وأيد هذا العمل من قبل الدولي العمود الفقري بحوث الثقة والثقة Rosetrees.

بيان الأخلاق: وكانت جميع الإجراءات وفقا للمبادئ التوجيهية من وزارة الداخلية في المملكة المتحدة والحيوانات (إجراءات علمية) لعام 1986. 1. جراحة والإصابات ملاحظة: يمكن عن طريق الفئران أثقل من 220 غرام تساعد في التعافي بعد العملية الجراحية إذا كان الجراح يجد كثيرا ما تفقد الحيوانات أكثر من 10٪ من وزن الجسم قبل الجراحة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل الجراحة، اختبار الحيوانات لتفضيل forepaw مع اختبار اسطوانة تربية 15 أو مونتويا staicase اختبار 24. ويفضل، وقطع الهرم / جنة العلم والتكنولوجيا المقابلة لforepaw السائد. ملاحظة: لمدة يومين قبل الجراحة، ضع العناصر التالية في الأقفاص، حتى أن الفئران تصبح مألوفة مع المواد الغذائية التي من شأنها أن تكون مفيدة أثناء التعافي من الجراحة: حزم هيدروجيل، الهريس الرطب، وارتفاع المكملات الغذائية من السعرات الحرارية. تتوفر من مختلف البائعين إصدارات العقيمة من هذه المكملات الغذائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الأنثى Lister الفئران مقنعين (وزنها بين 200 و 250 غرام) مع isoflurane (5٪ لتحريض و1 إلى 2٪ للصيانة) في الأوكسجين (معدل التدفق: 1.5 لتر / دقيقة). ملاحظة: إن اختيار مخدر هو المهم. مخدر استنشاق يسمح لتنظيم أسرع من عمق التخدير من الكيتامين، والذي هو أيضا شائعة الاستخدام. الأيزوفلورين يسمح للتحكم بشكل أفضل من وتيرة التنفس وعمق. اختيار مخدر هو الأيزوفلورين. ملاحظة: يمكن عن طريق الفئران أثقل من 220 غرام تساعد في التعافي بعد العملية الجراحية إذا كان الجراح يجد كثيرا ما تفقد الحيوانات أكثر من 10٪ من وزن الجسم قبل الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة كاربروفين تحت الجلد بمثابة مسكن عندما يتم مخدرة الحيوانات لتخفيف الالتهاب وتوفير تسكين. ملاحظة: يتم إعطاء كاربروفين أثناء الجراحة قطع السبيل الهرمي في المختبر لدينا وفقا لنصيحتنا البيطري. قد تتسبب المواد الأفيونية مزيد من الاكتئاب التنفسي أثناء الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الحيوانات عند 37 درجة مئوية أثناء الجراحة باستخدام منزلنظام بطانية othermic والتحقيق في درجة الحرارة المستقيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكيد التخدير الكامل عن طريق التحقق من مخلب قرصة انسحاب رد الفعل وردة الفعل طرفة. ملاحظة: اختياري: لمواجهة مشاكل في الجهاز التنفسي أثناء الجراحة، التنبيب والتهوية قد يكون ممكنا. ومع ذلك، نضع في اعتبارنا أن تحتاج القصبة الهوائية ليتم تشريد أثناء الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة تخدير، ووضع الفئران في موقف ضعيف، حلق الرقبة بطني وتعقيم مع 1٪ مناديل الكلورهيكسيدين و / أو مناديل الكحول. تطبيق بطانية الجراحية المعقمة على الحيوان والحفاظ على منطقة معقمة في كل الأوقات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة تخدير، ووضع الفئران في موقف ضعيف، حلق الرقبة بطني وتعقيم مع 1٪ الكلورهيكسيدين والكحول مناديل. تطبيق بطانية الجراحية المعقمة على الحيوان والحفاظ على منطقة معقمة في كل الأوقات. ملاحظة: اختياريا، رئيس الفئران يمكن أن تكون ثابتة في إطار التجسيمي في موقف ضعيف أثناء الجراحة لتعطيل حركة الرأس، أيالعظم القذالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق خط الوسط من 2 إلى 3 سم طويلة من الذقن إلى ما يقرب من نهاية منقاري من القص باستخدام مشرط معقم (# 10). اختياريا، وتطبيق المشابك البلدغ صغيرة لسحب الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلانت تشريح الطبقات العليا من الأنسجة مثل الغدد (الغدة تحت الفك على سبيل المثال والغدة النكفية) والعضلات التي تغطي القصبة الهوائية باستخدام العمل العكسي مع مقص أضعفت وملقط مسننة. البقاء دائما على خط الوسط. يجب أن أنسجة منفصلة بسهولة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتعرض القصبة الهوائية، تهجير إلى جانب واحد. خط الوسط مرئيا تحته مع اثنين من منصات الدهون البيضاء، بمناسبة خط الوسط في نهاية منقاري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منقاري إلى منصات الدهون البيضاء، ويتم التوصل حادة الأنسجة تشريح حتى السطح البطني من الجمجمة (العظم القذالي القاعدي). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج الكامشات-مسننة طويلة (طول السن 5.5 ملم أو 16 ملم) للحفاظ على القصبة الهوائية النازحين إلى جانب واحد (بحد أقصى 1 سم) وفضح قاعدة الجمجمة. النزوح من القصبة الهوائية يمكن OBالبنية التنفس. ملاحظة: بالنسبة لبعض الحيوانات، وتخفف من الكامشات في عدة مرات خلال عملية جراحية لإزالة الضغط على القصبة الهوائية، مثل كل 10 دقيقة لمدة 2 دقيقة. الكامشات هوك يمكن استخدامها بدلا من الكامشات مسننة طويلة للحد من سلالة من النزوح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كوى بعناية الأوعية الدموية مرئية صغيرة في نهاية منقاري الذهاب نحو الحنجرة لتجنب النزيف. ملاحظة: من أجل منع كية يتم سحبها الأوعية الدموية العصب الحنجري المتكررة بعناية بعيدا عن الجدار الأنسجة قبل أن يتم أكتوي بها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط المجهر للفترة المتبقية من عملية جراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة السمحاق تغطي قاعدة الجمجمة مع ملقط غرامة. ضبط الكامشات لتحقيق أفضل عرض ممكن للحفر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يشعر سطح متفاوتة من عظم القذالي القاعدي مع ملقط غرامة، مشيرا إلى إرتفاع في خط الوسط، الذي يغطي الشريان القاعدي. Rostrally، يصبح الجمجمة أثار باعتباره التحدب طفيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اعتمادا على الجانب الذي هو المطلوب الآفة، حفر حفرة ما يقرب من 1 مم الوحشي على خط الوسط في الحركات الناصفي الوحشي. ملاحظة: تذكر أن الفئران هو في موقف ضعيف، وربما يكون الجانب الأيسر على المحققين الجانب الأيمن! </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم حفرة، وتكبير نحو خط الوسط مع الرأسية يصل وأسفل-حركات صغيرة مع الحفر حتى هو واضح الشريان القاعدي المرئي وتكبير أفقيا لا يقل عن 2 ملم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من الشريان القاعدي واضحة للعيان. يمكن التعرف على الهرم من شكله المنتفخة قليلا (الشكل 2) وعلى الحدود مع الأوعية الدموية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة أي شظايا العظام المتبقية مع ملقط غرامة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق قطرة واحدة من دوكسابرام هيدروكلوريد، منبه الجهاز التنفسي، وعلى اللسان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح الجافية طوليا مع إبرة قياس 26 وملقط غرامة الوحشي على الشريان القاعدي. امتصاص السائل النخاعي (CSF) وأي نزيف مع براعم القطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجنب injuراي لالشريان القاعدي، وجعل قطع تغطي ما يقرب من 1.5 مم عرض الهرم و 0.5 مم عميقة مع Vannas الربيع مقص عمودي على الشريان القاعدي (الشكل 2) لقطع الألياف CST. ملاحظة: بمناسبة microscissors مسبقا عند 0.5 ملم من النصائح. مرة واحدة يتم فتح الجافية يمكن نقل الشريان القاعدي قليلا إلى جانب واحد مما يتيح الوصول بشكل أفضل إلى الهرم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تكرار قطع باستخدام غيض من إبرة قياس 26 لضمان تشمل الآفة الألياف قريبة من الشريان القاعدي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقف النزيف مع الضغط الخفيف التي تطبقها براعم القطن. اختياريا، يمكن تغطية قطع مع جلفوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكامشات، تحل محل الأنسجة وخياطة فقط الجلد مع الغرز 3-0 Vicryl. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الجراحة، والحفاظ على الحيوانات في حاضنة في 32 درجة مئوية حتى مستيقظا تماما وإدارة 5 مل المالحة تحت الجلد، إذا لزم الأمر. لا تترك الحيوان غير المراقب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعطاء Carporfen تحت الجلدباعتبارها مضادة للالتهاب وبمثابة مسكن لمنصب الجراحية postsurgery الألم يوم واحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الحيوانات عن كثب لمدة أسبوع بعد الجراحة ومرة ​​واحدة في الأسبوع على الأقل بعد ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كما هو مطلوب بعد الجراحة، ومكان ترطيب حزم هلام، والطعام المهروس الطفل، والهريس الرطب والجاف طعام في الطابق القفص. توفير زجاجات المياه مع ينبثق الطويلة (التي تفتقر إلى صمامات واضعا الكرة). </li></ol>

