يسمح البروتوكول بتمثيل وتحليل غير باضع وعالي الدقة لوظيفة قلب سمك الحمار الوحشي البالغ. يمكن استخدام هذه الطريقة للتحقق من نماذج أمراض القلب للبالغين وشاشات الأدوية المحتملة. تسمح هذه التقنية بالتمركز السريع للأسماك للتصوير الصحيح الذي يوفر نتائج دقيقة وقابلة للتكرار.
ومن غير باضع وتنفيذها تحت الماء الذي يسمح الانتعاش السريع للأسماك. لإعداد منصة للحصول على صورة، واستخدام مقص صغير أو مشرط لجعل شق على اسفنجة في موقف 12:00. ضع الإسفنج في وعاء زجاجي.
باستخدام الشريط على الوجهين، الصق الحاوية الزجاجية التي تحتوي على الإسفنج على منصة الموجات فوق الصوتية. تأكد من أن الحاوية الزجاجية في وسط المنصة ومتعلقة بقوة. إمالة المنصة إلى الأمام حوالي 30 درجة باستخدام مقبض الباب على الجانب الأيسر من حامل المنصة.
ملء حاوية زجاجية مع ما يقرب من 200 ملليلتر من المياه نظام الأسماك التي تحتوي على 0.2 ملليغرام لكل ملليلتر tricaine الميثان. إدراج محول داخل حامل ميكرومانيبولاتور على محطة السكك الحديدية العاملة تحويل درجة من محول نحو المشغل. الحفاظ على مجموعة موازية للأرض مع الجانب العامل الطولي فيما يتعلق المرحلة.
اترك مساحة كافية على كلا الجانبين 10 سنتيمترات لنظام سكة حديد محولات الان متصل للتحرك على طول محاور x و ص. تسجيل الدخول إلى برنامج التحكم واختيار الماوس الأوعية الدموية الصغيرة. إنشاء دراسة جديدة فضلا عن سلسلة جديدة لكل المستحثة في الدراسة.
اضغط على زر الدراسة الجديد الموجود في الجانب الأيسر السفلي من الشاشة على صفحة المتصفح. يبدأ العرض في وضع B. باستخدام شبكة السمك، نقل الأسماك إلى خزان صغير يحتوي على المياه النظام مع 0.2 ملليغرام لكل ملليلتر من tricaine.
انتظر حتى يتم تخدير السمك بالكامل بدون حركة أو عدم استجابة للمس. بلطف وبسرعة نقل الأسماك في وعاء زجاجي مع الاسفنج في شق التي أجريت سابقا مع الجانب البطني من الأسماك التي تواجه ما يصل. خفض بلطف محول باستخدام مقبض على نظام السكك الحديدية وضعه طوليا وإغلاق الجانب البطني من الأسماك مع درجة من محول التي تواجه المشغل.
اترك 2 إلى 3 ملليمترات من إزالة من الأسماك. ضبط منصة فيما يتعلق محول باستخدام ميكرومانبولاتور في جميع المحاور الثلاثة حتى يتم تصور قلب السمك. بعد ترجمة القلب مباشرة، حدد أو البقاء في وضع B والحد من الحقل عن طريق التكبير في تحقيق نظرة فاحصة على القلب.
إذا لزم الأمر، تحسين جودة أو التباين من الصورة عن طريق تعيين النطاق الديناميكي إلى 45 إلى 50 ديسيبل. انتقل إلى عناصر تحكم الوضع B في خيار المزيد من عناصر التحكم ثم احفظ التغيير إلى إعدادات مسبقة لوضع. وضع الضغط المسبقة لوضع لتحديد الصورة الأمثل اقتناء الإعداد في كل مرة قبل البدء في صورة سلسلة جديدة.
التقاط العديد من الصور كما هو مرغوب في الطائرة محور طويل. بعد ذلك، التحول إلى دوبلر اللون للكشف عن تدفق الدم والحيازة. باستخدام شاشة اللمس، ضع الربع فوق الصمام الاتوري والطرني وتوطين التدفق الذي يتميز بإشارة اللون الأحمر.
