The authors thank the three anonymous reviewers for their helpful comments on the manuscript. This work was partly supported by Grant-in-Aid for JSPS Fellows (26.11613).

ملاحظة: تستند هذه المادة على عملنا السابق 30. وطبع بعض أجزاء بإذن من الجمعية النباتية من اليابان والوثاب اليابان. 1. مراقبة الزهور آخر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختيار الحقول المراقبة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ابحث في المناطق التي يتم فيها توزيع المواد النباتية، وتحديد مواقع الدراسة مرشح استخدام موارد موثوق بها، مثل الكتب المصورة والمجلات الأكاديمية، الخ ضبط عدد من مواقع الدراسة لتتناسب مع أهداف البحث (على سبيل المثال، مجموعة واسعة من المواقع ل المقارنة بين زوار زهرة في جميع أنحاء اليابان). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من المواقع السكان المرشح المختار والمسافات من المنطلقات ذات الصلة، مثل معاهد البحوث وأماكن الإقامة، إذا كانت هناك حاجة البحوث الطويلة الأمد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقريبا كل تقدير حجم السكان حسب إحصاء عدد الأفراد مصنع في وحدة المساحة. تحديد عدد كبير من السكان لتجربة التلاعبق باستخدام العديد من الأفراد النبات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل مراقبة زوار الأزهار <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقرر التي تستهدف الأفراد في كل منطقة سيحتفل خلال نفس الفترة الزمنية، اعتمادا على الكثافة السكانية. اختر 5-10 الزهور افتتح حديثا أو كسر براعم الزهور كما المستهدفة، ورفض تلك المتدهورة التي فتحت بالفعل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء الملاحظة البصرية لمدة يوم كامل، لأن الزهور يمكن أن يزوره الملقحات مختلفة في أوقات مختلفة تتراوح 31،32. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على ورقة التسجيل، تسجيل اسم الأنواع من الزوار الأزهار ووقت كل زيارة لكل ساعة لكل زهرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة عن كثب ما إذا كان زوار الأزهار تلمس anthers و / أو الندبات. إذا فعلوا ذلك، تسجيل الزوار والملقحات. إذا كان زوار الأزهار فقط زيارة الزهور ولا تلمس الجهاز التناسلي، وتسجيلها من الزوار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام صافي الحشرات أو يدوية الصنع الشافطة، التقاط زوار الأزهار لتحديد والحفاظ عليها كما العينات (الشكل 1F). قتل زوار المحاصرين بسرعة مع خلات الإيثيل أو ضغط الإصبع على الصدر، والحفاظ عليها في كيس لينة أو في أنبوب من البلاستيك أو حالة مع الإيثانول بنسبة 100٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الملاحظة، وتحديد أسماء معينة من العينات باستخدام الميزات المورفولوجية أو، في حالة وجود صعوبات في تحديد الهوية، وطلب مساعدة من الخبراء لكل مجموعة تصنيفية. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المراقبة في الميدان <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحديد مواقع البحث على أساس إمكانية الوصول إليها، وحجم السكان، وعدد من الزوار الأزهار. اختيار الفترات الزمنية التي تشمل عينة تمثيلية من الزوار الأزهار في موسم الإزهار، وتحديد فترات الملاحظة على أساس أهداف البحث (على سبيل المثال، للبحث عن تقلبات الزيارة التردد من قبل الزوار الأزهار، يجب تعيين فترات زمنية طويلة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد أجهزة التسجيل اللازمة، مثل كاميرات الفيديو الرقمية (على سبيل المثال، لتسجيل يلة، وكاميرات الفيديو مع وظيفة الأشعة تحت الحمراء وينبغي أن تستخدم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد الزهور الهدف بنفس الطريقة بالنسبة لل1.1.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إصلاح كاميرات الفيديو لحوامل الألمنيوم. ضبط كاميرات مع حوامل أمام الأفراد المستهدفة، ما يقرب من 50 سم بعيدا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فحص وتعديل كمية الضوء والتركيز من المواد على ما يعرض على الشاشة من الكاميرات قبل التصوير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء الملاحظة البصرية والتصوير الفيديو في نفس الوقت عن المناطق الزمنية المناسبة حسب تقديرات-الملاحظات قبل (في هذه الحالة، كانت فترات الملاحظة لأكثر من ست ساعات في المتوسط، من حوالي 5:00 حتي 13:00 مساء ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعرف على أسماء الأنواع من الزوار والملقحات، وتسجيل أسمائهم وأوقات زياراتهم على أوراق تسجيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التقاط وتحديد الزوار والملقحات في نفس الطريقة كما في 1.1.4.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات من 1.2.1 إلى 1.2.7 لكل observatioفترة ن. تعيين فترات الملاحظة على أساس أهداف البحوث والبيانات ما قبل الملاحظة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحليل البيانات وبعد مراقبة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التعرف على أسماء الأنواع من العينات الملتقطة بعد مراقبة الملقحات في نفس الطريقة كما في 1.1.4.6. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من مقاطع الفيديو ولاحظ أسماء الأنواع وأوقات زيارتهم في نفس الطريقة كما في الملاحظة البصرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب الترددات الزيارة في زهرة لكل ساعة من كل زائر الأزهار من بيانات رصد وتسجيل الفيديو المرئية. قارن هذه الترددات إحصائيا بين المواقع وسنوات من كل زائر باستخدام الأساليب الإحصائية المناسبة بناء على الإحصاءات الأساسية واستخدام البرمجيات المناسبة، مثل R، SPSS، و / أو SAS 33-35 (على سبيل المثال، وتحليل التباين الثنائي (أنوفا ) مع اختلاف كبير (HSD) اختبار توكي وصادقة في برنامج R). </li></ol></li></ol> 2. التعبئة وقفص التجارب<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستعدادات لتكييس والتجارب قفص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتجارب التعبئة، وإعداد الحقائب التي لها أحجام شبكة صغيرة (~ 0.5-1 مم) واستخدامها لمنع تماما زهرة الزيارة (على سبيل المثال، تم استخدام أكياس النسيج غير المنسوجة للتجارب التعبئة في عامي 2011 و 2012). