وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل مؤسسة Mcihael J. فوكس للبحوث 2011 الابتكارات الاستجابة السريعة باركنسون برنامج جوائز. كان الممولين أي دور في تصميم الدراسة وجمع البيانات وتحليلها، قرار نشر أو إعداد المخطوطة.

قبل الجراحة تأكد من الموافقة على جميع الإجراءات التي تتم عن طريق IACUC وأية سلطات أخلاقية أو قانونية إضافية واستخدام الممارسات علاج الحيوان إنسانية. وهذا يشمل استخدام الظروف الجراحة المعقمة، التخدير باستخدام الماوس وافق IACUC الأسلوب، التشحيم عيون الفئران مع مرهم الطبيب البيطري أثناء الجراحة، وتوفير الرعاية بعد الجراحة. لا المضي قدما في عملية جراحية إذا كان هناك أي سؤال حول ما إذا تمت الموافقة على جوانب الإجراء. تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تؤدى في هذه الوثيقة من قبل لجنة جامعة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام بوسطن. 1. إعداد الحيوانات واللوازم الجراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الأوتوكلاف كل أداة جراحية التي سيتم استخدامها أثناء الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من الموافقة على جميع التقنيات التي سيتم تنفيذها من قبل الهيئات التنظيمية الحيوان. </li></ol> 2. حصاد المخاطي الكسب غير المشروع <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختار الماوس متطابقة وراثيا من العمر مماثلة لالماوس التجريبية والموت ببطء في طريقة IACUC المعتمدة (هنا: الاختناق isoflurane وتليها خلع عنق الرحم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام مقص جراحي، وإزالة الجلد حول منطقة الأنف من الرأس الماوس تعريض الجمجمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع هوائي الحفر، مع علامة ثلاثة خطوط اثنان منها الجناح أفقيا منطقة الأنف وثالثة تمشيا مع عيون الذي يربط بين خطين عموديا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتقل لأسفل البطني من أجل فصل الحاجز الأنفي من الأنسجة المحيطة بها. وهناك مسار أوسع منع تلف الغشاء المخاطي لكنه سيجعل الأمر أكثر صعوبة أيضا لعزل الغشاء. ينصح قطع الضيق أقرب إلى خط الوسط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام مقص لقطع الحاجز خالية من أي نوع من الأنسجة انضمت إليها وتخزينها في محلول ملحي معقم. في هذا الوقت يمكن تنظيفها الكسب غير المشروع حتى إزالة أي نوع من الأنسجة المتصلة. الوضع المثالي هو أن يكون الأغشية المخاطية التالفة تعرض على جانبي الحاجز الغضروف. واحد غرامالخلف ان نورد الغشاء لمدة الفئران وفرت المساحة السطحية للغشاء هي كافية لتغطية مواقع حج القحف. فمن المستحسن أن يستخدم الكسب غير المشروع في أسرع وقت ممكن والعائدات الباحث إلى الخطوة 3 حالما يتم عزل الكسب غير المشروع. </li></ol> 3. زرع الجراحي لالمخاطي الكسب غير المشروع <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام والإجراءات الجراحية الفئران العقيم القياسية، تخدير وجبل ماوس في إطار stereological. استخدام ما يقرب من 2٪ isoflurane والأكسجين النقي في استخدام آلة التخدير القوارض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لشل حركة الماوس في جهاز التجسيمي بقضبان الأذن والأنف حامل. تطبيق مرهم للعين للعيون وفرك فروة الرأس مع بتدين و 75٪ من الإيثانول لمدة ثلاث جولات. باستخدام مقص أو الانتهازي الشعر، إزالة الفراء على رأسه. فضح الجمجمة بشفرة حلاقة ومستوى الرأس. إجراء حج القحف فوق موقع الدماغ التي سيتم مداوي. على سبيل المثال، عند استهداف المخطط قطع 1.25 ملمقطر ثقب دائري في الجمجمة (تركزت في AP: 1.00 مم؛ ML: 0.88 مم) باستخدام الحفر بالهواء المضغوط. الرطب منطقة حفر مع ملحي معقم واستخدام شفرة حلاقة لإزالة الجمجمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة بعناية الجافية باستخدام غيض من إبرة. بالإضافة إلى ذلك، وهذا يمكن أن يتحقق من خلال تطبيق الحد الأدنى من الأنسجة لاصقة على سطح الجافية رطبة. مرة واحدة وشددت هذه الطبقة، الحركة الجانبية مع طرف شفرة حلاقة يمكن استخدامها لإزالة الغشاء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الغشاء