وأيد هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81573992). نشكر إميلي K. لو وكاثلين دينابولي لمساعدتهم تحرير اللغة.

بروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية رعاية الحيوان من جامعة شنغهاي للطب الصيني التقليدي، وهي معتمدة من قبل التجربة الحيوانية لجنة الأخلاقيات الحيوانية شنغهاي. 1 - البروتوكول الأول: إعداد إكسد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عملية حسابية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة إكسد لمجموعة العلاج من 10 الفئران إمبرينتينغ السيطرة المنطقة (إكر) الفئران (0.02 كجم / ماوس)، 5 أيام في الأسبوع لمدة 12 أسبوعا. ملاحظة: هناك حاجة إلى ما مجموعه 1.702 إكسد. لأن إكسدس تقاس بزيادات منفصلة، ​​في الممارسة الحقيقية، إدارة 2 إكسدس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب حجم إكسد تطبيقها في الماوس ( أي V = (0.1418 إكسد / كغ • يوم) * (0.02 كجم / الماوس) * 50 مل / إكسد = 0.14 مل / ماوس • اليوم). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمرغ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع جميع المواد الخام من اثنين إكسدز ( أي، كوركوليغو أورشيوادس غايرتن (18 غرام)، هيربا إبيمديي (18 غرام)، الرقم الأساسي موريندي أوفيسيناليس (18 غرام)، Rأديكس أنجليسا سينينسيس (18 غراما)، اللحاء فيلودندري (12 غراما)، و ريزوما أنيمارهيني (12 غراما)، 96 غرام في المجموع) في وعاء مع غطاء. ملاحظة: يوصى بحاوية خزفية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكررات الأعشاب الخام مع 500 مل من الماء المقطر لمدة 1 ساعة. يجب أن تغطي المياه الأعشاب بنحو بوصة واحدة. السماح لجميع الأعشاب نقع جيدا. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أول مغلي الماء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسخين الأعشاب باستخدام طباخ الغاز أو طباخ التعريفي على الطاقة العالية حتى يغلي الماء (حوالي 5-10 دقيقة؛ الفترة الزمنية يعتمد على قوة التدفئة، والحاوية، وكمية من الأعشاب والمياه). رفض السلطة إلى انخفاض ينضج لمدة 2 ساعة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الترشيح الأول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غطاء كوب 500 مل مع ورقة الترشيح العادية أو مع الشاش والقطن. صب بعناية قبالة مغلي في الدورق من خلال مرشح. ترك الأعشاب في الحاوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعادة بقايا الأعشاب المتبقية سn ورق الترشيح إلى الحاوية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مغلي الماء الثاني <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة الماء المقطر إلى الحاوية مع الأعشاب. والسماح لها تغطية الأعشاب بنحو بوصة واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 1.3. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الترشيح الثاني <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات 1.4.1 و 1.4.2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صب قبالة مغلي الثاني في نفس الدورق. خلط ديكوكتيونس الأولى والثانية معا. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تركيز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الكأس على طباخ الغاز مع الاسبستوس خالية من الشاش الأسلاك بينهما، حرارة ديكوتيون باستخدام ينضج منخفضة، وببطء وبشكل مستمر اثارة مع قضيب من الزجاج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يقلل ديكوتيون إلى 200 مل، نقله إلى كوب 500 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 1.7.1 حتى ديكوتيون يقلل إلى 100 مل. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التخزين والإدارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل ديكوتيون المركزة إلى زجاجة معقمة. السماح لها باردة إلى غرفة تمبراتوري (رت). تخزين في 4 درجات مئوية إذا كان استخدامه في غضون أسبوع واحد أو في -70 درجة مئوية للتخزين على المدى الطويل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام إبرة التزقيم، وإدارة 0.14 مل / الماوس من ديكوتيون ل أوفاريكتوميزد (أوفكس) الفئران مرة واحدة يوميا، 5 أيام في الأسبوع لمدة 12 أسبوعا. </li></ol></li></ol> 2. البروتوكول الثاني: إعداد المصل المحتوي على إكسد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عملية حسابية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب الجرعة المكافئة للفئران (ريد) باستخدام 0.15 كغ وزن الجسم لكل فئران (1 شهر من العمر): ديسيبل = (1/60) * (90/100) * (60 / 0.15) 1/3 = 0.111 إكسد / كغ / يوم. ملاحظة: هناك حاجة إلى ما مجموعه 10 مل من المصل المحتوي على إكسد لإعداد 100 مل من الوسط الثقافي (10٪ من المصل يحتوي على إكسد). ومن المتوقع أن توفر 2 مل من الفئران كل الفئران. وبالتالي، هناك حاجة إلى 6 الفئران (خسارة 20٪ في الاعتبار) لإدارة إكسد مرة واحدة يوميا لمدة 3 أيام. عدد إكسدس هو: (0.111 إكسد / كغ • يوم) * (0.15 كجم / الفئران) * (6 الفئران) * (3 أيام) = 0.300 إكسد. مرة أخرى، لأن إكسدس يتم قياسها في زيادات منفصلة،استخدام 1 إكسد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حساب حجم إكسد تطبيقها في الفئران ( أي، V = (0.111 إكسد / كجم في اليوم) * (0.15 كجم / الفئران) * (50 مل / إكسد) = 0.83 مل / الفئران • اليوم). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمرغ <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع المواد الخام ل 1 إكسد في وعاء مع غطاء. مكررات الأعشاب الخام في الماء المقطر لمدة 1 ساعة؛ يجب أن تغطي المياه الأعشاب بنحو بوصة واحدة. السماح لجميع الأعشاب نقع جيدا. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أول مغلي الماء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسخين الأعشاب باستخدام طباخ التعريفي على الطاقة العالية حتى يغلي الماء (حوالي 5-10 دقيقة؛ الفترة الزمنية يعتمد على الطاقة الحرارية، والحاوية، وكمية من الأعشاب والمياه). تحويل الطاقة إلى انخفاض ينضج لمدة 2 ساعة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الترشيح الأول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غطاء كوب 500 مل مع ورقة الترشيح العادية أو مع الشاش والقطن. صب بعناية قبالة مغلي في الدورق من خلال مرشح. ترك الأعشاب في الحاوية. </li><li&gt; أعد بقايا الأعشاب على ورق الترشيح إلى الحاوية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مغلي الماء الثاني <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة الماء المقطر إلى الحاوية مع الأعشاب. والسماح لها تغطية الأعشاب بنحو بوصة واحدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 2.4. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الترشيح الثاني <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوات 2.5.1 و 2.5.2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> صب قبالة مغلي الثاني في نفس الدورق كما في الخطوة 2.4.1 وتخلط ديكوكتيونس الأولى والثانية معا. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تركيز <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الكأس على طباخ الغاز مع الشاش الأسلاك خالية من الاسبستوس بينهما، حرارة ديكوتيون باستخدام ينضج منخفضة، وإثارة ببطء وبشكل مستمر مع قضيب من الزجاج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يقلل ديكوتيون إلى 100 مل، نقله إلى كوب 100 مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر الخطوة 2.7.1 حتى يقلل ديكوتيون إلى 50 مل. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التخزين والإدارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل ديكوتيون المركزة إلى سترإيل، قنينة الزجاج. السماح لتبرد ل رت. تخزين في 4 درجات مئوية إذا كان استخدامه في غضون أسبوع واحد أو في -70 درجة مئوية للتخزين على المدى الطويل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة عن طريق الفم 0.83 مل / الفئران مرة واحدة يوميا لمدة 3 أيام. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إكسد التي تحتوي على إعداد المصل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران عن طريق الحقن داخل الصفاق من 300 مل / 100 غرام من 80 ملغ / كغ من الكيتامين و 10 ملغ / كغ زيلازين في 1 ساعة بعد آخر إدارة إكسد. تأكيد التخدير الصحيح عن طريق قرصة أخمص قدميه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شق الجلد والبريتوني من الفئران من البطن إلى الجزء السفلي من الصدر باستخدام مشرط (أو مقص التشغيل على التوالي). إنشاء شق طول وعمق حوالي 5 سم و 0.5 سم، على التوالي. نقل أحشاء البطن إلى اليسار باستخدام ورقة الأنسجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام ورقة الأنسجة، وإزالة النسيج الضام من الشريان الأورطي البطني للكشف بوضوح السفينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رسم الدم ببطء من الشريان الأورطي البطني باستخدام 10 مل، 22-حقنة قياس. نقله إلىأنبوب معقم 15 مل بعد إزالة الإبرة. فئران واحدة يمكن أن تنتج 8-10 مل من الدم. ملاحظة: يجب أن يكون الفئران على قيد الحياة ( أي، مع البطن الشريان الأورطي النابض) عند بدء رسم الدم والموتى بعد اكتمال الرسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخثر الدم في وضع مستقيم لمدة 30 - 60 دقيقة في الغرفة رت. أجهزة الطرد المركزي في 500-600 x ج لمدة 20 دقيقة. وضع بعناية كل طاف (المصل) في أنبوب 50 مل واحد معقمة وتخلط كل المصل (من الحيوانات المختلفة) معا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أداء تعطيل الحرارة عن طريق احتضان المصل في حمام مائي 56 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. تصفية المصل باستخدام مرشح حقنة مع 0.22 ميكرون حجم المسام غشاء بوليثرزولفون ماء. استخدام المصل جديدة أو تخزينه في -20 درجة مئوية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السيطرة على المخدرات التي تحتوي على إعداد المصل (المستخدمة في مجموعة السيطرة) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة كل الفئران مع نفس الحجم من المياه المالحة (0.83 مل) مرة واحدة يوميا لمدة 3 أيام. الخطوات الأخرى هي نفسها كما في الخطوة 2.9.</li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الوضعية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 10 مل من المصل تحتوي على إكسد المصل أو المخدرات التي تحتوي على كل 100 مل من المتوسطة، بالإضافة إلى 1٪ البنسلين الستربتومايسين (بس) 23 . </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Zhang, L. G., Ouyang, X. W., Wu, T. T., Ni, L. J., Shi, W. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+evaluation+of+in+vitro+effects+and+interactions+of+active+fractions+in+a+Chinese+medicinal+formula+(Yaotongning+Capsule)+on+rat+chondrocytes.">Quantitative evaluation of in vitro effects and interactions of active fractions in a Chinese medicinal formula (Yaotongning Capsule) on rat chondrocytes.</a> J Ethnopharmacol. 155 (3), 1424-1432 (2014).</li><li>Ogawa, Y., Fujii, Y., Sugiyama, R., Konishi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+seven+crude+drug+components+in+the+sleep-promoting+effect+of+Yokukansan.">The role of the seven crude drug components in the sleep-promoting effect of Yokukansan.</a> J Ethnopharmacol. 177, 19-27 (2016).</li><li>Kim, J. H., Doh, E. J., Lee, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Medicinal+Categorization+of+Atractylodes+japonica+Koidz.+by+Using+Internal+Transcribed+Spacer+Sequencing+Analysis+and+HPLC+Fingerprinting+Combined+with+Statistical+Tools.">Evaluation of Medicinal Categorization of Atractylodes japonica Koidz. by Using Internal Transcribed Spacer Sequencing Analysis and HPLC Fingerprinting Combined with Statistical Tools.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2016, 2926819 (2016).</li><li>Sheridan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+metabolic+fingerprinting+as+a+tool+for+the+modernisation+of+TCM+preparations.">The potential of metabolic fingerprinting as a tool for the modernisation of TCM preparations.</a> J Ethnopharmacol. 140 (3), 482-491 (2012).</li><li>Planas, G. M., Kucacute, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contraceptive+Properties+of+Stevia+rebaudiana.">Contraceptive Properties of Stevia rebaudiana.</a> Science. 162 (3857), 1007 (1968).</li><li>Tashino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Serum+pharmacology"+and+"serum+pharmaceutical+chemistry":+from+pharmacology+of+Chinese+traditional+medicines+to+start+a+new+measurement+of+drug+concentration+in+blood.">"Serum pharmacology" and "serum pharmaceutical chemistry": from pharmacology of Chinese traditional medicines to start a new measurement of drug concentration in blood.