<ol>
	<li>Lemon, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Descending+pathways+in+motor+control.">Descending pathways in motor control.</a> Annual review of neuroscience. 31, 195-218 (2008).</li><li>Lemon, R. N., Griffiths, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparing+the+function+of+the+corticospinal+system+in+different+species:+organizational+differences+for+motor+specialization.">Comparing the function of the corticospinal system in different species: organizational differences for motor specialization.</a> Muscle &amp; nerve. 32, 261-279 (2005).</li><li>Starkey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+behavioural+function+following+a+pyramidotomy+lesion+of+the+corticospinal+tract+in+adult+mice.">Assessing behavioural function following a pyramidotomy lesion of the corticospinal tract in adult mice.</a> Experimental neurology. 195, 524-539 (2005).</li><li>Starkey, M. L., Bartus, K., Barritt, A. W., Bradbury, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroitinase+ABC+promotes+compensatory+sprouting+of+the+intact+corticospinal+tract+and+recovery+of+forelimb+function+following+unilateral+pyramidotomy+in+adult+mice.">Chondroitinase ABC promotes compensatory sprouting of the intact corticospinal tract and recovery of forelimb function following unilateral pyramidotomy in adult mice.</a> Eur J Neurosci. 36, 3665-3678 (2012).</li><li>Brosamle, C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+of+origin,+course,+and+termination+patterns+of+the+ventral,+uncrossed+component+of+the+mature+rat+corticospinal+tract.">Cells of origin, course, and termination patterns of the ventral, uncrossed component of the mature rat corticospinal tract.</a> The Journal of comparative neurology. 386, 293-303 (1997).</li><li>Brosamle, C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ipsilateral,+ventral+corticospinal+tract+of+the+adult+rat:+ultrastructure,+myelination+and+synaptic+connections.">Ipsilateral, ventral corticospinal tract of the adult rat: ultrastructure, myelination and synaptic connections.</a> Journal of neuroctology. 29, 499-507 (2000).</li><li>Bareyre, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+injured+spinal+cord+spontaneously+forms+a+new+intraspinal+circuit+in+adult+rats.">The injured spinal cord spontaneously forms a new intraspinal circuit in adult rats.</a> Nat Neurosci. 7, 269-277 (2004).</li><li>Chen, Q., Smith, G. M., Shine, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+activation+is+required+for+NT-3-induced+axonal+plasticity+in+chronic+spinal+cord+injury.">Immune activation is required for NT-3-induced axonal plasticity in chronic spinal cord injury.</a> Exp Neurol. 209, 497-509 (2008).</li><li>Z'Graggen, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+sprouting+and+impulse+rerouting+after+unilateral+pyramidal+tract+lesion+in+neonatal+rats.">Compensatory sprouting and impulse rerouting after unilateral pyramidal tract lesion in neonatal rats.</a> J Neurosci. 20, 6561-6569 (2000).</li><li>Rosenzweig, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+spontaneous+plasticity+of+corticospinal+projections+after+primate+spinal+cord+injury.">Extensive spontaneous plasticity of corticospinal projections after primate spinal cord injury.</a> Nat Neurosci. 13, 1505-1510 (2010).</li><li>Z'Graggen, W. J., Metz, G. A., Kartje, G. L., Thallmair, M., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+recovery+and+enhanced+corticofugal+plasticity+after+unilateral+pyramidal+tract+lesion+and+blockade+of+myelin-associated+neurite+growth+inhibitors+in+adult+rats.">Functional recovery and enhanced corticofugal plasticity after unilateral pyramidal tract lesion and blockade of myelin-associated neurite growth inhibitors in adult rats.</a> J Neurosci. 18, 4744-4757 (1998).</li><li>Kartje-Tillotson, G., O'Donoghue, D. L., Dauzvardis, M. F., Castro, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyramidotomy+abolishes+the+abnormal+movements+evoked+by+intracortical+microstimulation+in+adult+rats+that+sustained+neonatal+cortical+lesions.">Pyramidotomy abolishes the abnormal movements evoked by intracortical microstimulation in adult rats that sustained neonatal cortical lesions.</a> Brain Res. 415, 172-177 (1987).</li><li>Thallmair, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurite+growth+inhibitors+restrict+plasticity+and+functional+recovery+following+corticospinal+tract+lesions.">Neurite growth inhibitors restrict plasticity and functional recovery following corticospinal tract lesions.</a> Nature Neuroscience. 1, 124-131 (1998).</li><li>Akbik, F. V., Bhagat, S. M., Patel, P. R., Cafferty, W. B., Strittmatter, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+plasticity+of+adult+brain+is+titrated+by+Nogo+Receptor+1.">Anatomical plasticity of adult brain is titrated by Nogo Receptor 1.</a> Neuron. 77, 859-866 (2013).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacol. 39, 777-787 (2000).</li><li>Steward, O., Sharp, K., Yee, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+re-assessment+of+the+effects+of+intracortical+delivery+of+inosine+on+transmidline+growth+of+corticospinal+tract+axons+after+unilateral+lesions+of+the+medullary+pyramid.">A re-assessment of the effects of intracortical delivery of inosine on transmidline growth of corticospinal tract axons after unilateral lesions of the medullary pyramid.</a> Experimental neurology. 233, 662-673 (2012).</li><li>Thallmair, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurite+growth+inhibitors+restrict+plasticity+and+functional+recovery+following+corticospinal+tract+lesions.">Neurite growth inhibitors restrict plasticity and functional recovery following corticospinal tract lesions.</a> Nature neuroscience. 1, 124-131 (1998).</li><li>Weidner, N., Ner, A., Salimi, N., Tuszynski, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+corticospinal+axonal+plasticity+and+functional+recovery+after+adult+central+nervous+system+injury.">Spontaneous corticospinal axonal plasticity and functional recovery after adult central nervous system injury.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 98, 3513-3518 (2001).</li><li>Schnell, L., Schneider, R., Kolbeck, R., Barde, Y. A., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophin-3+enhances+sprouting+of+corticospinal+tract+during+development+and+after+adult+spinal+cord+lesion.">Neurotrophin-3 enhances sprouting of corticospinal tract during development and after adult spinal cord lesion.</a> Nature. 367, 170-173 (1994).</li><li>Starkey, M. L., Bleul, C., Maier, I. C., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rehabilitative+training+following+unilateral+pyramidotomy+in+adult+rats+improves+forelimb+function+in+a+non-task-specific+way.">Rehabilitative training following unilateral pyramidotomy in adult rats improves forelimb function in a non-task-specific way.</a> Experimental neurology. 232, 81-89 (2011).</li><li>Ueno, M., Hayano, Y., Nakagawa, H., Yamashita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraspinal+rewiring+of+the+corticospinal+tract+requires+target-derived+brain-derived+neurotrophic+factor+and+compensates+lost+function+after+brain+injury.">Intraspinal rewiring of the corticospinal tract requires target-derived brain-derived neurotrophic factor and compensates lost function after brain injury.</a> Brain : a journal of neurology. 135, 1253-1267 (2012).</li><li>Maier, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constraint-induced+movement+therapy+in+the+adult+rat+after+unilateral+corticospinal+tract+injury.">Constraint-induced movement therapy in the adult rat after unilateral corticospinal tract injury.</a> J Neurosci. 28, 9386-9403 (2008).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&amp;#34;staircase+test&amp;#34;:+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats.">The &amp;#34;staircase test&amp;#34;: a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> Journal of neuroscience methods. 36, 219-228 (1991).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behavioural brain research. 119, 1-13 (2001).</li><li>Soleman, S., Yip, P., Leasure, J. L., Moon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+sensorimotor+impairments+after+endothelin-1+induced+focal+cerebral+ischemia+(stroke)+in+aged+rats.">Sustained sensorimotor impairments after endothelin-1 induced focal cerebral ischemia (stroke) in aged rats.</a> Experimental neurology. 222, 13-24 (2010).</li><li>Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Rat Nervous System. , (1995).</li><li>Benowitz, L. I., Goldberg, D. E., Madsen, J. R., Soni, D., Irwin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inosine+stimulates+extensive+axon+collateral+growth+in+the+rat+corticospinal+tract+after+injury.">Inosine stimulates extensive axon collateral growth in the rat corticospinal tract after injury.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96, 13486-13490 (1999).</li><li>Zhou, L., Baumgartner, B. J., Hill-Felberg, S. J., McGowen, L. R., Shine, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophin-3+expressed+in+situ+induces+axonal+plasticity+in+the+adult+injured+spinal+cord.">Neurotrophin-3 expressed in situ induces axonal plasticity in the adult injured spinal cord.</a> J Neurosci. 23, 1424-1431 (2003).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

