Rich, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+therapeutic+implications+of+cancer+stem+cells+in+glioblastoma.">Potential therapeutic implications of cancer stem cells in glioblastoma.</a> Biochem. Pharmacol. 80, 654-665 (2010).</li><li>Cheng, L., Ramesh, A. V., Flesken-Nikitin, A., Choi, J., Nikitin, A. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+for+cancer+stem+cell+research.">Mouse models for cancer stem cell research.</a> Toxicol. Pathol. 38, 62-71 (2010).</li><li>Dirks, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+tumor+stem+cells:+the+cancer+stem+cell+hypothesis+writ+large.">Brain tumor stem cells: the cancer stem cell hypothesis writ large.</a> Mol. Oncol. 4, 420-430 (2010).</li><li>Ebben, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cancer+stem+cell+paradigm:+a+new+understanding+of+tumor+development+and+treatment.">The cancer stem cell paradigm: a new understanding of tumor development and treatment.</a> Expert Opin. Ther. Targets. 14, 621-632 (2010).</li><li>Germano, I., Swiss, V., Casaccia, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+brain+tumors,+neural+stem+cell,+and+brain+tumor+cancer+cells:+where+is+the+link.">Primary brain tumors, neural stem cell, and brain tumor cancer cells: where is the link.</a> Neuropharmacology. 58, 903-910 (2010).</li><li>Park, D. M., Rich, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biology+of+glioma+cancer+stem+cells.">Biology of glioma cancer stem cells.</a> Mol. Cells. 28, 7-12 (2009).</li><li>Bao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-like+glioma+cells+promote+tumor+angiogenesis+through+vascular+endothelial+growth+factor.">Stem cell-like glioma cells promote tumor angiogenesis through vascular endothelial growth factor.</a> Cancer Res. 66, 7843-7848 (2006).</li><li>Calabrese, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+perivascular+niche+for+brain+tumor+stem+cells.">A perivascular niche for brain tumor stem cells.</a> Cancer Cell. 11, 69-82 (2007).</li><li>Barami, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+neural+stem+cells+with+their+vascular+niche:+implications+in+the+malignant+progression+of+gliomas.">Relationship of neural stem cells with their vascular niche: implications in the malignant progression of gliomas.</a> J. Clin. Neurosci. 15, 1193-1197 (2008).</li><li>Gilbertson, R. J., Rich, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+a+tumour's+bed:+glioblastoma+stem+cells+and+the+vascular+niche.">Making a tumour's bed: glioblastoma stem cells and the vascular niche.</a> Nat. Rev. Cancer. 7, 733-736 (2007).</li><li>Cho, R. W., Clarke, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+cancer+stem+cells.">Recent advances in cancer stem cells.</a> Curr. Opin. Genet. Dev. 18, 48-53 (2008).</li><li>Drew, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+optical+access+through+a+polished+and+reinforced+thinned+skull.">Chronic optical access through a polished and reinforced thinned skull.</a> Nat. Methods. 7, 981-984 (2010).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المفتاح لنجاح الموانئ نافذة الجمجمة هو رقيق والتلميع. في حين لا يمكن أن يؤديها الأولية ترقق بسرعة، ينبغي توخي الحذر لضمان متجانسة ترقق في الجمجمة على مساحة واسعة. عادة نطبق طبقة رقيقة من المياه المالحة في الجمجمة، والجمجمة رقيقة ثم مرور واحد في وقت واحد، على ان يكون ?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> التعليقات (اختياري) </td></tr><tr><td> DMEM/F12 (1:1) مع البيروفات الصوديوم </td><td> العلوم الحرارية Hyclone </td><td> SH3026101 </td><td></td></tr><tr><td> B-27 الملحق المصل الحرة (50X) </td><td> إينفيتروجن </td><td> 17504-044 </td><td></td></tr><tr><td> GlutaMax-1 الملحق </td><td> إينفيتروجن </td><td> 35050061 </td><td></td></tr><tr><td> البنسلين الستربتوميسين الحل </td><td> العلوم الحرارية Hyclone </td><td> SV30010 </td><td></td></tr><tr><td> Accutase انزيم متوسطة خلية مفرزة </td><td> eBiosciences </td><td> 00-4555-56 </td><td></td></tr><tr><td> T25-قوارير تنفيس غطاء أخضر </td><td> SARSTEDT </td><td> 83.1810.502 </td><td></td></tr><tr><td> 70٪ كحول </td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 10٪ بوفيدون حل موضعي </td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> الكيتامين هيدروكلوريد </td><td> بتلر التموين صحة الحيوان </td><td> NDC # 11695-0550-1 </td><td></td></tr><tr><td> زيلازين </td><td> Akorn، وشركة </td><td> NADA # 139-236 </td><td></td></tr><tr><td> كاربروفين </td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> مرهم العيون </td><td> Dechra منتجات البيطرية </td><td> 17033-211-38 </td><td></td></tr><tr><td> 0.5٪ ليدوكائين هيدروكلوريد </td><td> REGENT، وشركة </td><td> NDC 0517-0625-25 </td><td></td></tr><tr><td> CYANOACRYLATE الغراء </td><td> شركة هنكل </td><td> 46551 </td><td></td></tr><tr><td> معقم مسحات </td><td> فيشر العلمية </td><td> 23-400-114 </td><td></td></tr><tr><td> لصق الماس </td><td> القطعة التموين </td><td> BBE60 </td><td></td></tr><tr><td> القصدير أكسيد </td><td> LORTONE، وشركة </td><td> 591-038 </td><td></td></tr><tr><td> بطانة بوند 2V </td><td> KURARAY الطبية وشركة </td><td> 1921-KA </td><td></td></tr><tr><td> AP-X Clearfil </td><td> KURARAY الطبية وشركة </td><td> 1721-KA </td><td></td></tr><tr><td> ملحي </td><td> JAX LAHS </td><td></td><td></td></tr><tr><td> تغطية الزجاج </td><td> وارنر الصكوك </td><td> 64-0720 </td><td></td></tr><tr><td> عرافة الجوز </td><td> أجزاء صغيرة، وشركة </td><td> HNX-0090-C </td><td></td></tr><tr><td> حقنة مضخة </td><td> Syringepump.com </td><td> NE-1000 </td><td></td></tr><tr><td> ثنائي الفوتون التصوير نظام </td><td> المبنية حسب الطلب (أي نظام من شأنه التجاريةالعمل) </td><td></td><td></td></tr></table>

