الكتاب نود أن نعترف بما يلي: الدكتور جوزيف برونزينو، والدكتور خميس أبو حسب الله، والسيد RJ-افرانس أوستن، والسيدة جيسيكا Koranda.

هذا البروتوكول هو مناسبة للفئران من 3 و 18 شهرا من العمر ووزن الجسم التقريبية 30-50 غ). ويمكن الحصول على الفئران من مختبر جاكسون (بار هاربور، ME). تمت الموافقة على جميع البروتوكولات الجراحية والتجريبية من قبل لجنة رعاية الحيوان واستخدام كلية ترينيتي وكانت وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. 1. إعداد الحيوان والعمليات الجراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد التخدير كوكتيل يحتوي على الكيتامين (25 ملغ / مل)، زيلازين (2.5 ملغ / مل) وآسيبرومازين (0.5 ملغ / مل). حقن 1 مل / كجم من وزن الجسم في الربع السفلي الأيمن من البطن تكملها 0.2 الحقن مل / كغ كل 45 دقيقة بعد ذلك للحفاظ على عمق مستقرة التخدير باستخدام دواسة منعكس الانسحاب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الماوس تخدير لعملية جراحية من قبل حلق الفراء على الجمجمة وذلك باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية. وينبغي أن تشمل منطقة حلق منتصف العينين إلى منتصف الأذنين. تأكد من عدم حلق whiskeالتمرير لأنها جزء من الجهاز الحسي الماوس برميل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مسحات القطن لتطبيق ايزوبروبيل تليها بتدين إلى منطقة حلق على رأسه. ثم، أيضا باستخدام قطعة قطن، وتطبيق كمية صغيرة من الزيت المعدني على العيون لمنع مقل العيون من التجفيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الأصفاد الأذن الفئران الرضع بدلا من قضبان الأذن العادية لتركيب رأس الحيوان على جهاز التجسيمي الإطار. للقيام بذلك، جبل أول الأذن اليسرى على الكفة الأذن اليسرى. ثم تخفيف بلطف الأذن اليمنى على الكفة الحق من خلال دعم بلطف رأس الحيوان مع يد واحدة ودفع الكفة الأذن مع جهة أخرى. المقبل، ووضع وسادة التدفئة تحت جسم الحيوان وتعيينها إلى 86 درجة فهرنهايت إلى الحفاظ على درجة حرارة الجسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم، تحقق من صلابة الثنائية من خلال محاولة لتحريك الجانب الرأس إلى جنب. هي التي شنت هذا الحيوان بشكل صحيح على الإطار التجسيمي عند الرأس هو جامد ولا يمكن نقل جنبا إلى جنب ولكن يمكن الإرتكاز بسهولة صعودا وهبوطا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> راحة بلطفخطم الماوس على شريط الأنف / الأسنان التجمع والتأكد من أن القواطع ويستريح بلطف ولكن بشكل آمن داخل الفتحة الأسنان من شريط الأنف / الأسنان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام مشرط معقم، وجعل شق خط الوسط بدءا من منتصف العين إلى منتصف الأذنين. تأكد من أن تعقد مشرط في زاوية 45 درجة والضغط بما فيه الكفاية لقطع طريق اللفافة الكامنة ولكن ليس من خلال الجمجمة لأن ذلك سوف يسبب النزيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مسحات القطن لفصل اللفافة وفضح الجمجمة. معالم الجمجمة bregma وامدا يجب أن تكون واضحة للعيان (الشكل 1A). تأكد من أن الحيوان هو في موقف الجمجمة المسطحة من خلال تعديل شريط الأنف / الأسنان بحيث معالم bregma وامدا هي في نفس ظهري بطني (DV) موقف (+ 0.1 ملم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنطبق على كمية صغيرة من ملحي معقم للمنطقة المكشوفة واستخدام مسحات القطن لتنظيف بلطف الجمجمة. ثم الانتظار لمدة 2-3 دقيقة الجمجمة إلى الهواء الجاف تماماقبل المتابعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جبل إبرة في الذراع التجسيمي غادر لقياس موقف DV من bregma وامدا. يجب أن تكون المواقع DV هذه المعالم اثنين في 0.1 ملم من بعضها البعض. إن لم يكن، شريط الأنف من الإطار التجسيمي يمكن تعديلها صعودا وهبوطا لتحقيق ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الإبرة على bregma لتسجيل له في الخلفية الأمامية (ا ف ب)، الجانبي (LAT) وظهري بطني (DV) القياسات. تأكد من أن إبرة يمس فقط الجمجمة وأنها لا تخترق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ماوس أطلس الدماغ، مثل &quot;الفأر الدماغ في التجسيمي إحداثيات&quot; 1، لتحديد الإحداثيات للهياكل الهدف: مسار وسطي الثاقب (القسط) في حزمة الزاوي والتلفيف المسنن (DG) من الحصين، نسبة إلى امدا وbregma، على التوالي (انظر أيضا الجدول 1). ثم، استخدم قلم غرامة نقطة أو قلم رصاص بمناسبة هذه النقاط على الجمجمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أيضا، علامة اثنين المزيد من النقاط على الجانب المقابل من الجمجمة. هذه النقاط ثhich سيكون بمثابة الأرض (GND) والمرجعية (REF) ينبغي أن تكون حوالي 3 مم من خط الوسط ووضع طولي بالنسبة لبعضها البعض (1A الشكل، وأيضا الجدول 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة علامة الإبرة من ذراع التجسيمي اليسار واستبدالها حفر الأسنان الكهربائية مجهزة جبل التجسيمي. ضع الحفر على كل نقطة ملحوظ وجعل الثقوب لدغ صغيرة من حوالي 0.5 ملم في القطر. عند الحفر، واستخدام الحركة صعودا ونزولا والمتكررة في كثير من الأحيان تحقق ما إذا كان الحفر قد اخترقت الجمجمة لفضح سطح الدماغ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلطف ولكن بحزم قيادة القطب المسمار (# 0-80 1/8 في براغي آلة الفولاذ المقاوم للصدأ، مشقوق الفرزة الرأس) في كل من الثقوب المقابل (GND وREF) بحيث أنها مجرد لمس السطح القشري دون اختراق ذلك (الشكل 1A ). هذه أقطاب المسمار اثنين بمثابة الأرض والمرجعية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جبل محفزة وتسجيل الأقطاب الكهربائية فيأصحاب دي على الأسلحة التجسيمي اليسار واليمين، على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط المحطات تحفيز الكهربائي إلى مشجعا الكهربية مع العزلة الحالية ومحطة القطب تسجيل لمكبر للصوت التفاضلية الكهربية (كسب = 1،000، ممر الموجة مرشح = 1 هرتز، 3 كيلو هرتز) ومن ثم إلى الذبذبات الرقمية للتفتيش البصري للاستجابات أثار. أيضا، الاتصال GND ومحطات القطب المرجع إلى مكبر للصوت التفاضلية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلطف وببطء أقل حد سواء محفزة وأقطاب تسجيل في 0.5 ملم بزيادات في حين رصد بصريا الاستجابة للمنبهات المسموعة لصدمة التحفيز من 600-800 تعميم الوصول إلى الخدمات. الاستمرار في خفض كل قطب كهربائي حتى يصلوا موقف DV هدف لكل منهما ولكن لوحظ أنه إشارة النمطية على الذبذبات (الشكل 1B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد ذلك، استخدم الاسمنت الأسنان الاكريليك لجعل الحد الأقصى لعقد محطات الكهربائي في المكان؛ يجب أن تمحى أي الاسمنت الأسنان التي تلامس الجلد قبالةعلى الفور. مرة واحدة يتم الشفاء الاسمنت الأسنان تماما نقل الحيوان من الإطار التجسيمي إلى القوارض القفص نظيفة. استخدام مصباح التدفئة أو وسادة للحفاظ على درجة الحرارة الأساسية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد الحيوان كل ساعة حتى يستعيد وعيه. حقنة من فلونيكسين يمكن أن تدار بمثابة مسكن. </li></ol> 2. الكمونية التعريفي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسمح الأيام الحيوان 5-7 للتعافي من الجراحة. وضع الحيوان في البيئة تسجيل تتألف من قفص فاراداي (122 سم × 43 سم × 43 سم) تجهيزه بمواد عازلة للصوت والدورية العاكس 5 قناة ربط الكهربائي يؤدي إلى الإعداد محفزة / تسجيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح للحيوان حتى يتأقلم لمدة 1-2 ساعة في بيئة التسجيل قبل توصيل الأقطاب الكهربائية إلى الصكوك محفزة وتسجيل (راجع الخطوة 1.17). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الضوابط مشجعا لإخراج 400 تعميم الوصول إلى الخدمات وتسجيل اتساع بمتوسط ​​10 أثار ردود التأكد عشرفي لا يقل عن 10 ثانية بين مرور المحفزات. استخدام الأسلوب هو موضح في الشكل 1C لقياس استجابة أثار. كرر هذا الإجراء ل600، 800، 1،000، 1،200، 1،400 وتعميم الوصول إلى الخدمات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بناء منحنى الإدخال / الإخراج بواسطة المتهم بالتآمر في متوسط ​​مدى الاستجابة أثار مقابل كثافة التحفيز. من هذه المؤامرة تحديد كثافة التحفيز الذي يتوافق مع 50٪ من الحد الأقصى لسعة قياسها. استخدام كثافة 50٪ للفترة المتبقية من التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم، وذلك باستخدام كثافة التحفيز 50٪، للحصول على خط الأساس عن طريق تسجيل متوسط ​​السعة من 5 أثار ردود كل دقيقة لمدة 15 دقيقة. جعل مرة أخرى من أن لا يقل عن 10 ثانية بين مرور المحفزات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في وقت لاحق بتسليم التحفيز كزازي يتكون من 10 رشقات نارية من البقول 10 ألقاها في 400 هرتز مع معدل ابلا من 5 هرتز إلى مسار الثاقب وسطي. مراقبة الحيوانات عن كثب بحثا عن علامات على الاستيلاء، بما في ذلك يهز الكلب الرطب. إذا كان الحيوان لديه استيلاء experimينبغي إنهاؤها والأنف والحنجرة وينبغي استبعاد كافة البيانات من هذا الحيوان من نتائج الدراسة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثم، والاستمرار في تسجيل متوسط ​​السعة من 5 أثار ردود كل دقيقة لمدة 30 دقيقة posttetanization. بعد ذلك، قارن هذه السعة إلى السعة الأساسية التي تم الحصول عليها في الخطوة 2.5 عن طريق حساب نسبة التغير من الأساس (الشكل 2). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عقب اختتام التجارب، والموت الرحيم للحيوان عن طريق استنشاق isoflurane و-الطريقة التي هي متسقة مع المبادئ التوجيهية بشأن القتل الرحيم للجمعية الأميركية للطب البيطري. </li></ol>

