نشكر السيدة أنجيلا فرويند للمساعدة التقنية الممتازة في باجتزاء الدعامات جزءا لا يتجزأ من البلاستيك. كما نشكر السيدة رويا سلطان والسيدة أنجيلا فرويند لمساعدة مهنية مع تلطيخ المناعية.

1. الدعامة إعداد وزرع <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> والدعامة الدعامات (فورت واين معادن، كاسلبار، أيرلندا) كانت مضفر ثم خفض إلى الحجم المطلوب في معهد تكنولوجيا النسيج والهندسة الميكانيكية، جامعة آخن في ألمانيا (الشكل 1A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل الزرع، يجب أن يتم نقل الدعامات إلى سم أنبوب السيليكون 2، وذلك باستخدام ملقط، ووضعها 2 ملم في نهاية محطة واحدة، ويشار الواجهة الأمامية (الشكل 1A). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن تقطع الواجهة الأمامية بشكل غير مباشر، لضمان وجود طرف حاد لزرع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل الزرع، وينبغي أن تكون الدعامات الماء بوفرة، لضمان انزلاق. </li></ol> 2. زرع دعامات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10-12 أسابيع من العمر ذكر C57BL / 6 الفئران نوع البرية، 25-27 ز هي تخدير باستخدام حقن داخل الصفاق من 100 ملغم / كغم من الكيتامين و 10 مغ / كغ زيلازين. تأكيد التخدير المناسب قبل الجراحة بسبب عدم وجود ردود الفعل وحركة حية. لمنع جفاف بينما تحت التخدير، يتم تغطية العينين الماوس عن طريق فيلم من bepanthene كريم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الحلاقة والتعقيم السليم للمنطقة الرقبة بطني، يتم إجراء شق صغير متوسط ​​من 1 سم تحت stereomicroscope، وذلك باستخدام مقص. بعد فصل الهيئات الدهنية 2 مع ملقط معقم المنحني، والشريان السباتي المشترك الأيسر ويمكن رؤية النبض جنبا إلى جنب مع القصبة الهوائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن يكون 1 سم من الشريان السباتي المشترك الأيسر والتشعب أعد مجانا. وسوف تكون ملزمة 1 عقدة باستخدام الموضوع 5/0 الحرير حول الشريان السباتي المشترك الأيسر، سوف تكون ملزمة 2 عقدة باستخدام 7/0 خيوط الحرير حول الشريان السباتي الخارجي اليسار، وسوف تكون ملزمة 1 عقدة باستخدام الموضوع 7/0 الحرير حول الشريان السباتي الداخلي (الشكل 1B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم يتوقف تدفق الدم عن طريق ربط عقدة في الشريان السباتي الداخلي والشريان السباتي الخارجي الداني بحزم، وكذلك عن طريق سحب عقدة المحيطيجي الشريان السباتي المشترك. ينبغي أن تكون ثابتة السفينة بطريقة الشريان السباتي المشترك والخارجية هي في خط مستقيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إجراء شق صغير في الشريان السباتي الخارجي، بالقرب من عقدة الداني، وذلك باستخدام مقص Vannas. يتم إدخال أنبوب السيليكون التي تحتوي على دعامة في الشريان السباتي الخارجي، مع نهاية حادة في الجبهة، واستخدام دليل من الأسلاك. بعد الدعامات تصل إلى الموضع المطلوب، يتم سحبها أنبوب السيليكون إلى أكثر من دليل من الأسلاك، وتتيح للتوسع شكل الذاكرة من الدعامات (1B الشكل). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عقدة البعيدة على الشريان السباتي الخارجي وربط بإحكام لإغلاق موقع شق وعقدة في الشريان السباتي الداخلي والمشتركة وإزالتها، وبالتالي استعادة تدفق الدم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إغلاق شق الجلد باستخدام 3-4 ميشال مقاطع خياطة وميشال forcep. يتم وضع الماوس تحت الضوء الأحمر حتى الشفاء التام. علاج مسكن ليست ضرورية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الويمكن تحليل الترسبات بعد 1-3 أسابيع. لدراسة إعادة تبطنن، في وقت سابق نقطة نهاية الوقت ضروري (3-4 أيام). لاحظنا في نموذجنا من زرع دعامات أنه بعد 4 أسابيع هذا التدخل الجراحي، وخاصة عن طريق استخدام طلاء محددة لbiofunctionalize الدعامات المنمنمة، يحدث neoangiogenesis في ما يقرب من 30٪ من العينة. هذا هو الخلفيتين لعمليات إعادة عرض والتجدد، مع آليات مختلفة ويمثل مشكلة مرضية أخرى. التركيز على neointima تشكيل، تضيق في الدعامة و / أو تحليل الآليات الكامنة وراء هذه الآثار الجانبية بعد زرع الدعامة نقطة نهاية الوقت من 3 أسابيع سيكون من المفيد عدم خلط مع الآثار الناجمة عن التجدد بداية neoangiogenesis. </li></ol> 3. تحليل لتشكيل اللوحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند نقطة نهاية الوقت، ويتم تخدير الحيوانات باستخدام حقن داخل الصفاق من 100 ملغم / كغم من الكيتامين و 10 مغ / كغ زيلازين.تأكيد التخدير المناسب قبل الجراحة بسبب عدم وجود ردود الفعل والحركة لحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم قتل الحيوانات عن طريق استنزاف intracardial. يتم جمع مصل الدم لمزيد من التحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد فتح التجويف الصدري وPBS غسل عبر intracardial punction، وهي هيئة نضح مع بارافورمالدهيد 4٪ (PFA) حل يتم تنفيذ لمدة 5 دقائق. يتم تشريح الشريان السباتي الأيسر الذي يحتوي على الدعامات، وضعها مباشرة في حل PFA 4٪ و 16 ساعة على الأقل embbeded في وقت لاحق من البلاستيك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تنفيذ 50 ميكرون أبواب سميكة من عينات من البلاستيك جزءا لا يتجزأ من استخدام الفرقة الماس رأى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لقياس حجم لوحة، يتم تنفيذ تلطيخ بالغيمزا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتحليل معدل إعادة تبطنن داخل منطقة stented للسفينة، يتم تنفيذ المناعية لعامل فون ويلبراند (عامل فون). </li></ol>