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للتجارب القفص، وإعداد شبكة سلكية أو البلاستيك لوحات مع قطر التي يسمح للزوار الهدف أصغر بالمرور لكنها لا تشمل أكبر منها، وربط هذه المجالس شبكة لتشكيل القفص. تأكد من عدم وجود ثغرات أكبر من قطر شبكة. ضبط حجم وشكل أقفاص استنادا إلى الأنواع النباتية المستهدفة والأرقام الفردية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التجارب التعبئة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختيار 30 فردا لكل معاملة التي لديها أي ضرر من الحيوانات العاشبة أو من بيئة قاسية. لتلقي العلاج، واختيار زهرة واحدة من كل مصنع الفردي، أو استخدام الزهور الفردية في مصنع واحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقيبة رانه استهداف الزهور في الميدان بعد اصفة إياهم مع شريط (الرقم التسلسلي والأبجدية، الشكل 1G). يجب الحرص على عدم لمس anthers أو الندبات داخل أكياس لتجنب إمكانية التلقيح الذاتي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعناية إصلاح أكياس لالزهور باستخدام سلسلة لينة أو سلك (1D الشكل). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع بعناية الزهور الفردية تستقيم مع الدعم باستخدام سلسلة لينة أو أسلاك لدعم الأفراد من الميل أو الانهيار تحت وطأة أكياس أو الرياح، حسب الاقتضاء. تطور أو الرياح سلسلة أو أسلاك بهدوء حول ساق من شخص المستهدف، وذلك ليس لخلق الضرر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العلاج في التجارب التعبئة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;السيطرة&quot;، ونعلق التسميات الى الزهور المستهدفة وإجراء أي علاج. السماح للزائرين الأزهار لزيارة بحرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;التهجين&quot;، تغطية البراعم حتى زهرة، ثم قم بإزالة anthers من الزهور حصل. وضع بعض polleالحبوب ن من الأفراد متعددة على الندبات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;إخصاب ذاتي&quot;، تغطية البراعم حتى الزهور مفتوحة، ووضع حبوب اللقاح من نفس الزهور على الندبات الخاصة بهم. تغطية هذه الزهور المعالجة مرة أخرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;لصناعة السيارات في النفس&quot;، تغطية براعم بأكياس حتى نهاية موسم الإزهار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;برعم كسر&quot;، وتحديد براعم كسر التي تمت زيارتها ومراقبة دخول أو خروج النحل الصغيرة (أرقام 1B، ج). إزالة anthers من براعم كسر لمنع ترسبات غبار الطلع المتكررة على الزهرة نفسها بعد الزيارة التي كتبها النحل الصغيرة، وحقيبة هذه البراعم بسرعة لمنع مزيد من الزيارات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;مزهرة&quot;، حقيبة البراعم حتى المرحلة الافتتاحية لتجنب الزيارات في مرحلة كسر برعم. بعد ذلك، إزالة أكياس والسماح للزوار لجمع الرحيق وحبوب اللقاح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;براعم&quot;،إزالة anthers من براعم فتحها وتهجين لهم بشكل مصطنع. حقيبة هذه البراعم بسرعة لمنع الزيارات زهرة. </li></ol></li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجارب قفص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الأفراد مصنع الهدف مع أقفاص المعدة. توفيق أوضاع الزهور في قفص من جهة لمنع الاتصال وحبوب اللقاح ترسبات بين جروح مختلفة (الشكل 1E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لعلاج &quot;قفص&quot;، حدد الأفراد مع براعم فتحها ووضع الملصقات عليها لتحديد الزهور المحدد. قفص الأفراد مع البراعم وصفت لرفض التأثيرات من قبل إنشاء أقفاص (أي والحشرات من الزهور لا يمكن زيارة براعم مفتوحة، ويمكن تقديرها إلا آثار الحشرات التي زيارة بعد وضع أقفاص). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق أقفاص بحزم على الأرض باستخدام أعمدة الحديد لمنع دخول من قبل الزوار بين قاعدة القفص والأرض. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحليلات البيانات آفثالثا تكييس والتجارب قفص <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع كل من الزهور وصفت في نهاية موسم الإزهار (الشكل 1G) عن طريق قطع وفصل لهم من الأفراد الأمهات. الحفاظ على كل عينة على حدة وصفت لمنع تلوث بهم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من وجود أو عدم وجود مجموعة الفواكه على كل صفت flower.Record الأرقام البذور من كل فاكهة في حالة وضع الفاكهة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب نسبة أعداد الفاكهة في زهرة (نسبة مجموعة الفواكه، الذي يعرف بأنه عدد من الفواكه مقسوما على عدد من الزهور) وأعداد البذور في ثمرة ناضجة (نسبة البذور، مجموعة، والذي يعرف بأنه عدد من البذور مقسوما على عدد من البويضات) باستخدام كافة الأرقام المسجلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إحصائية مقارنة fruit- والبذور مجموعة النسب بين معالجات باستخدام الأساليب المناسبة والبرامج، مثل تلك المذكورة في 1.3.3 (على سبيل المثال، في اتجاه واحد أنوفا مع HSD توكي أو اختبار فيشر الدقيق في R البرنامج 33). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التحقيقات من المواد باستخدام نتائج التجارب التعبئة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاختبار الحاجة إلى الملقحات الحيوانية، إحصائيا مقارنة النتائج بين &quot;السيطرة&quot; والعلاجات &quot;لصناعة السيارات في النفس&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لتقدير درجة الحد حبوب اللقاح، مقارنة &quot;مراقبة&quot; والعلاجات &quot;التهجين&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاختبار التوافق الذاتي، قارن &quot;التهجين&quot; والعلاجات &quot;إخصاب ذاتي&quot;. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تقييم التأثيرات كسر برعم التلقيح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقارنة &quot;السيطرة&quot; و &quot;براعم&quot; العلاجات لتحديد ما إذا كانت جروح براعم كسر ناضجة التناسل وعما إذا كان يمكن استخدامها قيمة العلاج &quot;السيطرة&quot; للسيطرة على مرحلة كسر برعم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقارنة &quot;السيارات عن النفس&quot; ومعالجات &quot;كسر برعم&quot; لتحديد ما إذا كان نجاح الإنجاب من الزهور التلقيح مع النحل الصغيرة في كسرمرحلة -bud أعلى إحصائيا من ذلك من النباتات أداء إعراس ذاتي (أي، لاختبار وجود التلقيح كسر برعم). بعد ذلك، ومقارنة هذه العلاجات اثنين مع &quot;السيطرة&quot; لتقدير كفاءة التلقيح التلقيح كسر برعم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقارنة &quot;كسر برعم&quot;، &quot;قفص&quot;، و &quot;&quot; العلاجات المزهرة لتقدير التأثيرات الإنجابية للتلقيح كسر برعم. </li></ol></li></ol></li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