</a> Ther Drug Monit Res. 5, 54-64 (1988).</li><li>Cao, Y., Liu, F., Huang, Z., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Guanxin+Shutong+capsule+drug-containing+serum+on+tumor+necrosis+factor-alpha-induced+endothelial+dysfunction+through+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+and+the+nitric+oxide+pathway.">Protective effects of Guanxin Shutong capsule drug-containing serum on tumor necrosis factor-alpha-induced endothelial dysfunction through nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase and the nitric oxide pathway.</a> Exp Ther Med. 8 (3), 998-1004 (2014).</li><li>Fu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+Vivo+Stromal+Cell-Derived+Factor+1-Mediated+Differentiation+of+Mouse+Bone+Marrow+Mesenchymal+Stem+Cells+into+Hepatocytes+Is+Enhanced+by+Chinese+Medicine+Yiguanjian+Drug-Containing+Serum.">Ex Vivo Stromal Cell-Derived Factor 1-Mediated Differentiation of Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into Hepatocytes Is Enhanced by Chinese Medicine Yiguanjian Drug-Containing Serum.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2016, 7380439 (2016).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+serum+pharmacology+in+evaluating+the+antitumor+effect+of+Fuzheng+Yiliu+Decoction+from+Chinese+Medicine.">Application of serum pharmacology in evaluating the antitumor effect of Fuzheng Yiliu Decoction from Chinese Medicine.</a> Chin J Integr Med. 20 (6), 450-455 (2014).</li><li>Sze, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism:+Erxian+Decoction,+a+Chinese+medicine+formula,+for+relieving+menopausal+syndrome.">A novel mechanism: Erxian Decoction, a Chinese medicine formula, for relieving menopausal syndrome.</a> J Ethnopharmacol. 123 (1), 27-33 (2009).</li><li>Sze, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Erxian+decoction,+a+Chinese+medicinal+formulation,+on+serum+lipid+profile+in+a+rat+model+of+menopause.">Effects of Erxian decoction, a Chinese medicinal formulation, on serum lipid profile in a rat model of menopause.</a> Chin Med. 6, 40 (2011).</li><li>Zhong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized,+double-blind,+controlled+trial+of+a+Chinese+herbal+formula+(Er-Xian+decoction)+for+menopausal+symptoms+in+Hong+Kong+perimenopausal+women.">A randomized, double-blind, controlled trial of a Chinese herbal formula (Er-Xian decoction) for menopausal symptoms in Hong Kong perimenopausal women.</a> Menopause. 20 (7), 767-776 (2013).</li><li>Wang, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroidogenic+effect+of+Erxian+decoction+for+relieving+menopause+via+the+p-Akt/PKB+pathway+in+vitro+and+in+vivo.">Steroidogenic effect of Erxian decoction for relieving menopause via the p-Akt/PKB pathway in vitro and in vivo.</a> J Ethnopharmacol. , (2016).</li><li>Lin, L., Wu, S., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Clinical+observation+and+experimental+study+of+the+treatment+of+aplastic+anemia+by+warming+and+tonifying+the+spleen+and+kidney].">[Clinical observation and experimental study of the treatment of aplastic anemia by warming and tonifying the spleen and kidney].</a> Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 10 (5), 272-274 (1990).</li><li>Nian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antiosteoporotic+activity+of+Er-Xian+Decoction,+a+traditional+Chinese+herbal+formula,+in+ovariectomized+rats.">Antiosteoporotic activity of Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, in ovariectomized rats.</a> J Ethnopharmacol. 108 (1), 96-102 (2006).</li><li>Qin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antiosteoporotic+chemical+constituents+from+Er-Xian+Decoction,+a+traditional+Chinese+herbal+formula.">Antiosteoporotic chemical constituents from Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula.</a> J Ethnopharmacol. 118 (2), 271-279 (2008).</li><li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HNMR-based+metabonomics+study+of+postmenopausal+osteoporosis+and+intervention+effects+of+Er-Xian+Decoction+in+ovariectomized+rats.">A HNMR-based metabonomics study of postmenopausal osteoporosis and intervention effects of Er-Xian Decoction in ovariectomized rats.</a> Int J Mol Sci. 12 (11), 7635-7651 (2011).</li><li>Lu, X. N., Xu, X. R., Lin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Clinical+observation+of+bushen+er'xian+decoction+in+treating+premature+ovarian+failure].">[Clinical observation of bushen er'xian decoction in treating premature ovarian failure].</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 28 (7), 594-596 (2008).</li><li>Yu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-angiogenic+activity+of+Erxian+Decoction,+a+traditional+Chinese+herbal+formula,+in+zebrafish.">Anti-angiogenic activity of Erxian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, in zebrafish.</a> Biol Pharm Bull. 35 (12), 2119-2127 (2012).</li><li>Chu, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+vitro+and+in+vivo+investigation+of+the+antimetastatic+effects+of+a+Chinese+medicinal+decoction,+erxian+decoction,+on+human+ovarian+cancer+models.">An in vitro and in vivo investigation of the antimetastatic effects of a Chinese medicinal decoction, erxian decoction, on human ovarian cancer models.</a> Integr Cancer Ther. 12 (4), 336-346 (2013).</li><li>Zhu, Z., Li, L., Jin, X., Fang, J., Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Er-Xian+Decoction,+a+traditional+Chinese+herbal+formula,+intervening+early+in+hypothalamic-pituitary+axis+of+male+rats+with+delayed+puberty.">Er-Xian Decoction, a traditional Chinese herbal formula, intervening early in hypothalamic-pituitary axis of male rats with delayed puberty.