<ol>
	<li>Ross, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+to+injury+and+atherogenesis.">Response to injury and atherogenesis.</a> Am. J. Pathol. 86, 675-684 (1977).</li><li>Virmani, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+the+vulnerable+plaque.">Pathology of the vulnerable plaque.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 47, 13-18 (2006).</li><li>Farb, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+acute+and+chronic+coronary+stenting+in+humans.">Pathology of acute and chronic coronary stenting in humans.</a> Circulation. 99, 44-52 (1999).</li><li>Weber, C., Noels, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis:+current+pathogenesis+and+therapeutic+options.">Atherosclerosis: current pathogenesis and therapeutic options.</a> Nat. Med. 17, 1410-1422 (2011).</li><li>Lenzen, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+and+outcome+of+patients+with+established+coronary+artery+disease:+the+Euro+Heart+Survey+on+coronary+revascularization.">Management and outcome of patients with established coronary artery disease: the Euro Heart Survey on coronary revascularization.</a> Eur. Heart J. 26, 1169-1179 (2005).</li><li>Babapulle, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+hierarchical+Bayesian+meta-analysis+of+randomised+clinical+trials+of+drug-eluting+stents.">A hierarchical Bayesian meta-analysis of randomised clinical trials of drug-eluting stents.</a> Lancet. 364, 583-591 (2004).</li><li>Wiviott, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intensive+oral+antiplatelet+therapy+for+reduction+of+ischaemic+events+including+stent+thrombosis+in+patients+with+acute+coronary+syndromes+treated+with+percutaneous+coronary+intervention+and+stenting+in+the+TRITON-TIMI+38+trial:+a+subanalysis+of+a+randomised+trial.">Intensive oral antiplatelet therapy for reduction of ischaemic events including stent thrombosis in patients with acute coronary syndromes treated with percutaneous coronary intervention and stenting in the TRITON-TIMI 38 trial: a subanalysis of a randomised trial.</a> Lancet. 371, 1353-1363 (2008).</li><li>van Werkum, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+coronary+stent+thrombosis:+the+Dutch+Stent+Thrombosis+Registry.">Predictors of coronary stent thrombosis: the Dutch Stent Thrombosis Registry.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 53, 1399-1409 (2009).</li><li>Finn, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+responses+to+drug+eluting+stents:+importance+of+delayed+healing.">Vascular responses to drug eluting stents: importance of delayed healing.</a> Arterioscler. Thromb Vasc. Biol. 27, 1500-1510 (2007).</li><li>Joner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+drug-eluting+stents+in+humans:+delayed+healing+and+late+thrombotic+risk.">Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 48, 193-202 (2006).</li><li>Cines, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cells+in+physiology+and+in+the+pathophysiology+of+vascular+disorders.">Endothelial cells in physiology and in the pathophysiology of vascular disorders.</a> Blood. 91, 3527-3561 (1998).</li><li>Hristov, M., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+characterization,+pathophysiology,+and+possible+clinical+relevance.">Endothelial progenitor cells: characterization, pathophysiology, and possible clinical relevance.</a> J. Cell Mol. Med. 8, 498-508 (2004).</li><li>Rabelink, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells:+more+than+an+inflammatory+response?.">Endothelial progenitor cells: more than an inflammatory response?.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 24, 834-838 (2004).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+evaluation+of+drug-eluting+stents+for+peripheral+applications:+recommendations+from+an+expert+consensus+group.">Preclinical evaluation of drug-eluting stents for peripheral applications: recommendations from an expert consensus group.</a> Circulation. 110, 2498-2505 (2004).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+neointimal+response+to+coronary+artery+injury+in+pigs+and+dogs.+Implications+for+restenosis+models.">Differential neointimal response to coronary artery injury in pigs and dogs. Implications for restenosis models.</a> Arterioscler. Thromb. 14, 395-400 (1994).</li><li>Schwartz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restenosis+and+the+proportional+neointimal+response+to+coronary+artery+injury:+results+in+a+porcine+model.">Restenosis and the proportional neointimal response to coronary artery injury: results in a porcine model.</a> J. Am. Coll. Cardiol. 19, 267-274 (1992).</li><li>Ali, Z. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+in-stent+stenosis+in+ApoE+knockout+mice:+insights+from+a+novel+mouse+model+of+balloon+angioplasty+and+stenting.">Increased in-stent stenosis in ApoE knockout mice: insights from a novel mouse model of balloon angioplasty and stenting.</a> Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 27, 833-840 (2007).</li><li>Chamberlain, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+of+in+situ+stenting.">A novel mouse model of in situ stenting.</a> Cardiovasc. Res. 85, 38-44 (2010).</li><li>Rodriguez-Menocal, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+of+in-stent+restenosis.">A novel mouse model of in-stent restenosis.</a> Atherosclerosis. 209, 359-366 (2010).</li><li>Costa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Covalent+immobilization+of+antimicrobial+peptides+(AMPs)+onto+biomaterial+surfaces.">Covalent immobilization of antimicrobial peptides (AMPs) onto biomaterial surfaces.</a> Acta Biomaterialia. 7, 1431-1440 (2011).</li><li>Soehnlein, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil-derived+cathelicidin+protects+from+neointimal+hyperplasia.">Neutrophil-derived cathelicidin protects from neointimal hyperplasia.</a> Science Translational Medicine. 3, 103ra198 (2011).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

