Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis

Quantitative characterization of protein  interactions is essential in practically any field of life sciences,  particularly drug discovery. Most of ...

National Cancer Institute

&#x722A;&#x87FE;&#x9752;&#x86D9;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x5927;&#x91CF;&#x771F;&#x77E5;&#x707C;&#x89C1;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5341;&#x3001; &#x87FE;&#x5DF2;&#x6392;&#x9664;&#x5176;&#x8F6C;&#x53D1;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x5F02;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x3002;&#x9057;&#x4F20;&#x5206;&#x6790;&#x53EF;&#x80FD;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; (Silurana) &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E8C;&#x500D;&#x4F53;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x548C;&#x8F83;&#x77ED;&#x7684;&#x751F;&#x6210;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5341;&#x3001; &#x87FE;&#x53D1;&#x5C55;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x5F88;&#x591A;&#x5DE5;&#x5177;&#x53EF;&#x4EE5;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; Nieuwkoop &#x548C;&#x8D39;&#x4F2F;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x5206;&#x671F;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x5C55;&#x5230;&#x5341;.&#x87FE;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7387;&#x5728;&#x8FD9;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5FCD;&#x53D7;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x8F83;&#x7A84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x663E;&#x793A;&#x5F88;&#x591A;&#x53EF;&#x4F9B;&#x5341;.&#x87FE;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8BD5;&#x5242;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x8F6C;&#x5165;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x3002;&#x5341;&#x3001; &#x87FE;&#x6574;&#x4E2A;&#x88C5;&#x8F7D;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x5230; mRNA &#x8A8A;&#x672C;&#x8BAE;&#x5B9A;&#x4E66; &#x300B; &#x53EF;&#x4EE5;&#x6210;&#x529F;&#x5730;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E0D;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5341;&#x3001; &#x87FE;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x7ECF;&#x5E38;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x5728;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD; &mdash; &mdash; &#x51CF;&#x8F7B;&#x7ACB;&#x5373;&#x9700;&#x8981;&#x514B;&#x9686;&#x542F;&#x52A8;&#x53D1;&#x5C55;&#x7814;&#x7A76;&#x524D;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD; orthologs&#x3002;&#x9488;&#x5BF9;&#x5341;.&#x87FE;&#x86CB;&#x767D;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x80FD;&#x9AD8;&#x6548;&#x5730;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x53CD;&#x4E49; morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178; (MOs) &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x65B0;&#x7684;&#x66FF;&#x4EE3;&#x9009;&#x62E9;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; MOs &#x51FD;&#x6570;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x5341;&#x3001; &#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6B63;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;

&#x6280;&#x672F;&#x548C;&#x7814;&#x7A76;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE;&#x70ED;&#x5E26;&#x5047;&#x4E1D;&#x9175;&#x6BCD;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x63A2;&#x6D4B;&#x5668;&#x3002;

The frog Xenopus laevis has provided significant insights into developmental and cellular processes. However, X. laevis has an allotetraploid genome precluding its use in forward genetic analysis. Genetic analysis may be applicable to Xenopus (Silurana) tropicalis, which has a diploid genome and a shorter generation time. Here, we show that many tools for the study of X. laevis development can be applied to X. tropicalis. By using the developmental staging system of Nieuwkoop and Faber, we find that X. tropicalis embryos develop at similar rates to X. laevis, although they tolerate a narrower range of temperatures. We also show that many of the analytical reagents available for X. laevis can be effectively transferred to X. tropicalis. The X. laevis protocol for whole-mount in situ hybridization to mRNA transcripts can be successfully applied to X. tropicalis without alteration. Additionally, X. laevis probes often work in X. tropicalis--alleviating the immediate need to clone the X. tropicalis orthologs before initiating developmental studies. Antibodies that react against X. laevis proteins can effectively detect the X. tropicalis protein by using established immunohistochemistry procedures. Antisense morpholino oligonucleotides (MOs) offer a new alternative to study loss of gene activity during development. We show that MOs function in X. tropicalis. Finally, X. tropicalis offers the possibility for forward genetics and genomic analysis.

Techniques and probes for the study of Xenopus tropicalis development.