<ol>
	<li>Paxinos, G., Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2004).</li><li>Bliss, T. V. P., Lomo, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-lasting+potentiation+of+synaptic+transmission+in+the+dentate+area+of+the+anesthetized+rabbit+following+stimulation+of+the+perforant+path.">Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the anesthetized rabbit following stimulation of the perforant path.</a> J. Physiol. 232, 331-356 (1973).</li><li>Blaise, J. H., Bronzino, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+stimulus+frequency+and+age+on+bidirectional+synaptic+plasticity+in+the+dentate+gyrus+of+freely+moving+rats.">Effects of stimulus frequency and age on bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of freely moving rats.</a> Exp. Neurol. 182, 497-506 (2003).</li><li>Blaise, J. H., Koranda, J. L., Chow, U., Haines, K. E., Dorward, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+isolation+stress+alters+bidirectional+long-term+synaptic+plasticity+in+amygdalo-hippocampal+synapses+in+freely+behaving+adult+rats.">Neonatal isolation stress alters bidirectional long-term synaptic plasticity in amygdalo-hippocampal synapses in freely behaving adult rats.</a> Brain Res. 1193, 25-33 (2008).</li><li>Koranda, J. L., Masino, S. A., Blaise, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bidirectional+synaptic+plasticity+in+the+dentate+gyrus+of+the+awake+freely+behaving+mouse.">Bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of the awake freely behaving mouse.</a> J. Neurosci. Methods. 167, 160-166 (2008).</li><li>Cooke, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autophosphorylation+of+alphaCaMKII+is+not+a+general+requirement+for+NMDA+receptor-dependent+LTP+in+the+adult+mouse.">Autophosphorylation of alphaCaMKII is not a general requirement for NMDA receptor-dependent LTP in the adult mouse.</a> J. Physiol. 574, 805-818 (2006).</li><li>Davis, S., Bliss, T. V., Dutrieux, G., Laroche, S., Errington, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+duration+of+long-term+potentiation+in+the+hippocampus+of+the+freely+moving+mouse.">Induction and duration of long-term potentiation in the hippocampus of the freely moving mouse.</a> J. Neurosci. Methods. 75, 75-80 (1997).</li><li>Jones, M. W., Peckham, H. M., Errington, M. L., Bliss, T. V., Routtenberg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity+in+the+hippocampus+of+awake+C57BL/6+and+DBA/2+mice:+interstrain+differences+and+parallels+with+behavior.">Synaptic plasticity in the hippocampus of awake C57BL/6 and DBA/2 mice: interstrain differences and parallels with behavior.</a> Hippocampus. 11, 391-396 (2001).</li><li>Zhang, T. A., Tang, J., Pidoplichko, V. I., Dani, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Addictive+nicotine+alters+local+circuit+inhibition+during+the+induction+of+in+vivo+hippocampal+synaptic+potentiation.">Addictive nicotine alters local circuit inhibition during the induction of in vivo hippocampal synaptic potentiation.</a> J. Neurosci. 30, 6443-6453 (2010).</li><li>Tang, J., Dani, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+enables+in+vivo+synaptic+plasticity+associated+with+the+addictive+drug+nicotine.">Dopamine enables in vivo synaptic plasticity associated with the addictive drug nicotine.</a> Neuron. 63, 673-682 (2009).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

في هذا البروتوكول، ونحن أثبتت طريقة موثوقة وبسيطة لدراسة الكمونية في DG في الفئران يتصرف بحرية. في حين أن العديد من الدراسات الكمونية في الفئران مستيقظا وقد أجريت 3،4، وقد أجريت في عدد قليل جدا من الفئران مستيقظا يرجع أساسا إلى التعقيد التقني الذي يشكله العقارات...