</a> Pharmacogn Mag. 10 (40), 517-521 (2014).</li><li>Miao, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Experimental animals and technology. 1997, 145 (1997).</li><li>Soleimani, M., Nadri, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+isolation+and+culture+of+mesenchymal+stem+cells+from+mouse+bone+marrow.">A protocol for isolation and culture of mesenchymal stem cells from mouse bone marrow.</a> Nat Protoc. 4 (1), 102-106 (2009).</li><li>Lu, S., Huang, J., Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Er-Xian+Decoction+Stimulates+Osteoblastic+Differentiation+of+Bone+Mesenchymal+Stem+Cells+in+Ovariectomized+Mice+and+Its+Gene+Profile+Analysis.">Er-Xian Decoction Stimulates Osteoblastic Differentiation of Bone Mesenchymal Stem Cells in Ovariectomized Mice and Its Gene Profile Analysis.</a> Stem Cells International. 2016, 4079210 (2016).</li><li>Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Administration+of+substances+to+laboratory+animals:+routes+of+administration+and+factors+to+consider.">Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (5), 600-613 (2011).</li><li>Wu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+determination+of+seven+flavonoids+in+dog+plasma+by+ultra-performance+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry+and+its+application+to+a+bioequivalence+study+of+bioactive+components+in+Herba+Epimedii+and+Er-Xian+Decoction.">Simultaneous determination of seven flavonoids in dog plasma by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry and its application to a bioequivalence study of bioactive components in Herba Epimedii and Er-Xian Decoction.</a> J Pharm Biomed Anal. 54 (1), 186-191 (2011).</li><li>Hu, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+major+chemical+constituents+and+their+metabolites+in+rat+plasma+and+various+organs+after+oral+administration+of+effective+Erxian+Decoction+(EXD)+fraction+by+liquid+chromatography-mass+spectrometry.">Identification of the major chemical constituents and their metabolites in rat plasma and various organs after oral administration of effective Erxian Decoction (EXD) fraction by liquid chromatography-mass spectrometry.</a> Biomed Chromatogr. 24 (5), 479-489 (2010).</li><li>Xue, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+and+interaction+of+icariin,+curculigoside,+and+berberine+in+er-xian+decoction,+a+traditional+chinese+medicinal+formula,+on+osteoclastic+bone+resorption.">Effects and interaction of icariin, curculigoside, and berberine in er-xian decoction, a traditional chinese medicinal formula, on osteoclastic bone resorption.</a> Evid Based Complement Alternat Med. , (2012).</li><li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human.">A simple practice guide for dose conversion between animals and human.</a> J Basic Clin Pharm. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+the+traditional+Chinese+medicine+xuesaitong+on+intestinal+ischemia-reperfusion+injury+in+rats.">Protective effect of the traditional Chinese medicine xuesaitong on intestinal ischemia-reperfusion injury in rats.</a> Int J Clin Exp Med. 8 (2), 1768-1779 (2015).</li><li>Li, Z., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+methods+for+Chinese+herbs+serum+pharmcology.">On the methods for Chinese herbs serum pharmcology.</a> Zhong Guo Zhong Yi Yao Xing Xi Za Zhi. 9 (2), 5-6 (2002).</li><li>Jiang, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating-blood+and+dispelling-toxin+on+ox-LDL-induced+inflammatory+factors'+expression+in+endothelial+cells.">Effect of chinese herbal drug-containing serum for activating-blood and dispelling-toxin on ox-LDL-induced inflammatory factors' expression in endothelial cells.</a> Chin J Integr Med. 18 (1), 30-33 (2012).</li><li>Guo, C. Y., Ma, X. J., Liu, Q., Yin, H. J., Shi, D. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Effect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating+blood,+activating+blood+and+dispelling+toxin+on+TNF-alpha-induced+adherence+between+endothelial+cells+and+neutrophils+and+the+expression+of+MAPK+pathway].">[Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating blood, activating blood and dispelling toxin on TNF-alpha-induced adherence between endothelial cells and neutrophils and the expression of MAPK pathway].</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 35 (2), 204-209 (2015).</li><li>Li, Y., Xia, J. Y., Chen, W., Deng, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Ling+Qi+Juan+Gan+capsule+drug-containing+serum+on+PDGF-induced+proliferation+and+JAK/STAT+signaling+of+HSC-T6+cells].">Effects of Ling Qi Juan Gan capsule drug-containing serum on PDGF-induced proliferation and JAK/STAT signaling of HSC-T6 cells].</a> Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 21 (9), 663-667 (2013).</li><li>Li, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Some+issues+in+methology+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology].">[Some issues in methology of Chinese herbs serum pharmcology].</a> Zhong Yao Xin Yao Yu Lin Chuang Yao Li. 10 (5), 263 (1999).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[A+review+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology+methodological+study].">[A review of Chinese herbs serum pharmcology methodological study].</a> Nan Jing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao. 18 (4), 254 (2002).</li><li>Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=[Issues+and+strategies+for+study+of+serum+pharmcology+in+oncology].">[Issues and strategies for study of serum pharmcology in oncology].</a> Zhong Yi Yan Jiu. 17 (5), 13-14 (2004).</li></ol>

ويعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة.

في السنوات الأخيرة، تم إيلاء المزيد من الاهتمام للأدوية العشبية، وهو نوع واحد من الطب البديل الذي تم تطبيقه في الإعداد السريري في العالم الشرقي لآلاف السنين. مختلفة من &quot;مقعد إلى السرير&quot; نمط الطب الحديث، والأدوية العشبية التقليدية تتطلب أولا &quot;السرير إلى مقاعد...

الاهتمام في دراسة وتطبيق الأدوية العشبية التقليدية ينمو حاليا. على عكس الأدوية الحديثة، التي المكونات الكيميائية هي محددة، الصيغ العشبية لديها بعض المكونات غير معروفة وتتطلب عمليات استخراج لتمكين تسليم المركبات النشطة. على الرغم من أن العديد من الدراسات في محاولة لتحديد مجمع صغير واحد مع بنية معروفة كممثل من عشب كامل أو صيغة العشبية، لا يمكن اعتبار أي فعالية الدوائية أو آليات يعادل 1 ، 2 . في حين أن البصمات تمكن من تحليل مكونات الصيغ العشبية المعقدة، وبعض المكونات لا تزال غير تحليلها بشكل واضح، مما يؤدي إلى تحدي عند الجمع بين جميع مقتطفات للدراسة 3 . التفاعلات من العديد من المكونات / مقتطفات توسط الآثار العلاجية للأدوية العشبية. للحفاظ على هذه الميزة، استخراج التقليدية شكل ديكوكت<html> أيون-لا يزال يستخدم على نطاق واسع في العيادة. منذ إجراء استخراج له تأثير كبير على فعالية العلاجية، وبروتوكول قياسي من مغلي المياه التقليدية ضروري، وخاصة بالنسبة للدراسات في الجسم الحي 4 ، 5 . من ناحية أخرى، عند استكشاف الآليات الدوائية، وإدارة الاستغناء العشبية أثناء الدراسات في المختبر أو خارج الجسم الحي هو أيضا تحديا. وقد اقترح تاشينو في عام 1988 مفهوم المصل الذي يحتوي على المخدرات 6 . ومنذ ذلك الحين، طبقت أعداد متزايدة من الباحثين على الأدوية العشبية 7 و 8 و 9 . على الرغم من أن طريقة المصل يحتوي على المخدرات لديها بعض القيود، مثل تأثير بعض مكونات المصل، فإنه لا يزال يعتبر أن الطريقة التي تحاكي عن كثب الظروف الفسيولوجية. &quot;jove_content&quot;&gt; تم تطوير مغلي إير-زيان في أوائل 1950s لتخفيف أعراض انقطاع الطمث 10 ، 11 ، 12 ، 13 . كما تم تطبيقه على علاج فقر الدم اللاتنسجي 14 ، هشاشة العظام بعد انقطاع الطمث 15 ، 16 ، 17 ، سابق لأوانه فشل المبيض 18 ، سرطان الثدي 19 ، سرطان المبيض 20 ، وتأخر سن البلوغ 21 . هنا، نقدم بروتوكولات مفصلة لإعداد كل من مغلي إشيان (إكسد) والمصل الذي يحتوي على المخدرات. بالإضافة إلى ذلك، نحن تصف تطبيق إكسد و إكسد التي تحتوي على المصل إلى نماذج هشاشة العظام الفئران الفئران. ويتكون إكسد من 9 غرام كل من كوركوليغو أورشيوادس غايرتن ، هيربا إبيمديي </eم&gt;، الرقم الأساسي مورينداي المخزنية ، والجذر انجليكا سينينسيس و 6 غرام كل من اللحاء فيلودندري و ريزوما أنيمارهيني لكل مريض بالغ يوميا. الجرعة المكافئة للفأرة هي 0.1418 إكسد / كغ / يوم استنادا إلى المعادلة التالية 22 : دب = دا * رب / را * (وا / وب) 1/3 . دا و دب يشير إلى الجرعة لكل وزن الجسم (ملغ / كلغ) من الإنسان والفأر، على التوالي. يتم استبدال الجرعة، في ملغ / كغ، بعدد إكسد / كغ. ويمثل را و رب عامل الجسم البشري وعامل جسم الفأر، على التوالي، والتي تتناسب مع (مساحة سطح الجسم (م 2 ) / وزن الجسم (كغ)) 2/3 (انظر الجدول 1 ). وا و وب تشير إلى وزن الجسم (كلغ) من الإنسان والفأر، على التوالي.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="651">
	