وصفناها نموذج إصابة قطع السبيل الهرمي. يتم قطع السبيل القشري النخاعي على مستوى الدماغ. من جهة النظر الفنية هذه الجراحة يتطلب الكثير من الحذر والدقة. الدماغ يستوعب مراكز التنفس ومراكز القلب والأوعية الدموية في نوى متعددة مثل نواة غامضة والانفرادية جزءا لا يتجزأ في تشكيل شبكي تحت الأهرامات. إذا تم إجراء خفض عميق جدا وهذا يمكن أن يؤدي إلى صعوبات في التنفس المفاجئ، والتي قد تكون قاتلة. نعطي Dopram فقط قبل قطع لزيادة النشاط التنفس لمنع وقف التنفس المفاجئ. إذا توقف التنفس ومن الجدير التهوية الحيوان تتعلق بما يلي خمس دقائق مع الأكسجين لأنه قد يتعافى. بالإضافة إلى ذلك، ينبغي على الاطلاق أن تجنب أي ضرر يلحق الشريان القاعدي. مضاعفات خلال أول أيام قليلة postinjury هي: نزيف آخر في الدماغ تؤثر على الوظائف الحيوية، وفقدان الوزن كبيرة، والتنفس الحاد difficulties بسبب التهجير القصبة الهوائية والتوجيه والتوازن مشاكل حادة للحيوان بسبب الاصابة واسعة بما في ذلك الزيتون فقط الجانبية لالأهرامات. ويمكن علاج هذه المضاعفات كما نهاية نقاط والحيوانات قد يكون قتل إنسانية. الرصد الدقيق خلال الأسبوع الأول بعد الجراحة أمر ضروري. يمكن إعطاء الأغذية التكميلية من أجل موازنة فقدان الوزن. التهاب الشعب الهوائية (التنفس خشن) يحل عادة في غضون 1-2 أيام. عموما، الحيوانات الأصغر سنا هي أسهل للعمل على النحو رقابهم أقل عميقة. وعلاوة على ذلك، فهي أكثر مرونة وأقل مضاعفات لديهم التنفس. فهو يتطلب بعض الممارسة لتحقيق الآفة كاملة من CST مع قطع السبيل الهرمي. وبالمثل، التي نشرت في دراستين من قبل ستيوارد وآخرون 16، التي تحدد لتكرار تجربة السابقة التي Benowitz وآخرون. 28 معدلات وفيات عالية في البداية وأن بعض الآفات التي كانت غير مكتملة. السلوكيسوف يكون العجز متغير أيضا. ونحن نوصي بأن الطبيب الجراح جديد يقوم العديد من العمليات الجراحية ممارسة قطع السبيل الهرمي قبل إجراء أي تجربة كاملة لاختبار العلاج مرشح. طرق لمنع الآفات غير مكتملة ويتراجع خفض بإبرة تحت الجلد والتأكد من قطع ألياف القشري قريبة من الشريان القاعدي كما هو موضح في هذا البروتوكول. هناك خيارات أخرى وهي نضح موقع الآفة مع يميل الزجاج شفط ماصة كما هو موضح في زهو وآخرون 2003 (29). ويمكن أيضا سلك التنغستن غرامة استخدامها لقطع الجهاز 22. بديل لقطع السبيل الهرمي هو لقطع عنق الرحم C3 الظهرية CST من جانب واحد ومن ثم إلى قطع مع نهج البطني في الجزء البطني C2 ipsilesional من CST 18. ومع ذلك يمكن القول، آفة كاملة ليست ضرورية إذا كان الهدف هو دراسة تنتشر من CST contralesional. إذا تم lesioned غالبية الهرم وحدوث استجابة تنتشر من الجانب unlesioned هذا يمكن أن يكون كافيا. هدف واحد من طراز قطع السبيل الهرمي الآفة هو يجتذ جانب واحد من المسالك القشرية واستخدام العلاجات يحفز المرونة العصبية لتحفيز اللدونة وتنتشر من الألياف سليمة غير المصابين. لاختبار العلاجات العصبية واقية هذا النموذج غير مناسب ونماذج إصابة أخرى مثل الإصابات كدمة ينبغي أن تستخدم. ويتم تقييم نتائج pyramidotomies غالبا مع الاختبار السلوكي وعلم التشريح. اختبار سلم أفقي، واختبار اسطوانة تربية ومونتويا اختبار الدرج هي التقييمات السلوكية الأكثر شيوعا. اختبارات أخرى وصفها في المؤلفات هي بيليه الوصول الاختبار، اختبار حبل التسلق، وتحليل المشية وشريط لاصق اختبار 3،17-19. ومع ذلك، غالبا ما يتم رصد نتائج معظم الاختبار السلوكي فقط بحد أقصى 42 يوما postlesion 3،4،11،17،18،20-22. من التجارب السابقة والقوارض استعادة معظم وظيفة في نقاط زمنية لاحقة دون أي تدخل العلاج. لقد أظهرنا ثار الاختبار سلم الأفقي واختبار الوصول مونتويا الدرج بيليه كشف عن الإعاقة تصل إلى نقطة زمنية لاحقة. أنها يمكن أن تستخدم لقياس الانتعاش وظيفية بسبب العلاج. يتم الحكم على اكتمال الآفة التي كتبها بي كي سي جاما تلطيخ (التي تصف الألياف CST في الأعمدة الظهرية) من الحبل الشوكي في مستوى عنق الرحم منقاري أو eriochrome تلطيخ cyanine من المقاطع العرضية للموقع الآفة. ويمكن حقن أمين ديكستران المعقدة البيروكسيديز في القشرة contralesional لتقييم تنتشر من الألياف سليمة عبر خط الوسط في منطقة النخاع الشوكي مزالة العصب. وفي الختام، فإن النموذج الهرمي هو جيد لتقييم قدراتهم في إحداث المرونة العصبية من دواء لعلاج إصابات الجهاز العصبي المركزي إذا أتقنت عملية جراحية بنجاح. ويقيم اللدونة من الألياف سليمة. ان الخطوة التالية ستكون استخدام نموذج أكثر ذات الصلة سريريا مثل الإصابات كدمة لتقييم قدرة الدواء على التغلب على injuri أكبروفاق تؤثر على مساحات متعددة.