وقد أنتجت تطوير تكنولوجيا الجينات المعدلة وراثيا لمعالجة وخروج المغلوب نماذج الماوس من الأمراض العصبية والعصبية تقريبا. وقد استلزم هذه الترجمة من تقنيات البحث الكهربية المستخدمة سابقا في أنواع القوارض أكبر للنموذج حيواني الماوس. واحدة من هذه التقنية التحقيق العصبية هو استخدام التقوية على المدى الطويل (الكمونية) لاختبار فعالية الاتصالات متشابك داخل الشبكات العصبية المعنية في مختلف اضطرابات عصبية مرضية. يصف هذا البروتوكول تقنيات التحقيق الكهربية يمكن الاعتماد عليها من الكمونية في الفئران يتصرف بحرية. ميزة هذا البروتوكول على الآخرين هو أنه بسيطة وسهلة التنفيذ، بل هو أيضا بدلا أقل تكلفة كما أنها لا تتطلب ولا استخدام نظم مكلفة ميكرودريفي الكمبيوتر التي تسيطر عليها ولا تأثير الحقل headstages الترانزستور، و، على حد علمنا، هو البروتوكول الأول من الفيديو المزمنة التسجيلات الكهربية رس دراسة الكمونية في الفئران يتصرف بحرية. تحقيقا لهذه الغاية، وصفنا في هذه المقالة منهجيات بسيطة لدراسة التقوية على المدى الطويل في الفئران يتصرف بحرية. يمكن بسهولة أن تترجم هذه المنهجيات لنماذج الماوس المعدلة وراثيا وخروج المغلوب من اضطرابات عصبية مرضية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="514">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Ketamine (100 mg/ml)</td>
			<td style="width:104px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:137px;">10177</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Xylazine (20 mg/ml)</td>
			<td style="width:104px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:137px;">33197</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Acepromazine (10 mg/ml)</td>
			<td style="width:104px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:137px;">2177</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Dental acrylic powder</td>
			<td style="width:104px;">Lang Dental Manufacturing Co.</td>
			<td style="width:137px;">1330CLR</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Dental acrylic liquid</td>
			<td style="width:104px;">Lang Dental Manufacturing Co.</td>
			<td style="width:137px;">1306CLR</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Tungsten wire (0.127 mm)</td>
			<td style="width:104px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:137px;">TGW0515</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm)</td>
			<td style="width:104px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:137px;">832400</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Flunixin (50 mg/ml)</td>
			<td style="width:104px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:137px;">14165</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Epoxilyte</td>
			<td style="width:104px;">Superior Essex</td>
			<td style="width:137px;">EP 6001-M</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Stainless steel wire insert (0.2 mm)</td>
			<td style="width:104px;">World Precision Instruments</td>
			<td>792900</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:195px;">Stereotaxic frame apparatus</td>
			<td style="width:95px;">Kopf Instruments</td>
			<td style="width:137px;">Model 902</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:195px;">Ear cuffs (ear cups)</td>
			<td style="width:95px;">Kopf Instruments</td>
			<td style="width:137px;">Model 921&#160;</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:195px;">Electrophysiological stimulator</td>
			<td style="width:95px;">Astro-Med, Inc.</td>
			<td style="width:137px;">S88</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:195px;">Digital oscilloscope</td>
			<td style="width:95px;">B &#38; K Precision Corp.</td>
			<td style="width:137px;">2542</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:195px;">Current isolation unit</td>
			<td style="width:95px;">Astro-Med, Inc.</td>
			<td style="width:137px;">PSIU-6</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:195px;">Differential amplifier</td>
			<td style="width:95px;">World Precision Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:137px;">DAM-50</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Commutator</td>
			<td style="width:95px;">Plastics One</td>
			<td style="width:137px;">SLC6</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:195px;">Dental drill</td>
			<td style="width:95px;">Stoelting</td>
			<td style="width:137px;">58650</td>
			<td style="width:79px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term potentiation of perforant pathway-dentate gyrus synapse in freely behaving mice