المخاطي فوق سطح الدماغ مع الحرص الشديد للحفاظ على الجانب الظهارية التي تواجه بعيدا عن الجرح. من الأفضل القيام بذلك عن طريق نقل الحاجز بأكمله على سطح الجمجمة المجاورة لموقع حج القحف مع ملاقط. استخدام غيض من زوج من مقص جراحي، وسحب الغشاء الخروج من الغضروف وعلى الجمجمة والدماغ السطح. لا تدع غشاء تجف أو لمسها مع أي مادة ماصة. الكسب غير المشروع يجب أن تتداخل بسخاء كل الحواف العظمية من ليالي حج القحفالفنار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الكسب غير المشروع مع قطعة معقمة من النتريل. هذا يعمل على منع التصاق الجلد إلى الكسب غير المشروع خلال الشفاء. والنتريل يحتاج إلى أن تكون كبيرة بما يكفي لتغطية الغشاء المخاطي بأكمله. تقليم الغشاء المفرطة إذا لزم الأمر. تجنب أي حركة النتريل مرة واحدة قد حان في اتصال مع الكسب غير المشروع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق الجلد مع تشغيل 5-0 خياطة العقيمة والسماح للماوس على التعافي لمدة 3-7 أيام قبل الانتقال إلى الخطوة التالية. والحرص على عدم التشويش على حاجز النتريل أو الكسب غير المشروع المخاطية أثناء إغلاق الجلد. </li></ol> 4. إدارة الجرعات الحل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد تأمين الماوس تخدير في إطار التجسيمي، وقطع مع مقص خياطة وإزالة الجلد الزائد حول الجمجمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة حاجز النتريل وتنظيف سطح الجمجمة. استخدام العقيمة المالحة والقطن مسحات لتنظيف المنطقة حتى الكسب غير المشروع مرئيا. قد يكون من الضروري لخفض الكسب غير المشروع بشفرة الحلاقة لو نمت أكبر من دesired مساحة السطح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كانت التجربة سوف تكون أطول من بضعة أيام، وأنه من الحكمة لزرع ما لا يقل عن اثنين من مسامير الجمجمة لتعزيز عملية الزرع الرأس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع أعلى بكثير من الكسب غير المشروع بحيث حواف على اتصال مع الجمجمة. تطبيق لاصقة cyanoacrylate عند تقاطع بين البئر والجمجمة. ملء البئر مع ملحي معقم وتحقق للتأكد من عدم وجود تسرب. مصنوعة من الآبار الإبر قطع حقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق الأسمنت العظام في الجمجمة لتأمين البئر في المكان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الملوحة من البئر مع ماصة. يغسل عدة مرات للتحقق جيدا لم تسربت بأن لاصقة فيها إضافة إلى الحل المنشود؛ في هذه الحالة يتم استخدام 50 ميكرولتر من ديكستران الفلورسنت. ومن المتوقع أن المركبات القابلة للذوبان المياه من قطبية مماثلة سوف تتصرف نفس ديكستران. لم يتم استكشافها تسليم مركبات مسعور أو تعليق مع هذا الأسلوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سقف أعلى البئر باستخدام قطعة دائرية من النتريل تأمين لأعلى باستخدام فورية الغراء اللاصق. تأكد من أن لاصق لا تأتي في اتصال مع محتويات جيدا. </li></ol> 5. تحليل Transmucosal التسليم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد المبلغ المطلوب من الوقت قد انقضى، تخدير الماوس وتبادل محتويات جيدا بمحلول صبغة زرقاء ايفان. ويستخدم هذه الصبغة للتحقق من أن الكسب غير المشروع كان سليما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 30 دقيقة، تخدير الماوس بشكل كبير، وإزالة محلول الصبغة، والموت ببطء عبر قطع الرأس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة يدويا الزرع وإزالة المخ باستخدام مقص جراحي. توخي الحذر للحفاظ الكسب غير المشروع في المكان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مرة واحدة، وتبريد فلاش تجميد الدماغ في حل من الأيزوبيوتان في حمام الثلج الجاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تضمين الدماغ في درجة الحرارة المثلى للقطع (أكتوبر) حل وشريحة في 50 ميكرون. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع شرائح المطلوب مباشرة على شريحة المجهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صورة شريحة باستخدام مجهر الإزهار في أقرب وقت الحل أكتوبر قد جفت. </li></ol>