كانوا يعملون الملاحظات زهرة والتجارب التعبئة في هذه الدراسة إلى الكشف عن ترددات الزيارة والنجاح التناسلي للأنثى من النباتات، على التوالي. في دافني (1992) 38، كانت الطريقة شريط فيديو فعال لأنه يمكن تسجيل توقيت ومدة زوار للتحليل ومنع التحيز مراقب. ومع ذلك، في ذلك ال...

التفاعلات مصنع الملقحات ومن الأمثلة البارزة لدراسة علم الأحياء التطوري وعلم البيئة. ويعتقد أن علاقات المنفعة المتبادلة بين الزهور والملقحات قد روجت لتنويع نبتة كاسية البذور 1،2 نتيجة الانتقاء الطبيعي، على الرغم من العوامل الحيوية وغير الحيوية الأخرى مارست أيضا تأثير 3،4،5. ويعتقد أيضا أن الصفات الأزهار تغيرت للتكيف مع الملقحات الأكثر فعالية، وإنتاج المزيد من الفاكهة والبذور 6. وقد شيدت هذه المعتقدات على الرغم من الدراسات الكبيرة على أساس مؤشرات مختلفة، مثل فعالية التلقيح، التي تنطوي على تفسيرات مختلفة 7. وزار النباتات المزهرة التي المعمم أنظمة التلقيح بواسطة أنواع مختلفة من الملقحات 8. هنا، تم تعريف الزوار زهرة من الفصائل الحيوانية التي زارت للحصول على مكافأة من الزهور، وحددت الملقحات كزوار الأزهار التي تلقح.بعض من هؤلاء الزوار تحمل حبوب اللقاح مناوع إلى جروح الزهور زار ويمكن أن تصنف على أنها الملقحات. قد يكون غيرهم من الزوار أيضا بعض حبوب اللقاح ضمن النوع. لأنها قد إجراء أقل التلقيح بسبب عدم التطابق السلوكية أو المورفولوجية بين الملقحات والزهور. هذه الاختلافات المماثلة في المساهمة في إعادة إنتاج مصنع يمكن أن تنتج درجات متفاوتة من الضغوط الانتقائية على الصفات الأزهار 9، ويمكن أن تسبب الاختلاف على التكيف للنباتات المزهرة. لذلك، على الرغم من أن تكوين المجتمع الملقحات ووفرة الأنواع النسبية هامة 10، وتقييم دقيق لفعالية كل زائر لأمر بالغ الأهمية أيضا لتحديد التكيف و / أو العمليات التطورية للنباتات. في هذه الدراسة تم تحديد التقديرات الكمية للكفاءات الملقحات، الذي يعرف بأنه إنتاج الفاكهة والبذور في تردد الزيارة، 11. المواصفاتوقد لوحظت المنشأ وتردد من كل زائر الأزهار، وقدرت الآثار الإنجابية على الزهور التي تمت زيارتها. تسجيل مرة الأزهار من خلال الملاحظات الإنسان هو أسلوب الكلاسيكية في علم البيئة التلقيح. ومع ذلك، وهذه الطريقة يفرض عبئا كبيرا على المراقبين، الذين يطلب منهم البقاء في الجبهة من النباتات واتخاذ الحذر، والقياسات على المدى الطويل. في الآونة الأخيرة، وتقنيات تصوير وتسجيل تطورت بشكل سريع، ومكنت منخفضة التكلفة كاميرات الفيديو الرقمية مقدمة من تسجيل الفيديو الملاحظات الملقحات 12،13. ويمكن لهذه الطرق تيسير جمع معلومات أساسية عن زوار الأزهار، ويمكن أن تساعد على تطوير فهم البيئة التلقيح من الأنواع النباتية المستهدفة. ومع ذلك، لا يرتبط الترددات الزيارة من الملقحات بالضرورة إلى فعالية تلقيحه 7،14، وأنه من المهم لتقييم الآثار النوعية من كل الملقحاتعلى اللياقة البدنية زهرة. وقد قدر فعالية التلقيح من خلال عدد من حبوب اللقاح على الندبات 15،16، 17،18 أنبوب اللقاح النمو والفواكه و / أو إنتاج البذور 19،20. التعبئة التجارب، التي أجريت باستخدام أكياس الزوار الحصري، هي طرق نموذجية لاختبار التوافق الذاتي، إعراس ذاتي 21،22، ووجود apomixes 23. بالإضافة إلى ذلك، تم في كثير من الأحيان إجراء تقييم فعالية التلقيح لالملقحات معينة في تجميع الزائر في بيئات حيث اقتصرت زوار الأزهار الأخرى (أي سلك القفص، النت، أو كيس مع شبكة صغيرة بما يكفي لاستبعاد الملقحات الكبيرة التي هي مجموعة على النباتات المزهرة). على سبيل المثال، أجريت التجارب التعبئة مع أكياس شبكية صغيرة للكشف عن قدرة التلقيح من النمل