The authors would like to acknowledge the support of NIH/NIDDK K12 DK100014 (Lan Lu), the Case Comprehensive Cancer Center (NIH/NCI P30 CA43703), and the Clinical and Translation Science Collaborative of Cleveland (NIH/NCATS UL1 TR000439).

أجريت جميع الدراسات الحيوانية وفقا لبروتوكولات اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (إاكوك) في جامعة كيس ويسترن ريزيرف. مدة العملية الجراحية الموصوفة أدناه حوالي 45-60 دقيقة. إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي نفسه حوالي 15 دقيقة لكل نقطة زمنية. 1. التخدير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران في غرفة إيسوفلوران تعيين في 2٪ إيسوفلوران مختلطة مع الأكسجين لتسهيل التعامل مع الحيوانات وضبط النفس قبل إعطاء التخدير عن طريق الحقن داخل البريتونيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد 3-5 دقائق من التعرض ل إيسوفلوران، تحقق من أن الحيوان هو تخدير ويعرض أي رد على قرصة أخمص قدميه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيد من الفئران رزين مع حقن داخل البريتوني من مزيج من زيلازين والكيتامين: 75 ملغ / كغ من الكيتامين / 10 ملغ / كغ زيلازين. عند إجراء الحقن داخل البريتوني، ورسم الإبرة للتأكد من أن أجزاء من الأمعاء أو الأعضاء الحيوية الأخرى لم ثقب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أنانجكت 2 ملغ / كغ من بوبيفاكين تحت الجلد في موقع شق لتوفير تخفيف الألم الموضعية. </li></ol> 2. إعداد منطقة الجراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم الأدوات الجراحية واللوازم قبل أن يتم استخدامها لعملية جراحية ووضع على لوحة الجراحية للعقم. يمكن تعقيم معظم الأدوات واللوازم وإعادة استخدامها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام قفازات معقمة لجميع العمليات الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الحلاقة الكهربائية لحلق الفراء قبالة الجانب الأيمن للحيوان. يحلق الحيوان من الجزء السفلي من القفص الصدري إلى الجزء العلوي من الساق الخلفية توفير منطقة خالية من الشعر كبيرة للشق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان على لوحة جراحية معقمة لعزل المنطقة المطهرة من المناطق المحيطة بها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فرك الجلد مع مطهر مثل اليود بوفيدون أو بيتادين. بدء الغسل في مركز الموقع الجراحي والانتقال إلى الخارج بطريقة دائرية. كرر ثلاث مرات على الأقل مع مسح جديد من اليود بوفيدون أو بيتادين. </لى&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> فرك الموقع الجراحي مع مسحات الكحول 70٪ حتى الجلد هو واضح، واليود قد تكون سامة إذا امتص. </li></ol> 3. الإجراء الجراحي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على هذا الإجراء تحت ظروف معقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان تخدير على سرير التدفئة الدافئة في موقف الأيسر الوحشي الأيسر مع الجناح الأيمن تواجه صعودا. ملاحظة: يجب توخي الحذر للحفاظ على درجة حرارة الجسم الأساسية للحيوان في 35-37 درجة مئوية لمنع انخفاض حرارة الجسم. وينبغي أيضا تعقيم هذا السرير الاحترار حسب الحاجة للحفاظ على ظروف العقيم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يشعر القفص الصدري، وجعل صغير 2-3 سم الحق الظهرية خلف الصفاق شق باستخدام حجم العقيمة 10 شفرة مشرط بدءا من الجزء السفلي من القفص الصدري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الشاش العقيمة طوليا على طول جانبي شق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح بعيدا الأنسجة تحت الجلد، والدهون، والعضلات من أجل تصور والوصول إلى تجويف البطن. استخدام مقص منحني مايو مقصوص للسماح اختراق أعمقحصص في الجرح وقطع الأنسجة السميكة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة في الكبد واضحة للعيان ويمكن الوصول إليها، واستخدام ملقط حادة لسحب الكبد صعودا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام زوج آخر من ملقط حادة في ناحية أخرى، وفضح الكلى الحق لذلك يجلس خارج تجويف البطن مباشرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام إصبع المؤشر والإبهام من اليد اليسرى لعقد الكلى في الموقف. مع اليد اليمنى، ببطء وبشكل مطرد حقن 0.1 مل UTI89 E. القولونية الحل (تركيز بين 1 × 10 8 -1 × 10 9 ) من حقنة معقمة في الحوض الكلوي (الذي يظهر كما فقاعة بيضاء) 15 . ملاحظة: إعداد عيار البكتيرية كما هو موضح في المرجع 15 . </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع شريط من مرقئ قابل للامتصاص على إبرة لمنع تدفق اللقاح في الصفاق. سحب ببطء الإبرة من الحوض الكلوي. ملاحظة: ينبغي الحرص على عدم بيرس أو إصابة الأنسجة المحيطة مما أدى إلى إنفكتي خارج الهدفو / أو المضاعفات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام حقنة أكبر لشطف شامل الكلى مع المياه المالحة العادية قبل وضعها مرة أخرى في تجويف البطن. </li></ol> 4. الغرز ملاحظة: خياطة التي سيتم دفنها في الأنسجة يجب أن يكون 4-0 غير قابلة للامتصاص خيوط مضفر. يمكن استخدام خيوط امتصاصية أو أحادية الشعاع لأسطح الجسم. