يسمح هذا البروتوكول للباحثين بفحص آثار الإجهاد المزمن على الاستجابة الجهود في كل من الفئران الذكور والإناث. ميزة من هذه التقنية هو أن كلا من الفئران الذكور والإناث يمكن أن تخضع في وقت واحد نموذج الهزيمة الاجتماعية المزمنة التحقق من صحة تسمح السلوكيات مكافأة أن تكون مقارنة مباشرة. تاريخيا، استخدمت البحوث قبل إكلينيكية في اضطرابات المزاج المهام السلوكية التي تنطوي على تجنب البيئات تهديد.
ومع ذلك، فإن مهام المكافأة والتحفيز، مثل الاختيار المرتبط بالجهد، قد توفر أهمية أكثر ترجمة. لتحضير حل السيارة، قم بحل 3.375 جرام من بيتا-سيكليكستروين في 750 ملليلتر من ماء الصنبور في وعاء زجاجي علوي من أعلى اللورات سعة لتر واحد. لتحضير محلول الكورتيكوستيرون، قم بإذابة 3.375 جرام من بيتا-سيكليكستروين في 750 ملليلتر من ماء الصنبور، تليها إضافة 26.25 ملليغرام من الكورتيكوستيرون.
حل الكورتيكوستيرون في محلول في حمام ماء أنظف بالموجات فوق الصوتية لمدة 30 دقيقة تقريبا في 40 كيلوهيرتز حتى السائل يدل على مظهر واضح، ثم ملء زجاجات المياه من السيارة ومجموعة الماوس كورتيكوستيرون مع الحلول المناسبة وتسجيل حجم السائل المستهلكة مرتين في الأسبوع. لتعود الفئران إلى Y المتاهة، في اليوم التالي للحرمان من الطعام ، ضع عددًا كبيرًا من حبيبات الطعام القائمة على الحبوب 20 ملليغرامًا في قبعات أنبوبي طرد مركزي سعة 50 ملليلتر ووضع قبعة واحدة في نهاية كل ذراع من متاهة Y ، ثم ضع فأرًا في مربع البداية في Y-maze مع مقسم مربع البداية في مكانه لبضع ثوانٍ قبل إزالة المقسم والسماح للماوس باستكشاف متاهة Y لـ 15 دقائق. بعد يومين من التعود Y-متاهة، مكان الكريات في قبعة لذراع مكافأة عالية ووضع اثنين من الكريات في قبعة لذراع مكافأة منخفضة.
للحصول على مكافأة عالية محاكمة الاختيار القسري، منع الوصول إلى الذراع مكافأة منخفضة ووضع الماوس في مربع البداية لبضع ثوان قبل إزالة المقسم، والسماح للماوس 60 ثانية لدخول الذراع مكافأة عالية لاستهلاك الكريات المتاحة. للحصول على محاكمة اختيار إجباري لمكافأة منخفضة ، منع الوصول إلى ذراع المكافأة العالية. للتدريب على الاختيار الحر، ابدأ كل جلسة بإحدى الجلسات عالية وأخرى منخفضة الذراع تجريبية الاختيار القسري قبل إكمال 10 تجارب الاختيار الحر.
السماح للماوس لتحديد ذراع المتاهة إما. مرة واحدة قد سافر الماوس إلى نهاية الذراع إلى قبعة الكريات، ووضع مقسم الذراع وراء الماوس، وتأمين في الحيوان حتى أنها قد استهلكت الكريات. سجل الذراع الذي يتم تحديده لجميع التجارب 10 الاختيار الحر يوميا.
مرة واحدة وقد اختار الماوس الذراع مكافأة عالية ل 7 من أصل 10 تجارب في يوم التدريب الاختيار الحر، ووضع حاجز 10 سم في منتصف الطريق أسفل الذراع مكافأة عالية في Y-المتاهة وأداء ما لا يقل عن اثنين من التجارب الذراع العالية والمنخفضة الاختيار القسري مع الحاجز في مكان. بعد الانتهاء من جميع التجارب الأربع، ضع الفأر في مربع البداية واسمح للماوس باختيار ذراع لـ 10 تجارب اختيار حر مع حاجز 10 سنتيمتر لذراع المكافأة العالية في المكان. في اليوم التالي، اعتادوا واختبار الماوس كما هو موضح، ولكن استخدام حاجز 15 سم في الذراع مكافأة عالية.