imaging glioma initiation in vivo through a polished and reinforced thin-skull cranial window

دبقي هي واحدة من أكثر أشكال السرطان فتكا من الإنسان. العلاج الأكثر فعالية لدبقي جراحة حديثة تليها الاشعاع المعاملة يقدم المرضى فوائد متواضعة، حيث أن معظم المرضى لا البقاء على قيد الحياة أكثر من خمس سنوات بعد التشخيص بسبب الانتكاس 1،2 دبقي. اكتشاف الخلايا الجذعية السرطانية في أورام الدماغ البشري يحمل وعدا عن وجود تأثير هائل على وضع استراتيجيات علاجية جديدة لدبقي 3. وتعرف الخلايا الجذعية السرطانية بقدرتها على حد سواء في تقرير المصير، وتفرق لتجديد، ويعتقد أن تكون الخلايا السرطانية فقط في أن لديها القدرة على الشروع في أورام جديدة 4. ويعتقد دبقي الانتكاس العلاج الإشعاعي التالي لتنشأ من مقاومة الخلايا الجذعية دبقي (GSCs) للعلاج 5-10. في الجسم الحي، وترد GSCs للإقامة في محراب حول الوعاء وهذا أمر مهم للحفاظ على الخلايا الجذعية من خصائص شبيهة 11-14 . المركزية إلى املنظماتzation من مكانة GSC هي خلايا بطانة الأوعية الدموية 12. الأدلة الموجودة تشير إلى أن GSCs وتفاعلها مع خلايا بطانة الأوعية الدموية هي مهمة للتنمية الورم، وتحديد GSCs وتفاعلها مع الخلايا البطانية كأهداف العلاجية الهامة لدبقي. يتم تحديد وجود GSCs تجريبيا من قدرتها على بدء أورام جديدة على زرع مثلي 15. ويتحقق هذا عادة عن طريق حقن عدد محدد من الخلايا المعزولة من الأورام GBM الإنسان في أدمغة الفئران التي تعاني من نقص المناعة الشديد، أو من الخلايا GBM الماوس في أدمغة الفئران مسانج مشترك المضيف. ثم يتم إجراء فحوصات لنمو الورم بعد الوقت الكافي للسماح GSCs بين خلايا GBM حقن تثير أسابيع الأورام عادة جديدة، أو عدة أشهر. وبالتالي، المقايسات القائمة لا تسمح دراسة العملية المرضية من المهم بدء الورم من GSCs واحدة في الجسم الحي. ونتيجة لذلك، من الضروري طnsights في أدوار معينة من GSCs وتفاعلها مع خلايا بطانة الأوعية الدموية في المراحل الأولى من بدء الورم غير متوفرة. رؤى مثل هذه العناصر الهامة لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة لدبقي، وسيكون لها آثار كبيرة على منع الانتكاس في المرضى الذين دبقي. هنا تكيفنا المنافذ الجمجمة إجراء إطار 16 و في الجسم الحي ثنائي الفوتون المجهري للسماح التصور من بدء الورم من الخلايا المحقونة GBM في دماغ فأر حي. سوف أسلوبنا تمهيد الطريق لمستقبل الجهود لتوضيح الآليات الرئيسية عصبي بين خلايا بطانية GSCs والأوعية الدموية أثناء بدء دبقي.

