بروتوكولنا مهم لأنه يوفر أول طريقة كمية سابقة لـ vivo لتقييم الحركة التلقائية للرحم السليم. هذا النهج الجديد يوفر بديلاً سهلاً وأقل تكلفة لاختبار إمكانيات المرخّط من العلاجات التي تحدث بشكل طبيعي في المركبات الاصطناعية. ومن المزايا الرئيسية لهذه التقنية أن جميع التفاعلات الخلوية داخل الرحم تبقى سليمة طوال التجربة.
ويرتبط أكثر من انكماش الرحم مع عسر الطمث, التي قد تكون مفيدة للاسترخاء الرحم للعلاج. توفر هذه الطريقة طريقة سهلة لاختبار المرخّات الجديدة. بعد التأكد من مرحلة الدورة استروس، وضع الماوس في موقف سوبين، وانتشار الأطراف لفضح منطقة الحوض البطن.
الرطب البطن مع 70٪ الإيثانول، واستخدام ملقط لرفع بعناية الجلد متفوقة على البظر. جعل شقوق عرضية صغيرة على الجوانب الجانبية من منطقة البطن السفلي حتى الأطراف العليا لفضح الصفاق. قطع بعناية من خلال البريتوني لفضح الجهاز الهضمي دون إتلاف قرون الرحم، واستخدام ملقط لإزالة اللفافة والأنسجة الدهنية التي تغطي الجهاز الهضمي.
إزالة الاثني، jejunum، ileum، cecum، والصعودية والقولون عرضية. تحديد موقع المثانة البولية لتحديد موقع المهبل الذي تم العثور عليه مباشرة تحت المثانة. تحديد موقع symphysis العانة في التقاء عظام العانة،caudal إلى المثانة، واستخدام مقص لجعل بعناية شق على الجانبين الجانبي من التكافل العانة من خلال الأنسجة الليفية بين العانة للوصول وتوفير مسار لاستخراج المهبل.
قطع من خلال الاطنان الموجود بين فتحة الشرج والجزء السفلي من الفرج، واستخدام ملقط لرفع المهبل للسماح الختان بطيئة من المستقيم. تحديد قرنين الرحم التي bifurcate في شوكة rostrally إلى المهبل وتحديد موقع oviduct معقدة والمبيض في نهاية كل قرن. تحديد قرون الرحم بشكل صحيح أمر بالغ الأهمية لإجراء لضمان عدم تلف الأنسجة.
استخدام مقص تشريح صغيرة لإزالة أي الأربطة التي تتصل ودعم قرون، oviducts والمبايض داخل تجويف البطن، وإزالة المهبل والرحم، oviducts والمبايض. نقل كامل الجهاز التناسلي المعزول إلى طبق بيتري 100 ملليمتر يحتوي على 10 ملليلتر من برنامج تلفزيوني في دولبيككو. استخدام ملقط ومقص الجراحية لإزالة أي النسيج الضام والحماية المحيطة قرون الرحم والمهبل وكذلك أي الفراء في منطقة العانة التي يمكن أن تعوق جودة الصورة.
إزالة الرباط العريض للسماح حركية قرون الرحم وغسل الأنسجة مرتين مع برنامج تلفزيوني Dulbecco الطازجة في غسل قبل نقل الجهاز التناسلي المعزول في طبق بيتري 35 ملليمتر تحتوي على ثلاثة ملليلترات من محلول كريبس المكسج. بالنسبة لتصوير الحركة التلقائي، ضع طبق بيتري على سطح أسود في درجة حرارة الغرفة، واسمح لـ 15 إلى 30 دقيقة للانقباضات العفوية للبدء. عندما يمكن ملاحظة الحركة، تسجيل حركة الرحم التلقائية لمدة 10 دقائق من طائرة محورية باستخدام أي نوع من معدات الفيديو الرقمية.
بعد ذلك، نقل التحضير إلى طبق بيتري يحتوي على عازلة كريبس المؤكسجة المكملة بمركب الاختبار وسجل حركة الرحم العفوية لمدة 10 دقائق إضافية بنفس الطريقة. في نهاية فترة التسجيل، قم بغسل الجهاز التناسلي بأكمله في 10 ملليلتر من PBS في دولبيككو في طبق بيتري 100 ملليمتر، ونقل العينة إلى طبق بيتري جديد من عازل كريبس المكسج حديثا لتقييم عكس العلاج. تسجيل حركة الرحم العفوية لمدة 10 دقائق في نفس الطريقة، كما في التسجيلات الماضيين.
ثم نقل الإعداد إلى آخر 35 ملليمتر طبق بيتري مليئة عازلة كريبس المؤكسجة تكملها السيارة لمجمع الاختبار لضمان عدم وجود تغييرات مستحثة ميكانيكيا في حركة الرحم العفوية. أظهر إعداد الجهاز التناسلي حركية عالية في اللوحات A و C في غياب الإبينفرين. ولكن هذا النمط الظاهري هو نائمة في لوحة B مع وجود واحد ميكرو مولر الابينيفرين.
هنا, يتم عرض تحليل بيانات عينة من الإبينفرين الإدارة والانتعاش الحركة التلقائية, توضح كيف يمكن تحديد آثار الهرمون على الحركة التلقائية الجهاز التناسلي من تسجيلات الأنسجة التي اتخذت قبل, أثناء وبعد العلاج المركب الاختبار. من المهم تجنب ضغط أو الإفراط في تضبيد قرون الرحم وإلا لن يتم ملاحظة أي انكماش عفوي. قد تستخدم طريقتنا أيضًا لاختبار المركبات التي قد تزيد من قابلية الرحم للانقباقد.
يمكن تطبيق هذا الإجراء على الماوس uteri الحوامل في المراحل الأولى من الحمل. هذه التجربة لديها القدرة على الارتقاء إلى شكل ستة لوحة جيدا لفحص الإنتاجية المخدرات.