دراسات التقوية على المدى الطويل من فعالية متشابك، ظاهرة تعتمد على النشاط متشابك وجود الخصائص التي تجعلها جذابة كآلية الخلوية الكامنة التعلم وتخزين المعلومات المحتملة، منذ فترة طويلة تستخدم لتوضيح علم وظائف الأعضاء من مختلف الدوائر العصبية في الحصين، اللوزة ، والهياكل الحوفي والقشرية الأخرى. مع هذا في الاعتبار، ونماذج الماوس المعدلة وراثيا من الأمراض العصبية تمثل منصات المفيد إجراء التقوية على المدى الطويل (الكمونية) دراسات لتطوير فهم أكبر لدور الجينات في الاتصالات متشابك العادية وغير العادية في الشبكات العصبية المشاركة في التعلم، والعاطفة والمعلومات المعالجة. يصف هذا المقال منهجيات لإحداث موثوق الكمونية في الماوس يتصرف بحرية. هذه المنهجيات يمكن استخدامها في دراسات المعدلة وراثيا وخروج المغلوب يتصرف نماذج الماوس من أمراض الاعصاب بحرية.

ويبين الجدول 1 الإحداثيات لDG والقسط كما هو مستخدم في هذا البروتوكول ويبين الشكل 1A علامات للهياكل الهدف على الجمجمة؛. أظهرت أيضا هي موقع الأقطاب الأرضية والمرجعية ويوضح الشكل 1B أثار ممثل استجابة يتتبع سواء قبل وposttetanization في نفس الحيوان. لاح?...

Watch this Scientific Journal Video about Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice at JoVE.com

Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice

المعدلة وراثيا وخروج المغلوب نماذج الماوس من الأمراض العصبية هي مفيدة لدراسة دور الجينات في الفسيولوجيا العصبية العادية وغير العادية. يصف هذا المقال المنهجيات التي يمكن استخدامها لدراسة التقوية طويلة الأمد، وهي آلية الخلوية التي قد تكمن وراء التعلم والذاكرة، وبالضربة القاضية في المعدلة وراثيا بحرية التصرف نماذج الماوس من أمراض الأعصاب.

التقوية طويلة الأمد من المسار الثاقب-التلفيف المسنن سنبس في يتصرفون بحرية الفئران

Studies of long-term potentiation of synaptic efficacy, an activity-dependent synaptic phenomenon having properties that make it attractive as a potential ...

long-term-potentiation-perforant-pathway-dentate-gyrus-synapse-freely

Research

JoVE Journal

Behavior

14.0K Views.  Trinity College.  المعدلة وراثيا وخروج المغلوب نماذج الماوس من الأمراض العصبية هي مفيدة لدراسة دور الجينات في الفسيولوجيا العصبية العادية وغير العادية. يصف هذا المقال المنهجيات التي يمكن استخدامها لدراسة التقوية طويلة الأمد، وهي آلية الخلوية التي قد تكمن...

Video: Long-term Potentiation of Perforant Pathway-dentate Gyrus Synapse in Freely Behaving Mice

Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software

Locomotor activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice and other rodents. Improvements in video tracking software (VTS) have allowed it to be coupled to LMA testing, dramatically improving specificity and sensitivity when compared to the line crossings method with manual scoring. In addition, VTS enables high-throughput experimentation. While similar to automated video tracking used for the open field test (OFT), LMA testing is unique in that it allows mice to remain in their home cage and does not utilize the anxiogenic stimulus of bright lighting during the active phase of the light-dark cycle. Traditionally, LMA has been used for short periods of time (mins), while longer movement studies (hrs-days) have often used implanted transmitters and biotelemetry. With the option of real-time tracking, long-, like short-term LMA testing, can now be conducted using videography. Long-term LMA testing requires a specialized, but easily constructed, cage so that food and water (which is usually positioned on the cage top) does not obstruct videography. Importantly, videography and VTS allows for the quantification of parameters, such as path of mouse movement, that are difficult or unfeasible to measure with line crossing and/or biotelemetry. In sum, LMA testing coupled to VTS affords a more complete description of mouse movement and the ability to examine locomotion over an extended period of time.

Locomotor activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice. Coupling of video tracking software (VTS) and LMA allows for the improvement of specificity and sensitivity, especially when compared with the manual, line crossing method of LMA analysis. Additionally VTS allows long-term tracking of mouse LMA.