Watch this Scientific Journal Video about Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window at JoVE.com

Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

من خلال الجمع بين ومصقول المقوى رقيقة الجمجمة (منافذ) الجمجمة وورم أرومي دبقي إطار حقن الخلايا (GBM)، يمكننا أن نلاحظ بدء دبقي والنمو من خلايا GBM حقن في دماغ فأر حي طوليا.

بدء تصوير دبقي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; من خلال نافذة رقيقة الجمجمة ملمع وعززت القحف

Glioma is the one of the most lethal forms of human cancer. The most effective glioma therapy to date-surgery followed by radiation treatment-offers ...

imaging-glioma-initiation-vivo-through-polished-reinforced-thin-skull

Research

JoVE Journal

Medicine

Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

13.0K Views.  The Jackson Laboratory. من خلال الجمع بين ومصقول المقوى رقيقة الجمجمة (منافذ) الجمجمة وورم أرومي دبقي إطار حقن الخلايا (GBM)، يمكننا أن نلاحظ بدء دبقي والنمو من خلايا GBM حقن في دماغ فأر حي طوليا.

Video: Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading to an accumulation of lipid-laden intra-luminal plaque, smooth muscle cell proliferation and progressive narrowing of the vessel lumen. The formation of such vulnerable plaques prone to rupture underlies the majority of cases of acute myocardial infarction. The complex molecular and cellular inflammatory cascade is orchestrated by the recruitment of T lymphocytes and macrophages and their paracrine effects on endothelial and smooth muscle cells.1
Molecular imaging in atherosclerosis has evolved into an important clinical and research tool that allows in vivo visualization of inflammation and other biological processes. Several recent examples demonstrate the ability to detect high-risk plaques in patients, and assess the effects of pharmacotherapeutics in atherosclerosis.4 While a number of molecular imaging approaches (in particular MRI and PET) can image biological aspects of large vessels such as the carotid arteries, scant options exist for imaging of coronary arteries.2 The advent of high-resolution optical imaging strategies, in particular near-infrared fluorescence (NIRF), coupled with activatable fluorescent probes, have enhanced sensitivity and led to the development of new intravascular strategies to improve biological imaging of human coronary atherosclerosis.
Near infrared fluorescence (NIRF) molecular imaging utilizes excitation light with a defined band width (650-900 nm) as a source of photons that, when delivered to an optical contrast agent or fluorescent probe, emits fluorescence in the NIR window that can be detected using an appropriate emission filter and a high sensitivity charge-coupled camera. As opposed to visible light, NIR light penetrates deeply into tissue, is markedly less attenuated by endogenous photon absorbers such as hemoglobin, lipid and water, and enables high target-to-background ratios due to reduced autofluorescence in the NIR window. Imaging within the NIR 'window' can substantially improve the potential for in vivo imaging.2,5
Inflammatory cysteine proteases have been well studied using activatable NIRF probes10, and play important roles in atherogenesis. Via degradation of the extracellular matrix, cysteine proteases contribute importantly to the progression and complications of atherosclerosis8. In particular, the cysteine protease, cathepsin B, is highly expressed and colocalizes with macrophages in experimental murine, rabbit, and human atheromata.3,6,7 In addition, cathepsin B activity in plaques can be sensed in vivo utilizing a previously described 1-D intravascular near-infrared fluorescence technology6, in conjunction with an injectable nanosensor agent that consists of a poly-lysine polymer backbone derivatized with multiple NIR fluorochromes (VM110/Prosense750, ex/em 750/780nm, VisEn Medical, Woburn, MA) that results in strong intramolecular quenching at baseline.10 Following targeted enzymatic cleavage by cysteine proteases such as cathepsin B (known to colocalize with plaque macrophages), the fluorochromes separate, resulting in substantial amplification of the NIRF signal. Intravascular detection of NIR fluorescence signal by the utilized novel 2D intravascular NIRF catheter now enables high-resolution, geometrically accurate in vivo detection of cathepsin B activity in inflamed plaque.