La grenouille Xenopus laevis a fourni des informations importantes sur processus cellulaires et du d&eacute;veloppement. Toutefois, X. laevis poss&egrave;de un g&eacute;nome allot&eacute;traplo&iuml;de emp&ecirc;chant son utilisation dans l&#39;analyse g&eacute;n&eacute;tique vers l&#39;avant. L&#39;analyse g&eacute;n&eacute;tique peut s&#39;applique &agrave; (Silurana) de Xenopus tropicalis, qui poss&egrave;de un g&eacute;nome diplo&iuml;de et une plus courte dur&eacute;e d&#39;une g&eacute;n&eacute;ration. Ici, nous montrons que beaucoup d&#39;outils pour l&#39;&eacute;tude du d&eacute;veloppement de X. laevis peut &ecirc;tre appliqu&eacute; &agrave; X. tropicalis. En utilisant le syst&egrave;me interm&eacute;diaire du d&eacute;veloppement de Nieuwkoop et Faber, nous trouvons que X. tropicalis embryons se d&eacute;veloppent &agrave; un taux similaire &agrave; X. laevis, bien qu&#39;ils tol&egrave;rent une gamme plus &eacute;troite de temp&eacute;ratures. Nous montrons &eacute;galement que bon nombre des r&eacute;actifs analytiques disponibles pour X. laevis peuvent &ecirc;tre efficacement transf&eacute;r&eacute;es &agrave; X. tropicalis. Le protocole de X. laevis pour entier-montent l&#39;hybridation in situ &agrave; la transcription de l&#39;ARNm peut &ecirc;tre appliqu&eacute; avec succ&egrave;s &agrave; X. tropicalis sans alt&eacute;ration. En outre, sondes de X. laevis travaillent souvent en X. tropicalis--soulager imm&eacute;diatement besoin de cloner les orthologues chez X. tropicalis avant d&#39;entreprendre des &eacute;tudes sur le d&eacute;veloppement. Anticorps qui r&eacute;agissent contre les prot&eacute;ines de X. laevis peuvent efficacement d&eacute;tecter la prot&eacute;ine X. tropicalis en utilisant les proc&eacute;dures &eacute;tablies de l&#39;immunohistochimie. Morpholino antisens oligonucl&eacute;otides (MOs) offrent une nouvelle alternative pour &eacute;tudier la perte de l&#39;activit&eacute; des g&egrave;nes au cours du d&eacute;veloppement. Nous d&eacute;montrons cette fonction MOs dans X. tropicalis. Enfin, X. tropicalis offre la possibilit&eacute; de la g&eacute;n&eacute;tique vers l&#39;avant et de l&#39;analyse g&eacute;nomique.

Techniques et sondes pour l&#39;&eacute;tude du d&eacute;veloppement de Xenopus tropicalis.

Techniken und Sonden f&#xFC;r die Untersuchung von Xenopus tropicalis Entwicklung.

La rana Xenopus laevis ha fornito significative intuizioni in processi di sviluppo e cellulari. Tuttavia, X. laevis ha un genoma allotetraploide, precludendo l&#39;impiego in avanti analisi genetiche. Analisi genetica potrebbero essere applicabile a Xenopus (Silurana) tropicalis, che ha un genoma diploide e un pi&ugrave; breve tempo di generazione. Qui, ci mostra che molti strumenti per lo studio di sviluppo di X. laevis possono essere applicati a X. tropicalis. Utilizzando il sistema di stadiazione dello sviluppo di Nieuwkoop and Faber, troviamo che X. tropicalis gli embrioni si sviluppano a prezzi simili a X. laevis, anche se tollerano una pi&ugrave; ristretta gamma di temperature. Mostriamo anche che molti dei reagenti analitici disponibili per X. laevis pu&ograve; essere effettivamente trasferiti a X. tropicalis. Il protocollo X. laevis per intero-monta l&#39;ibridazione in situ di trascritti di mRNA pu&ograve; essere applicato con successo a X. tropicalis senza alterazione. Inoltre, X. laevis sonde spesso funziona in X. tropicalis-alleviare l&#39;immediato bisogno di clonare il orthologs X. tropicalis prima di iniziare gli studi dello sviluppo. Gli anticorpi che reagiscono contro le proteine di X. laevis &egrave; in grado di rilevare efficacemente la proteina X. tropicalis mediante immunoistochimica stabilito procedure. Oligonucleotidi antisense oligonucleotides (MOs) di offrire una nuova alternativa per studiare la perdita di attivit&agrave; del gene durante lo sviluppo. Mostriamo che la funzione MOs in X. tropicalis. Infine, X. tropicalis offre la possibilit&agrave; per l&#39;analisi genomica e genetica avanti.

Tecniche e sonde per lo studio dello sviluppo di Xenopus tropicalis.