الجهاز القشري (CST) هو واحد المسالك المحرك الرئيسي في الحبل الشوكي البشري. الأضرار التي لحقت هذا الجهاز بعد النتائج إصابة الحبل الشوكي في خسائر كبيرة من البراعة. وCST المهم وخاصة بالنسبة للحركة الحركية الدقيقة عند الإنسان، مثل حركة أرقام والسيطرة على العضلات البعيدة. كما أنها وجدت في القوارض على الرغم من أن موقع تشريحي لها داخل الحبل الشوكي يختلف عن البشر والضرر CST أقل تعطيل 1-4. واحد في الجسم الحي نموذج للإصابة CST ينطوي على قطع السبيل الهرمي من جانب واحد، حيث يتم قطع هرم واحد في الدماغ بطني منقاري إلى التصالب (الشكل 1). الأهرامات هي سمة تشريحية واضحة على الجانب البطني من النخاع المستطيل من خلالها يدير CST قبل أن decussates. في الفئران، والغالبية العظمى من الألياف (حوالي 95٪) متقاطع في نهاية الذيلية من النخاع وجدت بعد ذلك في الجزء الظهري وسطي من الحبل الشوكي. ومع ذلك، approximatاعل 10٪ من الألياف decussated تعمل في الأعمدة الظهرية الوحشية. ما تبقى من ~ 5٪ من الألياف البقاء امتصالب على الجانب المماثل والسفر في الجزء الأنسي بطني 5،6. بعد قطع السبيل الهرمي يفقد الحبل الشوكي مدخلاتها مباشر من CST المقابل (الشكل 1). نموذج قطع السبيل الهرمي هو جيد وخاصة لاختبار ردود الألياف سليمة من CST unlesioned إلى العلاج. انها تسمح تقييم اللدونة وتنتشر من الألياف سليمة عبر خط الوسط في الحبل الشوكي، وهي عصب المناطق مزالة العصب. وقد لوحظ أن السبيل القشري النخاعي لتنبت بشكل كبير في نماذج إصابة في العمود الفقري ويتوسط forelimb خاصة الانتعاش 7-10. قد تهدف علاج لتعزيز هذا الانتعاش forelimb. فعالية من العلاج يمكن اختبارها مع التقييمات السلوكية، وتقنيات تتبع تشريحية من الجهاز unlesioned والتجارب الكهربية محطة 3،11،12. &lt;/ P&gt; ميزة بالمقارنة مع معظم النماذج قبل السريرية الأخرى من إصابات في العمود الفقري هو أنه يؤثر على وجه التحديد المسالك واحد مقارنة مع إصابات العمود الفقري الأخرى التي تؤثر في كثير من الأحيان مساحات متعددة. وlesioned المسالك واحد فقط في واضحة، والموقع التشريحي سطحية. ميزة أخرى هي أن السبيل الهرمي هو نموذج اصابة استنساخه. إنها مناسبة في الموارد الحية للباحثين لاختبار تأثير العلاجات يحفز المرونة العصبية المحتملة، التي تهدف إلى استعادة وظيفة السيارات بعد وقوع إصابات أو الاضطرابات التي تؤثر على الجهاز الحركي 13،14.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>Vm No; 02000/4229</td>
			<td>give 5mg/kg twice daily</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Scissors- Tough Cut</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11019-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Long-toothed Alm retractors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>17009-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cautery system kit</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>726067</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine Dumont forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel burrs</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>19007-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dopram V-drops</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td>apply 1 drop to tongue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gelfoam</td>
			<td>Equimedical</td>
			<td>EQU705001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Vicryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact Anaesthesia System Isoflurane K/F Single Gas</td>
			<td>VetTech Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scales</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>NVT3201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel Scalpel blades No. 10</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td align="right">201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25g needles</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN-2525R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringes (1ml and 5ml)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+01T1 / SS*05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (Sodium Chloride 0.9%)</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>Pl 08828/0178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton buds</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td align="right">5000207582502</td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