أو التربس 24،25. وعلاوة على ذلك، فقد أظهرت التجارب استبعاد الطيور باستخدام قفص الأسلاك أو شبكة الملقحات فعالة من الأنواع الألوة26-28. وكان الهدف من هذه الدراسة: 1) لإدخال الأساليب المستخدمة في ورقة سابقة و 2) لتحسين هذه الأساليب للاستخدام العام في دراسات أخرى على الزوار الأزهار، ترددات زيارتهم، وتأثيرها على اللياقة البدنية محطة المذئبة الدموية للفار. الدموية للهي واحدة من الأنواع المدرجة في جنس المذئبة، والتي يتم توزيعها على نطاق واسع في جميع أنحاء اليابان وضيق في كوريا 29 ولها شكل قمع، البرتقالي المحمر الزهور (الشكل 1A). وكشفت دراسة سابقة أن L. وقد زار الدموية للفار. الدموية للمن أنواع الحشرات متعددة، بما في ذلك الأنواع نحلة صغيرة مجهولة الهوية وأكبر الأنواع Amegilla فلوريا 29. ومع ذلك، لم يتم تحديد فعالية ترددات الزيارة وتلقيح هؤلاء الزوار. أجريت الملاحظات الملقحات لتحديد زوار الأزهار أولا. وقد obse الزيارة من قبل النحل الصغيرةrved على الزهور التي لم يفتح تماما بعد (كسر براعم، أرقام 1B، ج). انتقلت النحل الصغيرة على عجل حول anthers undehisced في براعم كسر وجمعت حبوب اللقاح باستخدام الفك السفلي لها. كانت فرضية أن النحل الصغيرة يمكن أن تكون الملقحات في مرحلة كسر برعم لأن الفجوات بين anthers والندبات في الزهور كانت أصغر من طول الجسم من النحل. لذلك، أجريت تجارب التعبئة لاختبار قدرة تلقيح النحل الصغيرة في مرحلة كسر برعم، وبالإضافة إلى ذلك لدراسة استراتيجيات الإنجابية للL. الدموية للفار. الدموية لل. وقد حصل هؤلاء البراعم بعد النحل الصغيرة التي تمت زيارتها، مما سمح تقدير القدرة تلقيح النحل. تم قفص الأفراد مع براعم فتحها. تم استخدام قفص شبكة صغيرة، التي من خلالها فقط النحل الصغيرة يمكن أن تمر، السماح لتقدير الكفاءة تلقيح النحل الصغيرة في جميع أنحاء ابحث عن المزيد: كاملمرحلة الحلبة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="535">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:200px;">recording sheet</td>
			<td style="width:159px;">any</td>
			<td style="width:112px;">NA</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">insect net</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">pooter</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">ethyl acetate</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">100% Ethanol</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plastic tube</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">plastic case</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">soft bag</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">digital video camera(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">tripod(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">bags</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">wire or plastic mesh boards</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">iron wires</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">labeling tape</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">stick supporters</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">soft strings or wire</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">pincette(s)</td>
			<td>any</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

field experiments of pollination ecology: the case of lycoris sanguinea var. sanguinea

