نحن ممتنون للدعم المالي المقدم من مؤسسة العلوم الطبيعية بمقاطعة شنشي (رقم المنحة 2021SF-118) والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (أرقام المنح 81973409 82204631).

تم شراء من جامعة شيان جياوتونغ. تمت الموافقة على جميع إجراءات التجارب على من قبل اللجنة المؤسسية لأخلاقيات بجامعة Xi'an Jiaotong (رقم الموافقة: SCXK [Shaanxi] 2021-103). تم الاحتفاظ بالفئران لمدة أسبوع واحد مع 5 فئران لكل قفص. وسمح لهم بحرية الحصول على الطعام والماء. تم الحفاظ على في درجة حرارة الغرفة (RT ؛ 24 درجة مئوية ± 1 درجة مئوية) ودورة الضوء / الظلام (12 ساعة / 12 ساعة) قبل إجراء الدراسة.
1. إعداد المخزن المؤقت والمعدات
<ol><li>جيم - زراعة خلايا البيض<ol><li>تلقيح مستعمرة وحيدة النسيلة من C. albicans (SC5314) من وسط صفيحة مستخلص الخميرة بيبتون دكستروز (YPD) مع حلقة تلقيح إلى 5 مل من وسط سائل YPD (YPD + 50 ميكروغرام / مل كاربينيسيلين).</li>
		<li>هز خلايا C. albicans بعد ذلك بسرعة 220 دورة في الدقيقة عند 30 درجة مئوية طوال الليل.</li>
		<li>جهاز طرد مركزي التعليق عند 400 × جم لمدة 5 دقائق في RT. أعد تعليق خلايا C. albicans في محلول ملحي عادي وقم بتخفيف تركيز الخلايا إلى 1 × 106 خلايا / مل عن طريق ضبط التعكر بصريا ليكون هو نفسه 0.5 McFarland.</li>
	</ol></li>
	<li>تحضير محلول ملحي طبيعي<ol><li>تزن 0.9 جم من كلوريد الصوديوم وتذوب في 100 مل من الماء منزوع الأيونات لتحضير محلول ملحي طبيعي بنسبة 0.9٪.</li>
	</ol></li>
	<li>إعداد الأدوات الجراحية<ol><li>الأوتوكلاف (121 درجة مئوية ، 30 دقيقة) الأدوات الجراحية (مقص ، ملقط ، ملقط مرقئ ، حاملات إبرة ، إبر خياطة) وسلك سبائك التيتانيوم والنيكل (قطرها حوالي 0.5 مم) قبل الاستخدام.</li>
	</ol></li>
</ol>2. إنشاء نموذج PJI الماوس
<ol><li>قسم عشوائيا 30 C57BL / 6 فئران (ذكر ، 15-20 جم) إلى 3 مجموعات (10 فئران / مجموعة) ، وهي المجموعة الضابطة ، ومجموعة الزرع الفارغة (زرع سلك التيتانيوم والنيكل بدون عدوى C. albicans ) ، ومجموعة PJI (زرع سلك التيتانيوم والنيكل مع عدوى C. albicans ).</li>
	<li>تخدير الفئران باستنشاق الأيزوفلوران بنسبة 1-4٪ قبل إزالة الشعر على الطرف الخلفي الأيسر وتطهيره باليود. يؤكد فقدان رد الفعل الصحيح وعدم الاستجابة لتحفيز إصبع القدم عمق التخدير. أثناء التخدير ، ضع مرهم العيون على كلتا العينين لمنع جفاف القرنية وتجديد الحرارة أثناء الجراحة والتعافي.</li>
	<li>بالنسبة للفئران في المجموعة الضابطة ، لا تقدم أي علاج. وفر لهم حرية الحصول على الماء والغذاء.</li>
	<li>بالنسبة للفئران في مجموعة الزرع الفارغة ومجموعة PJI ، قم بعمل شق طولي 5 مم على ركبة كل طرف خلفي أيسر بشفرة #10 أو ماكينة حلاقة معقمة لكشف المفاصل.</li>
	<li>اصنع ثقبا بطول 5 مم في القناة داخل الفخذ عن طريق إدخال إبرة حقنة معقمة (26 جم).</li>
	<li>أدخل سلكا ناعما من سبائك النيكل والتيتانيوم (قطره 0.5 مم وطوله 5 مم) في الفتحة قبل قطعه بالمقص (الشكل 1).</li>