unilateral pyramidotomy of the corticospinal tract in rats for assessment of neuroplasticity-inducing therapies

الجهاز القشري (CST) يمكن قطعت تماما من جانب واحد في الأهرامات النخاعية من الدماغ القوارض. جنة العلم والتكنولوجيا هو الجهاز الحركية التي لها أهمية كبيرة للسيطرة على العضلات البعيدة في البشر، وإلى حد أقل، في القوارض. وهناك قطع من جانب واحد واحد النتائج هرم في فقدان تعصيب CST من الحبل الشوكي بشكل رئيسي على الجانب المقابل من الحبل الشوكي مما يؤدي إلى عابرة الإعاقة الحركية في الأطراف الأمامية ويستمر فقدان البراعة. توقعات المماثل من الجهاز القشري طفيفة. لقد المكرر أسلوبنا الجراحي لزيادة فرص الآفة اكتمالها. وصفنا الرعاية بعد الجراحة. تم الكشف عن العجز في الاختبار مونتويا الدرج بيليه الوصول واختبار سلم أفقي هو موضح هنا ما يصل إلى 8 أسابيع postinjury. تم الكشف عن العجز في اختبار اسطوانة تربية فقط عابر. ولذلك، فإن اختبار اسطوانة قد يكون فقط مناسبة للكشف عن التعافي على المدى القصير. وتبين لنا كيف، electrophysiologicallyوتشريحيا، يمكن للمرء أن تقييم الآفات والتغييرات البلاستيك. وصفنا أيضا كيفية تحليل الألياف من CST يصب بأذى تنتشر في جميع أنحاء خط الوسط في المناطق المحرومة. ومن الصعب الحصول على آفات كاملة&gt; 90٪ باستمرار نظرا لقربها من الشريان القاعدي في النخاع المستطيل ومعدلات البقاء على قيد الحياة يمكن أن تكون منخفضة. يتم وصف النهج الجراحية البديلة والاختبار السلوكي في هذا البروتوكول. نموذج قطع السبيل الهرمي هو وسيلة جيدة لتقييم العلاج الذي يحفز المرونة العصبية، مما يزيد تنتشر من الألياف سليمة بعد الاصابة.

Watch this Scientific Journal Video about Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies at JoVE.com

Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

الجهاز القشري، واحدة من مساحات الحسية الكبرى، يمكن lesioned من جانب واحد في الدماغ القوارض من أجل اختبار علاجات الذي يحفز المرونة العصبية للجهاز العصبي المركزي. يتم وصف هذا الإجراء الجراحي (&quot;قطع السبيل الهرمي&quot;) والتقييمات بعد العملية الجراحية في هذا البروتوكول.