قم بتقليل مساحة الربع قدر الإمكان لزيادة معدل الإطار. تنشيط نبض موجة دوبلر التحرك إلى عينة سرعة تدفق الدم البطين. ضع بوابة حجم العينة في مركز الصمام الاتريوفيني الكشف عن السرعة القصوى للتدفق.
إشارة اللون الأحمر يصبح أكثر اصفر. ضبط زاوية موجة النبض على الشاشة باستخدام الأصابع بحيث محاذاة مع اتجاه تدفق الدم. اضغط على بدء أو تحديث لبدء أخذ العينات سرعة الدم المتدفقة إلى البطين.
تحديد سرعة تدفق عن طريق وضع رباعي دوبلر اللون عند تقاطع بين البطين وبلص وتوطين تدفق. هذا هو المميز من قبل إشارة اللون الأزرق. ضع بوابة حجم العينة مباشرة قبل تقاطع لمبة البطين واضبط خط تصحيح الزاوية ليتناسب مع اتجاه تدفق الدم.
ضبط خط الأساس رفعه في لوحة سرعة التدفق من أجل الكشف عن تماما وتتبع قمم إشارة. بمجرد اكتمال عملية الحصول على الصورة، استخدم ملعقة صغيرة ونقل الأسماك إلى مياه مهيّنة منتظمة خالية من الترايكايين واترك الأسماك تتعافى. للمساعدة في الانتعاش، وبخ المياه مرارا وتكرارا على الخياشيم باستخدام ماصة نقل لتعزيز تهوية لنقل المياه والأكسجين.
وعادة ما يستغرق 30 ثانية إلى دقيقتين لاستئناف حركة الخياشيم والسباحة. افتح برنامج تحليل الصور. حدد صورة وانقر على أيقونة معالجة الصور.
ضبط سطوع الصورة وتباينها للسماح بالتصور الواضح للجدران البطينية أو نمط تدفق الدم. باستخدام صورة الوضع B، افتح القائمة المنسدلة من خيار المحور الطويل على قياسات حزمة القلب. حدد LV تتبع وتتبع الجدار الداخلي البطيني في systole وdiastole للحصول على منطقة البطين في systole والزابسة وحجم الانبساطي ونهاية حجم الانقباضي.
في هذه الدراسة، سمحت الصور ب-الوضع لتتبع الجدار الداخلي البطيني في systole وdiastole والحصول على البيانات الأبعاد مثل أبعاد الغرفة والجدار. كما تم الحصول على بيانات وظيفية مثل معدل ضربات القلب وحجم السكتة الدماغية، وإخراج القلب وكذلك معلمات وظيفة البطين الانقباضي بما في ذلك تغيير المنطقة الكسرية وكسر الطرد. كما وفرت القياسات على مستوى الصمام البطيني باستخدام صور وضع دوبلر اللون تدفق البطين وسرعات الدم الخارجة.
استنادا إلى صورة دوبلر موجة النبض، ولدت قيمة معدل ضربات القلب عن طريق تتبع ثلاث قمم متتالية تدفق الأبهر. أهم شيء هو وضع منصة الموجات فوق الصوتية والأسماك بشكل صحيح للتصوير الدقيق وتقليل تعرض الأسماك إلى tricaine. وتشمل الطرق الإضافية لدعم هذا الإجراء تخطيط القلب للأسماك للكشف السريع عن خلل القلب مثل عدم انتظام ضربات القلب أو أساليب علم الأنسجة لتقييم بنية أنسجة القلب أو موت الخلايا.
هذه التقنيات تسمح بتقييم وظيفة القلب حمار وحشي وإنشاء نمط ظاهري القلب في نماذج أمراض القلب حمار وحشي. كما أنه يسمح لاختبار أدوية جديدة، ودراسة إصابات القلب والقدرة على التجدد. Tricaine MS-222 هو الجلد والعين، ومهيجة الجهاز التنفسي.
عند إعداد حل tricaine، يجب أن تشمل معدات الحماية قناع الغبار، درع العين والقفازات.