	<li>بالنسبة للفئران في مجموعة الغرسات الفارغة ، أضف 2 ميكرولتر من وسط YPD على طول سلك سبائك النيكل والتيتانيوم قطرة قطرة قبل إغلاق طبقة الجرح بطبقة باستخدام خياطة نايلون (قطر 0.15 مم).</li>
	<li>بالنسبة للفئران في مجموعة PJI ، قم بتلقيح 2 ميكرولتر من خلايا C. albicans (1 × 106 خلايا / مل) في الفضاء المشترك للفئران على طول سلك سبائك النيكل والتيتانيوم قطرة قطرة قبل إغلاق طبقة الجرح بطبقة باستخدام خياطة النايلون.</li>
	<li>إيواء الفئران مع حرية الوصول إلى الماء والطعام لمدة 14 يوما. يجب تطبيق ميلوكسيكام عن طريق الحقن تحت الجلد (4 ملغ/ كغ) كل 24 ساعة لمدة تصل إلى 3 أيام.</li>
	<li>بعد 14 يوما ، قم بتخدير الفئران بنسبة 3٪ إيزوفلوران قبل القتل الرحيم للفئران عن طريق خلع عنق الرحم.</li>
</ol>3. تقييم نموذج PJI
<ol><li>تقييم الالتهابات في الأعضاء الرئيسية<ol><li>جمع الكلى والكبد والطحال من الفئران بعد القتل الرحيم.</li>
		<li>أضف 500 ميكرولتر من محلول ملحي طبيعي معقم في كل عضو وطحن الأنسجة على الخالط عند 4 درجات مئوية.</li>
		<li>أضف 100 ميكرولتر من المجانسة المحضرة في الخطوة 3.1.2 إلى لوحة YPD قبل نشرها بالتساوي بقضيب منحني.</li>
		<li>ضع ألواح YPD مقلوبة في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة.</li>
		<li>مراقبة وحساب عدد المستعمرات بصريا.</li>
	</ol></li>
	<li>مراقبة المطثية البيضاء والأغشية الحيوية على الغرسات<ol><li>قطع بعناية الجلد على مفصل الفئران بالمقص قبل جمع الغرسة بالملاقط.</li>
		<li>حافظ على الغرسات مغمورة في محلول غلوتارالدهيد 2.5٪ للتثبيت عند 4 درجات مئوية لمدة 48 ساعة.</li>
		<li>شطف الغرسات مع برنامج تلفزيوني معقم ثلاث مرات قبل غمرها في محلول حمض الأوزميوم 1 ٪ لمدة 3 ساعات.</li>
		<li>شطف الغرسات مع برنامج تلفزيوني معقم ثلاث مرات قبل غمرها في 50٪ ، 70٪ ، 80٪ ، 90٪ ، و 100٪ من محاليل الإيثانول لمدة 15 دقيقة للجفاف.</li>
		<li>احتفظ بالغرسات مغمورة في ثلاثي البيوتانول لمدة 30 دقيقة ثلاث مرات قبل تجفيف الغرسات بالتجميد.</li>
		<li>ثبت عينات الزرع في مرحلة العينة ، وقم بتغطية الغرسة بالذهب (طلاء 10 نانومتر) ، وراقبها تحت المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) تحت فراغ عالي و 1.5 كيلو فولت.</li>
	</ol></li>
	<li>التحليل المرضي لأنسجة عظم الفخذ<ol><li>جمع أنسجة الفخذ مع مقص بعد القتل الرحيم الفئران.</li>
		<li>اغمر أنسجة عظم الفخذ في محلول بارافورمالدهيد 4٪ للتثبيت عند 4 درجات مئوية لمدة 48 ساعة.</li>
		<li>ضع أنسجة عظم الفخذ في 10 ٪ الفورمالين لمدة 1 أسبوع.</li>
		<li>قم بتجفيف أنسجة عظم الفخذ عن طريق غمرها في محاليل الإيثانول بنسبة 50٪ و 70٪ و 80٪ و 90٪ و 100٪ لمدة 15 دقيقة على التوالي.</li>
		<li>قم بتضمين أنسجة عظم الفخذ المجففة في البارافين قبل تقسيم الأنسجة إلى عينات 4 ميكرومتر باستخدام ميكروتوم.</li>
		<li>تلطيخ أقسام عظم الفخذ مع الهيماتوكسيلين ويوزين باتباع بروتوكول قياسي قبل التحليل المرضي21.</li>
	</ol></li>
</ol>