من جانب واحد قطع السبيل الهرمي للالقشري المسالك في الجرذان لتقييم العلاج الذي يحفز المرونة العصبية

The corticospinal tract (CST) can be completely severed unilaterally in the medullary pyramids of the rodent brainstem. The CST is a motor tract that has ...

unilateral-pyramidotomy-corticospinal-tract-rats-for-assessment

Research

JoVE Journal

Neuroscience

15.7K Views.  King's College London.  الجهاز القشري، واحدة من مساحات الحسية الكبرى، يمكن lesioned من جانب واحد في الدماغ القوارض من أجل اختبار علاجات الذي يحفز المرونة العصبية للجهاز العصبي المركزي. يتم وصف هذا الإجراء الجراحي ("قطع السبيل الهرمي") والتقييمات بعد العملية الج?...

Video: Unilateral Pyramidotomy of the Corticospinal Tract in Rats for Assessment of Neuroplasticity-inducing Therapies

Assessment of Ultrasonic Vocalizations During Drug Self-administration in Rats

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and relapse. Various types of behavioral activity are commonly utilized as measures of drug motivation in animals. However, a crucial component of drug abuse relapse in abstinent cocaine users is "drug craving", which is difficult to model in animals, as it often occurs in the absence of overt behaviors. Yet, it is possible that a class of ultrasonic vocalizations (USVs) in rats may be a useful marker for affective responses to drug administration, drug anticipation and even drug craving. Rats vocalize in ultrasonic frequencies that serve as a communicatory function and express subjective emotional states. Several studies have shown that different call frequency ranges are associated with negative and positive emotional states. For instance, high frequency calls ("50-kHz") are associated with positive affect, whereas low frequency calls ("22-kHz") represent a negative emotional state. This article describes a procedure to assess rat USVs associated with daily cocaine self-administration. For this procedure, we utilized standard single-lever operant chambers housed within sound-attenuating boxes for cocaine self-administration sessions and utilized ultrasonic microphones, multi-channel recording hardware and specialized software programs to detect and analyze USVs. USVs measurements reflect emotionality of rats before, during and after drug availability and can be correlated with commonly assessed drug self-administration behavioral data such lever responses, inter-response intervals and locomotor activity. Since USVs can be assessed during intervals prior to drug availability (e.g., anticipatory USVs) and during drug extinction trials, changes in affect associated with drug anticipation and drug abstinence can also be determined. In addition, determining USV changes over the course of short- and long-term drug exposure can provide a more detailed interpretation of drug exposure effects on affective functioning.

Drug self-administration and ultrasonic vocalizations (USV) are used as behavioral assessments in animal research, but rarely in combination. The purpose of this article is to describe the advantages of recording USVs during drug self-administration procedures to assess affective responses to drug experience.

تقييم الالفاظ بالموجات فوق الصوتية خلال مخدرات الذاتي الإدارة في الفئران

Drug self-administration procedures are commonly used to study behavioral and neurochemical changes associated with human drug abuse, addiction and ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and relapse to food taking 1. Food craving conceptualized in this way is akin to drug craving in response to drug-paired cues. A rich literature has been developed around understanding the behavioral and neurobiological determinants of drug craving; we and others have been focusing recently on translating techniques from basic addiction research to better understand addiction-like behaviors related to food 2-4.
As done in previous studies of drug craving, we examine sucrose craving behavior by utilizing a rat model of relapse. In this model, rats self-administer either drug or food in sessions over several days. In a session, lever responding delivers the reward along with a tone+light stimulus. Craving behavior is then operationally defined as responding in a subsequent session where the reward is not available. Rats will reliably respond for the tone+light stimulus, likely due to its acquired conditioned reinforcing properties 5. This behavior is sometimes referred to as sucrose seeking or cue reactivity. In the present discussion we will use the term "sucrose craving" to subsume both of these constructs.
In the past decade, we have focused on how the length of time following reward self-administration influences reward craving. Interestingly, rats increase responding for the reward-paired cue over the course of several weeks of a period of forced-abstinence. This "incubation of craving" is observed in rats that have self-administered either food or drugs of abuse 4,6. This time-dependent increase in craving we have identified in the animal model may have great potential relevance to human drug and food addiction behaviors.
Here we present a protocol for assessing incubation of sucrose craving in rats. Variants of the procedure will be indicated where craving is assessed as responding for a discrete sucrose-paired cue following extinction of lever pressing within the sucrose self-administration context (Extinction without cues) or as responding for sucrose-paired cues in a general extinction context (Extinction with cues).

Responding for food or drug-paired cues increases over the course of a period of abstinence and this may relate to an increased susceptibility to relapse behaviors. Here we detail a procedure for evaluating this "incubation of craving" in rats that have self-administered sucrose.

طريقة عامة لتقييم الحضانة لالتوق السكروز في الجرذان

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for tissue formation during embryonic development and tissue homeostasis during adulthood 1. Currently, great efforts are invested towards controlling the switch of somatic stem cells from expansion to differentiation because this is thought to be fundamental for developing novel strategies for regenerative medicine 1,2. However, a major challenge in the study and use of somatic stem cell is that their expansion has been proven very difficult to control.
Here we describe a system that allows the control of neural stem/progenitor cell (altogether referred to as NSC) expansion in the mouse embryonic cortex or the adult hippocampus by manipulating the expression of the cdk4/cyclinD1 complex, a major regulator of the G1 phase of the cell cycle and somatic stem cell differentiation 3,4. Specifically, two different approaches are described by which the cdk4/cyclinD1 complex is overexpressed in NSC in vivo. By the first approach, overexpression of the cell cycle regulators is obtained by injecting plasmids encoding for cdk4/cyclinD1 in the lumen of the mouse telencephalon followed by in utero electroporation to deliver them to NSC of the lateral cortex, thus, triggering episomal expression of the transgenes 5-8. By the second approach, highly concentrated HIV-derived viruses are stereotaxically injected in the dentate gyrus of the adult mouse hippocampus, thus, triggering constitutive expression of the cell cycle regulators after integration of the viral construct in the genome of infected cells 9. Both approaches, whose basic principles were already described by other video protocols 10-14, were here optimized to i) reduce tissue damage, ii) target wide portions of very specific brain regions, iii) obtain high numbers of manipulated cells within each region, and iv) trigger high expression levels of the transgenes within each cell. Transient overexpression of the transgenes using the two approaches is obtained by different means i.e. by natural dilution of the electroporated plasmids due to cell division or tamoxifen administration in Cre-expressing NSC infected with viruses carrying cdk4/cyclinD1 flanked by loxP sites, respectively 9,15.
These methods provide a very powerful platform to acutely and tissue-specifically manipulate the expression of any gene in the mouse brain. In particular, by manipulating the expression of the cdk4/cyclinD1 complex, our system allows the temporal control of NSC expansion and their switch to differentiation, thus, ultimately increasing the number of neurons generated in the mammalian brain. Our approach may be critically important for basic research and using somatic stem cells for therapy of the mammalian central nervous system while providing a better understanding of i) stem cell contribution to tissue formation during development, ii) tissue homeostasis during adulthood, iii) the role of adult neurogenesis in cognitive functions, and perhaps, iv) better using somatic stem cells in models of neurodegenerative diseases.