للحد من خطر الاصابة بتجلط في الدعامات وعودة التضيق وللحفاظ على تطوير طلاء جديد لالدعامات المخدرات يبلغ حجمه، وسيلة سهلة وبسيطة ويمكن الوصول إليها من زرع دعامات في نموذج حيواني هو مطلوب. الفئران تسليم النظام المثالي لدراسة آليات معقدة من إعادة عرض الشرياني بعد زرع الدعامة وكفاءة مثل هذه العقاقير. النماذج الحالية لعودة التضيق في الدعامة في الماوس هي صعبة، تتطلب مهارات جراحية عالية وينطوي على مخاطر عالية من المضاعفات كما نزيف أو شلل 17-19. على سبيل المثال، في نموذج من الدعامات زرع في الشريان الأورطي الصدري على فأرة الحاسوب المانحة بعد منطاد توسع من السفينة ومن ثم زرع الجزء stented في الشريان السباتي على فأرة الحاسوب المتلقي 17، ودراسة الآليات المرضية-ليس أثرت فقط من رد فعل المتلقي على المواد المانحة، ولكن أيضا من قبل ضررا هائلة من الأوعية الوعائية والبرانية. غرس المس المقاوم للصدأويتبع ل الدعامة مباشرة في الشريان الأورطي البطني بعد منطاد توسع 19 بنسبة وفيات عالية (35٪) بسبب شلل الساق الخلفية بعد الجلطة أو النزيف من الشريان الأورطي البطني على موقع بضع الشريان. زرع على شكل حلزوني في التوسع الذاتي الننتول-الدعامات إلى الشريان الأورطي البطني عن طريق الشريان الفخذي 18 يحتاج المهارات الجراحية عالية، ويرجع ذلك في معظمه إلى توجيه عمياء الدعامات على طول المتفرعة من الشريان الفخذي إلى الشريان الأورطي لوضع الدعامات في الموقف الصحيح. ويتبع هذا الإجراء من قبل ارتفاع مخاطر إتلاف العصب الفخذي، وبالتالي شلل في الساق الخلفية. مقارنة مع هذه الإجراءات، لدينا نموذج من زرع دعامات في الماوس لا تحتاج إلى مهارات جراحية عالية. نموذجنا يوفر طريقة بسيطة وسهلة وفعالة لتحليل آثار مختلفة على المخدرات الطلاء على إعادة الشرايين، ويتكون الطرح من الدعامات تحت الأفق، وليس هناك أي مخاطر من الأعصاب مدمرة أو غيرها من الهياكل. كومالآليات الجزيئية بلكس يمكن التحقيق أسهل في نموذجنا من الماوس السباتي الدعامات الشريان، وليس فقط حسب سهولة الوصول المباشر للسفينة، ولكن أيضا بسبب وجود مختلف خروج المغلوب سلالات الفئران. كما حصر واحد، مقارنة مع الإجراء السريري، يستخدم نموذجنا الفئران صحية / والشرايين لا تنفيذ الدعامات على لويحات الموجودة من قبل (لا عودة التضيق في الدعامة، ولكن تضيق في الدعامة). نحن أيضا لا يؤدون منطاد توسع قبل الدعامة الزرع. ومع ذلك، ويرجع ذلك إلى أضرار جسيمة من جدار الوعاء الدموي في كلا النموذجين، والعمليات الصلحي متشابهة. للأسف، بسبب القطع الأثرية المعدنية المشتقة، وهي في رصد الجسم الحي من النمو neointimal غير ممكن من قبل وسائل التصوير الموجودة والموجات فوق الصوتية أو التصوير المقطعي الكمبيوتر. وثمة عامل آخر يحد من هو باجتزاء رقيقة من الدعامات القائمة على المعادن، الأمر الذي يتطلب بعض الخبرة في معالجة المعادن. باستخدام هذا الأسلوب، كناقادرة على أن تظهر، أن العدلة تعليمات biofunctionalized المنمنمة الننتول-الدعامات المغلفة مع LL-37-الدعامات في الحد من عودة التضيق، وتوفير مفهوم جديد لتعزيز الشفاء الأوعية الدموية بعد العلاج التداخلي 21. وعلى الرغم من هذه القيود، وهذا النموذج يبدو أن يكون، حتى الآن، النظام الأكثر مناسبة، وبالتالي المال وتوفير الوقت، للتحقيق جديدة طلاء المخدرات للالدعامات وآثارها على الأحداث الجزيئية خلال إعادة عرض الشرياني. وعلاوة على ذلك، وهذا النموذج يمكن أن تتكيف بسهولة مع الهامستر، والتي هي أكثر مماثلة إلى الإنسان، بحيث كل فرضية العلاجية يمكن التحقق قبل التقديم على الحيوانات الكبيرة أو الإنسان لتجنب الآثار غير سارة وغير متوقعة.