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify the pollination effectiveness of each pollinator for visited flowers. Pollinator observations have been one of the most common methods to identify pollinators, and bagging and cage experiments have been conducted to show the effectiveness of specific pollinators. In a previous study of Lycoris sanguinea var. sanguinea, its effective pollinators, the visitation frequencies of each floral visitor, and its reproductive strategies were not identified. This study reports the observation that small bees visited flowers that were partially opened (breaking buds). To the best of our knowledge, this phenomenon has not been reported previously. Further, this study investigates the hypothesis that small bees can pollinate at that flowering stage. This study demonstrates the basic methods of field experiments in pollination ecology using L. sanguinea var. sanguinea. Pollinator observations and digital video showed the visitation frequencies of each floral visitor. Bagging and cage experiments revealed that these flowers could be pollinated fully and that breaking-bud pollination could be important for the pollination of this plant species. The advantages and disadvantages of each method are discussed, and recent developments, including laboratory experiments, are described.

وقد تم اختيار خمس سكان لملاحظات الملقحات. في مرحلة ما قبل الملاحظة، وتأكدت الزيارات من مختلف أنواع الحشرات والزهور فتح والنحل الصغيرة لبراعم كسر. كشفت ملاحظات الزوار الأزهار أن معظم الزوار إلى جميع مواقع الدراسة خمسة من الأفراد من الأنواع نحلة صغي?...

Watch this Scientific Journal Video about Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea at JoVE.com

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

للكشف عن فعالية الملقحات من الأنواع النباتية معين، وقد وضعت أساليب متعددة من التجارب الميدانية. وتوضح هذه الدراسة الأساليب الأساسية من التجارب الميدانية لعلم البيئة التلقيح باستخدام دراسة الحالة من المذئبة الدموية للفار. الدموية للوآلية التلقيح جديدة، وكسر برعم التلقيح.

التجارب مجال التلقيح البيئة: حالة<em&gt; المذئبة الدموية لل</em&gt; فار.<em&gt; الدموية لل</em

Plant-pollinator interactions have been studied for approximately one hundred years. During that time, many field methods have been developed to clarify ...

field-experiments-pollination-ecology-case-lycoris-sanguinea-var

Research

JoVE Journal

Environment

Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

11.4K Views.  Chiba University.  للكشف عن فعالية الملقحات من الأنواع النباتية معين، وقد وضعت أساليب متعددة من التجارب الميدانية. وتوضح هذه الدراسة الأساليب الأساسية من التجارب الميدانية لعلم البيئة التلقيح باستخدام دراسة الحالة من المذئبة الدموية للفار. الدموية ...

Video: Field Experiments of Pollination Ecology: The Case of Lycoris sanguinea var. sanguinea

Modifying the Bank Erosion Hazard Index (BEHI) Protocol for Rapid Assessment of Streambank Erosion in Northeastern Ohio

Understanding the source of pollution in a stream is vital to preserving, restoring, and maintaining the stream&#8217;s function and habitat it provides. Sediments from highly eroding streambanks are a major source of pollution in a stream system and have the potential to jeopardize habitat, infrastructure, and stream function. Watershed management practices throughout the Cleveland Metroparks attempt to locate and inventory the source and rate the risk of potential streambank erosion to assist in formulating effect stream, riparian, and habitat management recommendations. The Bank Erosion Hazard Index (BEHI), developed by David Rosgen of Wildland Hydrology is a fluvial geomorphic assessment procedure used to evaluate the susceptibility of potential streambank erosion based on a combination of several variables that are sensitive to various processes of erosion. This protocol can be time consuming, difficult for non-professionals, and confined to specific geomorphic regions. To address these constraints and assist in maintaining consistency and reducing user bias, modifications to this protocol include a &#8220;Pre-Screening Questionnaire&#8221;, elimination of the Study Bank-Height Ratio metric including the bankfull determination, and an adjusted scoring system. This modified protocol was used to assess several high priority streams within the Cleveland Metroparks. The original BEHI protocol was also used to confirm the results of the modified BEHI protocol. After using the modified assessment in the field, and comparing it to the original BEHI method, the two were found to produce comparable BEHI ratings of the streambanks, while significantly reducing the amount of time and resources needed to complete the modified protocol.

Modifying the Bank Erosion Hazard Index BEHI Protocol for Rapid Assessment of Streambank Erosion in Northeastern Ohio

Streambank erosion potential can be evaluated and ranked using David Rosgen&#8217;s Bank Erosion Hazard Index (BEHI), however this protocol has significant limitations. Here we present protocol modifications to address time constraints, allow nonprofessionals to complete accurate assessments, and account for non-alluvial stream conditions in Northeast Ohio.

تعديل مؤشر (الباهي) بروتوكول البنك تآكل المخاطر للتقييم السريع للStreambank تآكل في شمال شرق أوهايو

Understanding the source of pollution in a stream is vital to preserving, restoring, and maintaining the stream&#8217;s function and habitat it provides. ...