<ol>
	<li>Cardoso, F. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Looking+at+the+blood-brain+barrier:+Molecular+anatomy+and+possible+investigation+approaches.">Looking at the blood-brain barrier: Molecular anatomy and possible investigation approaches.</a> Brain Res. Rev. 64, 328-363 (2010).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+transport+across+the+blood-brain+barrier.">Drug transport across the blood-brain barrier.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 32, 1959-1972 (2012).</li><li>Chen, Y., Liu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modern+methods+for+delivery+of+drugs+across+the+blood-brain+barrier.">Modern methods for delivery of drugs across the blood-brain barrier.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 64, 640-665 (2012).</li><li>Cheng, F. -. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+protects+against+1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine+(MPTP)-induced+neurotoxicity+in+C57BL/6+mice.">Glial cell line-derived neurotrophic factor protects against 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced neurotoxicity in C57BL/6 mice.</a> Neurosci. Lett. 252, 87-90 (1998).</li><li>Grondin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=controlled+GDNF+infusion+promotes+structural+and+functional+recovery+in+advanced+parkinsonian+monkeys.">controlled GDNF infusion promotes structural and functional recovery in advanced parkinsonian monkeys.</a> Brain. 125, 2191-2201 (2002).</li><li>Kirik, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+striatal+delivery+of+GDNF+as+a+treatment+for+Parkinson+disease.">Localized striatal delivery of GDNF as a treatment for Parkinson disease.</a> Nat. Neurosci. 7, 105-110 (2004).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+and+gene+targeting+to+the+brain+with+molecular+trojan+horses.">Drug and gene targeting to the brain with molecular trojan horses.</a> Nat. Rev. Drug Discov. 1, 131-139 (2002).</li><li>Pardridge, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier+delivery+of+protein+and+non-viral+gene+therapeutics+with+molecular+Trojan+horses.">Blood-brain barrier delivery of protein and non-viral gene therapeutics with molecular Trojan horses.</a> J. Control. Release. 122, 345-348 (2007).</li><li>Bellavance, M. -. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+blood-brain+barrier+disruption+as+a+CNS+delivery+strategy.">Recent advances in blood-brain barrier disruption as a CNS delivery strategy.</a> AAPS J. 10, 166-177 (2008).</li><li>Merkus, F. H. M., Berg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+nasal+drug+delivery+bypass+the+blood-brain+barrier.">Can nasal drug delivery bypass the blood-brain barrier.</a> Drugs R. D. 8, 133-144 (2007).</li><li>Dhuria, S. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+delivery+to+the+central+nervous+system:+Mechanisms+and+experimental+considerations.">Intranasal delivery to the central nervous system: Mechanisms and experimental considerations.</a> J. Pharm. Sci. 99, 1654-1673 (2010).</li><li>Illum, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nasal+drug+delivery-possibilities,+problems+and+solutions.">Nasal drug delivery-possibilities, problems and solutions.</a> J. Control. Release. 87, 187-198 (2003).</li><li>Craft, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+insulin+therapy+for+alzheimer+disease+and+amnestic+mild+cognitive+impairment:+A+pilot+clinical+trial.">Intranasal insulin therapy for alzheimer disease and amnestic mild cognitive impairment: A pilot clinical trial.</a> Arch. Neurol. 69, 29-38 (2012).</li><li>Freiherr, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intranasal+insulin+as+a+treatment+for+Alzheimer's+Disease:+A+review+of+basic+research+and+clinical+evidence.">Intranasal insulin as a treatment for Alzheimer's Disease: A review of basic research and clinical evidence.</a> CNS Drugs. 27, 505-514 (2013).</li><li>Gill, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+brain+infusion+of+glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+in+Parkinson+disease.">Direct brain infusion of glial cell line-derived neurotrophic factor in Parkinson disease.</a> Nat. Med. 9, 589-595 (2003).</li><li>Love, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+induces+neuronal+sprouting+in+human+brain.">Glial cell line-derived neurotrophic factor induces neuronal sprouting in human brain.</a> Nat. Med. 11, 703-704 (2005).</li><li>Antunes, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+nasal+septa+for+respiratory+epithelial+air-liquid+interface+cultures.">Murine nasal septa for respiratory epithelial air-liquid interface cultures.</a> BioTechniques. 43, 195-204 (2007).</li><li>Bleier, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permeabilization+of+the+blood-brain+barrier+via+mucosal+engrafting:+implications+for+drug+delivery+to+the+brain.">Permeabilization of the blood-brain barrier via mucosal engrafting: implications for drug delivery to the brain.</a> PLoS ONE. 8, (2013).</li><li>Bernal-Sprekelsen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closure+of+cerebrospinal+fluid+leaks+prevents+ascending+bacterial+meningitis.">Closure of cerebrospinal fluid leaks prevents ascending bacterial meningitis.</a> Rhinology. 43, 277-281 (2005).</li><li>Bleier, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser-assisted+cerebrospinal+fluid+leak+repair:+An+animal+model+to+test+feasibility.">Laser-assisted cerebrospinal fluid leak repair: An animal model to test feasibility.</a> Otolaryngol. Head Neck Surg. 137, 810-814 (2007).</li></ol>