In vivo molecular imaging of atherosclerosis using catheter-based 2D NIRF imaging, as opposed to a prior 1-D spectroscopic approach,6 is a novel and promising tool that utilizes augmented protease activity in macrophage-rich plaque to detect vascular inflammation.11,12 The following research protocol describes the use of an intravascular 2-dimensional NIRF catheter to image and characterize plaque structure utilizing key aspects of plaque biology. It is a translatable platform that when integrated with existing clinical imaging technologies including angiography and intravascular ultrasound (IVUS), offers a unique and novel integrated multimodal molecular imaging technique that distinguishes inflammatory atheromata, and allows detection of intravascular NIRF signals in human-sized coronary arteries.

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

We detail a new near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for 2-dimensional intravascular molecular imaging of plaque biology in vivo. The NIRF catheter can visualize key biological processes such as inflammation by reporting on the presence of plaque-avid activatable and targeted NIR fluorochromes. The catheter utilizes clinical engineering and power requirements and is targeted for application in human coronary arteries. The following research study describes a multimodal imaging strategy that utilizes a novel in vivo intravascular NIRF catheter to image and quantify inflammatory plaque in proteolytically active inflamed rabbit atheromata.

في الجسم الحي الأدنى الإسفار التصوير بالأشعة تحت الحمراء داخل الأوعية (NIRF) الجزيئية من البلاك التهابية ، وهو النهج المتعدد الوسائط إلى التصوير من تصلب الشرايين

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate since the advent of in vivo bioluminescent imaging technologies 1-3. Indeed, the ability to locate and quantify tumor growth longitudinally in a single cohort of animals to completion of the study as opposed to sacrificing individual groups of animals at specific assay times has revolutionized how researchers investigate breast cancer metastasis. Unfortunately, current methodologies preclude the real-time assessment of critical changes that transpire in cell signaling systems as breast cancer cells (i) evolve within primary tumors, (ii) disseminate throughout the body, and (iii) reinitiate proliferative programs at sites of a metastatic lesion. However, recent advancements in bioluminescent imaging now make it possible to simultaneously quantify specific spatiotemporal changes in gene expression as a function of tumor development and metastatic progression via the use of dual substrate luminescence reactions. To do so, researchers take advantage for two light-producing luciferase enzymes isolated from the firefly (Photinus pyralis) and sea pansy (Renilla reniformis), both of which react to mutually exclusive substrates that previously facilitated their wide-spread use in in vitro cell-based reporter gene assays 4. Here we demonstrate the in vivo utility of these two enzymes such that one luminescence reaction specifically marks the size and location of a developing tumor, while the second luminescent reaction serves as a means to visualize the activation status of specific signaling systems during distinct stages of tumor and metastasis development. Thus, the objectives of this study are two-fold. First, we will describe the steps necessary to construct dual bioluminescent reporter cell lines, as well as those needed to facilitate their use in visualizing the spatiotemporal regulation of gene expression during specific steps of the metastatic cascade. Using the 4T1 model of breast cancer metastasis, we show that the in vivo activity of a synthetic Smad Binding Element (SBE) promoter was decreased dramatically in pulmonary metastasis as compared to that measured in the primary tumor 4-6. Recently, breast cancer metastasis was shown to be regulated by changes within the primary tumor microenvironment and reactive stroma, including those occurring in fibroblasts and infiltrating immune cells 7-9. Thus, our second objective will be to demonstrate the utility of dual bioluminescent techniques in monitoring the growth and localization of two unique cell populations harbored within a single animal during breast cancer growth and metastasis.