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Controlling the expansion of somatic stem cells is a major factor hampering their study and use in therapy. Here we describe a system to temporally control neural stem cells expansion during development and adulthood, which can be used to increase the number of neurons generated in the mouse brain.

توسيع الجنينية والكبار الخلايا الجذعية العصبية من قبل<em&gt; في الرحم</em&gt; الصعق الكهربائي أو حقن التجسيمي الفيروسية

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Micromanipulation of Gene Expression in the Adult Zebrafish Brain Using Cerebroventricular Microinjection of Morpholino Oligonucleotides

Manipulation of gene expression in tissues is required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the cerebroventricular microinjection (CVMI) technique as a means to modulate gene expression in the adult zebrafish brain. By using CVMI, substances can be administered into the cerebroventricular fluid and be thoroughly distributed along the rostrocaudal axis of the brain. We particularly focus on the use of antisense morpholino oligonucleotides, which are potent tools for knocking down gene expression in vivo. In our method, when applied, morpholino molecules are taken up by the cells lining the ventricular surface. These cells include the radial glial cells, which act as neurogenic progenitors. Therefore, knocking down gene expression in the radial glial cells is of utmost importance to analyze the widespread neurogenesis response in zebrafish, and also would provide insight into how vertebrates could sustain adult neurogenesis response. Such an understanding would also help the efforts for clinical applications in human neurodegenerative disorders and central nervous system regeneration. Thus, we present the cerebroventricular microinjection method as a quick and efficient way to alter gene expression and neurogenesis response in the adult zebrafish forebrain. We also provide troubleshooting tips and other useful information on how to carry out the CVMI procedure.

In this article, we demonstrate a method for manipulation of gene expression in the ventricular cells of the adult zebrafish telencephalon using antisense morpholino oligonucleotides. We present this method as an efficient and quick protocol that can be used for functional studies in the adult vertebrate brain.

المجهرية من التعبير الجيني في الدماغ اسماك الزرد الكبار عن طريق حقن مكروي Cerebroventricular [أليغنوكليوتيد] Morpholino

Manipulation of gene expression in tissues is  required to perform functional studies. In this paper, we demonstrate the  cerebroventricular ...

Growing Neural Stem Cells from Conventional and Nonconventional Regions of the Adult Rodent Brain

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the adult brain. However, the mechanisms these normally quiescent cells employ to ensure proper functioning of neural networks, as well as their role in recovery from injury and mitigation of neurodegenerative processes are little understood. These cells reside in regions referred to as &#34;niches&#34; that provide a sustaining environment involving modulatory signals from both the vascular and immune systems. The isolation, maintenance, and differentiation of CNS SCs under defined culture conditions which exclude unknown factors, makes them accessible to treatment by pharmacological or genetic means, thus providing insight into their in vivo behavior. Here we offer detailed information on the methods for generating cultures of CNS SCs from distinct regions of the adult brain and approaches to assess their differentiation potential into neurons, astrocytes, and oligodendrocytes in vitro. This technique yields a homogeneous cell population as a monolayer culture that can be visualized to study individual SCs and their progeny. Furthermore, it can be applied across different animal model systems and clinical samples, being used previously to predict regenerative responses in the damaged adult nervous system.

Neural stem cells harvested from the adult brain are increasing utilized in applications ranging from the basic research of nervous system development to exploring potential clinical applications in regenerative medicine. This makes rigorous control in the isolation and culturing conditions used to grow these cells critical to sound experimental outcomes.

تزايد الخلايا الجذعية العصبية من المناطق التقليدية وغير التقليدية من الدماغ الكبار القوارض

Recent work demonstrates that central nervous system (CNS) regeneration and tumorigenesis involves populations of stem cells (SCs) resident within the ...

One Mouse, Two Cultures: Isolation and Culture of Adult Neural Stem Cells from the Two Neurogenic Zones of Individual Mice

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult neural stem cells in vitro. These assays can be used to compare the precursor potential of cells isolated from genetically different or differentially treated animals&#160;to determine the effects of exogenous factors on neural precursor cell proliferation and differentiation and to generate neural precursor cell lines that can be assayed over continuous passages. The neurosphere assay is traditionally used for the post-hoc identification of stem cells, primarily due to the lack of definitive markers with which they can be isolated from primary tissue&#160;and has the major advantage of giving a quick estimate of precursor cell numbers in brain tissue derived from individual animals. Adherent monolayer cultures, in contrast, are not traditionally used to compare proliferation between individual animals, as each culture is generally initiated from the combined tissue of between 5-8 animals. However, they have the major advantage that, unlike neurospheres, they consist of a mostly homogeneous population of precursor cells and are useful for following the differentiation process in single cells. Here, we describe, in detail, the generation of neurosphere cultures and, for the first time, adherent cultures from individual animals. This has many important implications including paired analysis of proliferation and/or differentiation potential in both the subventricular zone (SVZ) and dentate gyrus (DG) of treated or genetically different mouse lines, as well as a significant reduction in animal usage.