أمراض القلب والأوعية الدموية الناجمة عن تطور تصلب الشرايين هي السبب الرئيسي للوفاة في الدول الصناعية. تصلب الشرايين هو التنسيق، التهابات استجابة الليفي التكاثري في جدار الأوعية الدموية للإصابة البطانية 1، مما أدى إلى تشكيل لوحة ممتدة في التجويف للسفينة، التي تؤثر على تدفق الدم من خلال الشرايين التاجية. أكثر من 75٪ من بعضلة القلب نتيجة من تمزق الغطاء الليفي رقيقة من لوحة 2 ملتهبة. منذ هذه المضاعفات يمكن أن تكون قاتلة، وهي عن طريق الجلد transluminal (التاجي) قسطرة (PTCA) مع زرع دعامات أصبح العلاج الخيار الأول في الممارسة الطبية الحالية. الأسلوب يسمح للتوسع الشريان التاجي ضاقت، وبالتالي استعادة تدفق الدم. في وقت واحد، ما تسبب في إصابة مدى البطانة وجدار الوعاء الدموي 3. ومع ذلك، فإن تأثير طويل الأمد من هذا العلاج محدودة من قبل remode الشرياني المفرطلينغ وعودة التضيق 4. من قبل العمالة من الدعامات، أصبح PTCA أكثر فعالية في علاج آفات معقدة، مما يتيح عودة التوعي بعد إغلاق الأوعية الحادة 5. هذا الأسلوب يقلل من حدوث عودة التضيق في الدعامة إلى أقل من 10٪ 6. بجانب هذه الفوائد، وهذا العلاج الخيار الأول للعودة التوعي التاجي يحمل أيضا مخاطر مهددة للحياة من تخثر في الدعامات وعودة التضيق. ويتسبب تخثر في الدعامات من قبل دي تبطنن للسفينة، تليها التصاق الصفائح الدموية وهائلة من الليفين إلى موقع الجرحى. 26٪ من المرضى الذين يعانون من تجلط الدم في الدعامات ويموت 63٪ من احتشاء عضلة القلب 7. يشير عودة التضيق في عملية التئام الجروح بعد إصابة ميكانيكية لجدار الوعاء الدموي، والتي تنطوي تضخم neointimal (الهجرة وانتشار خلايا العضلات الملساء الوعائية (VSMC)، ترسب المصفوفة خارج الخلية (ECM)، وإعادة عرضللسفينة. في كثير من الأحيان، يصبح من الضروري dilatate الأوعية تصلب الشرايين ضاقت بشدة بسبب تجلط الدم في الدعامات وعودة التضيق على الغازية إعادة التدخل. لمنع تجلط الدم في الدعامات، علاج طويل الأمد مع العقاقير المضادة للخثار ضروري 8. لمنع عودة التضيق، جيل جديد من المخدرات يبلغ حجمه الدعامات أزل العوامل المضادة للالتكاثري مثل الأدوية المثبطة للمناعة (مثل سيروليميس، everolimus، zotarolimus) والعقاقير المضادة للسرطان (مثل باكليتاكسيل) من طلاء البوليمر لعدة أشهر 9،10. على الرغم من أن هذه الأدوية تقلل من تشكيل neointima وعودة التضيق، كانت المحافظة على ارتفاع مخاطر تجلط الدم في الدعامات عن طريق تثبيط إعادة تبطنن. بعد إصابة الشرايين، والحفاظ على المقصورة البطانية أمر ضروري لمنع مضاعفات الجلطات. في ظل الظروف الفسيولوجية، يبين البطانة الإنسان على معدل دوران صغير 11. تحت patholشروط ogical، ومع ذلك، هو ضعف سلامة بطانة الأوعية الدموية، بحيث انتعاش سريع من قبل المحيطة الخلايا البطانية ناضجة وتعميم الخلايا الاصلية البطانية (EPCS) مطلوب 12،13. دراسة هذه الآليات الجزيئية المعقدة في الحيوانات الكبيرة 14-16 في الشريان الأبهر أو الماوس هو إجراء صعبة للغاية، وتقدم بيانات محدودة 17-19. لاختبار كفاءة رواية الدعامة طلاء لتقليل تجلط الدم في الدعامات ونماذج جديدة عودة التضيق أمر لا بد منه. الننتول يمثل منصة مثالية لالدعامات لما له من &#39;مرونة عالية، وتأثير شكل الذاكرة والتسامح جيدة في المرضى، ويجري استخدامها بنجاح كما الدعامات المعدنية العارية في الاستخدام السريري. جعلت هذه السبائك من الممكن لإنشاء الدعامة المنمنمة مع القطر الخارجي من 500 ميكرومتر، والتي يمكن أن تطلى 20 و زرعها في الشريان السباتي من الفئران. وضع الدعامات الننتول المنمنمة للماوس جالشريان arotid، يسمح للدراسة الآليات الجزيئية الدقيقة الناجمة عن زرع دعامات وتوفر إمكانية لاختبار بسرعة وكفاءة آثار مختلفة، طلاء المخدرات لمنع عودة التضيق. وعلاوة على ذلك، فإن وجود مختلف خروج المغلوب سلالات الفئران يمثل ميزة كبيرة في توضيح دور الجزيئات المختلفة المشاركة في النمو neointima وتخثر في الدعامة.