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الغرز بالتساوي وعلى مقربة من حافة الأنسجة ممكن لمنع انسداد تدفق الدم. وعادة ما لا يزيد عن 0.3 سم من الحافة أمر ضروري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فهم الجلد و إفرت قليلا باستخدام زوج من ملقط مسنن غرامة، وتدوير حامل الإبرة في موقف بروناتد في التحضير لثقب الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع الإبرة من خلال سمك كامل من الجلد عن طريق سوبينغ المعصم لتدوير الإبرة وتمريره من خلال الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر هذه العملية لحافة الجلد الأقرب إلى الفرد تنفيذ الإجراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شدالغرز بما فيه الكفاية لمعارضة حواف الأنسجة. أي تشديد سوف تعوق إمدادات الدم، بطيئة التئام الجروح وقد يؤدي إلى التفكك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعادل قبالة خياطة باستخدام عقدة مربع، كما لو كانت غرزة توقف بسيطة، إلا أنه يتم قطع فقط حبلا قصيرة، وترك حوالي ذيل 3-4 ملم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد ربط غرزة الأولى قبالة، وإعداد لوضع غرزة الثانية حوالي 3 ملم بعيدا عن الأول، ومواصلة خياطة تشغيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة يتم التوصل إلى نهاية شق، لا سحب غرزة الماضي تماما من خلال. بدلا من ذلك، استخدام حلقة التي تعقد مع حامل الإبرة هنا كما حبلا قصيرة من أجل التعادل من نهاية البعيدة من إغلاق خياطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام العلاقات أداة، التعادل قبالة خياطة باستخدام عقدة مربع. وهذا يؤدي إلى 3 فروع تلتصق من عقدة الانتهاء في نهاية البعيدة. </li></ol> 5. الحيوان الانتعاش <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن 2.1 ملغ / كغ يوهيمبين داخل البريتونيا بعد الجراحة لعكس التخدير. اومن المتوقع نيمالس للتعافي تماما من الإجراء الجراحي بعد 3-5 ساعة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الحيوان على وسادة التدفئة (لتجنب انخفاض حرارة الجسم) والفراش لينة ماصة بعد الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توفير الإماهة مع السوائل عن طريق الفم أو الوريدية حتى يمكن العودة إلى التغذية الطبيعية (في غضون 24 ساعة). حقن حوالي 0.6 مل من محلول ملحي عادي البريتوني مباشرة بعد الجراحة للحد من آثار الجفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توفير تسكين كما هو موضح في إاكوك وافق رعاية الحيوان واستخدام بروتوكول. حقن 5 ملغ / كغ كاربروفين تحت الجلد لإدارة الألم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الشقوق بانتظام للتورم، الافرازات، ألم، أو التفكك. </li></ol> 6. التحقق من صحة عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء أنا فيفو تجارب التصوير بالرنين المغناطيسي على حقل كبير الماسحات الضوئية التصوير بالرنين المغناطيسي الحيوانات الصغيرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة التخدير مع 3٪ الأيزوفلورين في الأكسجين ووضع الحيوان مع الكلى الحق في إزوسنتر في الماسح الضوئي والتصوير بالرنين المغناطيسيأكلت الترددات الراديوية لفائف. توفير الحيوانات مع 1-2٪ إيسوفلوران التخدير بشكل مستمر في جميع أنحاء إجراء التصوير عن طريق نوسكون. ملاحظة: بالنسبة للصور التصوير بالرنين المغناطيسي في الجسم الحي هو مبين في الشكل 1 ، تم استخدام لفائف حجم الفئران الحجم (القطر الداخلي = 72 ملم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام نظام مراقبة الحيوان ومراقبة للحفاظ على معدل التنفس كل حيوان (40-60 الأنفاس / دقيقة) ودرجة حرارة الجسم الأساسية (35 ± 1 درجة مئوية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام متعددة شريحة، متعددة صدى تدور صدى الحصول على التصوير بالرنين المغناطيسي للحصول على دقة عالية، محوري T2 المرجحة الصور من كل من المصابة والسيطرة على الكلى. معلمات اكتساب التصوير بالرنين المغناطيسي النموذجية هي زمن التكرار = 5000 ميللي ثانية، وقت صدى = 40 ميللي ثانية، سمك شريحة = 2.0 ملم، في المكان القرار المكاني = 200 ميكرون، 3 متوسطات إشارة، ووقت اكتساب من 8 دقائق. </li></ol>