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

Herein we describe the methods to construct, visualize, and quantify the bioluminescent reactions of both firefly and renilla luciferase enzymes expressed in metastatic breast cancer cells during their growth and metastasis in vivo.

في الجسم الحي التصوير المزدوج الركيزة Bioluminescent

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be performed in many locations overlying the rat cerebrum, but is most easily carried out by creating a craniectomy over the readily accessible frontal or parietal bones. Most frequently, we have used this technique in combination with the endothelin-1 middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke to quantify the changes in middle cerebral artery vessel diameter that occur with injection of endothelin-1 into the brain parenchyma adjacent to the proximal MCA4, 5. In order to visualize the proximal portion of the MCA during endothelin -1 induced MCAO, we use a technique to create a cranial window through the temporal bone on the lateral aspect of the rat skull (Figure 1). Cerebral arteries can be visualized either with the dura intact or with the dura incised and retracted. Most commonly, we leave the dura intact during visualization since endothelin-1 induced MCAO involves delivery of the vasoconstricting peptide into the brain parenchyma. This bypasses the need to incise the dura directly over the visualized vessels for drug delivery. This protocol will describe how to create a cranial window to visualize cerebral arteries in a step-wise fashion, as well as how to avoid many of the potential pitfalls pertaining to this method.

This article describes a method for visualizing rat cerebral arteries through a cranial window using temporal craniectomy in order to view proximal portions of the middle cerebral artery (Figure 1). This versatile method can be combined with various techniques of drug delivery to measure cerebral artery reactivity in vivo.

الاستفادة من وجود نافذة القحف لتصور الشريان الدماغي الأوسط خلال Endothelin-1 انسداد الشريان الدماغي الأوسط المستحثة

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

3D-Neuronavigation In Vivo Through a Patient's Brain During a Spontaneous Migraine Headache

A growing body of research, generated primarily from MRI-based studies, shows that migraine appears to occur, and possibly endure, due to the alteration of specific neural processes in the central nervous system. However, information is lacking on the molecular impact of these changes, especially on the endogenous opioid system during migraine headaches, and neuronavigation through these changes has never been done. This study aimed to investigate, using a novel 3D immersive and interactive neuronavigation (3D-IIN) approach, the endogenous &#181;-opioid transmission in the brain during a migraine headache attack in vivo. This is arguably one of the most central neuromechanisms associated with pain regulation, affecting multiple elements of the pain experience and analgesia. A 36 year-old female, who has been suffering with migraine for 10 years, was scanned in the typical headache (ictal) and nonheadache (interictal) migraine phases using Positron Emission Tomography (PET) with the selective radiotracer [11C]carfentanil, which allowed us to measure &#181;-opioid receptor availability in the brain (non-displaceable binding potential - &#181;OR BPND). The short-life radiotracer was produced by a cyclotron and chemical synthesis apparatus on campus located in close proximity to the imaging facility. Both PET scans, interictal and ictal, were scheduled during separate mid-late follicular phases of the patient's menstrual cycle. During the ictal PET session her spontaneous headache attack reached severe intensity levels; progressing to nausea and vomiting at the end of the scan session. There were reductions in &#181;OR BPND in the pain-modulatory regions of the endogenous &#181;-opioid system during the ictal phase, including the cingulate cortex, nucleus accumbens (NAcc), thalamus (Thal), and periaqueductal gray matter (PAG); indicating that &#181;ORs were already occupied by endogenous opioids released in response to the ongoing pain. To our knowledge, this is the first time that changes in &#181;OR BPND during a migraine headache attack have been neuronavigated using a novel 3D approach. This method allows for interactive research and educational exploration of a migraine attack in an actual patient's neuroimaging dataset.