إنشاء نموذج ماوس ل PJI المتعلق بالأغشية الحيوية المبيضات البيض

<ol>
	<li>Mayer, F. L., Wilson, D., Hube, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+pathogenicity+mechanisms.">Candida albicans pathogenicity mechanisms.</a> Virulence. 4 (2), 119-128 (2013).</li><li>Fan, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+biofilms:+antifungal+resistance,+immune+evasion,+and+emerging+therapeutic+strategies.">Candida albicans biofilms: antifungal resistance, immune evasion, and emerging therapeutic strategies.</a> International Journal of Antimicrobial Agents. 60 (5-6), 106673 (2022).</li><li>Tong, Y., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+infection+and+intestinal+immunity.">Candida albicans infection and intestinal immunity.</a> Microbiological Research. 198, 27-35 (2017).</li><li>Kanaguchi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+salivary+protein+flow+and+indigenous+microorganisms+on+initial+colonization+of+Candida+albicans+in+an+in+vivo+model.">Effects of salivary protein flow and indigenous microorganisms on initial colonization of Candida albicans in an in vivo model.</a> Bmc Oral Health. 12, 36 (2012).</li><li>Gulati, M., Nobile, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+biofilms:+development,+regulation,+and+molecular+mechanisms.">Candida albicans biofilms: development, regulation, and molecular mechanisms.</a> Microbes and Infection. 18 (5), 310-321 (2016).</li><li>Douglas, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+biofilms+and+their+role+in+infection.">Candida biofilms and their role in infection.</a> Trends in Microbiology. 11 (1), 30-36 (2003).</li><li>Nobile, C. J., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+biofilms+and+human+disease.">Candida albicans biofilms and human disease.</a> Annual Review of Microbiology. 69, 71-92 (2015).</li><li>Mack, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilm+formation+in+medical+device-related+infection.">Biofilm formation in medical device-related infection.</a> The International Journal of Artificial Organs. 29 (4), 343-359 (2006).</li><li>Miller, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periprosthetic+joint+infection:+A+review+of+antibiotic+treatment.">Periprosthetic joint infection: A review of antibiotic treatment.</a> JBJS Reviews. 8 (7), e1900224 (2020).</li><li>Brown, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periprosthetic+joint+infection+with+fungal+pathogens.">Periprosthetic joint infection with fungal pathogens.</a> The Journal of Arthroplasty. 33 (8), 2605-2612 (2018).</li><li>Kojic, E. M., Darouiche, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+infections+of+medical+devices.">Candida infections of medical devices.</a> Clinical Microbiology Reviews. 17 (2), 255-267 (2004).</li><li>Schoof, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fungal+periprosthetic+joint+infection+of+the+hip:+a+systematic+review.">Fungal periprosthetic joint infection of the hip: a systematic review.</a> Orthopedic Reviews (Pavia). 7 (1), 5748 (2015).</li><li>Izakovicova, P., Borens, O., Trampuz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periprosthetic+joint+infection:+current+concepts+and+outlook.">Periprosthetic joint infection: current concepts and outlook.</a> EFORT Open Reviews. 4 (7), 482-494 (2019).</li><li>Tande, A. J., Patel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prosthetic+joint+infection.">Prosthetic joint infection.</a> Clinical Microbiology Reviews. 27 (2), 302-345 (2014).</li><li>Stocks, G., Janssen, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+in+patients+after+implantation+of+an+orthopedic+device.">Infection in patients after implantation of an orthopedic device.</a> ASAIO Journal. 46 (6), S41-S46 (2000).</li><li>Shahi, A., Tan, T. L., Chen, A. F., Maltenfort, M. G., Parvizi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-hospital+mortality+in+patients+with+periprosthetic+joint+infection.">In-hospital mortality in patients with periprosthetic joint infection.</a> The Journal of Arthroplasty. 32 (3), 948-952 (2017).</li><li>Carli, A. V., Ross, F. P., Bhimani, S. J., Nodzo, S. R., Bostrom, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+a+clinically+representative+model+of+periprosthetic+joint+infection.">Developing a clinically representative model of periprosthetic joint infection.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. 98 (19), 1666-1676 (2016).</li><li>Stavrakis, A. I., Niska, J. A., Loftin, A. H., Billi, F., Bernthal, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+infection:+A+primer+on+animal+models+of+periprosthetic+joint+infection.">Understanding infection: A primer on animal models of periprosthetic joint infection.</a> The Scientific World Journal. 2013, 925906 (2013).</li><li>Qiao, B., Lv, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrochemical+investigation+of+interaction+of+candida+albicans+with+titanium-nickel+implant+in+human+saliva.">Electrochemical investigation of interaction of candida albicans with titanium-nickel implant in human saliva.</a> International Journal of Electrochemical Science. 17 (2), 22028 (2022).