بنيامين س بليير MD هو المخترع الرئيسي للطرق تغطي براءات الاختراع المؤقت لتسليم المخدرات الى الجهاز العصبي المركزي.

الخطوة الأكثر صعوبة من الإجراء الموصوفة هنا هو النقل الناجح للغشاء المخاطي الحجم بشكل كاف على سطح الدماغ. يرصد هذه الخطوة أسهل بكثير إذا كان الحاجز الأنفي تحصد كبيرة بما فيه الكفاية وتنظيفها جيدا. إذا تم اقتطاع جزء بطني من الحاجز، وينبغي الحصول على الكسب غير المشروع ...

علاج الأمراض العصبية والنفسية وأعاقت بشدة من وجود حاجز الدم في الدماغ (BBB) ​​الذي يمنع أكثر من 95٪ من جميع وكلاء الدوائية المحتملة من الوصول إلى الجهاز العصبي المركزي 1-3. على سبيل المثال، الدبقية مشتقة عصبية عامل (GDNF) وقد تبين أن تكون فعالة في علاج مرض باركنسون عند حقنه مباشرة في الدماغ، ولكن غير فعالة عند تسليمها بشكل منتظم لأنه لا يمكن اختراق BBB 4-6. العديد من اقترب وضعت في محاولة للتحايل على هذه المشكلة. وقد أظهرت تحسنا في تسليم النظامية من neurotheraputics باستخدام تقارن المخدرات التي تحتوي على الأجسام المضادة للبروتينات النقل انتقائية تقع على البطانة الشعرية الدماغ؛ ومع ذلك لم يظهر هذا الأسلوب لتكون قابلة للتطبيق لمجموعة واسعة من المستحضرات الصيدلانية 7،8. بالإضافة إلى ذلك، تم استخدام افتتاح الاسموزي من BBB العيادةحليف، ومع ذلك تعاني هذه الطريقة من الجرعات النظامية المخدرات في مقابل تسليم أكثر مباشرة إلى منطقة الدماغ التي تهم 9. وقد بذلت جهود كبيرة في تحسين تسليم transnasal على أمل تستهدف الدماغ 10-12 مباشرة. على الرغم من تحقيق بعض النجاح، وفقط تم الحصول على نتائج قاطعة عن الأدوية التي تمتلك مستقبلات الذاتية، مثل الأنسولين 13،14. وعلاوة على ذلك كانت آلية التسليم transnasal مثيرة للجدل مع أدلة تشير إلى دخول غير مباشرة الى الدماغ عن طريق حاسة الشم امتصاص الخلايا العصبية أو من خلال مجرى الدم 11. وقد تحقق المباشر، والتسليم عبر الجمجمة باستخدام القسطرة زرع، ولكن هذا الإجراء هو الغازية للغاية ويرتبط مع العديد من المضاعفات 15،16. حتى الآن، لا يوجد، طريقة مينيملي العامة لتقديم مركبات عالية الوزن الجزيئي في الدماغ. الواردة في هذه الوثيقة هو إجراء العمليات الجراحية الفئرانالذي يخلق واجهة نصف نافذ مع الدماغ. ويتم إنجاز ذلك عن طريق engrafting على الغشاء المخاطي ازدراع 17 على عيب حج القحف الجراحية في الماوس. باستخدام هذا الإجراء فقد تبين أن مركبات قابلة للذوبان تصل إلى 500 كيلو دالتون يمكن تسليمها في النظام العصبي المركزي (الدماغ مباشرة في حمة وكذلك في السائل النخاعي) في كل وقت والوزن الجزيئي تعتمد الأزياء 18. هذا الأسلوب من تجاوز BBB هو نموذج لإصلاح عيب قاعدة الجمجمة في البشر والذي يستخدم ترقيع الغشاء المخاطي أوعية دموية لإصلاح ثقوب في الجمجمة التالية transnasal الجراحة بالمنظار 19،20.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:848px;" width="849">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:220px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:263px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">mice</td>
			<td style="width:220px;">Taconic</td>
			<td>C57BL/6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:220px;">Piramal Healthcare</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Fine Scissors</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91461-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">pneumatic drill</td>
			<td style="width:220px;">MTI Dental</td>
			<td style="width:119px;">333-CB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">drill bit</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">forcepts</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">0.9% Sodium Chloride Injection USP</td>
			<td style="width:220px;">Abbott Laboratories</td>
			<td>4925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Polystyrene Detri Dish</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>08-757-12</td>
			<td>for temporarily storing graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxygen/Isoflurane System</td>
			<td style="width:220px;">SurgiVet</td>
			<td>V720100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Temperature Control System</td>
			<td style="width:220px;">Physitemp</td>
			<td style="width:119px;">TCAT-2LV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Small Animal Stereotaxic Instrument</td>
			<td style="width:220px;">KOPF</td>
			<td style="width:119px;">Model 940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye Ointment</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Electric shaver</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td style="width:220px;">Fisher</td>
			<td>23-400-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7.5% Provadone Iodine</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Betadine surgical scrub</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Surgical Blade Stainless</td>
			<td style="width:220px;">Feather</td>
			<td style="width:119px;">2976#10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Scalpel Handle - #3</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3% Hydogen Peroxide</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>for cleaning the skull</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Vetbond Tissue Adhesive</td>
			<td style="width:220px;">3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">needles</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>305176</td>
			<td>needle tip cut off and used as well</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">syringes</td>
			<td>Becton, Dickinson and Company</td>
			<td>309597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">nitrile gloves</td>
			<td style="width:220px;">Denville Scientific Inc</td>
			<td>G4162</td>
			<td>for well closure and protection of graft</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5-0 Nylon Suture Thread</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">Student Halsey Needle Holder</td>
			<td style="width:220px;">Fine Science Tools</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">cyanoacrylate adhesive</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>commecially available super glue</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Cement Kit, 1 lb, Pink Opaque</td>
			<td style="width:220px;">Stoelting</td>
			<td>51458</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">isobutane (2-methylbutane)</td>
			<td style="width:220px;">Aldrich</td>
			<td>M32631</td>
			<td>for dry ice bath</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:247px;">dry ice</td>
			<td style="width:220px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