الماوس قصيرة وطويلة الأجل الحركي نشاط تحليلها بواسطة برامج تتبع فيديو

Locomotor  activity (LMA) is a simple and easily performed measurement of behavior in mice  and other rodents. Improvements in video tracking software ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field potentials (LFPs) from populations of neurons and action potentials from individual cells, as the animal engages in experimentally relevant tasks. Chronically implanted microdrives allow for brain recordings to last over periods of several weeks. Miniaturized drives and lightweight components allow for these long-term recordings to occur in small mammals, such as mice. By using tetrodes, which consist of tightly braided bundles of four electrodes in which each wire has a diameter of 12.5 &mu;m, it is possible to isolate physiologically active neurons in superficial brain regions such as the cerebral cortex, dorsal hippocampus, and subiculum, as well as deeper regions such as the striatum and the amygdala. Moreover, this technique insures stable, high-fidelity neural recordings as the animal is challenged with a variety of behavioral tasks. This manuscript describes several techniques that have been optimized to record from the mouse brain. First, we show how to fabricate tetrodes, load them into driveable tubes, and gold-plate their tips in order to reduce their impedance from M&Omega; to K&Omega; range. Second, we show how to construct a custom microdrive assembly for carrying and moving the tetrodes vertically, with the use of inexpensive materials. Third, we show the steps for assembling a commercially available microdrive (Neuralynx VersaDrive) that is designed to carry independently movable tetrodes. Finally, we present representative results of local field potentials and single-unit signals obtained in the dorsal subiculum of mice. These techniques can be easily modified to accommodate different types of electrode arrays and recording schemes in the mouse brain.

The design and assembly of microdrives for in vivo electrophysiological recordings of brain signals from the mouse is described. By attaching microelectrode bundles to sturdy driveable carriers, these techniques allow for long-term and stable neural recordings. The lightweight design allows for unrestricted behavioral performance by the animal following drive implantation.

بناء صالحة ميكرودريفي للتسجيلات العصبية المزمنة في الفئران يتصرفون استيقظ

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

Trace Fear Conditioning in Mice

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings between a neutral stimulus and an unconditioned stimulus. There is a 20 sec trace period that separates each conditioning trial. On the following day freezing is measured during presentation of the conditioned stimulus (CS) and trace period. On the third day there is an 8 min test to measure contextual memory. The representative results are from mice that were presented with the aversive unconditioned stimulus (shock) compared to mice that received the tone presentations without the unconditioned stimulus. Trace fear conditioning has been successfully used to detect subtle learning and memory deficits and enhancements in mice that are not found with other fear conditioning methods. This type of fear conditioning is believed to be dependent upon connections between the medial prefrontal cortex and the hippocampus. One current controversy is whether this method is believed to be amygdala-independent. Therefore, other fear conditioning testing is needed to examine amygdala-dependent learning and memory effects, such as through the delay fear conditioning.

In the following experiment we describe a protocol for trace fear conditioning in mice. This type of associative memory includes a trace period that separates the neutral stimulus and the unconditioned stimulus.

تتبع تكييف الخوف في الفئران

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure multiple dimensions of unconditioned behavior in small laboratory mammals (e.g., mice, rats, tree shrews and small primates). This paradigm is a valuable alternative for the use of a behavioral test battery, since a broad behavioral spectrum of an animal&#8217;s behavioral profile can be investigated in one single test.
The apparatus consists of a box, representing the &#8216;protected&#8217; area, separated from a group compartment. A board, on which small cylinders are staggered in three lines, is placed in the center of the box, representing the &#8216;unprotected&#8217; area of the set-up. The cognitive abilities of the animals can be measured by baiting some cylinders on the board and measuring the working and reference memory. Other unconditioned behavior, such as activity-related-, anxiety-related- and social behavior, can be observed using this paradigm. Behavioral flexibility and the ability to habituate to a novel environment can additionally be observed by subjecting the animals to multiple trials in the mHB, revealing insight into the animals&#8217; adaptive capacities.
Due to testing order effects in a behavioral test battery, na&#239;ve animals should be used for each individual experiment. By testing multiple behavioral dimensions in a single paradigm and thereby circumventing this issue, the number of experimental animals used is reduced. Furthermore, by avoiding social isolation during testing and without the need to food deprive the animals, the mHB represents a behavioral test system, inducing if any, very low amount of stress.

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

مجلس هول التعديل - قياس السلوك، الإدراك والتفاعل الاجتماعي في الفئران والجرذان

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

A Novel Experimental and Analytical Approach to the Multimodal Neural Decoding of Intent During Social Interaction in Freely-behaving Human Infants

Understanding typical and atypical development remains one of the fundamental questions in developmental human neuroscience. Traditionally, experimental paradigms and analysis tools have been limited to constrained laboratory tasks and contexts due to technical limitations imposed by the available set of measuring and analysis techniques and the age of the subjects. These limitations severely limit the study of developmental neural dynamics and associated neural networks engaged in cognition, perception and action in infants performing &#8220;in action and in context&#8221;. This protocol presents a novel approach to study infants and young children as they freely organize their own behavior, and its consequences in a complex, partly unpredictable and highly dynamic environment. The proposed methodology integrates synchronized high-density active scalp electroencephalography (EEG), inertial measurement units (IMUs), video recording and behavioral analysis to capture brain activity and movement non-invasively in freely-behaving infants. This setup allows for the study of neural network dynamics in the developing brain, in action and context, as these networks are recruited during goal-oriented, exploration and social interaction tasks.