</li><li>Oh, Y. R., Ku, H. M., Kim, D., Shin, S. J., Jung, I. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+a+Nickel-titanium+ultrasonic+instrument+for+biofilm+removal+in+a+simulated+complex+root+canal.">Efficacy of a Nickel-titanium ultrasonic instrument for biofilm removal in a simulated complex root canal.</a> Materials. 13 (21), 4914 (2020).</li><li>Feldman, A. T., Wolfe, D., Christina E, D. a. y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Processing+and+Hematoxylin+and+Eosin+Staining.">Tissue Processing and Hematoxylin and Eosin Staining.</a> Histopathology: Methods and Protocols. , 31-43 (2014).</li><li>Sinclair, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+development+for+determining+the+efficacy+of+a+combination+coating+for+the+prevention+of+perioperative+device+related+infections:+A+pilot+study.">Model development for determining the efficacy of a combination coating for the prevention of perioperative device related infections: A pilot study.</a> Journal of Biomedical Materials Research - Part B Applied Biomaterials. 101 (7), 1143-1153 (2013).</li><li>Mo, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+effects+of+the+combination+of+myricetin+and+miconazole+nitrate+incorporated+to+thermosensitive+hydrogels,+on+C.+albicans+biofilms.">In vitro and in vivo effects of the combination of myricetin and miconazole nitrate incorporated to thermosensitive hydrogels, on C. albicans biofilms.</a> Phytomedicine. 71, 153223 (2020).</li><li>Zahar, A., Sarungi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+management+of+the+infected+total+knee+replacement:+a+practical+surgical+guide.">Diagnosis and management of the infected total knee replacement: a practical surgical guide.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 8 (1), 14 (2021).</li><li>Parvizi, J., Jacovides, C., Zmistowski, B., Jung, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+periprosthetic+joint+infection:+Is+there+a+consensus.">Definition of periprosthetic joint infection: Is there a consensus.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 469 (11), 3022-3030 (2011).</li><li>Karczewski, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+periprosthetic+joint+infections+-+risk+factors+and+outcome+between+albicans+and+non-albicans+strains.">Candida periprosthetic joint infections - risk factors and outcome between albicans and non-albicans strains.</a> International Orthopaedics. 46 (3), 449-456 (2022).</li><li>Cobo, F., Rodriguez-Granger, J., Sampedro, A., Aliaga-Martinez, L., Navarro-Mari, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+prosthetic+joint+infection.+A+review+of+treatment+methods.">Candida prosthetic joint infection. A review of treatment methods.</a> Journal of Bone and Joint Infection. 2 (2), 114-121 (2017).</li><li>Cobrado, L., Silva-Dias, A., Azevedo, M. M., Pina-Vaz, C., Rodrigues, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+antibiofilm+effect+of+cerium,+chitosan+and+hamamelitannin+against+usual+agents+of+catheter-related+bloodstream+infections.">In vivo antibiofilm effect of cerium, chitosan and hamamelitannin against usual agents of catheter-related bloodstream infections.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 68 (1), 126-130 (2013).</li><li>Vila, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+implications+of+C.+albicans-S.+aureus+mixed+biofilm+in+a+murine+subcutaneous+catheter+model+of+polymicrobial+infection.">Therapeutic implications of C. albicans-S. aureus mixed biofilm in a murine subcutaneous catheter model of polymicrobial infection.</a> Virulence. 12 (1), 835-851 (2021).</li><li>Nishitani, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+the+natural+history+of+biofilm+formation+in+vivo+during+the+establishment+of+chronic+implant-associated+Staphylococcus+aureus+osteomyelitis+in+mice+to+identify+critical+pathogen+and+host+factors.">Quantifying the natural history of biofilm formation in vivo during the establishment of chronic implant-associated Staphylococcus aureus osteomyelitis in mice to identify critical pathogen and host factors.</a> Journal of Orthopaedic Research. 33 (9), 1311-1319 (2015).</li><li>Ormsby, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+osteocyte-media+ted+bone-matrix+degradation+associated+with+periprosthetic+joint+infection+(PJI).">Evidence for osteocyte-media ted bone-matrix degradation associated with periprosthetic joint infection (PJI).</a> European Cells &amp; Materials. 42, 264-280 (2021).</li><li>Garlito-D&#237;az, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+antifungal-loaded+sol-gel+can+prevent+candida+albicans+prosthetic+joint+infection.">A new antifungal-loaded sol-gel can prevent candida albicans prosthetic joint infection.</a> Antibiotics (Basel). 10 (6), 711 (2021).</li><li>Harro, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+and+rapid+antibody-based+diagnostic+for+chronic+staphylococcus+aureus+infections+based+on+biofilm+antigens.">Development of a novel and rapid antibody-based diagnostic for chronic staphylococcus aureus infections based on biofilm antigens.</a> Journal of Clinical Microbiology. 58 (5), e01414-e01419 (2020).</li></ol>