<ol>
	<li>Saliba, W., Barnett-Griness, O., Rennert, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+association+between+obesity+and+urinary+tract+infection.">The association between obesity and urinary tract infection.</a> Eur J Intern Med. 24 (2), 27-31 (2012).</li><li>Semins, M., Shore, A., Makary, M., Weiner, J., Matlaga, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+obesity+on+urinary+tract+infection+risk.">The impact of obesity on urinary tract infection risk.</a> Urology. 79 (2), 266-269 (2011).</li><li>Zilberberg, M., Shorr, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secular+trends+in+gram-negative+resistance+among+urinary+tract+infection+hospitalizations+in+the+United+States,+2000-2009.">Secular trends in gram-negative resistance among urinary tract infection hospitalizations in the United States, 2000-2009.</a> Infect Control Hosp Epidemiol. 34 (9), 940-946 (2013).</li><li>Whiting, D., Guariguata, L., Weil, C., Shaw, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDF+diabetes+atlas:+global+estimates+of+the+prevalence+of+diabetes+for+2011+and+2030.">IDF diabetes atlas: global estimates of the prevalence of diabetes for 2011 and 2030.</a> Diabetes Res Clin Pract. 94 (3), 311-321 (2011).</li><li>Wild, S., Roglic, G., Green, A., Sicree, R., King, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+prevalence+of+diabetes:+estimates+for+the+year+2000+and+projections+for+2030.">Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030.</a> Diabetes Care. 27 (5), 1047-1053 (2004).</li><li>Ma, D., Gulani, V., Seiberlich, N., Liu, K., Sunshine, J., Duerk, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+fingerprinting.">Magnetic resonance fingerprinting.</a> Nature. 495 (7440), 187-192 (2013).</li><li>Lu, L., Sedor, J., Gulani, V., Schelling, J., O'Brien, A., Flask, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+diffusion+tensor+MRI+to+identify+early+changes+in+diabetic+nephropathy.">Use of diffusion tensor MRI to identify early changes in diabetic nephropathy.</a> Am J Nephrol. 34 (5), 476-482 (2011).</li><li>Rosen, D., Hooton, T., Stamm, W., Humphrey, P., Hultgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+intracellular+bacterial+communities+in+human+urinary+tract+infection.">Detection of intracellular bacterial communities in human urinary tract infection.</a> PLoS Med. 4 (12), e329 (2007).</li><li>Torine, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urinary+tract+infection:+diabetic+women's+strategies+for+prevention.">Urinary tract infection: diabetic women's strategies for prevention.</a> Br J Nurs. 20 (13), 791-792 (2011).</li><li>Rosen, D., Hung, C., Kline, K., Hultgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptozocin-induced+diabetic+mouse+model+of+urinary+tract+infection.">Streptozocin-induced diabetic mouse model of urinary tract infection.</a> Infect Immun. 76 (9), 4290-4298 (2008).</li><li>Larsson, P., Kaijser, B., Mattsby-Baltzer, I., Olling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+for+ascending+acute+pyelonephritis+caused+by+Escherichia+coli+or+proteus+in+rats.">An experimental model for ascending acute pyelonephritis caused by Escherichia coli or proteus in rats.</a> J Clin Pathol. 33 (4), 408-412 (1980).</li><li>Gupta, R., Ganguly, N., Ahuja, V., Joshi, K., Sharma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+ascending+non-obstructive+model+for+chronic+pyelonephritis+in+BALB/c+mice.">An ascending non-obstructive model for chronic pyelonephritis in BALB/c mice.</a> J. Med. Microbiol. 43 (1), 33-36 (1995).</li><li>Fernandes, P., Shipkowitz, N., Bower, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+for+studying+the+pathogenesis+and+treatment+of+pyelonephritis.">Murine models for studying the pathogenesis and treatment of pyelonephritis.</a> Adv. Exp. Med. Biol. 224, 35-51 (1987).</li><li>Kaye, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+water+diuresis+on+spread+of+bacteria+through+the+urinary+tract.">The effect of water diuresis on spread of bacteria through the urinary tract.</a> J. Infect. Dis. 124 (3), 297-305 (1971).</li><li>Fierer, J., Tainer, L., Braude, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacteremia+in+the+pathogenesis+of+retrograde+E.+coli+pyelonephritis+in+the+rat.">Bacteremia in the pathogenesis of retrograde E. coli pyelonephritis in the rat.</a> Am. J. Pathol. 64 (2), 443-456 (1971).</li><li>Nickel, J., Olson, M., Costerton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+model+of+experimental+bacterial+prostatitis.">Rat model of experimental bacterial prostatitis.</a> Infection. 19 (3), S126-S130 (1991).</li><li>Hagberg, L., Engberg, I., Freter, R., Olling, S., Eden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending,+unobstructed+urinary+tract+infection+in+mice+caused+by+pyelonephritogenic+Escherichia+coli+of+human+origin.">Ascending, unobstructed urinary tract infection in mice caused by pyelonephritogenic Escherichia coli of human origin.</a> Am Soc Microbiol. 40 (1), 273-283 (1983).</li><li>Kurosaka, Y., Ishida, Y., Yamamura, E., Takase, H., Otani, T., Kumon, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+non-surgical+rat+model+of+foreign+body-associated+urinary+tract+infection+with+Pseudomonas+aeruginosa.">A non-surgical rat model of foreign body-associated urinary tract infection with Pseudomonas aeruginosa.</a> Microbiol. Immunol. 45 (1), 9-15 (2001).</li><li>Anderson, B., Jackson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyelitis,+an+important+factor+in+the+pathogenesis+of+retrograde+pyelonephritis.">Pyelitis, an important factor in the pathogenesis of retrograde pyelonephritis.</a> J Exp Med. 114 (3), 375-384 (1961).</li><li>Anderson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vesico-ureteric+reflux.">Vesico-ureteric reflux.</a> J R Soc Med. 55 (6), 419-426 (1962).</li></ol>