This protocol presents a novel methodology for the neural decoding of intent from freely-behaving infants during unscripted social interaction with an actor. Neural activity is acquired using non-invasive high-density active scalp electroencephalography (EEG). Kinematic data is collected with inertial measurement units and supplemented with synchronized video recording.

مقاربة الرواية التجريبية والتحليلية لالمتعدد الوسائط العصبية فك نوايا خلال التفاعل الاجتماعي في التصرف بحرية-الرضع الإنسان

Understanding typical and atypical development remains one of the fundamental questions in developmental human neuroscience. Traditionally, experimental ...

A Pressure Injection System for Investigating the Neuropharmacology of Information Processing in Awake Behaving Macaque Monkey Cortex

The top-down modulation of feed-forward cortical information processing is functionally important for many cognitive processes, including the modulation of sensory information processing by attention. However, little is known about which neurotransmitter systems are involved in such modulations. A practical way to address this question is to combine single-cell recording with local and temporary neuropharmacological manipulation in a suitable animal model. Here we demonstrate a technique combining acute single-cell recordings with the injection of neuropharmacological agents in the direct vicinity of the recording electrode. The video shows the preparation of the pressure injection/recording system, including preparation of the substance to be injected. We show a rhesus monkey performing a visual attention task and the procedure of single-unit recording with block-wise pharmacological manipulations.

Here, we show the pressure injection of neuropharmacological substances during single-cell recording in an awake, behaving macaque monkey. This procedure allows pharmacological manipulation in the direct vicinity of a cortical recording site.

نظام حقن الضغط للتحقيق في الجهاز العصبي من معالجة المعلومات في استيقظ يتصرفون المكاك القرد اللحاء

The top-down modulation of feed-forward cortical information processing is functionally important for many cognitive processes, including the modulation ...

Multi-layer Cortical Ca2+ Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy

In vivo circuit and cellular level functional imaging is a critical tool for understanding the brain in action. High resolution imaging of mouse cortical neurons with two-photon microscopy has provided unique insights into cortical structure, function and plasticity. However, these studies are limited to head fixed animals, greatly reducing the behavioral complexity available for study. In this paper, we describe a procedure for performing chronic fluorescence microscopy with cellular-resolution across multiple cortical layers in freely behaving mice. We used an integrated miniaturized fluorescence microscope paired with an implanted prism probe to simultaneously visualize and record the calcium dynamics of hundreds of neurons across multiple layers of the somatosensory cortex as the mouse engaged in a novel object exploration task, over several days. This technique can be adapted to other brain regions in different animal species for other behavioral paradigms.

Multi-layer Cortical Ca2+ Imaging in Freely Moving Mice with Prism Probes and Miniaturized Fluorescence Microscopy

Here, we present a procedure for performing large-scale Ca2+ imaging with cellular-resolution across multiple cortical layers in freely moving mice. Hundreds of active cells can be observed simultaneously using a miniature, head-mounted microscope coupled with an implanted prism probe.

متعدد الطبقات الكالسيوم الكالسيوم<sup&gt; 2+</sup&gt; التصوير في الفئران تتحرك بحرية مع تحقيقات بريزم والمصور المجهري مضان

In vivo circuit and cellular level functional imaging is a critical tool for understanding the brain in action. High resolution imaging of mouse cortical ...

A Wireless, Bidirectional Interface for In Vivo Recording and Stimulation of Neural Activity in Freely Behaving Rats

In vivo electrophysiology is a powerful technique to investigate the relationship between brain activity and behavior at a millisecond and micrometer scale. However, current methods mostly rely on tethered cable recordings or only use unidirectional systems, allowing either recording or stimulation of neural activity, but not at the same time or same target. Here, a new wireless, bidirectional device for simultaneous multichannel recording and stimulation of neural activity in freely behaving rats is described. The system operates through a single portable head stage that both transmits recorded activity and can be targeted in real-time for brain stimulation using a telemetry-based multichannel software. The head stage is equipped with a preamplifier and a rechargeable battery, allowing stable long-term recordings or stimulation for up to 1 h. Importantly, the head stage is compact, weighs 12 g (including battery) and thus has minimal impact on the animal&#180;s behavioral repertoire, making the method applicable to a broad set of behavioral tasks. Moreover, the method has the major advantage that the effect of brain stimulation on neural activity and behavior can be measured simultaneously, providing a tool to assess the causal relationships between specific brain activation patterns and behavior. This feature makes the method particularly valuable for the field of deep brain stimulation, allowing precise assessment, monitoring, and adjustment of stimulation parameters during long-term behavioral experiments. The applicability of the system has been validated using the inferior colliculus as a model structure.