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% fine dust formation within the EU15. But NH3 emissions also mean a considerable loss of nutrients. Many studies on NH3 emission from organic and mineral fertilizer application have been performed in recent decades. Nevertheless, research related to NH3 emissions after application fertilizers is still limited in particular with respect to relationships to emissions, fertilizer type, site conditions and crop growth. Due to the variable response of crops to treatments, effects can only be validated in experimental designs including field replication for statistical testing. The dominating ammonia loss methods yielding quantitative emissions require large field areas, expensive equipment or current supply, which restricts their application in replicated field trials. This protocol describes a new methodology for the measurement of NH3 emissions on many plots linking a simple semi-quantitative measuring method used in all plots, with a quantitative method by simultaneous measurements using both methods on selected plots. As a semi-quantitative measurement method passive samplers are used. The second method is a dynamic chamber method (Dynamic Tube Method) to obtain a transfer quotient, which converts the semi-quantitative losses of the passive sampler to quantitative losses (kg nitrogen ha-1). The principle underlying this approach is that passive samplers placed in a homogeneous experimental field have the same NH3 absorption behavior under identical environmental conditions. Therefore, a transfer co-efficient obtained from single passive samplers can be used to scale the values of all passive samplers used in the same field trial. The method proved valid under a wide range of experimental conditions and is recommended to be used under conditions with bare soil or small canopies (&#60;0.3 m). Results obtained from experiments with taller plants should be treated more carefully.

Calibrated Passive Sampling - Multi-plot Field Measurements of NH3 Emissions with a Combination of Dynamic Tube Method and Passive Samplers

Ammonia emissions are a major threat to the environment by eutrophication, soil acidification and fine particle formation and stem mainly from agricultural sources. This method allows ammonia loss measurements in replicated field trials enabling statistical analysis of emissions and of relationships between crop development and emissions.

السلبي أخذ العينات معايرة - متعدد مؤامرة القياسات الميدانية NH<sub&gt; 3</sub&gt; الانبعاثات مع مزيج من أسلوب أنبوب الديناميكية وأخذ العينات سلبية

Agricultural ammonia (NH3) emissions (90% of total EU emissions) are responsible for about 45% airborne eutrophication, 31% soil acidification and 12% ...

Spotting Cheetahs: Identifying Individuals by Their Footprints

The cheetah (Acinonyx jubatus) is Africa's most endangered large felid and listed as Vulnerable with a declining population trend by the IUCN1. It ranges widely over sub-Saharan Africa and in parts of the Middle East. Cheetah conservationists face two major challenges, conflict with landowners over the killing of domestic livestock, and concern over range contraction. Understanding of the latter remains particularly poor2. Namibia is believed to support the largest number of cheetahs of any range country, around 30%, but estimates range from 2,9053 to 13,5204. The disparity is likely a result of the different techniques used in monitoring.
Current techniques, including invasive tagging with VHF or satellite/GPS collars, can be costly and unreliable. The footprint identification technique5 is a new tool accessible to both field scientists and also citizens with smartphones, who could potentially augment data collection. The footprint identification technique analyzes digital images of footprints captured according to a standardized protocol. Images are optimized and measured in data visualization software. Measurements of distances, angles, and areas of the footprint images are analyzed using a robust cross-validated pairwise discriminant analysis based on a customized model. The final output is in the form of a Ward's cluster dendrogram. A user-friendly graphic user interface (GUI) allows the user immediate access and clear interpretation of classification results.
The footprint identification technique algorithms are species specific because each species has a unique anatomy. The technique runs in a data visualization software, using its own scripting language (jsl) that can be customized for the footprint anatomy of any species. An initial classification algorithm is built from a training database of footprints from that species, collected from individuals of known identity. An algorithm derived from a cheetah of known identity is then able to classify free-ranging cheetahs of unknown identity. The footprint identification technique predicts individual cheetah identity with an accuracy of &gt;90%.

The cheetah (Acinonyx jubatus) is an iconic, endangered species, but conservation efforts are challenged by habitat shrinkage and conflict with commercial farmers. The footprint identification technique, a robust, accurate and cost-effective image classification system, is a new approach to monitoring cheetahs.

اكتشاف الفهود: الأفراد تحديد من آثارهم

The cheetah (Acinonyx jubatus) is Africa's most endangered large felid and listed as Vulnerable with a declining population trend by the IUCN1. It ranges ...

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and detritus, and excreting particulate and dissolved compounds, they serve as important agents for benthic-pelagic coupling. Accurately measuring the compounds removed and excreted by suspension feeders (such as sponges, ascidians, polychaetes, bivalves) is crucial for the study of their physiology, metabolism, and feeding ecology, and is fundamental to determine the ecological relevance of the nutrient fluxes mediated by these organisms. However, the assessment of the rate by which suspension feeders process particulate and dissolved compounds in nature is restricted by the limitations of the currently available methodologies. Our goal was to develop a simple, reliable, and non-intrusive method that would allow clean and controlled water sampling from a specific point, such as the excurrent aperture of benthic suspension feeders, in situ. Our method allows simultaneous sampling of inhaled and exhaled water of the studied organism by using minute tubes installed on a custom-built manipulator device and carefully positioned inside the exhalant orifice of the sampled organism. Piercing a septum on the collecting vessel with a syringe needle attached to the distal end of each tube allows the external pressure to slowly force the sampled water into the vessel through the sampling tube. The slow and controlled sampling rate allows integrating the inherent patchiness in the water while ensuring contamination free sampling. We provide recommendations for the most suitable filtering devices, collection vessel, and storing procedures for the analyses of different particulate and dissolved compounds. The VacuSIP system offers a reliable method for the quantification of undisturbed suspension feeder metabolism in natural conditions that is cheap and easy to learn and apply to assess the physiology and functional role of filter feeders in different ecosystems.