The authors have no other disclosures.

يمكن أن تنتج التهاب الحويضة والكلية الحاد في القوارض (أي الفئران والجرذان) عن طريق القسطرة عبر الإحليل. 16 ، 17 ، 18 هذا الأسلوب العدوى عبر الإحليل هو مفيد في أنه غير الغازية ويحاكي الفيزيولوجيا المرضية البشرية من ?...

وقد استخدمت نماذج القوارض لدراسة العديد من المظاهر المرض البشري، بما في ذلك التهاب الحويضة والكلية والتهابات المسالك البولية (وتي). عدوى المسالك البولية هي مشكلة صحية عالمية، ويمكن أن تؤثر على الأطفال والرجال والنساء من جميع الأعمار. 1 ، 2 ، 3 المظاهر الأولية من التهاب المسالك البولية تشمل التهاب المثانة، وإذا تصعد العدوى على طول الحالب، قد تلحق التهاب الكلى (التهاب الحويضة والكلية). وفي الوقت نفسه، فإن انتشار مرض السكري يقترب من 400 مليون شخص في جميع أنحاء العالم. 4 ، 5 الأهم من ذلك، قد يكون معدل التهاب المسالك البولية أعلى إلى 4 مرات في المرضى الذين يعانون من السمنة المفرطة أو لديهم نوع 2 من مرض السكري، مما أدى إلى زيادة خطر الإصابة المتكررة التهاب المسالك البولية (روتي)، الإنتان، والتليف الكلوي من التهاب الحويضة والكلية، وخلل المثانة. 6 ، 7 ، 8 القوارضنماذج مهمة في دراسة التهاب المسالك البولية، لأن العلاجات بالمضادات الحيوية الحالية تنتج استجابة مستدامة، وقائية فقط في مجموعة فرعية من مرضى التهاب المسالك البولية. لتحسين الرعاية المسالك البولية السريرية، والخطوات الرئيسية هي لفهم آلية روتي وعملياتها الفيزيولوجية المرضية من العدوى الحادة إلى التهاب في التليف، فضلا عن تأثير داء السكري من النوع 2. والهدف من تحسين النماذج الحيوانية هو تطوير التقنيات التي تسمح بتقييم أكثر دقة لتطور المرض والتدخلات العلاجية. وقد استخدمت عدة نهج مختلفة للحث على التهاب الحويضة والكلية في الفئران و / أو الفئران لدراسة الفيزيولوجيا المرضية من تلف الكلى، وأثر العلاج بالمضادات الحيوية، وغيرها من جوانب المسار الطبيعي للعدوى البولية. وهناك نهج مشترك لإنشاء وتي الوراء هو قسطرة عبر الإحليل. 10 ، 11 ، 12 ، 13 &lt;/ سوب&gt; هذا الأسلوب يدخل البكتيريا عبر مجرى البول في المثانة البولية من الحيوانات تخدير. في حين أن هذه التقنية تحاكي عن كثب التهاب الحويضة والكلية البشرية، فإن الإصابة الفعلية وحجم العدوى التهاب الحويضة والكلية يمكن أن تكون متغيرة للغاية بسبب عوامل متعددة بما في ذلك عدم وجود ارتجاع الحالب العفوي أو البولية يفرغ أثناء أو بعد التلقيح مباشرة. 11 ونتيجة لذلك، فإن التباين التجريبي في إحداث العدوى التهاب الحويضة والكلية تصاعدي يمكن أن تحد من فائدة هذا النموذج لدراسة التهابات الكلى فضلا عن الاستراتيجيات العلاجية. ويصف هذا التقرير نموذج الفئران التهاب الحويضة والكلية الجراحي حيث يتم حقن E. القولونية مباشرة في الكلى الفئران. على الرغم من هذا النموذج الفئران يجري الغازية، وكمية E. القولونية تسليمها إلى الكلى يمكن السيطرة عليها بشكل فعال مما يتيح التهاب الكلى قوية والالتهابات. 14 وفي هذا اإلجراء، نصف أيضاكيف يمكن رصد هذه الالتهابات الكلوية التي يسببها طوليا مع في الجسم الحي التصوير بالرنين المغناطيسي (مري).