في اليوم التالي، اختبار الماوس مع حاجز 20 سم كما هو موضح. بالنسبة لاختبار الإجهاد المزمن غير التمييزي ، محاذاة أقفاص الذكور CD1 مع C57BL/6J ذكور والإناث مع أقفاص CD1 في الجبهة وأقفاص C57BL/6J المجاورة للفئران الذكور CD1 في غرفة الهزيمة الاجتماعية. لبدء المحاكمة، ضع رجل بالغ واحد وأنثى بالغة الماوس التجريبي C57BL/6J في القفص المنزلي لكل ذكر معتدي CD1 لجلسة هزيمة اجتماعية مدتها خمس دقائق وسجل الكمون الهجومي وتواتر الهجوم لكل من الحيوانات التجريبية من الذكور والإناث.
في نهاية الدورة، نقل الماوس C57BL/6J الذكور إلى قفص من الذكور CD1 المشتركة في الإقامة مفصولة حاجز زجاج شبكي مثقب واضح. فصل مهاجمة CD1 وأنثى C57BL/6 الفئران مع حاجز الزجاج الضبي مثقبة مماثلة واضحة. لجلسة التحكم، ضع فأرة تحكم واحدة في القفص المنزلي للماوس C57BL/6 من نوع C57BL/6.
بعد خمس دقائق، ضع مقسم زجاج شبكي مثقوب واضح بين الحيوانات. في نهاية التجربة الأولى، تدوير الفئران لدورات الهزيمة التسع المتبقية، بحيث يتم تدوير كل زوج C57BL/6 ذكور وأنثى قفص واحد إلى اليسار لتوفير تفاعل جديد مع ماوس CD1 رواية لكل جلسة. الكورتيكوستيرون المزمن والهزيمة الاجتماعية المزمنة غير التمييزية الفئران الإجهاد على حد سواء المعرض انخفاض متوسط وزن الجسم مقارنة مع السيارات والحيوانات السيطرة.
هذه الفئران أيضا تستهلك أقل يعني المنزل قفص تشاو مختبر. تستهلك الفئران التي تديرها المركبات والكورتيكوستيرون حجمًا مماثلًا من السائل على مدار أربعة أسابيع من العلاج وثلاثة أسابيع من اختبار السلوك. الإجهاد المزمن الهزيمة الاجتماعية غير التمييزية تنتج نمط ظاهري غير مثير في الفئران عرضة بالمقارنة مع الفئران إما مرنة أو السيطرة على الفئران غير المعرضة لهزيمة اجتماعية مزمنة غير تمييزية الإجهاد عرض انخفاض في الوقت الذي يقضيه في منطقة التفاعل تحتوي على رواية ماوس CD1.
كل من الكورتيكوستيرون المزمن والهزيمة الاجتماعية المزمنة فئران الإجهاد تنتج تحولا في الاستجابة جهد عندما يرتفع ارتفاع الحاجز إلى 15 و 20 سنتيمترا. ارتفاع وانخفاض المكافأة ذراع الكمون مع حاجز 15 سنتيمترا لا يتأثر إدارة كورتيكوستيرون ويشبه لكلا المجموعتين مع كل من الأسلحة مكافأة منخفضة وعالية. الأهم من ذلك، إذا كان الكورتيكوستيرون المزمن أو الإجهاد المزمن الهزيمة الاجتماعية غير التمييزية يضعف التعلم من مهمة حاجز Y-متاهة، قد تفشل هذه الفئران للوصول إلى المعيار في دورات التدريب الاختيار الحر، مما يؤثر على تفسير نتيجة الحاجز اللاحقة.
وبالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام مهمة التفاعل الاجتماعي لتقسيم الفئران إلى مجموعات مرنة وعرضة، وكذلك حسب الجنس. عند إجراء المهمة حاجز Y-المتاهة، فمن الأهمية بمكان لتسجيل كل من الذراع المختارة والكمون للوصول إلى مكافأة بيليه الغذاء في كل محاكمة الفردية. ويمكن تنفيذ السلوكيات الأخرى ذات الصلة بالمكافأة الهامة والملائمة، مثل تخفيض قيمة الناتج أو النسبة التدريجية، بعد الهزيمة الاجتماعية المزمنة من الكورتيكوستيرون أو بروتوكولات الهزيمة الاجتماعية المزمنة غير التمييزية.