	<tbody>
		<tr height="165">
			<td height="165" style="height:165px;width:216px;">Curculigo orchioides Gaertn (9&#8201;g), Herbaa Epimedii (9&#8201;g), Radix Morindae Officinalis (9&#8201;g), Radix Angelicae Sinensis (9&#8201;g), Cortex Phellodendri (6&#8201;g), and Rhizoma Anemarrhenae (6&#8201;g)</td>
			<td style="width:149px;">Kang-qiao Chinese Medicine Yinpian Co. Ltd (Shanghai, CN)</td>
			<td style="width:119px;">160922</td>
			<td style="width:167px;">EXD components</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Filter paper</td>
			<td style="width:149px;">GElifesciences</td>
			<td style="width:119px;">99-103-952</td>
			<td style="width:167px;">Filter EXD decoction before concentration</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Imprinting Control Region (ICR) mice</td>
			<td style="width:149px;">Shanghai Laboratory Animal Center</td>
			<td style="width:119px;">SCXK 2007-0005</td>
			<td style="width:167px;">In vivo study</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Sprague Dawley rats</td>
			<td style="width:149px;">Shanghai Laboratory Animal Center</td>
			<td style="width:119px;">SCXK 2007-0005</td>
			<td style="width:167px;">EXD-containing serum preparation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Syringe filter</td>
			<td style="width:149px;">Millipore</td>
			<td style="width:119px;">SLGP033RB</td>
			<td style="width:167px;">0.22 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:216px;">gavage needles (10 ml)</td>
			<td style="width:149px;">Shanghai BO Ge trade sales department</td>
			<td align="right" style="width:119px;">59104274</td>
			<td style="width:167px;">Adminstration of EXD</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;">Ketamine (80 mg/kg)&#160;</td>
			<td style="width:149px;">Fujian Gutian Pharma Co. Ltd</td>
			<td style="width:119px;">H35020148</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Xylazine (10 mg/kg)</td>
			<td style="width:149px;">Sunway Pharma Co. Ltd</td>
			<td style="width:119px;">CB07591</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="81">
			<td height="81" style="height:81px;width:216px;">Dulbecco&#8217;s modification of Eagle&#8217;s medium Dulbecco (DMEM) culture medium</td>
			<td style="width:149px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">12800-116</td>
			<td style="width:167px;">DMEM with 2 mM L-glutamine and without ribonucleosides and ribonucleotides</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Streptomycin</td>
			<td style="width:149px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:119px;">1277</td>
			<td style="width:167px;">100 &#181;g / ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Penicillin</td>
			<td style="width:149px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:119px;">4687</td>
			<td style="width:167px;">100 &#181;g / ml</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of herbal medicine: er-xian decoction and er-xian-containing serum for in vivo and in vitro experiments

وقد حظيت الأدوية العشبية التقليدية، وهي طب بديل في الإطار السريري، باهتمام متزايد في السنوات الأخيرة. قبل التسليم إلى الجسم، وعادة ما يتطلب إجراء استخراج إضافية للافراج عن المكونات النشطة من الأعشاب الخام. ديكوتيون المياه هو إجراء استخراج الكلاسيكية التي لا تزال تستخدم على نطاق واسع في الإعدادات السريرية. هنا، نقترح بروتوكول مفصل ل إر-زيان مغلي (إكسد) من أجل تطبيق ديكوكتيونس العشبية للدراسات التجريبية. يتم وصف حساب الجرعة المناسبة للحيوان، وكذلك الخطوات الرئيسية الأربعة من إكسد: تمرغ، مغلي الماء، والترشيح، والتركيز. وبالإضافة إلى ذلك، يتم عرض إكسد المصل المحتوية على المصل إلى الفئران كوسيلة للتحقق من صحة المختبر . هنا، كانت الفئران تدار شفويا إكسد لمدة ثلاثة أيام. ثم تم جمع عينات الدم، المعطل، الطرد المركزي، وتصفيتها. المصل، المخفف مع الوسط الثقافي، يمكن أن تستخدم لعلاج الخلايا أو الأنسجة في الخامسإترو. على سبيل المثال، تم تطبيق إكسد على حد سواء في الجسم الحي وفي الدراسات المختبرية وأظهرت أن إكسد يعزز تكوين العظم. هذا البروتوكول يمكن أن تستخدم كمرجع لإعداد وتطبيق الأدوية العشبية.

تأثير إكسد على كثافة العظام من الفئران أوفكس يظهر هيماتوكسيلين ويوزين (H &amp; E) تلطيخ القسم الفقرات القطنية زيادة ترابيك العظام بعد العلاج إكسد في الجسم الحي ( الشكل 1A ، اللوحة اليمن?...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments at JoVE.com

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

هنا، نقدم إعداد مغلي إشيان (إكسد) في أربع خطوات، تمرغ، مغلي، والترشيح، والتركيز، وإظهار إدارة مصل يحتوي على إكسد المحضرة إلى الفئران. هذه الأساليب قابلة للتطبيق على الجسم الحي وفي دراسة المختبر من الاستغناء العشبية مثل الأدوية الصينية التقليدية.

إعداد الأدوية العشبية: إير-زيان ديكوتيون و إير-زيان التي تحتوي على مصل ل<em&gt; في فيفو</em&gt; و<em&gt; في المختبر</em&gt; التجارب

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the ...

preparation-herbal-medicine-er-xian-decoction-er-xian-containing

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

10.9K Views.  Shanghai University of Traditional Chinese Medicine.  هنا، نقدم إعداد مغلي إشيان (إكسد) في أربع خطوات، تمرغ، مغلي، والترشيح، والتركيز، وإظهار إدارة مصل يحتوي على إكسد المحضرة إلى الفئران. هذه الأساليب قابلة للتطبيق على الجسم الحي وفي دراسة المختبر من الاستغناء العشبية مثل الأدوية ا?...

Video: Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. Here, we describe a general protocol for cell labeling, imaging, and image processing. The technique is applicable to various cell types and animal models, although here we focus on a typical mouse model for tracking murine immune cells. The most important issues for cell labeling are described, as these are relevant to all models. Similarly, key imaging parameters are listed, although the details will vary depending on the MRI system and the individual setup. Finally, we include an image processing protocol for quantification. Variations for this, and other parts of the protocol, are assessed in the Discussion section. Based on the detailed procedure described here, the user will need to adapt the protocol for each specific cell type, cell label, animal model, and imaging setup. Note that the protocol can also be adapted for human use, as long as clinical restrictions are met.

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

We describe a general protocol for in vivo cell tracking using MRI in a mouse model with ex vivo labeled cells. A typical protocol for cell labeling, image acquisition processing and quantification is included.