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Name of the reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nitinol-stents (self-made from nitinol-struts)</td>
			<td>Fort Wayne Metals, Castlebar, Ireland NiTi#1, superelastic, straight annealed, light oxide, diameter 500 &mu;m</td>
			<td>custom-made product</td>
			<td>Institute for Textile Technology and Mechanical Engineering</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon tube</td>
			<td>IFK Isofluor, Germany</td>
			<td>custom-made product</td>
			<td>diameter 500 &mu;m, section thickness 100 &mu;m, polytetrafluorethylene catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>SZ/X9</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td>FST, Germany</td>
			<td>91197-00</td>
			<td>standard tip curved 0.17 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine 10%</td>
			<td>CEVA, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine 2%</td>
			<td>Medistar, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthene</td>
			<td>Bayer, Germany</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>FST, Germany</td>
			<td>91460-11</td>
			<td>Straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas scissor</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>OC 498 R</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5/0 Silk</td>
			<td>Seraflex</td>
			<td>IC 108000</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7/0 Silk</td>
			<td>Seraflex</td>
			<td>IC 1005171Z</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>guide-wire</td>
			<td>Abbott Vascular</td>
			<td>1001782-HC</td>
			<td>0.014-inch angioplastie guide-wire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Michel suture clips</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>BN507R</td>
			<td>7.5 x 1.75 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Michel Forcep</td>
			<td>Aesculap, Germany</td>
			<td>BN730R</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of stent implantation in the carotid artery for the study of restenosis