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة معروفة أو علاقات شخصية يمكن أن يبدو أنها تؤثر على العمل المذكور في هذه الورقة.

العدوى الناجمة عن تلوث الأدوات الجراحية أو البيئة الجراحية أثناء الجراحة هي السبب الرئيسي لمعظم التهابات الزرع24،25،26،27. لذلك ، تم بناء نموذج PJI المرتبط بالأغشية الحيوية للفأر C. albicans في هذه الدراسة. مقارنة بنموذج PJI...

المبيضات البيض (C. albicans) يقيمون بشكل مشترك في أجزاء كثيرة من جسم الإنسان1 ، وهو أيضا أكثر مسببات الأمراض الانتهازية شيوعا التي تسبب الالتهابات الفطرية الغازية التي تهدد الحياة ، خاصة في المرضى الذين يعانون من نقص المناعة 2,3. يمكن أن تتحول C. albicans بين حالات الخميرة والفطريات كفطر متعدد الأشكال. تظهر حالة الفطريات ضراوة أعلى ، والتصاق أقوى ، وغزو الخلايا والأنسجة 4,5. إلى جانب ذلك ، يمكن أن تشكل C. albicans الأغشية الحيوية على أسطح المواد الطبية الحيوية مثل أطقم الأسنان والقسطرة والدعامات1،6،7. يقيد الهيكل الكثيف ثلاثي الأبعاد للأغشية الحيوية تسلل الأدوية المضادة للفطريات ، ويعبر عن الجينات المقاومة للأدوية ، وينظم عملية التمثيل الغذائي للخلايا الفطرية لمقاومة إزالة الجهاز المناعي 6,7. لذلك ، فإن العدوى المرتبطة بالأغشية الحيوية تمثل تحديا كبيرا في العيادات8.
المكورات العنقودية الذهبية والمكورات العنقودية سلبية التخثر والبكتيريا المعوية هي مسببات الأمراض الرئيسية التي تسبب PJI9. على الرغم من أن حدوث PJI الفطري منخفض نسبيا (حوالي 1٪) 10 ، إلا أن تكلفة علاج PJI الفطرية أعلى11 ، ودورة العلاج أطول11 ، ومعدل نجاح العلاج أقل10 من PJI البكتيري. في السنوات الأخيرة ، ازداد معدل الإصابة ب PJI الفطري عاما بعد عام10. المبيضات PJI تمثل 77 ٪ -84 ٪ من PJI الفطرية10،12 ، و C. البيض هو الأكثر شيوعا في المبيضات (54 ٪). لذلك ، يجب دراسة PJI الفطرية.
حاليا ، يتم علاج PJI عن طريق جراحة المراجعة عن طريق (1) إزالة الغرسة المصابة ، (2) التنضير ، (3) العلاج المضاد للميكروبات ، و (4) إعادة الزرع. بعد التنضير الشامل ، يتم وضع مضاد حيوي يحتوي على الأسمنت العظمي ، ويتم علاج المريض بالمضادات الحيوية بشكل منهجي لأكثر من 6 أسابيع للسيطرة بشكل فعال على العدوى قبل وضع غرسة جديدة13. ومع ذلك ، لا يمكن لهذه الطريقة القضاء تماما على مسببات الأمراض في الأنسجة ، ومن المرجح جدا أن تتطور العدوى المتكررة المعالجة بالعلاج المضاد للميكروبات على المدى الطويل في السلالات المقاومة للأدوية14،15،16.
يعد إنشاء نماذج حيوانية ل PJI أمرا مهما للبحث والتطوير في أدوية أو علاجات جديدة ل PJI. في تطور PJI ، تتشكل مساحات ميتة كبيرة حول الطرف الاصطناعي ، مما يؤدي إلى تكوين أورام دموية ، مما يزيد من منع تدفق الدم للأنسجة المحيطة ويضعف تأثير المضادات الحيوية11,15. نظرا لصعوبة محاكاة البيئة المحيطة بالطرف الاصطناعي ، لا يمكن للنماذج الحيوانية التقليدية محاكاة الوضع الفعلي ل PJI17,18 بدقة.
في هذه الورقة ، تم إنشاء نموذج PJI المرتبط بالأغشية الحيوية C. albicans في الفئران باستخدام سلك التيتانيوم والنيكل المستخدم سريريا على نطاق واسع لمحاكاة غرسات المفاصل19،20. يعرض نموذج PJI هذا مزايا التشغيل السهل ، ومعدل النجاح العالي ، والتكرار العالي ، والارتباط السريري العالي. ومن المتوقع أن يكون نموذجا هاما لدراسة الوقاية والعلاج من PJI المرتبط بالأغشية الحيوية C. albicans .