heterotopic mucosal engrafting procedure for direct drug delivery to the brain in mice

وأعاق إيصال العلاجات إلى الدماغ عن وجود حاجز الدم في الدماغ (BBB) ​​الذي يقيد مرور مركبات الوزن الجزيئي القطبية وارتفاع من مجرى الدم وإلى أنسجة المخ. وقد تحقق بعض النجاح التسليم المباشر في البشر من خلال زرع القسطرة عبر الجمجمة؛ ولكن هذا الأسلوب هو الغازية للغاية ويترافق مع مضاعفات عديدة. وثمة بديل أقل الغازية لتكون جرعة الدماغ من خلال زرع جراحيا، غشاء نصف نفوذ مثل الغشاء المخاطي للأنف الذي يستخدم لإصلاح العيوب الجمجمة قاعدة التالية بالمنظار transnasal جراحة إزالة ورم في البشر. نقل المخدرات على الرغم من أن هذا الغشاء تجاوز بشكل فعال ومنتشر BBB مباشرة الى الدماغ والسائل المخي الشوكي. مستوحاة من هذا النهج، وقد وضعت نهجا الجراحية في الفئران التي تستخدم الأغشية المخاطية المغروسة المانحة الحاجز أكثر من خارج القحف الجراحية عيب BBB. وقد تبين هذا النموذج على نحو فعالتسمح بمرور المركبات عالية الوزن الجزيئي في الدماغ. منذ العديد من المرشحين المخدرات غير قادرين على عبور BBB، وهذا النموذج هو قيمة لأداء اختبار قبل السريرية لعلاجات جديدة للأمراض العصبية والنفسية.

الحصول على كبيرة بما يكفي الأنف الحاجز ازدراع هو أمر حاسم لخطوات لاحقة. ويمكن تحقيق ذلك عن طريق حفر في الموقع على الجمجمة الماوس المانحة هو مبين في الشكل 1A. وقطع على طول هذا الطريق إنتاج النباتى من حجم كاف كما هو مبين في الشكل 1B. إذا كان عمق الحفر ليست...