على الرغم من التقدم الكبير المحرز في تطوير الدعامات في العقود الماضية، لا تزال أمراض القلب والأوعية الدموية السبب الرئيسي للوفاة في الدول الغربية. بجانب الفوائد التي يتيحها تطوير مختلف الدعامات المخدرات يبلغ حجمه، يتحمل عودة التوعي التاجي أيضا المخاطر التي تهدد الحياة من تخثر في الدعامات وعودة التضيق. هو اعاقة البحوث حول استراتيجيات علاجية جديدة بسبب عدم وجود طرق مناسبة لدراسة زرع دعامات والعمليات عودة التضيق. هنا، نحن تصف الإجراء السريع ويمكن الوصول إليها من زرع دعامات الشريان السباتي في الماوس، والتي توفر إمكانية للدراسة في وسيلة مريحة الآليات الجزيئية من إعادة عرض السفينة وآثار طلاء المخدرات المختلفة.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غرس من الننتول الدعامة المنمنمة في الشريان السباتي الأيسر من الفئران يأخذ 25-30 دقيقة، ويظهر معدل وفيات بنسبة 10٪ ويرجع ذلك أساسا إلى الضرر للسفينة أثناء التدخل. ويلاحظ وجود معدل البقاء على قيد الحياة أفضل في الفئران وجود أكثر من الوزن 25 غراما في وقت زرع دعامات (معدل وفيات من 5٪). ولذلك، اخترنا للفئران زرع يبلغ وزنها بين 25-27 غرام. بعد الجراحة، والفئران على التعافي من التخدير خلال 2-5 دقيقة وليس العاهات البدنية، مثل على سبيل المثال الشلل، ويلاحظ. التصوير المقطعي مايكرو كمبيوتر (مايكرو-CT) التصوير يؤديها أسبوع واحد بعد أن أظهرت زرع دعامات أن الدعامات ليست خلع بواسطة تدفق الدم (الشكل 1C). للأسف، وتحليل تشكيل neointima في هذه الصور غير ممكن بسبب القطع الأثرية المعدنية المشتقة (1D الشكل، 1E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نحن لم نلاحظ أي سفينة أو أضرار البطانية من منطقة unstented للسفينة، مباشرة أسفل الدعامة، للكشف عن طريق النسيجية (الشكل 2A)، وتلطيخ محددة لبطانة (الشكل 2B، ومكافحة فأر CD31 الضد). لمحة أفضل، تم تفحص المقطع باستخدام اثنين من الفوتون المجهري المسح الضوئي ليزر (الشكل 2B، 2C). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في السفينة stented، تم الكشف عن توسع دائم من 15٪ (نسبة الدعامة: الشريان، 1،15:1) من خلال الفئران مع وزنها بين 25-27 غرام. تشكيل خثرة Neointima وتشكيل يمكن تحليلها بواسطة stainings النسيجي الكلاسيكية (مثل Hematoxilin-يوزين، بالغيمزا، Movat، Toluidin الأزرق، ماسون-Trichrom-Goldner، الشكل 3A، 3B). منذ الصفيحة الظاهرة والباطنة ليست واضحة بعد الآن، تم حساب حجم لوحة بالفرق من الخارجية والمناطق اللمعية (يعني منطقة لوحة: 234566 ± 3315 ميكرومتر 2، يعني منطقة اللمعية: 12036 ± 2662 ميكرون 2). وقد تم قياس محيط الخارجي أيضا (يعني: 1799 ± 14 ميكرون). لتحليلتكوين الخلوية، تحتاج المقاطع ليتم deplastified وملطخة علامات محددة. لإعادة تبطنن، استخدمنا الأجسام المضادة لمكافحة CD31 CY3 مترافق وعن الخلية السلس انتشار العضلات الأجسام المضادة-SMA FITC مترافق (الشكل 3C). تم احتساب إعادة تبطنن كنسبة مئوية من CD-31 الملون إيجابية إلى مجموع سطح اللمعية (يعني: 23.07 ± 3.14٪) أسبوع واحد بعد زرع الدعامة. </li></ol> بالطبع، عدد غير محدود من تلطيخ محددة من الممكن، اعتمادا على تجربة كل المختبرات &#39;. ويمكن أيضا تحليل سلسلة ميوسين الثقيلة، لتوصيف أفضل من SMCS، ولكن أيضا تحليل الخلايا تسلل (وحيدات، الخلايا الليمفاوية)، أو stainings لالسيتوكينات الالتهابية المختلفة أن يؤديها، وهذا يتوقف على الهدف من هذه الدراسة. <img alt="الشكل 1" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig1highres.jpg" sr<html> ج = &quot;/ files/ftp_upload/50233/50233fig1.jpg&quot; /&gt; الشكل 1. نظرة عامة تخطيطي لإجراء العمليات الجراحية (A). يتوقف تدفق الدم عن طريق ربط عقدة في الشريان السباتي الداخلي والشريان السباتي الخارجي الداني بحزم، وكذلك عن طريق سحب عقدة المحيطة الشريان السباتي المشترك. يتم إدخال أنبوب السيليكون التي تحتوي على دعامة في الشريان السباتي الخارجي من خلال شق صغير في الشريان السباتي الخارجي. بعد الدعامات تصل إلى الموضع المطلوب، يتم سحبها أنبوب السيليكون إلى أكثر من دليل من الأسلاك، وتتيح للتوسع شكل الذاكرة من الدعامات. الصور مايكرو-CT تبين الوضع الدعامة أسبوع واحد بعد زرع الجراحية (B). ويرجع ذلك إلى المواد المشتقة من القطع الأثرية، تحليلا للنمو neointima غير ممكن (C، D). 3fig2highres.jpg &quot;SRC =&quot; / files/ftp_upload/50233/50233fig2.jpg &quot;/&gt; الشكل 2. لا يتأثر منطقة Unstented من السفينة قبل إجراء العمليات الجراحية، كما هو موضح من قبل Toluidin الأزرق (A) والبطانية محددة CD31 تلطيخ (B، C). <img alt="الشكل (3)" fo:content-width="6in" fo:src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50233/50233fig3.jpg" /> الشكل 3. تحليل الترسبات يمكن أن يقوم بها stainings النسيجي الكلاسيكية (مثل ماسون-Trichrom-Goldner) (A). ويمكن الكشف عن خثرة المنظمة من قبل ترسبات الليفين الأسود الملطخة داخل neointima، في بعض الحالات لوحظ انسداد كامل للسفينة (B). تم الكشف عن إعادة تبطنن (CY3 والأحمر) أو على نحو سلس تكاثر الخلايا العضلية (FITC والأخضر) من خلال تلوين المناعي مزدوج باستخدام علامات محددة.تم إجراء Counterstaining مع 4 &#39;،6-diamidino-2-phenylindole (دابي والأزرق) (C). لاحظنا أكملت إعادة تبطنن من الدعامات الدعامات (، سهم مزدوج يسار) بالمقارنة مع إعادة تبطنن incompleted على اللمعية (يمين، سهم واحد).