3D-Neuronavigation In Vivo Through a Patient&#039;s Brain During a Spontaneous Migraine Headache

In this study, the authors report for the first time a novel 3D-Immersive &#38; Interactive Neuronavigation (3D-IIN) through the impact of a spontaneous migraine headache attack in the &#956;-opioid system of a patient's brain in vivo.

3D-Neuronavigation<em&gt; في فيفو</em&gt; من خلال الدماغ المريض خلال العفوي الصداع النصفي

A growing body of research, generated primarily from MRI-based studies, shows that migraine appears to occur, and possibly endure, due to the alteration ...

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in vivo demonstration of such cells has only recently been attained. Here, in vivo imaging techniques to investigate the role of endogenous osteogenic stem/progenitor cells (OSPCs) and their progeny in bone repair are provided. Using osteo-lineage cell tracing models and intravital imaging of induced microfractures in calvarial bone, OSPCs can be directly observed during the first few days after injury, in which critical events in the early repair process occur. Injury sites can be sequentially imaged revealing that OSPCs relocate to the injury, increase in number and differentiate into bone forming osteoblasts. These methods offer a means of investigating the role of stem cell-intrinsic and extrinsic molecular regulators for bone regeneration and repair.

Sequential In vivo Imaging of Osteogenic Stem/Progenitor Cells During Fracture Repair

Quantitative measurement of bone progenitor function in fracture healing requires high resolution serial imaging technology. Here, protocols are provided for using intravital microscopy and osteo-lineage tracking to sequentially image and quantify the migration, proliferation and differentiation of endogenous osteogenic stem/progenitor cells in the process of repairing bone fracture.

تسلسلي<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; التصوير من الخلايا الجذعية المكونة للعظم / السلف خلال اصلاح الكسر

Bone turns over continuously and is highly regenerative following injury. Osteogenic stem/progenitor cells have long been hypothesized to exist, but in ...

Combined In vivo Optical and &#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in vivo optical and &#956;CT imaging allow the visualization of biological phenomena in an anatomical context. These imaging modalities may be especially useful to study conditions that impact bone. In particular, orthopaedic implant infections are an important problem in clinical orthopaedic surgery. These infections are difficult to treat because bacterial biofilms form on the foreign surgically implanted materials, leading to persistent inflammation, osteomyelitis and eventual osteolysis of the bone surrounding the implant, which ultimately results in implant loosening and failure. Here, a mouse model of an infected orthopaedic prosthetic implant was used that involved the surgical placement of a Kirschner-wire implant into an intramedullary canal in the femur in such a way that the end of the implant extended into the knee joint. In this model, LysEGFP mice, a mouse strain that has EGFP-fluorescent neutrophils, were employed in conjunction with a bioluminescent Staphylococcus aureus strain, which naturally emits light. The bacteria were inoculated into the knee joints of the mice prior to closing the surgical site. In vivo bioluminescent and fluorescent imaging was used to quantify the bacterial burden and neutrophil inflammatory response, respectively. In addition, &#956;CT imaging was performed on the same mice so that the 3D location of the bioluminescent and fluorescent optical signals could be co-registered with the anatomical &#956;CT images. To quantify the changes in the bone over time, the outer bone volume of the distal femurs were measured at specific time points using a semi-automated contour based segmentation process. Taken together, the combination of in vivo bioluminescent/fluorescent imaging with &#956;CT imaging may be especially useful for the noninvasive monitoring of the infection, inflammatory response and anatomical changes in bone over time.

Combined In vivo Optical and  &amp;#181;CT Imaging to Monitor Infection, Inflammation, and Bone Anatomy in an Orthopaedic Implant Infection in Mice

Combined optical and &#956;CT imaging in a mouse model of orthopaedic implant infection, utilizing a bioluminescent engineered strain of Staphylococcus aureus, provided the capability to noninvasively and longitudinally monitor the dynamics of the bacterial infection, as well as the corresponding inflammatory response and anatomical changes in the bone.