<table><tbody><tr><td>Absorbing Pad</td><td>Fisher</td><td>14-127-47</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Cotton Gauze Pad</td><td>Fisher</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>Latex Surgical Gloves</td><td>Henry Schein Animal Health</td><td>21540</td><td></td></tr><tr><td>Curved Mayo Scissors</td><td>Fisher</td><td>S17341</td><td></td></tr><tr><td>Straight Blunt Foreceps</td><td>Fisher</td><td>08-895</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel Handle&amp;nbsp;</td><td>Fisher</td><td>08-913-5</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Scalpel Blades</td><td>Fisher</td><td>53220</td><td></td></tr><tr><td>1 ml Luer-Lok Syringe</td><td>BD Biosciences</td><td>309628</td><td>For bacterial injections</td></tr><tr><td>20 ml Luer-Lok Syringe&amp;nbsp;</td><td>BD Biosciences</td><td>301031</td><td>For saline wash</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Seneca Medical</td><td>240267</td><td></td></tr><tr><td>23 G 3/4 in. Needle&amp;nbsp;</td><td>BD Biosciences</td><td>305143</td><td></td></tr><tr><td>30 G 1 in. Needle&amp;nbsp;</td><td>BD Biosciences</td><td>305128</td><td></td></tr><tr><td>U-100 Insulin Syringe</td><td>Exel International&amp;nbsp;</td><td>25846</td><td>For medication injections</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Henry Schein Animal Health</td><td>050033</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Henry Schein Animal Health</td><td>33197</td><td>Inject IP</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Patterson Vetrinary&amp;nbsp;</td><td>07-881-9413</td><td>Inject IP</td></tr><tr><td>Yohimbine (Atipamezole)</td><td>Patterson Vetrinary&amp;nbsp;</td><td>07-867-7097</td><td>Inject IP after surgery</td></tr><tr><td>Bupivacaine (Marcaine)</td><td>Patterson Vetrinary&amp;nbsp;</td><td>07-890-4584</td><td>Inject SQ at site of incision&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>4-0 Chromic Gut Suture</td><td>Ethicon Inc.</td><td>U203H</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Braided Vicryl Suture</td><td>Ethicon Inc.</td><td>J304H</td><td></td></tr><tr><td>1 ml SubQ Syringe</td><td>BD Biosciences</td><td>309597</td><td></td></tr><tr><td>&lt;em&gt;E. coli&lt;/em&gt;&amp;nbsp; UTI89 or CFT073</td><td>ATCC</td><td>700928</td><td></td></tr><tr><td>Surgicel Absorbable Hemostat</td><td>Ethicon Inc.</td><td>ETH1951CS&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Biospec 9.4T MRI&amp;nbsp;</td><td>Bruker&amp;nbsp;</td><td>94/20 USR</td><td></td></tr></tbody></table>