VacuSIP, an Improved InEx Method for In Situ Measurement of Particulate and Dissolved Compounds Processed by Active Suspension Feeders

We introduce the VacuSIP, a simple, non-intrusive, and reliable method for clean and accurate point sampling of water. The system was developed and evaluated for the simultaneous collection of the water inhaled and exhaled by benthic suspension feeders in situ, to cleanly measure removal and excretion of particulate and dissolved compounds.

VacuSIP، وتحسين أسلوب INEX ل<em&gt; في الموقع</em&gt; قياس الجسيمات والمذاب المركبات التي تتم معالجتها بواسطة مغذيات تعليق النشطة

Benthic suspension feeders play essential roles in the functioning of marine ecosystems. By filtering large volumes of water, removing plankton and ...

Modification and Application of a Leaf Blower-vac for Field Sampling of Arthropods

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropod populations in rice. When used in combination with an enclosure, application of this sampling device provides absolute estimates of the populations of arthropods as numbers per standardized sampling area. The sampling efficiency depends critically on the sampling duration. In a mature rice crop, a two-minute sampling in an enclosure of 0.13 m2 yields more than 90% of the arthropod population. The device also allows sampling of arthropods dwelling on the water surface or the soil in rice paddies, but it is not suitable for sampling fast flying insects, such as predatory Odonata or larger hymenopterous parasitoids. The modified blower-vac is simple to construct, and cheaper and easier to handle than traditional suction sampling devices, such as D-vac. The low cost makes the modified blower-vac also accessible to researchers in developing countries.

Assessment of arthropod abundance in crops is critical for investigating population dynamics and species interactions. Here we describe the modification and application of a leaf blower-vac for suction sampling of arthropods in rice.

تعديل وتطبيق ورقة المنفاخ-VAC لأخذ العينات مجال المفصليات

Rice fields host a large diversity of arthropods, but investigating their population dynamics and interactions is challenging. Here we describe the ...

Reliable Method for Assessing Seed Germination, Dormancy, and Mortality under Field Conditions

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester fabric and glue can be folded and glued to construct a strip of compartments that house seeds and identifying information, while allowing contact with soil leachate, water, microorganisms, and ambient temperature. Strips may be constructed with a wide range of compartment numbers and sizes and allow the researcher to house a variety of genotypes within a single species, different species, or seeds that have experienced different treatments. As opposed to individual seed packets, strips are more easily retrieved as a unit. While replicate packets can be included within a strip, different strips can act as blocks or can be retrieved at different times for observation of seed behavior over time. We used a high temperature glue gun to delineate compartments and sealed the strips once the seed and tags identifying block and removal times were inserted. The seed strips were then buried in the field at the desired depth, with the location marked for later removal. Burrowing animal predators were effectively excluded by use of a covering of metal mesh hardware cloth on the soil surface. After the selected time interval for burial, strips were dug up and seeds were assessed for germination, dormancy and mortality. While clearly dead seeds can often be distinguished from ungerminated living ones by eye, dormant seeds were conclusively identified using a standard Tetrazolium chloride colorimetric test for seed viability.

Here we present a protocol for assessing seed survivorship, germination and dormancy under field conditions using buried, labeled seed strips and tetrazolium chloride (TZ) viability testing.

طريقة موثوقة لتقييم انبات البذور، الخمول، والوفيات تحت الظروف الحقلية

We describe techniques for approximating seed bank dynamics over time using Helianthus annuus as an example study species. Strips of permeable polyester ...

Construction of a Compact Low-Cost Radiation Shield for Air-Temperature Sensors in Ecological Field Studies

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although cost-effective, if not deployed with proper solar radiation shielding, the observations recorded from these sensors will be biased and inaccurate. Manufactured radiation shields are effective at minimizing this bias, but are expensive compared to the cost of these sensors. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom fabricated radiation shield, which is more accurate than other published shielding methods that attempt to minimize shield size or construction costs. The method requires very little material: corrugated plastic sheets, aluminum foil duct tape, and cable ties. One 15 cm and two 10 cm squares of corrugated plastic are used for each shield. After cutting, scoring, taping and stapling of the sheets, the 10 cm squares form the bottom two layers of the solar radiation shield, while the 15 cm square forms the top layer. The three sheets are held together with cable ties. This compact solar radiation shield can be suspended, or placed against any flat surface. Care must be taken to ensure that the shield is completely parallel to the ground to prevent direct solar radiation from reaching the sensor, possibly causing increased warm biases in sun-exposed sites in the morning and afternoon relative to the original, larger design. Even so, differences in recorded temperatures between the smaller, compact shield design and the original design were small (mean daytime bias = 0.06 &#176;C). Construction costs are less than half of the original shield design, and the new design results in a less conspicuous instrument that may be advantageous in many field ecology settings.