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis at JoVE.com

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

يوصف نموذج من زرع الدعامات في الشريان السباتي الماوس. بالمقارنة مع الطرق الأخرى المماثلة، هذا الإجراء هو سريع جدا وبسيطة ويمكن الوصول إليها، وتقدم إمكانية للدراسة في وسيلة مريحة رد فعل جدار الأوعية الدموية لمختلف المخدرات يبلغ حجمه الدعامات والآليات الجزيئية لعودة التضيق.

نموذج الفئران من زرع دعامات في الشريان السباتي لدراسة عودة التضيق

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

a-murine-model-stent-implantation-carotid-artery-for-study

Research

JoVE Journal

Medicine

25.2K Views.  RWTH Aachen University. يوصف نموذج من زرع الدعامات في الشريان السباتي الماوس. بالمقارنة مع الطرق الأخرى المماثلة، هذا الإجراء هو سريع جدا وبسيطة ويمكن الوصول إليها، وتقدم إمكانية للدراسة في وسيلة مريحة رد فعل جدار الأوعية الدموية لمختلف المخدرات يبلغ حجمه الدعامات والآليات الجزيئية ...

Video: A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

المؤشرات الحيوية في نموذج حيواني لكشف الاقتران العصبية، الدموية، والسلوكية للPTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

الداخلية الثديية البشرية الشريان (IMA) وزرع الدعامات: نموذج الإنسان لدراسة تطوير داخل الدعامة عودة التضيق

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in peripheral arterial bypass surgery as well as in arteriovenous fistulas.1-5 The experimental procedure of vein graft interposition in the common carotid artery by using the cuff-technique has been applied in several research projects to examine the aetiology of neointimal hyperplasia and therapeutic options to address it. 6-8 The cuff prevents vessel anastomotic remodeling and induces turbulence within the graft and thereby the development of neointimal hyperplasia.
Using the superior caval vein graft is an established small-animal model for venous arterialization experiment.9-11 This current protocol refers to an established jugular vein graft interposition technique first described by Zou et al., 9 as well as others.12-14 Nevertheless, these cited small animal protocols are complicated.
To simplify the procedure and to minimize the number of experimental animals needed, a detailed operation protocol by video training is presented. This video should help the novice surgeon to learn both the cuff-technique and the vein graft interposition. Hereby, the right external jugular vein was grafted in cuff-technique in the common carotid artery of 21 female Sprague Dawley rats categorized in three equal groups that were sacrificed on day 21, 42 and 84, respectively. Notably, no donor animals were needed, because auto-transplantations were performed. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice. In addition, the graft patency rate was 60 % for the first 10 operated animals and 82 % for the remaining 11 animals. The blood flow at the time of sacrifice was 8&plusmn;3 ml/min. In conclusion, this surgical protocol considerably simplifies, optimizes and standardizes this complicated procedure. It gives novice surgeons easy, step-by-step instruction, explaining possible pitfalls, thereby helping them to gain expertise fast and avoid useless sacrifice of experimental animals.

Neointimal hyperplasia is the primary cause of stenosis in arterialized veins. We propose a new protocol whereby the right external jugular vein is grafted using the cuff technique in the common carotid artery of Sprague Dawley rats. The survival rate was 100 % at the time point of sacrifice.

تدريب تقنية متطورة المجهرية: مداخلة من حبل الوريد الخارجية الكسب غير المشروع في الشريان السباتي المشترك في الجرذان

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

A الفئران نموذج من عضلة القلب إصابة نقص التروية، ضخه من خلال ربط الشريان الأمامي اليسار تنازليا

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

نموذج الفئران من فخذي الشريان إصابة سلك مع غرس المحيطة بالأوعية تسليم المخدرات التصحيح

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to atherosclerotic plaque development or the rupturing of established plaques, interrupts normal blood flow leading to various morbidities such as myocardial infarction and stroke. In the clinic endovascular procedures such as angioplasty are commonly performed to reopen the lumen. However, these treatments inevitably damage the vessel wall as well as the vascular endothelium, triggering an excessive healing response and the development of a neointimal plaque that extends into the lumen causing vessel restenosis (re-narrowing). Restenosis remains a major cause of failure of endovascular treatments for atherosclerosis. Thus, preclinical animal models of restenosis are vitally important for investigating the pathophysiological mechanisms as well as translational approaches to vascular interventions. Among several murine experimental models, femoral artery wire injury is widely accepted as the most suitable for studies of post-angioplasty restenosis because it closely resembles the angioplasty procedure that injures both endothelium and vessel wall. However, many researchers have difficulty utilizing this model due to its high degree of technical difficulty. This is primarily because a metal wire needs to be inserted into the femoral artery, which is approximately three times thinner than the wire, to generate sufficient injury to induce prominent neointima. Here, we describe the essential surgical details to effectively overcome the major technical difficulties of this model. By following the presented procedures, performing the mouse femoral artery wire injury becomes easier. Once familiarized, the whole procedure can be completed within 20 min.