intrarenal injection of escherichia coli in a rat model of pyelonephritis

Pyelonephritis is a bacterial infection of the kidney and is most commonly caused by Escherichia coli. Recurrent infections can cause significant renal inflammation and fibrosis ultimately resulting in declining kidney function. Before improved clinical management and prevention of pyelonephritis can be instituted, a reliable animal model must be established in order to study the mechanisms of progression, recurrence, and therapeutic efficacy. The transurethral infection model closely mimics human pyelonephritis but exhibits considerable variation due to its reliance on urethral reflux to transport the bacteria to the kidney. Herein, a detailed surgical protocol for performing bacterial injections into the rat renal pelvis is provided and confirmed by non-invasive Magnetic Resonance Imaging (MRI). Using this protocol, animals receive direct exposure to a desired concentration of E. coli bacteria and can fully recover from the surgical procedure with adequate post-operative care. This facilitates subsequent longitudinal MRI assessments of the experimental animal models for comparison with saline (sham) controls. Using this direct delivery approach, the severity of infection is controllable and applicable for mechanistic studies of progression as well as development of novel treatment strategies.

تقنيات التصوير الطبي توفر الفرصة لتقييم غير جراحية التهاب المسالك البولية والفعالية العلاجية. لذلك، تم استخدام التصوير بالرنين المغناطيسي للتحقق من صحة تحريض العدوى الحادة بعد حقن 1-2 × 10 7 UTI89 E. القولونية ، وتصور التغيرات في الكلى قبل وبع...

Watch this Scientific Journal Video about Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis at JoVE.com

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

This manuscript describes a rat surgical model of pyelonephritis using direct intra-renal infection by Escherichia coli into the renal pelvis. The experimental procedure can be utilized to study the pathogenesis of pyelonephritis as well as the associated inflammation and fibrosis.

حقن إنترارينال من<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; في نموذج الجرذ من التهاب الحويضة والكلية

Pyelonephritis is a bacterial infection of the kidney and is most commonly caused by Escherichia coli. Recurrent infections can cause significant renal ...

intrarenal-injection-escherichia-coli-rat-model

Research

JoVE Journal

Medicine

Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

7.9K Views.  Case Western Reserve University. This manuscript describes a rat surgical model of pyelonephritis using direct intra-renal infection by Escherichia coli into the renal pelvis. The experimental procedure can be utilized to study the pathogenesis of pyelonephritis as well as the associated inflammation and fibrosis.

Video: Intrarenal Injection of Escherichia coli in a Rat Model of Pyelonephritis

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on Luria-Bertani (LB) agar at 37&deg;C in ambient air. UPEC strains grow as yellowish-white translucent colonies on LB agar. Following confirmation of appropriate colony morphology, single colonies are then picked to be cultured in broth. LB broth can be used for most uropathogenic bacterial strains. Two serial, overnight LB broth cultures can be employed to enhance expression of type I pili, a well-defined virulence factor for uropathogenic bacteria. Broth cultures are diluted to the desired concentration in phosphate buffered saline (PBS). Eight to 12 week old female mice are placed under isoflurane anesthesia and transurethrally inoculated with bacteria using polyethylene tubing-covered 30 gauge syringes. Typical inocula, which must be empirically determined for each bacterial/mouse strain combination, are 106 to 108 cfu per mouse in 10 to 50 microliters of PBS. After the desired infection period (one day to several weeks), urine samples and the bladder and both kidneys are harvested. Each organ is minced, placed in PBS, and homogenized in a Blue Bullet homogenizer. Urine and tissue homogenates are serially diluted in PBS and cultured on appropriate agar. The following day, colony forming units are counted.

This video will demonstrate methods to transurethrally induce mouse urinary tract infections and quantify the extent of resulting infections.

عبر الاحليل تحريض العدوى ماوس المسالك البولية

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

Immunology and Infection

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal features of the natural infection. This protocol describes procedures for the establishment and evaluation of systemic infection due to neuropathogenic Escherichia coli K1 in the neonatal rat. Colonization of the gastrointestinal tract leads to dissemination of the pathogen along the gut-lymph-blood-brain course of infection and the model displays strong age dependency. A strain of E. coli O18:K1 with enhanced virulence for the neonatal rat produces exceptionally high rates of colonization, translocation to the blood compartment and invasion of the meninges following transit through the choroid plexus. As in the human host, penetration of the central nervous system is accompanied by local inflammation and an invariably lethal outcome. The model is of proven utility for studies of the mechanism of pathogenesis, for evaluation of therapeutic interventions and for assessment of bacterial virulence.