Watch this Scientific Journal Video about Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice at JoVE.com

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

وقد تم تطوير نموذج الفأر من بالمنظار إعادة الإعمار قاعدة الجمجمة البشرية التي تخلق واجهة نصف نافذ بين الدماغ والأنف باستخدام الطعوم المخاطية الأنفية. يسمح هذا الأسلوب للباحثين لدراسة التسليم إلى النظام العصبي المركزي للعلاجات عالية الوزن الجزيئي التي تستبعد خلاف ذلك حاجز الدم في الدماغ عندما تدار بشكل منتظم.

منتبذ المخاطي Engrafting إجراءات تسليم المخدرات مباشرة الى المخ في الفئران

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

heterotopic-mucosal-engrafting-procedure-for-direct-drug-delivery-to

Research

JoVE Journal

Medicine

10.7K Views.  Boston University.  وقد تم تطوير نموذج الفأر من بالمنظار إعادة الإعمار قاعدة الجمجمة البشرية التي تخلق واجهة نصف نافذ بين الدماغ والأنف باستخدام الطعوم المخاطية الأنفية. يسمح هذا الأسلوب للباحثين لدراسة التسليم إلى النظام العصبي المركزي للعلاجات عالية الوز...

Video: Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to stimulate microcirculation. The choice of delivery method for these agents is important because the route of administration profoundly affects the bioactivity and efficacy of these agents1,2. In this article, we demonstrate how to locally administer a substance in ischemic hindlimbs by using a catheterized osmotic pump. This pump can deliver a fixed volume of aqueous solution continuously for an allotted period of time. We also present our mouse model of unilateral hindlimb ischemia induced by ligation of the common femoral artery proximal to the origin of profunda femoris and epigastrica arteries in the left hindlimb. Lastly, we describe the in vivo cannulation and ligation of the infrarenal abdominal aorta and perfusion of the hindlimb vasculature with Microfil, a silicone radiopaque casting agent. Microfil can perfuse and fill the entire vascular bed (arterial and venous), and because we have ligated the major vascular conduit for exit, the agent can be retained in the vasculature for future ex vivo imaging with the use of small specimen micro-CT3.

We show here the in vivo insertion of an osmotic pump for constant local drug delivery and the creation of hindlimb ischemia in a mouse model. Moreover, the hindlimb vasculature is perfused with Microfil, a silicone radiopaque agent, to prepare for micro-computed tomography (micro-CT) imaging.

ناضح تسليم المخدرات إلى Hindlimbs الدماغية ونضح من الأوعية الدموية مع Microfil للمشاريع المتناهية الصغر التصوير المقطعي التصوير

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these diseases. Chronic retinal diseases such as retinal oedema or neovascularization usually require multiple intraocular injections to effectively treat the condition. However, the risks associated with these injections increase with repeated delivery of the drug. Therefore, alternative delivery methods need to be established in order to minimize the risks of reinjection. Several other investigations have developed methods to deliver drugs over extended time, through materials capable of releasing chemicals slowly into the eye. In this investigation, we outline the use of Elvax 40W, a copolymer resin, to act as a vehicle for drug delivery to the adult rat retina. The resin is made and loaded with the drug. The drug-resin complex is then implanted into the vitreous cavity, where it will slowly release the drug over time. This method was tested using 2-amino-4-phosphonobutyrate (APB), a glutamate analogue that blocks the light response of the retina. It was demonstrated that the APB was slowly released from the resin, and was able to block the retinal response by 7 days after implantation. This indicates that slow-release drug delivery using this copolymer resin is effective for treating the retina, and could be used therapeutically with further testing.

This paper details how Elvax 40W can be used as a slow-release method for drug delivery to the adult rat retina. The protocol for preparing, loading, and delivering the drug-resin complex to the eye is described.

بطء الإفراج تسليم المخدرات من خلال Elvax 40W إلى الجرذ الشبكية: الآثار المترتبة على علاج الحالات المزمنة

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

Direct Mouse Trauma/Burn Model of Heterotopic Ossification

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical procedures. The majority of animal models used to study HO rely on the application of exogenous substances, such as bone morphogenetic protein (BMP), exogenous cell constructs, or genetic mutations in BMP signaling. While these models are useful they do not accurately reproduce the inflammatory states that cause the majority of cases of HO. Here we describe a burn/tenotomy model in mice that reliably produces focused HO. This protocol involves creating a 30% total body surface area partial thickness contact burn on the dorsal skin as well as division of the Achilles tendon at its midpoint. Relying solely on traumatic injury to induce HO at a predictable location allows for time-course study of endochondral heterotopic bone formation from intrinsic physiologic processes and environment only. This method could prove instrumental in understanding the inflammatory and osteogenic pathways involved in trauma-induced HO. Furthermore, because HO develops in a predictable location and time-course in this model, it allows for research to improve early imaging strategies and treatment modalities to prevent HO formation.