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 Mactutrius turbidibris</td>
			<td>Shanghai Lujing Technology Co., Ltd</td>
			<td>5106063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 &#176;C refrigerator</td>
			<td>Electrolux (China) Electric Co., Ltd</td>
			<td>ESE6539TA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd</td>
			<td>01-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical balances</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td>ATX124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclaves Sterilizer</td>
			<td>SANYO</td>
			<td>MLS-3750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbenicillin</td>
			<td>Amresco</td>
			<td>C0885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eclipse Ci Nikon upright optical microscope&#160;</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Eclipse Ts2-FL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Macklin&#160;</td>
			<td>D823520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inoculation ring</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>251586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>20210103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Xi&#39;an Jingxi Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd</td>
			<td>20180108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Beyotime Biotechnology</td>
			<td>P0099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>Beijing Aoboxing Bio-tech Co., Ltd</td>
			<td>01-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RWD R550 multi-channel small animal anesthesia machine&#160;</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R550</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SEM</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>TM-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature incubator</td>
			<td>Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd</td>
			<td>ZQTY-50N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water water generator</td>
			<td>Heal Force</td>
			<td>NW20VF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound machine</td>
			<td>Do-Chrom</td>
			<td>DS10260D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>Thermo Scientific&#160;Oxoid</td>
			<td>LP0021B</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a periprosthetic joint candida albicans infection model in mouse

عدوى المفصل حول الأطراف الاصطناعية (PJI) هي واحدة من الالتهابات الشائعة التي تسببها المبيضات البيض (C. albicans) ، والتي تهم الجراحين والعلماء بشكل متزايد. بشكل عام ، تتشكل الأغشية الحيوية التي يمكن أن تحمي C. albicans من المضادات الحيوية والتخليص المناعي في موقع الإصابة. الجراحة التي تنطوي على إزالة الغرسة المصابة ، والتنضير ، والعلاج المضاد للميكروبات ، وإعادة الزرع هي المعيار الذهبي لعلاج PJI. وبالتالي ، فإن إنشاء نماذج PJI الحيوانية له أهمية كبيرة للبحث والتطوير في مجال الأدوية أو العلاجات الجديدة ل PJI. في هذه الدراسة ، تم إدخال سلك من سبائك النيكل والتيتانيوم الأملس ، وهو زرع يستخدم على نطاق واسع في عيادات تقويم العظام ، في المفصل الفخذي للفأر C57BL / 6 قبل تلقيح C. albicans في التجويف المفصلي على طول السلك. بعد 14 يوما ، لوحظت الأغشية الحيوية الناضجة والسميكة على سطح الغرسات تحت المجهر الإلكتروني الماسح (SEM). تم العثور على ترابيق عظمي منخفض بشكل كبير في تلطيخ H& E لعينات المفاصل المصابة. باختصار ، تم إنشاء نموذج PJI للماوس مع مزايا التشغيل السهل ، ومعدل النجاح العالي ، والتكرار العالي ، والارتباط السريري العالي. من المتوقع أن يكون هذا نموذجا مهما للدراسات السريرية للوقاية من الأغشية الحيوية ذات الأغشية الحيوية C. albicans .