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Here, a procedure is described for the establishment of systemic infection in the neonatal rat with cultures of Escherichia coli K1. This non-invasive procedure permits colonization of the gastrointestinal tract, translocation of the pathogen to the systemic circulation, and invasion of the central nervous system at the choroid plexus.

نموذج غير الغازية من ممرض للأعصاب<em&gt; الإشريكية القولونية</em&gt; العدوى في الأطفال حديثي الولادة الجرذ

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, which accurately reflect disease establishment and progression, permit dissection of host-pathogen interactions and generation of immunity to infection. In mice, intravesical instillation of uropathogenic E. coli, the causative agent in more than 85% of community acquired UTI, recapitulates many of the stages of infection observed in humans. Until recently, however, UTI could only be modeled in female animals. This limitation has hindered the study of sex-related differences in UTI, as well as other bladder pathologies, such as cancer. Here, we describe a method to instill male mice that allows direct comparison between female and male animals and provide a detailed protocol to assess bladder tissue by flow cytometry as a means to better understand host responses to infection. Together, these approaches will aid in the identification of host factors that contribute to sex biases observed in UTI and other bladder-associated diseases.

The established model of transurethral catheterization of mice allows the study of bladder pathologies, including urinary tract infection, but can only be performed in females. A new model of male transurethral instillation, presented here, will enable research in an area marked by strong clinical and epidemiological differences between the sexes.

عدوى المسالك البولية في نموذج حيوانات صغيرة: قسطرة Transurethral من الفئران الذكور والإناث

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, ...

Standardized Colon Ascendens Stent Peritonitis in Rats - a Simple, Feasible Animal Model to Induce Septic Acute Kidney Injury

AKI in septic patients is associated with increased mortality and poor outcome despite major efforts to refine the understanding of its pathophysiology. Here, an in vivo model is presented that combines a standardized septic focus to induce AKI and an intensive care (ICU) setup to provide an advanced hemodynamic monitoring and therapy comparable in human sepsis. Sepsis is induced by standardized colon ascendens stent peritonitis (sCASP). AKI is investigated functionally by measurement of blood and urine samples as well as histologically by evaluation of histopathological scores. Furthermore, the advanced hemodynamic monitoring and the possibility of repetitive blood gas sampling enable a differentiated analysis of severity of induced sepsis.
The sCASP method is a standardized, reliable and reproducible method to induce septic AKI. The intensive care setup, continuous hemodynamic and gas exchange monitoring, low mortality rate as well as the opportunity of detailed analyses of kidney function and impairments are advantages of this setup. Therefore, the described method may serve as a new standard for experimental investigations of septic AKI.

Acute kidney injury (AKI) is a severe complication in critically ill patients and is related with an increased mortality. Here, we present a reliable and reproducible in vivo model to mimic AKI under inflammatory conditions that might contribute towards understanding the pathogenesis of septic AKI.

AKI in septic patients is associated with increased mortality and poor outcome despite major efforts to refine the understanding of its pathophysiology. ...

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of UTI in male and female mice have illustrated the procedures for bacterial inoculation and enumeration in urine and tissues. During an initial bladder infection in C57BL/6 mice, UPEC establish latent reservoirs inside bladder epithelial cells that persist following clearance of UPEC bacteriuria. This model builds on these studies to examine rUTI caused by the emergence of UPEC from within latent bladder reservoirs. The urogenital bacterium Gardnerella vaginalis is used as the trigger of rUTI in this model because it is frequently present in the urogenital tracts of women, especially in the context of vaginal dysbiosis that has been associated with UTI. In addition, a method for in situ bladder fixation followed by scanning electron microscopy (SEM) analysis of bladder tissue is also described, with potential application to other studies involving the bladder.

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

A mouse model of uropathogenic E. coli (UPEC) transurethral inoculation to establish latent intracellular bladder reservoirs and subsequent bladder exposure to G. vaginalis to induce recurrent UPEC UTI is demonstrated. Also demonstrated are the enumeration of bacteria, urine cytology, and in situ bladder fixation and processing for scanning electron microscopy.