With the advent of small, low-cost environmental sensors, it is now possible to deploy high-density networks of sensors to measure hyper localized temperature variation. Here, we provide a detailed methodology for constructing a compact version of a previously described custom-fabricated radiation shield for use with inexpensive thermochrons.

بناء درع ضغط الإشعاع المنخفضة التكلفة لأجهزة استشعار درجة حرارة الهواء في الدراسات الميدانية البيئية

Low cost temperature sensors are increasingly used by ecologists to assess climatic variation and change on ecologically relevant scales. Although ...

Visualizing Efficacy of Pesticides Against Disease Vector Mosquitoes in the Field

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform across ecological zones. To best protect public and veterinary health from these insects, the environmental limitations of pesticides need to be investigated to inform effective use of the most appropriate pesticide formulations and techniques. We have developed a research program to evaluate combinations of pesticides, pesticide application equipment, and application techniques in hot-arid desert, hot-humid tropical, warm and cool temperate, and urban locations to derive pesticide use guidelines specific to target insect and environment. To these ends we designed a system of protocols to support efficient, cost-effective, portable, and standardized evaluation of a diverse range of pesticides and equipment across multiple environments. At the core of these protocols is the use of an array of small cages with colony-reared sentinel mosquitoes (adults and immatures) and sand flies (adults), strategically arranged in natural habitats and exposed to pesticide spray. Spatial and temporal patterns of pesticide efficacy are derived from percent mortality in sentinel cages, then mapped and visualized in a geographic information system. Maps of sentinel mortality data may be statistically compared to evaluate relative efficacy of a pesticide across multiple environments, or to study multiple pesticides in a single environment. Protocols may be modified to accommodate a variety of scenarios, including, for example, the vertical orientation of sentinels in canopy habitats or simultaneous testing of ground and aerial application methods.

The efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects is not uniform across different ecological zones. Here we present a system of techniques using captive vector insects as sentinels for pesticide efficacy to derive electronic maps supporting the standard evaluation of pesticides across multiple environments.

تصور فعالية المبيدات ضد البعوض ناقل المرض في الحقل

Efficacy of public health pesticides targeting nuisance and disease-vector insects such as mosquitoes, sand flies, and filth-breeding flies is not uniform ...

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster (Nephrops norvegicus)

We present a protocol related to a video-tracking technique based on the background subtraction and image thresholding that makes it possible to individually track cohoused animals. We tested the tracking routine with four cohoused Norway lobsters (Nephrops norvegicus) under light-darkness conditions for 5 days. The lobsters had been individually tagged. The experimental setup and the tracking techniques used are entirely based on the open source software. The comparison of the tracking output with a manual detection indicates that the lobsters were correctly detected 69% of the times. Among the correctly detected lobsters, their individual tags were correctly identified 89.5% of the times. Considering the frame rate used in the protocol and the movement rate of lobsters, the performance of the video tracking has a good quality, and the representative results support the validity of the protocol in producing valuable data for research needs (individual space occupancy or locomotor activity patterns). The protocol presented here can be easily customized and is, hence, transferable to other species where the individual tracking of specimens in a group can be valuable for answering research questions.

Long-term Video Tracking of Cohoused Aquatic Animals: A Case Study of the Daily Locomotor Activity of the Norway Lobster Nephrops norvegicus

Here we present a protocol to individually track animals over a long period of time. It uses computer vision methods to identify a set of manually constructed tags by using a group of lobsters as case study, simultaneously providing information on how to house, manipulate, and mark the lobsters.

تتبع الفيديو الطويلة الأجل من الحيوانات المائية كوهوسيد: دراسة حالة من "النشاط الحركي اليومي" "النرويج جراد البحر" (النرويجي نيفروبس)

We present a protocol related to a video-tracking technique based on the background subtraction and image thresholding that makes it possible to ...

Standard Operating Procedure for Lyssavirus Surveillance of the Bat Population in Taiwan

Viruses within the genus Lyssavirus are zoonotic pathogens, and at least seven lyssavirus species are associated with human cases. Because bats are natural reservoirs of most lyssaviruses, a lyssavirus surveillance program of bats has been conducted in Taiwan since 2008 to understand the ecology of these viruses in bats. In this program, non-governmental bat conservation organizations and local animal disease control centers cooperated to collect dead bats or bats dying of weakness or illness. Brain tissues of bats were obtained through necropsy and subjected to direct fluorescent antibody test (FAT) and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for detection of lyssavirus antigens and nucleic acids. For the FAT, at least two different rabies diagnosis conjugates are recommended. For the RT-PCR, two sets of primers (JW12/N165-146, N113F/N304R) are used to amplify a partial sequence of the lyssavirus nucleoprotein gene. This surveillance program monitors lyssaviruses and other zoonotic agents in bats. Taiwan bat lyssavirus is found in two cases of the Japanese pipistrelle (Pipistrellus abramus) in 2016&#8211;2017. These findings should inform the public, health professionals, and scientists of the potential risks of contacting bats and other wildlife.

This protocol introduces a standard laboratory operating procedure for diagnostic testing of lyssavirus antigens in bats in Taiwan.

إجراءات التشغيل الموحدة لمراقبة فيروس ليسا لسكان الخفافيش في تايوان

Viruses within the genus Lyssavirus are zoonotic pathogens, and at least seven lyssavirus species are associated with human cases. Because bats are ...