في الجسم الحي 19 F التصوير بالرنين المغناطيسي لتتبع الخليوي

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same pathway, are likely to fail. Emphasis must be placed upon the inhibition of pathways that are responsible for intrinsic and/or adaptive resistance to therapy. An active field of investigation is the development and testing of DNA repair inhibitors that promote the action of, and prevent resistance to, commonly used chemotherapy and radiotherapy. We used a novel protocol to evaluate the effectiveness of BRCA2 inhibition as a means to sensitize tumor cells to the DNA damaging drug cisplatin. Tumor cell metabolism (acidification and respiration) was monitored in real-time for a period of 72 hr to delineate treatment effectiveness on a minute by minute basis. In combination, we performed an assessment of metastatic frequency using a chicken embryo chorioallantoic membrane (CAM) model of extravasation and invasion. This protocol addresses some of the weaknesses of commonly used in vitro and in vivo methods to evaluate novel cancer therapy regimens. It can be used in addition to common methods such as cell proliferation assays, cell death assays, and in vivo murine xenograft studies, to more closely discriminate amongst candidate targets and agents, and select only the most promising candidates for further development.

Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

Here, real-time monitoring of tumor cell metabolism, combined with an in vivo chicken embryo chorio-allantoic membrane (CAM) model of metastasis, are used to evaluate novel anti-cancer targets/agents for their ability to sensitize tumor cells to DNA damaging chemotherapeutics.

تقييم فعالية سرطان المخدرات توعية<em&gt; في المختبر</em&gt; و<em&gt; في فيفو</em

Due to the high level of heterogeneity and mutations inherent in human cancers, single agent therapies, or combination regimens which target the same ...

Validation of Nanobody and Antibody Based In Vivo Tumor Xenograft NIRF-imaging Experiments in Mice Using Ex Vivo Flow Cytometry and Microscopy

This protocol outlines the steps required to perform ex vivo validation of in vivo near-infrared fluorescence (NIRF) xenograft imaging experiments in mice using fluorophore labelled nanobodies and conventional antibodies.
First we describe how to generate subcutaneous tumors in mice, using antigen-negative cell lines as negative controls and antigen-positive cells as positive controls in the same mice for intraindividual comparison. We outline how to administer intravenously near-infrared fluorophore labelled (AlexaFluor680) antigen-specific nanobodies and conventional antibodies. In vivo imaging was performed with a small-animal NIRF-Imaging system. After the in vivo imaging experiments the mice were sacrificed. We then describe how to prepare the tumors for parallel ex vivo analyses by flow cytometry and fluorescence microscopy to validate in vivo imaging results.
The use of the near-infrared fluorophore labelled nanobodies allows for non-invasive same day imaging in vivo. Our protocols describe the ex vivo quantification of the specific labeling efficiency of tumor cells by flow cytometry and analysis of the distribution of the antibody constructs within the tumors by fluorescence microscopy. Using near-infrared fluorophore labelled probes allows for non-invasive, economical in vivo imaging with the unique ability to exploit the same probe without further secondary labelling for ex vivo validation experiments using flow cytometry and fluorescence microscopy.

Validation of Nanobody and Antibody Based In Vivo Tumor Xenograft NIRF-imaging Experiments in Mice Using Ex Vivo Flow Cytometry and Microscopy

This protocol outlines the steps required to perform ex vivo validation of in vivo near-infrared fluorescence xenograft imaging experiments in mice using fluorophore labelled nanobodies and conventional antibodies.

التحقق من Nanobody والجسم المضاد القائم<em&gt; في فيفو</em&gt; التجارب ورم طعم أجنبي NIRF التصوير في الفئران عن طريق<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; التدفق الخلوي والميكروسكوب

This protocol outlines the steps required to perform ex vivo validation of in vivo near-infrared fluorescence (NIRF) xenograft imaging experiments in mice ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. Despite the discovery of key regulators of uterine contractility, this process is still not fully understood. Transgenic mice provide an ideal model in which to study parturition. Previously, the only method to study uterine contractility in the mouse was ex vivo isometric tension recordings, which are suboptimal for several reasons. The uterus must be removed from its physiological environment, a limited time course of investigation is possible, and the mice must be sacrificed. The recent development of radiometric telemetry has allowed for longitudinal, real-time measurements of in vivo intrauterine pressure in mice. Here, the implantation of an intrauterine telemeter to measure pressure changes in the mouse uterus from mid-pregnancy until delivery is described. By comparing differences in pressures between wild type and transgenic mice, the physiological impact of a gene of interest can be elucidated. This technique should expedite the development of therapeutics used to treat myometrial disorders during pregnancy, including preterm labor.

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.

القياس عن بعد داخل الرحم لقياس ماوس مقلص الضغط<em&gt; في فيفو</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

نضوب خلايا الفأر من Xenografts ورم الإنسان يحسن بشكل ملحوظ تحليل المصب من الخلايا المستهدفة

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Optimized Analysis of In Vivo and In Vitro Hepatic Steatosis

Establishing a system of procedures to qualitatively and quantitatively characterize in vivo and in vitro hepatic steatosis is important for metabolic study in the liver. Here, numerous assays are described to comprehensively measure the phenotype and parameters of hepatic steatosis in mouse and hepatocyte models. 
Combining the physiological, histological, and biochemical methods, this system can be used to assess the progress of hepatic steatosis. In vivo, the measurements of body weight and nuclear magnetic resonance (NMR) provide a general understanding of mice in a non-invasive manner. Hematoxylin and Eosin (H&amp;E) and Oil Red O staining determine the histological morphology and lipid deposition of liver tissue under nutrient overload conditions, such as high-fat diet feeding. Next, the total lipid contents are isolated by chloroform/methanol extraction, which are followed by a biochemical analysis for triglyceride and cholesterol. Moreover, mouse primary hepatocytes are treated with high glucose plus insulin to stimulate lipid accumulation, an efficient in vitro model to mimic diet-induced hyperglycemia and hyperinsulinemia in vivo. Then, the lipid deposition is measured by Oil Red O staining and chloroform/methanol extraction. Oil Red O staining determines intuitive hepatic steatotic phenotypes, while the lipid extraction analysis determines the parameters that can be analyzed statistically. The present protocols are of interest to scientists in the fields of fatty liver diseases, insulin resistance, and type 2 diabetes.