عدوى الإشريكية القولونية المتكررة في المسالك البولية الناجمة عن التعرض للمثانة المهبلية Gardnerella في الفئران

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most common cause of AKI. To mimic this clinical scenario, this study presents a highly reproducible large animal model of renal IRI in swine using temporary percutaneous bilateral balloon-catheter occlusion of the renal arteries. The renal arteries are occluded for 60 min by introducing the balloon-catheters through the femoral and carotid artery and advancing them into the proximal portion of the arteries. Iodinated contrast is injected in the aorta to assess any opacification of the kidney vessels and confirm the success of the artery occlusion. This is furtherly confirmed by the flattening of the pulse waveform at the tip of the balloon catheters. The balloons are deflated and removed after 60 min of bilateral renal artery occlusion, and the animals are allowed to recover for 24 h. At the end of the study, plasma creatinine and blood urea nitrogen significantly increase, while eGFR and urine output significantly decrease. The need for iodinated contrast is minimal and does not affect renal function. Bilateral renal artery occlusion better mimics the clinical scenario of perioperative renal hypoperfusion, and the percutaneous approach minimizes the impact of the inflammatory response and the risk of infection seen with an open approach, such as a laparotomy. The ability to create and reproduce this clinically relevant swine model eases the clinical translation to humans.

This study presents a highly reproducible large animal model of renal ischemia-reperfusion injury in swine using temporary percutaneous bilateral balloon-catheter occlusion of the renal arteries for 60 min and reperfusion for 24 h.

نموذج حيواني كبير لإصابة الكلى الحادة عن طريق انسداد الشريان الكلوي الثنائي المؤقت

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

Hydrodynamic Renal Pelvis Injection: A Technique to Directly Deliver DNA into Kidney Cells of Murine Model

Source: Woodard, L. E. et al. <a href="https://www.jove.com/video/56324" target="_blank">Hydrodynamic Renal Pelvis Injection for Non-viral Expression of Proteins in the Kidney.</a> J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we present the protocol for hydrodynamic injection of plasmids into the renal pelvis of the mouse kidney for nucleic acid transfection. This technique allows organ-specific delivery of plasmids by utilizing the principle of high hydrostatic pressure, which forcefully drives the plasmids into the specific site without causing tissue injury.

حقن الحوض الكلوي الهيدروديناميكي: تقنية لتوصيل الحمض النووي مباشرة إلى خلايا الكلى في نموذج الفئران

Source: Woodard, L. E. et al. Hydrodynamic Renal Pelvis Injection for Non-viral Expression of Proteins in the Kidney. J. Vis. Exp. (2018)
In this video, ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Cancer Research

Urinary Tract Cancer

In vivo studies

Transurethral Catheterization and Bacterial Inoculation to Generate a Urinary Tract Infection Model in Male Mice

Source: Zychlinsky Scharff, A., et al. <a href="https://app.jove.com/v/54432">Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice.</a> J. Vis. Exp. (2017).
This video demonstrates the establishment of uropathogenic Escherichia coli infection in a female mouse bladder through transurethral catheter instillation. The injected bacteria successfully establish a urinary tract infection within the bladder, providing a valuable platform for studying healthcare-associated diseases related to the urinary tract.

القسطرة عبر الإحليل والتلقيح البكتيري لتوليد نموذج عدوى المسالك البولية في ذكور الفئران

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. ...

Immunology

Immunopathology

Host-Pathogen Interaction Models

Establishment of a Urinary Tract Infection Model in Female Mice

Source: Zychlinsky Scharff, A. et al., <a href="https://app.jove.com/v/54432">Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice.</a>&#160;J. Vis. Exp. (2017)
This video demonstrates the establishment of uropathogenic Escherichia coli infection in a female mouse bladder through transurethral catheter instillation. The injected bacteria successfully establish a urinary tract infection within the bladder, providing a valuable platform for studying healthcare-associated diseases related to the urinary tract.

إنشاء نموذج لعدوى المسالك البولية في إناث الفئران

Generating Urinary Tract Infection Model: A Technique to Administer Uropathogenic Bacteria in Mouse to Develop Urinary Tract Infection Model

Source: Luyts, N. et al., <a href="https://www.jove.com/v/62614">Longitudinal Follow-Up of Urinary Tract Infections and Their Treatment in Mice using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (2021).
In this video, we describe the technique for the intravesical administration of uropathogenic bacteria to generate a urinary tract infection model in mice. This model can be used to understand the spread of uropathogenic bacterial infection within the urinary system and the mechanisms that determine UTI susceptibility.

نموذج توليد عدوى المسالك البولية: تقنية لإدارة البكتيريا المسببة للمسالك البولية في الفئران لتطوير نموذج عدوى المسالك البولية

Source: Luyts, N. et al., Longitudinal Follow-Up of Urinary Tract Infections and Their Treatment in Mice using Bioluminescence Imaging. J. Vis. Exp. ...

حقن إنترارينال من

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video