An Achilles tenotomy and burn injury model of heterotopic ossification allows for the reliable study of trauma induced ectopic bone formation without the application of exogenous factors.

المباشرة ماوس الصدمة / حرق نموذج منتبذ التعظم

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

منتبذ عنق الرحم القلب زرع في الفئران

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

داخل اللمعة توصيل الدواء للماوس شرياني الناسور البطانة Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening pulmonary manifestations. Ivacaftor (IVA) and ivacaftor-lumacaftor (LUMA) combination are two new breakthrough CF drugs that directly modulate the activity and trafficking of the defective CFTR-protein. However, there is still a dearth of understanding on pharmacokinetic/pharmacodynamic parameters and the pharmacology of ivacaftor and lumacaftor. The HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of the concentrations of ivacaftor, hydroxymethyl-ivacaftor, ivacaftor-carboxylate, and lumacaftor in biological fluids in patients receiving standard ivacaftor or ivacaftor-lumacaftor combination therapy has previously been developed by our group and partially validated to FDA standards. However, to allow the high-throughput analysis of a larger number of patient samples, our group has optimized the reported method through the use of a smaller pore size reverse-phase chromatography column (2.6 &#181;m, C8 100 &#197;; 50 x 2.1 mm) and a gradient solvent system (0-1 min: 40% B; 1-2 min: 40-70% B; 2-2.7 min: held at 70% B; 2.7-2.8 min: 70-90% B; 2.8-4.0 min: 90% B washing; 4.0-4.1 min: 90-40% B; 4.1-6.0 min: held at 40% B) instead of an isocratic elution. The goal of this study was to reduce the HPLC-MS analysis time per sample dramatically from ~15 min to only 6 min per sample, which is essential for the analysis of a large amount of patient samples. This expedient method will be of considerable utility for studies into the exposure-response relationships of these breakthrough CF drugs.

Ivacaftor and ivacaftor-lumacaftor combination are two new CF drugs. However, there is still a dearth of understanding on their PK/PD and pharmacology. We present an optimized HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of ivacaftor and its major metabolites, and lumacaftor.

أسلوب LC-MS/MS الأمثل لتحليل العينات السريرية إيفاكافتور، والايضات الرئيسية، ولوماكافتور في السوائل البيولوجية لمرضى التليف الكيسي الفائق

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) models based on pBECs in mono-culture (MC), MC with astrocyte-conditioned medium (ACM), and non-contact co-culture (NCC) with astrocytes of porcine or rat origin. pBECs were isolated and cultured from fragments of capillaries from the brain cortices of domestic pigs 5-6 months old. These fragments were purified by careful removal of meninges, isolation and homogenization of grey matter, filtration, enzymatic digestion, and centrifugation. To further eliminate contaminating cells, the capillary fragments were cultured with puromycin-containing medium. When 60-95% confluent, pBECs growing from the capillary fragments were passaged to permeable membrane filter inserts and established in the models. To increase barrier tightness and BBB characteristic phenotype of pBECs, the cells were treated with the following differentiation factors: membrane permeant 8-CPT-cAMP (here abbreviated cAMP), hydrocortisone, and a phosphodiesterase inhibitor, RO-20-1724 (RO). The procedure was carried out over a period of 9-11 days, and when establishing the NCC model, the astrocytes were cultured 2-8 weeks in advance. Adherence to the described procedures in the protocol has allowed the establishment of endothelial layers with highly restricted paracellular permeability, with the NCC model showing an average transendothelial electrical resistance (TEER) of 1249 &#177; 80 &#937; cm2, and paracellular permeability (Papp) for Lucifer Yellow of 0.90 10-6 &#177; 0.13 10-6 cm sec-1 (mean &#177; SEM, n=55). Further evaluation of this pBEC phenotype showed good expression of the tight junctional proteins claudin 5, ZO-1, occludin and adherens junction protein p120 catenin. The model presented can be used for a range of studies of the BBB in health and disease and, with the highly restrictive paracellular permeability, this model is suitable for studies of transport and intracellular trafficking.