Here we describe a detailed protocol for the simultaneous generation of neural precursor cell cultures, as either adherent monolayers or neurospheres, from the subventricular zone and dentate gyrus of individual adult mice.

ماوس واحدة، واثنين من الثقافات: العزلة وثقافة الكبار الخلايا الجذعية العصبية من المناطق العصبية اثنان من الفئران الفردية

The neurosphere assay and the adherent monolayer culture system are valuable tools to determine the potential (proliferation or differentiation) of adult ...

The Power of Interstimulus Interval for the Assessment of Temporal Processing in Rodents

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in neurocognitive disorders. Despite the popularization of prepulse inhibition (PPI) in recent years, many current protocols promote using a percent of control measure, thereby precluding the assessment of temporal processing. The present study used cross-modal PPI and gap prepulse inhibition (gap-PPI) to demonstrate the benefits of employing a range of interstimulus intervals (ISIs) to delineate effects of sensory modality, psychostimulant exposure, and age. Assessment of sensory modality, psychostimulant exposure, and age reveals the utility of an approach varying the interstimulus interval (ISI) to establish the shape of the ISI function, including increases (sharper curve inflections) or decreases (flattening of the response amplitude curve) in startle amplitude. Additionally, shifts in peak response inhibition, suggestive of a differential sensitivity to the manipulation of ISI, are often revealed. Thus, the systematic manipulation of ISI affords a critical opportunity to evaluate temporal processing, which may reveal the underlying neural mechanisms involved in neurocognitive disorders.

Temporal processing, a preattentive process, may underlie deficits in higher-level cognitive processes, including attention, commonly observed in neurocognitive disorders. Using prepulse inhibition as an exemplar paradigm, we present a protocol for manipulating interstimulus interval (ISI) to establish the shape of the ISI function to provide an assessment of temporal processing.

قوة إينتيرستيمولوس الفاصل الزمني للتقييم لتجهيز الزمانية في القوارض

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in ...

Bilateral Assessment of the Corticospinal Pathways of the Ankle Muscles Using Navigated Transcranial Magnetic Stimulation

Distal leg muscles receive neural input from motor cortical areas via the corticospinal tract, which is one of the main motor descending pathway in humans and can be assessed using transcranial magnetic stimulation (TMS). Given the role of distal leg muscles in upright postural and dynamic tasks, such as walking, a growing research interest in the assessment and modulation of the corticospinal tracts relative to the function of these muscles has emerged in the last decade. However, methodological parameters used in previous work have varied across studies making the interpretation of results from cross-sectional and longitudinal studies less robust. Therefore, use of a standardized TMS protocol specific to the assessment of leg muscles&#39; corticomotor response (CMR) will allow for direct comparison of results across studies and cohorts. The objective of this paper is to present a protocol that provides the flexibility to simultaneously assess the bilateral CMR of two main ankle antagonistic muscles, the tibialis anterior and soleus, using single pulse TMS with a neuronavigation system. The present protocol is applicable while the examined muscle is either fully relaxed or isometrically contracted at a defined percentage of maximum isometric voluntary contraction. Using each subject&#39;s structural MRI with the neuronavigation system ensures accurate and precise positioning of the coil over the leg cortical representations during assessment. Given the inconsistency in CMR derived measures, this protocol also describes a standardized calculation of these measures using automated algorithms. Though this protocol is not conducted during upright postural or dynamic tasks, it&#160;can be used to assess bilaterally any pair of leg muscles, either antagonistic or synergistic, in both neurologically intact and impaired subjects.

The present protocol describes the simultaneous, bilateral assessment of the corticomotor response of the tibialis anterior and soleus during rest and tonic voluntary activation using a single pulse transcranial magnetic stimulation and neuronavigation system.

تقييم الثنائية للممرات كورتيكوسبينال في عضلات الكاحل باستخدام أبحر Transcranial التحفيز المغناطيسي

Distal leg muscles receive neural input from motor cortical areas via the corticospinal tract, which is one of the main motor descending pathway in humans ...

Determining the Functional Status of the Corticospinal Tract Within One Week of Stroke

High interindividual variability in the recovery of upper limb (UL) function after stroke means it is difficult to predict an individual&#39;s potential for recovery based on clinical assessments alone. The functional integrity of the corticospinal tract is an important prognostic biomarker for recovery of UL function, particularly for those with severe initial UL impairment. This article presents a protocol for evaluating corticospinal tract function within 1 week of stroke. This protocol can be used to select and stratify patients in trials of interventions designed to improve UL motor recovery and outcomes after stroke. The protocol also forms part of the PREP2 algorithm, which predicts UL function for individual patients 3 months poststroke. The algorithm sequentially combines a UL strength assessment, age, transcranial magnetic stimulation, and stroke severity, within a few days of the stroke. The benefits of using PREP2 in clinical practice are described elsewhere. This article focuses on the use of a UL strength assessment and transcranial magnetic stimulation to evaluate corticospinal tract function.

This protocol is for evaluating corticospinal tract function within 1 week of stroke. It can be used to select and stratify patients in trials of interventions designed to improve upper limb motor recovery and outcomes and in clinical practice for predicting upper limb functional outcomes 3 months after stroke.

تحديد الوضع الوظيفي للمسار القشري الشوكي في غضون أسبوع واحد من السكتة الدماغية

High interindividual variability in the recovery of upper limb (UL) function after stroke means it is difficult to predict an individual&#39;s potential ...

Induction of Diffuse Axonal Brain Injury in Rats Based on Rotational Acceleration

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large percentage of TBI patients requiring hospitalization. DAI involves widespread axonal damage from shaking, rotation or blast injury, leading to rapid axonal stretch injury and secondary axonal changes that are associated with a long-lasting impact on functional recovery. Historically, experimental models of DAI without focal injury have been difficult to design. Here we validate a simple, reproducible and reliable rodent model of DAI that causes widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

This protocol validates a reliable, easy-to-perform and reproducible rodent model of brain diffuse axonal injury (DAI) that induces widespread white matter damage without skull fractures or contusions.

تحريض من منتشر إصابة الدماغ أكسونال في الفئران على أساس تسارع التناوب

Traumatic brain injury (TBI) is a major cause of death and disability. Diffuse axonal injury (DAI) is the predominant mechanism of injury in a large ...