A Wireless, Bidirectional Interface for In Vivo Recording and Stimulation of Neural Activity in Freely Behaving Rats

A wireless, bidirectional system for multi-channel neural recordings and stimulation in freely behaving rats is introduced. The system is light and compact, thus having minimal impact on the animal&#180;s behavioral repertoire. Moreover, this bidirectional system provides a sophisticated tool to assess causal relationships between brain activation patterns and behavior.

جهاز لاسلكي، واجهة ثنائية الاتجاه للتسجيل في فيفو وحفز النشاط العصبي في التصرف بحرية الفئران

In vivo electrophysiology is a powerful technique to investigate the relationship between brain activity and behavior at a millisecond and micrometer ...

Automated, Long-term Behavioral Assay for Cognitive Functions in Multiple Genetic Models of Alzheimer's Disease, Using IntelliCage

Multiple factors&#8212;such as aging and genes&#8212;are frequently associated with cognitive decline. Genetically modified mouse models of cognitive decline, such as Alzheimer&#39;s disease (AD), have become a promising tool to elucidate the underlying mechanisms and promote the therapeutic advances. An important step is the validation and characterization of expected behavioral abnormality in the models, in the case of AD, cognitive decline. The long-term behavioral investigations of laboratory animals to study the effect of aging demand substantial efforts from researchers. The IntelliCage system is a high-throughput and cost-effective test battery for mice that eliminates the need for daily human handling. Here, we describe how the system is utilized in the long-term phenotyping of a genetic Alzheimer&#39;s disease model, specifically focusing on the cognitive functions. The experiment employs repeated battery of tests that assess spatial learning and executive functions. This cost-effective age-dependent phenotyping allows us to identify the transient and/or permanent effects of genes on various cognitive aspects.

Automated, Long-term Behavioral Assay for Cognitive Functions in Multiple Genetic Models of Alzheimer&#039;s Disease, Using IntelliCage

This paper describes a protocol for cognitive assessments for genetic models of the Alzheimer&#39;s disease using the IntelliCage system, which is a high throughput automated behavioral monitoring system with operant conditioning.

الآلي، التحليل السلوكي طويلة الأجل للوظائف المعرفية في عدة نماذج الوراثية لمرض الزهايمر، باستخدام إينتيليكاجي

Multiple factors&#8212;such as aging and genes&#8212;are frequently associated with cognitive decline. Genetically modified mouse models of cognitive ...

Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials and Electrocorticograms in Response to Nociceptive Laser Stimuli from Freely Moving Rats

Electrocortical responses, elicited by laser heat pulses that selectively activate nociceptive free nerve endings, are widely used in many animal and human studies to investigate the cortical processing of nociceptive information. These laser-evoked brain potentials (LEPs) consist of several transient responses that are time-locked to the onset of laser stimuli. However, the functional properties of the LEP responses are still largely unknown, due to the lack of a sampling technique that can simultaneously record neural activities at the surface of the cortex (i.e., electrocorticogram [ECoG] and scalp electroencephalogram [scalp EEG]) and inside the brain (i.e., local field potential [LFP]). To address this issue, we present here an animal protocol using freely moving rats. This protocol is composed of three main procedures: (1) animal preparation and surgical procedures, (2) a simultaneous recording of ECoG and LFP in response to nociceptive laser stimuli, and (3) data analysis and feature extraction. Specifically, with the help of a 3D-printed protective shell, both ECoG and LFP electrodes implanted on the rat&#39;s skull were securely held together. During data collection, laser pulses were delivered on the rat&#39;s forepaws through gaps in the bottom of the chamber when the animal was in spontaneous stillness. Ongoing white noise was played to avoid the activation of the auditory system by the laser-generated ultrasounds. As a consequence, only nociceptive responses were selectively recorded. Using the standard analytical procedures (e.g., band-pass filtering, epoch extraction, and baseline correction) to extract stimulus-related brain responses, we obtained results showing that LEPs with a high signal-to-noise ratio were simultaneously recorded from ECoG and LFP electrodes. This methodology makes the simultaneous recording of ECoG and LFP activities possible, which provides a bridge of electrocortical signals at the mesoscopic and macroscopic levels, thereby facilitating the investigation of nociceptive information processing in the brain.

We developed a technique that simultaneously records both electrocorticography and local field potentials in response to nociceptive laser stimuli from freely moving rats. This technique helps establish a direct relationship of electrocortical signals at the mesoscopic and macroscopic levels, which facilitates the investigation of nociceptive information processing in the brain.

التسجيلات المتزامنة من إمكانات القشرية الميدانية المحلية واليكتروكورتيكوجرامس في الاستجابة للمحفزات الليزر Nociceptive من الانتقال بحرية الفئران

Electrocortical responses, elicited by laser heat pulses that selectively activate nociceptive free nerve endings, are widely used in many animal and ...