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of the protocol is to present an optimized procedure for the establishment of an in vitro blood-brain barrier (BBB) model based on primary porcine brain endothelial cells (pBECs). The model shows high reproducibility, high tightness, and is suitable for studies of transport and intracellular trafficking in drug discovery.

تحسين أسلوب لإنشاء في المختبر حاجز الدم – المخ نموذج استناداً إلى خلايا المخ الخنزيري بطانية

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could interfere with the chemotherapeutic efficacy of the primary drugs. This is especially true for the drug cisplatin, whose anticancer actions are attenuated by antioxidants which provide adequate protection against hearing loss. Other current or potential otoprotective agents could pose a similar problem, if administered systemically. The application of various biologicals or protective agents directly to the cochlea would allow for high levels of these agents locally with limited systemic side effects. In this report, we demonstrate a trans-tympanic method of delivery of various drugs or biological reagents to the cochlea, which should enhance basic science research on the cochlea and provide a simple way of directing the use of otoprotective agents in the clinics. This report details a method of trans-tympanic drug delivery and provides examples of how this technique has been used successfully in experimental animals to treat cisplatin ototoxicity.

We present a technique for localized administration of drugs through the trans-tympanic route into the cochlea. Drug delivery through this route would not interfere with the anti-cancer efficacy of the chemotherapeutic drugs such as cisplatin.

تسليم المخدرات العابرة تيمبانيك لعلاج مؤقت

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

Enteric bacterial communities are established early in life and influence immune cell development and function. The neonatal microbiota is susceptible to numerous external influences including antibiotics use and diet, which impacts susceptibility to autoimmune and inflammatory diseases. Disorders such as Inflammatory Bowel Disease (IBD) are characterized by a massive influx of immune cells to the intestines. However, immune cells conditioned by the microbiota may additionally emigrate out of the intestines to influence immune responses at extra-intestinal sites. Thus, there is a need to identify and characterize cells that may carry microbial messages from the intestines to distal sites. Here, we describe a method to label cells in the colon of newborn mice in vivo that enables their identification at extra-intestinal sites after migration.

In Vivo Photolabeling of Cells in the Colon to Assess Migratory Potential of Hematopoietic Cells in Neonatal Mice

The protocol described here utilizes a photolabeling approach in newborn mice to specifically identify immune cells that emigrate from the colon to extra-intestinal sites. This strategy will be useful to study host-microbiome interactions in early life.

في فيفو فوتولابيلينج الخلايا في القولون لتقييم إمكانية الهجرة من الخلايا المكونة للدم في الفئران حديثي الولادة

Enteric bacterial communities are established early in life and influence immune cell development and function. The neonatal microbiota is susceptible to ...

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain barrier. However, there have been few reports regarding not only the quantitative analysis but also optimal administration conditions and dosing regimens for investigations of nose-to-brain delivery. The limited progress in research on nose-to-brain pathway mechanisms using rodents represents a significant impediment in terms of designing nose-to-brain delivery systems for candidate drugs.
To gain some headway in this regard, we developed and evaluated two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia for experimental animals. We also describe a method for the evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radio-labeled [14C]-inulin (molecular weight: 5,000) as a model substrate of water-soluble macromolecules.
Initially, we developed a pipette-based intranasal administration protocol using temporarily openable masks, which enabled us to perform reliable administration to animals under stable anesthesia. Using this system, [14C]-inulin could be delivered to the brain with little experimental error.
We subsequently developed an intranasal administration protocol entailing reverse cannulation from the airway side through the esophagus, which was developed to minimize the effects of mucociliary clearance (MC). This technique led to significantly higher levels of [14C]-inulin, which was quantitatively detected in the olfactory bulb, cerebrum, and medulla oblongata, than the pipette method. This appears to be because retention of the drug solution in the nasal cavity was substantially increased by active administration using a syringe pump in a direction opposite to the MC into the nasal cavity.
In conclusion, the two methods of intranasal administration developed in this study can be expected to be extremely useful techniques for evaluating pharmacokinetics in rodents. The reverse cannulation method, in particular, could be useful for evaluating the full potential of nose-to-brain delivery of drug candidates.

Here, we describe two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia with minimal physical stress for experimental animals. We also describe a method for quantitative evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radiolabeled [14C]-inulin as a model substrate of water-soluble macromolecules.

أساليب مبتكرة للإدارة داخل الآنف تحت التخدير استنشاق لتقييم تسليم المخدرات الآنف إلى المخ

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...