جنبا إلى جنب<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; بصري وμCT التصوير لرصد العدوى، التهاب، وتشريح العظام في العدوى زراعة العظام في الفئران

Multimodality imaging has emerged as a common technological approach used in both preclinical and clinical research. Advanced techniques that combine in ...

State of the Art Cranial Ultrasound Imaging in Neonates

Cranial ultrasound (CUS) is a reputable tool for brain imaging in critically ill neonates. It is safe, relatively cheap and easy to use, even when a patient is unstable. In addition it is radiation-free and allows serial imaging. CUS possibilities have steadily expanded. However, in many neonatal intensive care units, these possibilities are not optimally used. We present a comprehensive approach for neonatal CUS, focusing on optimal settings, different probes, multiple acoustic windows and Doppler techniques. This approach is suited for both routine clinical practice and research purposes. In a live demonstration, we show how this technique is performed in the neonatal intensive care unit. Using optimal settings and probes allows for better imaging quality and improves the diagnostic value of CUS in experienced hands. Traditionally, images are obtained through the anterior fontanel. Use of supplemental acoustic windows (lambdoid, mastoid, and lateral fontanels) improves detection of brain injury. Adding Doppler studies allows screening of patency of large intracranial arteries and veins. Flow velocities and indices can be obtained. Doppler CUS offers the possibility of detecting cerebral sinovenous thrombosis at an early stage, creating a window for therapeutic intervention prior to thrombosis-induced tissue damage. Equipment, data storage and safety aspects are also addressed.

Cranial ultrasound (CUS) is a valuable tool for brain imaging in critically ill neonates. This video shows a comprehensive approach for neonatal (Doppler) CUS for both clinical and research purposes, including a bedside demonstration of the technique.

حالة من الفن الجمجمة التصوير بالموجات فوق الصوتية في حديثي الولادة

Cranial ultrasound (CUS) is a reputable tool for brain imaging in critically ill neonates. It is safe, relatively cheap and easy to use, even when a ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

القياس عن بعد داخل الرحم لقياس ماوس مقلص الضغط<em&gt; في فيفو</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest improved outcome measures in both experimental and clinical studies. Although the BMMSC are implanted into the tendon lesion in large numbers (usually 10 - 20 million cells), only a relatively small number survive (&#60;10%) although these can persist for up to 5 months after implantation. This appears to be a common observation in other species where BMMSC have been implanted into other tissues and it is important to understand when this loss occurs, how many survive the initial implantation process and whether the cells are cleared into other organs. Tracking the fate of the cells can be achieved by radiolabeling the BMMSC prior to implantation which allows non-invasive in vivo imaging of cell location and quantification of cell numbers.
This protocol describes a cell labeling procedure that uses Technetium-99m (Tc-99m), and tracking of these cells following implantation into injured flexor tendons in horses. Tc-99m is a short-lived (t1/2 of 6.01 hr) isotope that emits gamma rays and can be internalized by cells in the presence of the lipophilic compound hexamethylpropyleneamine oxime (HMPAO). These properties make it ideal for use in nuclear medicine clinics for the diagnosis of many different diseases. The fate of the labeled cells can be followed in the short term (up to 36 hr) by gamma scintigraphy to quantify both the number of cells retained in the lesion and distribution of the cells into lungs, thyroid and other organs. This technique is adapted from the labeling of blood leukocytes and could be utilized to image implanted BMMSC in other organs.

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

This protocol describes the radiolabeling of equine mesenchymal stem cells and their implantation into tendon injuries in the horse in order to determine cell survival and tissue distribution using gamma scintigraphy.

في فيفو التصوير وتتبع التكنيتيوم-99m إعتبر نخاع العظم الوسيطة الخلايا الجذعية في فرسي Tendinopathy

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

نضوب خلايا الفأر من Xenografts ورم الإنسان يحسن بشكل ملحوظ تحليل المصب من الخلايا المستهدفة

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...