The mouse femoral artery wire injury model of restenosis is technically challenging. In this protocol we show the key technical details essential for successfully performing wire injury to induce consistent&#160;neointima for studies of restenosis.

والفئران نموذج من عودة التضيق الشرياني: الجوانب الفنية من الفخذ إصابة سلك

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

أداء الدائم القاصي الأوسط الدماغي مع السباتي المشترك انسداد الشريان في الجرذان المسنين لدراسة القشرية نقص التروية ذوي الإعاقة المستديمة

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves focal endothelial-selective transgenesis, thereby allowing an investigator to determine the biological roles of endothelial-expressed transgenes and to quantify the in vivo transcriptional activity of DNA sequences in large artery endothelial cells. The method uses surgical isolation of rabbit common carotid arteries and an arteriotomy to deliver a transgene-expressing viral vector into the arterial lumen. A short incubation period of the vector in the lumen, with subsequent aspiration of the lumen contents, is sufficient to achieve efficient and durable expression of the transgene in the endothelium, with no detectable transduction or expression outside of the isolated arterial segment. The method allows assessment of the biological activities of transgene products both in normal arteries and in models of human vascular disease, while avoiding systemic effects that could be caused either by targeting gene delivery to other sites (e.g. the liver) or by the alternative approach of delivering genetic constructs to the endothelium by germ line transgenesis. Application of the method is limited by the need for a skilled surgeon and anesthetist, a well-equipped operating room, the costs of purchasing and housing rabbits, and the need for expertise in gene-transfer vector construction and use. Results obtained with this method include: transgene-related alterations in arterial structure, cellularity, extracellular matrix, or vasomotor function; increases or reductions in arterial inflammation; alterations in vascular cell apoptosis; and progression, retardation, or regression of diseases such as intimal hyperplasia or atherosclerosis. The method also allows measurement of the ability of native and synthetic DNA regulatory sequences to alter transgene expression in endothelial cells, providing results that include: levels of transgene mRNA, levels of transgene protein, and levels of transgene enzymatic activity.

In Vivo Gene Transfer to the Rabbit Common Carotid Artery Endothelium

This method is to introduce a transgene into the endothelium of rabbit carotid arteries. Introduction of the transgene allows the assessment of the biological role of the transgene product either in normal arteries or disease models. The method is also useful for measuring activity of DNA regulatory sequences.

في فيفو نقل الجينات ببطانة الشريان السباتي المشترك الأرنب

The goal of this method is to introduce a transgene into the endothelium of isolated segments of both rabbit common carotid arteries. The method achieves ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, intimal hyperplasia, and atherosclerosis. The goal of this article is to demonstrate a method for placing bilateral venous interposition grafts in a rabbit, then transducing the grafts with a gene transfer vector that achieves durable transgene expression. The method allows the investigation of the biological roles of genes and their protein products in normal vein graft homeostasis. It also allows the testing of transgenes for the activities that could prevent vein graft failure, e.g., whether the expression of a transgene prevents the neointimal growth, reduces the vascular inflammation, or reduces atherosclerosis in rabbits fed with a high-fat diet. During an initial survival surgery, the segments of right and left external jugular vein are excised and placed bilaterally as reversed end-to-side common carotid artery interposition grafts. During a second survival surgery, performed 28 days later, each of the grafts is isolated from the circulation with vascular clips and the lumens are filled (via an arteriotomy) with a solution containing a helper-dependent adenoviral (HDAd) vector. After a 20-min incubation, the vector solution is aspirated, the arteriotomy is repaired, and flow is restored. The veins are harvested at time points dictated by individual experimental protocols. The 28-day delay between the graft placement and the transduction is necessary to ensure the adaptation of the vein graft to the arterial circulation. This adaptation avoids rapid loss of transgene expression that occurs in vein grafts transduced before or immediately after grafting. The method is unique in its ability to achieve durable, stable transgene expression in grafted veins. Compared to other large animal vein graft models, rabbits have advantages of low cost and easy handling. Compared to rodent vein graft models, rabbits have larger and easier-to-manipulate blood vessels that provide abundant tissue for analysis.

This method describes the placement of interposition vein grafts in rabbits, the transduction of the grafts, and the achievement of durable transgene expression. This allows the investigation of physiological and pathological roles of transgenes and their protein products in grafted veins, and testing of gene therapies for vein graft disease.

نموذج أرنب التعبير التحوير دائم في الوريد للشريان السباتي المشترك فاصلة الطعوم

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...