Candida albicans (C. albicans) commensally reside in many parts of the human body1, which is also the most common opportunistic pathogen that causes life-threatening invasive fungal infections, especially in immunocompromised patients2,3. C. albicans can transform between yeast and mycelium states as a polymorphic fungus. The mycelium state exhibits higher virulence, stronger adhesion, and invasion of cells and tissues4,5. Besides, C. albicans can form biofilms on the surfaces of biomedical materials such as dentures, catheters, and stents1,6,7. The dense three-dimensional structure of biofilms restricts the infiltration of antifungal drugs, expresses drug-resistant genes, and down-regulates the metabolism of fungal cells to resist immune system clearance6,7. Therefore, biofilms-related infections&#160;are quite challenging in clinics8.
Staphylococcus aureus, coagulase-negative staphylococcus, and enterobacter are the main pathogens causing PJI9. Although the incidence of fungal PJI is relatively low (about 1%)10, the treatment cost of fungal PJI is higher11, the treatment cycle is longer11, and the treatment success rate is lower10 than bacterial PJI. In recent years, the incidence of fungal PJI has been increasing year-by-year10. Candida PJI accounts for 77%-84% of fungal PJI10,12, and C. albicans is the most common in Candida (54%). Therefore, fungal PJI needs to be studied.
Currently, PJI is treated via revision surgery by (1) removing the infected implant, (2) debridement, (3) antimicrobial treatment, and (4) reimplantation. After thorough debridement, an antibiotic containing bone cement is placed, and the patient is treated with antibiotics systemically for more than 6 weeks to effectively control the infection before a new implant is placed13. However, this method cannot fully eliminate pathogens in tissues, and recurrent infections treated with long-term antimicrobial therapy are highly likely to develop in drug-resistant strains14,15,16.
Establishing animal models of PJI is important for the research and development of new drugs or therapeutics for PJI. In the development of PJI, large dead spaces are formed around the prosthesis, leading to the formation of hematomas, which further block the blood supply of the surrounding tissues and impair the effect of antibiotics11,15. Due to the difficulty in mimicking the surrounding environment of the prosthesis, traditional animal models cannot accurately simulate the actual situation of PJI17,18.
In this paper, a C. albicans biofilm-associated PJI model in mice was constructed by using a clinically widely used titanium-nickel wire to simulate joint implants19,20. This PJI model exhibits the advantages of easy operation, high successful rate, high repeatability, and high clinical correlation. It is expected to be an important model for studying the prevention and treatment of C. albicans biofilm-related PJI.

تسليط الضوء على المؤلف: تطوير البحوث حول التهابات المفاصل الاصطناعية المرتبطة بالمبيضات البيض بيوفيلم 

نموذج عدوى المبيضات البيضاء للمفصل حول الأطراف الاصطناعية في الفأر

In this study of Candida albicans biofilm-associated peri-prosthetic joint, Candida albicans infection model in mice was constructed, using titanium-nickel wire, commonly used to simulate joint implants. This PJI model is easy to operate, has a high success rate, and is clinically relevant. It will help understanding the prevention and treatment of Candida albicans biofilm-related PJI.Traditional animal models cannot accurately simulate the actual situation of PJI, due to the complex environment surrounding the processes. Candida albicans biofilm-related mouse PJI model, can address the research gap. The establishment of PJI animal model is very important for the research and the development of new drugs or therapeutics for PJI.The Candida albicans biofilm-associated mouse PJI model established in this paper is expected to be an important model for the prevention and treatment of Candida albicans biofilm-associated PJI.

يشيع استخدام نقل العينات إلى وسط صفيحة وعد المستعمرات بعد الحضانة الليلية لتقييم حمل مسببات الأمراض المحلية بالقرب من الآفة22,23. في دراستنا ، كانت الثقافة الميكروبية لعينات الكبد والكلى والطحال سلبية ، مما يشير إلى أن النموذج في هذه الدراسة أدى فقط إلى عدوى...