Optimized Analysis of In Vivo and In Vitro Hepatic Steatosis

Here, optimized methods to generate in vivo and in vitro models of hepatic steatosis and to analyze the steatotic phenotypes and related physiological parameters are described.

تحليل الأمثل ل<em&gt; في فيفو</em&gt; و<em&gt; في المختبر</em&gt; كبدي تشحم

Establishing a system of procedures to qualitatively and quantitatively characterize in vivo and in vitro hepatic steatosis is important for metabolic ...

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene and cell therapies are highly promising alternative approaches for CVD treatment. However, the broad clinical application of gene therapy is greatly limited by the lack of suitable gene delivery systems. The development of appropriate gene delivery vectors can provide a solution to current challenges in cell therapy. In particular, existing drawbacks, such as limited efficiency and low cell retention in the injured organ, could be overcome by appropriate cell engineering (i.e., genetic) prior to transplantation. The presented protocol describes the efficient and safe transient modification of endothelial cells using a polyethyleneimine superparamagnetic magnetic nanoparticle (PEI/MNP)-based delivery vector. Also, the algorithm and methods for cell characterization are defined. The successful intracellular delivery of microRNA (miR) into human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) has been achieved without affecting cell viability, functionality, or intercellular communication. Moreover, this approach was proven to cause a strong functional effect in introduced exogenous miR. Importantly, the application of this MNP-based vector ensures cell magnetization, with accompanying possibilities of magnetic targeting and non-invasive MRI tracing. This may provide a basis for magnetically guided, genetically engineered cell therapeutics that can be monitored non-invasively with MRI.

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

This manuscript describes the efficient, non-viral delivery of miR to endothelial cells by a PEI/MNP vector and their magnetization. Thus, in addition to genetic modification, this approach allows for magnetic cell guidance and MRI detectability. The technique can be used to improve the characteristics of therapeutic cell products.

إعداد و<em&gt; في المختبر</em&gt; توصيف ممغنط مير تعديل الخلايا البطانية

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a wide variety of disorders including metabolic diseases, premature aging syndromes, and neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD). Maintenance of mitochondrial health depends on mitochondrial biogenesis and the efficient clearance of dysfunctional mitochondria through mitophagy. Experimental methods to accurately detect autophagy/mitophagy, especially in animal models, have been challenging to develop. Recent progress towards the understanding of the molecular mechanisms of mitophagy has enabled the development of novel mitophagy detection techniques. Here, we introduce several versatile techniques to monitor mitophagy in human cells, Caenorhabditis elegans (e.g., Rosella and DCT-1/ LGG-1 strains), and mice (mt-Keima). A combination of these mitophagy detection techniques, including cross-species evaluation, will improve the accuracy of mitophagy measurements and lead to a better understanding of the role of mitophagy in health and disease.

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

Mitophagy, the process of clearing damaged mitochondria, is necessary for mitochondrial homeostasis and health maintenance. This article presents some of the latest mitophagy detection methods in human cells, Caenorhabditis elegans, and mice.

في المختبر و في فيفو كشف ميتوفاجي في الخلايا البشرية، ايليجانس جيموالفئران

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang (GSK) granules, a marketed prescription in China, have bone-protective effects in treating POP. Before administration to the body, one standard preparation procedure is commonly required, which aims to promote the release of active constituents from raw herbs and enhance the pharmacological effects as well as therapeutic outcomes. This study proposes a detailed protocol for using GSK granules in in vivo and in vitro experimental assays. The authors first provide a detailed protocol to calculate the animal-appropriate dosages of granules for in vivo investigation: weighing, dissolving, storage, and administration. Second, this article describes protocols for micro-CT scanning and the measurement of bone parameters. Sample preparation, protocols for running the micro-CT machine and quantification of bone parameters were evaluated. Third, serum-containing GSK granules are prepared, and drug-containing serum is extracted for in vitro osteoclastogenesis and osteoblastogenesis. GSK granules were intragastrically administered twice per day to rats for three consecutive days. Blood was then collected, centrifuged, inactivated, and filtered. Finally, serum was diluted and used for performing osteoclastogenesis and osteoblastogenesis. The protocol described here can be considered a reference for pharmacological investigations of herbal prescription medicines, such as granules.

Preparation Of Gushukang GSK Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

This article provides a detailed protocol for preparing a working solution of Gushukang granules for animal studies and GSK granule containing serum for in vitro experiments. This protocol can be applied to pharmacological investigations of herbal medicines as well as prescriptions for both in vivo and in vitro experiments.

إعداد حبيبات غوشوكانغ (GSK) للتجارب في الجسم الحي وفي المختبر

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

إعداد الأدوية العشبية: إير-زيان ديكوتيون و إير-زيان التي تحتوي على مصل ل

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

في الجسم الحي ¹⁹ F التصوير بالرنين المغناطيسي لتتبع الخليوي

الحقن الشريان السباتي لوأضافا الدوائية وتحليل Taxanes في الفئران

تقييم فعالية سرطان المخدرات توعية

التحقق من Nanobody والجسم المضاد القائم

القياس عن بعد داخل الرحم لقياس ماوس مقلص الضغط

نضوب خلايا الفأر من Xenografts ورم الإنسان يحسن بشكل ملحوظ تحليل المصب من الخلايا المستهدفة

تحليل الأمثل ل

إعداد و

في المختبر و في فيفو كشف ميتوفاجي في الخلايا البشرية، ايليجانس جيموالفئران

إعداد حبيبات غوشوكانغ (GSK) للتجارب في الجسم الحي وفي المختبر