Watch this Scientific Journal Video about Advancing Research on Candida albicans Biofilm-Associated Prosthetic Joint Infections at JoVE.com

عدوى المفصل حول الأطراف الاصطناعية (PJI) التي تسببها مسببات الأمراض الخطيرة شائعة في جراحة العظام السريرية. لا يمكن للنماذج الحيوانية الحالية محاكاة الوضع الفعلي ل PJI بدقة. هنا ، أنشأنا نموذج ماوس PJI المرتبط بغشاء حيوي من Candida albicans للبحث وتطوير علاجات جديدة ل PJI.

Periprosthetic joint infection (PJI) is one of the common infections caused by Candida albicans (C. albicans), which increasingly concerns surgeons and ...

في هذه الدراسة للمفصل المحيطي بالأغشية الحيوية المرتبط بالمبيضات البيض ، تم بناء نموذج عدوى المبيضات البيض في الفئران ، باستخدام سلك التيتانيوم والنيكل ، الذي يشيع استخدامه لمحاكاة غرسات المفاصل. نموذج PJI هذا سهل التشغيل ، وله معدل نجاح مرتفع ، وهو ذو صلة سريريا. وسوف يساعد على فهم الوقاية والعلاج من المبيضات البيض بيوفيلم PJI ذات الصلة.لا يمكن للنماذج الحيوانية التقليدية محاكاة الوضع الفعلي ل PJI بدقة ، بسبب البيئة المعقدة المحيطة بالعمليات. المبيضات البيض البيوفيلم ذات الصلة بالفأر PJI نموذج ، يمكن معالجة الفجوة البحثية. يعد إنشاء نموذج حيواني PJI مهما جدا للبحث وتطوير عقاقير أو علاجات جديدة ل PJI.من المتوقع أن يكون نموذج PJI للفأر المرتبط بالأغشية الحيوية المبيضات البيض الذي تم إنشاؤه في هذه الورقة نموذجا مهما للوقاية والعلاج من PJI المرتبط بالأغشية الحيوية المبيضات البيض.

a-periprosthetic-joint-candida-albicans-infection-model-in-mouse

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Periprosthetic Joint Candida albicans Infection Model in Mouse

498 Views.  Xi’an Jiaotong University. في هذه الدراسة للمفصل المحيطي بالأغشية الحيوية المرتبط بالمبيضات البيض ، تم بناء نموذج عدوى المبيضات البيض في الفئران ، باستخدام سلك التيتانيوم والنيكل ، الذي يشيع استخدامه لمحاكاة غرسات المفاصل. نموذج PJI هذا سهل التشغيل ، وله معدل نجاح مرتفع ، وهو ذو صلة سريريا. وسوف يساع?...

Video: تسليط الضوء على المؤلف: تطوير البحوث حول التهابات المفاصل الاصطناعية المرتبطة بالمبيضات البيض بيوفيلم 

Periprosthetic joint infection (PJI) is one of the common infections caused by Candida albicans (C. albicans), which increasingly concerns surgeons and scientists. Generally, biofilms that can shield C. albicans from antibiotics and immune clearance are formed at the infection site. Surgery involving the removal of the infected implant, debridement, antimicrobial treatment, and reimplantation is the gold standard for the treatment of PJI. Thus, establishing animal PJI models is of great significance for the research and development of new drugs or therapeutics for PJI. In this study, a smooth nickel-titanium alloy wire, a widely used implant in orthopedic clinics, was inserted into the femoral joint of a C57BL/6 mouse before the C. albicans were inoculated into the articular cavity along the wire. After 14 days, mature and thick biofilms were observed on the surface of implants under a scanning electronic microscope (SEM). A significantly reduced bone trabecula was found in the H&amp;E staining of the infected joint specimens. To sum up, a mouse PJI model with the advantages of easy operation, high successful rate, high repeatability, and high clinical correlation was established. This is expected to be an important model for clinical studies of C. albicans biofilm-related PJI prevention.

Periprosthetic joint infection (PJI) caused by dangerous pathogens is common in clinical orthopedics. Existing animal models cannot accurately simulate the actual situation of PJI. Here, we established a Candida albicans biofilm-associated PJI mouse model to research and develop new therapeutics for PJI.