&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB; &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x9806;&#x907A;&#x4F1D;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x6392;&#x9664; allotetraploid &#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x4E8C;&#x500D;&#x4F53;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x77ED;&#x3044;&#x4E16;&#x4EE3;&#x6642;&#x9593;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; (Silurana) &#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30BF;&#x30DE;&#x30CB;&#x30AF;&#x30C0;&#x30CB;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306B;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A; x. X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E29;&#x5EA6;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304C;&#x72ED;&#x304F;&#x3092;&#x5BB9;&#x8A8D;&#x304C; Nieuwkoop &#x3068;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306B;&#x306F;&#x305D;&#x306E; X. &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6599;&#x91D1;&#x306B; X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x80DA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x3042;&#x306A;&#x305F;&#x3092;&#x898B;&#x3064;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F; X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x5229;&#x7528;&#x5206;&#x6790;&#x8A66;&#x85AC;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B; X. &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;.&#x5168;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B; mrna &#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x306E;&#x4EA4;&#x914D;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E; X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;X. &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x6539;&#x5909;&#x305B;&#x305A;&#x306B;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB; &#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6; X. &#x5373;&#x6642;&#x7DE9;&#x548C;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x3067; &#x2015; &#x2015; &#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x4ED5;&#x4E8B; X. &#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30BF;&#x30DE;&#x30CB;&#x30AF;&#x30C0;&#x30CB; &#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;X. &#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A; x. &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9; morpholino &#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; (MOs) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x80A2;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x305D;&#x306E; MOs &#x95A2;&#x6570; X. &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A; x. &#x524D;&#x65B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C6;&#x30AF;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x3068;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x74B0;&#x5883;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3002;

Xenopus laevis &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, X. laevis&#xB294; &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD574;&#xC57C; allotetraploid &#xAC8C;&#xB188;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD84;&#xC11D; Xenopus (Silurana) tropicalis diploid &#xAC8C;&#xB188; &#xBC0F; &#xC9E7;&#xC740; &#xC0DD;&#xC131; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; X. tropicalis&#xC5D0; X. laevis &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nieuwkoop &#xD398;&#xC774; &#xBC84;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC900;&#xBE44; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC881;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC758; &#xC628;&#xB3C4; &#xC6A9;&#xB0A9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBC30;&#xC544; X. laevis &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; X. tropicalis &#xCC3E;&#xC73C;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xB9CE;&#xC740; X. laevis&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC; &#xC57D; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC62E;&#xACA8;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; X. tropicalis&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. X. laevis &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; mRNA &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xB97C; &#xC804;&#xCCB4; &#xB9C8;&#xC6B4;&#xD2B8; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5C6;&#xC774; X. tropicalis&#xC5D0; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, X. laevis &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC790;&#xC8FC; X. tropicalis-&#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xC644;&#xD654; &#xC791;&#xC5C5; X. tropicalis orthologs &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. X. laevis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300;&#xD558;&#xC5EC; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xD56D; &#xCCB4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xB9BD; &#xB41C; &#xAE30;&#xC220; &#xC808;&#xCC28;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5D1;&#xC2A4; tropicalis &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC13C;&#xC2A4; morpholino oligonucleotides (MOs) &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xACF5;&#xBD80;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB300;&#xC548;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; X. tropicalis&#xC5D0;&#xC11C; MOs &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, X. tropicalis &#xC55E;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xAC8C;&#xB188; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xAE30;&#xC220;&#xACFC; Xenopus tropicalis &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC870;&#xC0AC;.

La rana Xenopus laevis ha proporcionado importantes conocimientos en procesos de desarrollo y celulares. Sin embargo, X. laevis tiene un genoma tetraploide imposibilitando su uso en el an&aacute;lisis gen&eacute;tico hacia adelante. El an&aacute;lisis gen&eacute;tico pueden ser aplicable a tropicalis Xenopus (Silurana), que tiene un genoma diploide y un menor tiempo de generaci&oacute;n. Aqu&iacute;, demostramos que muchas herramientas para el estudio de desarrollo de X. laevis pueden aplicarse a X. tropicalis. Utilizando el sistema de estadificaci&oacute;n del desarrollo de Nieuwkoop y Faber, encontramos tropicalis X. embriones desarrollan a ritmos similares a X. laevis, aunque toleran un rango estrecho de temperaturas. Demostramos tambi&eacute;n que muchos de los reactivos anal&iacute;ticos disponibles para X. laevis pueden transferirse eficazmente a X. tropicalis. El protocolo de X. laevis para hibridaci&oacute;n in situ de whole-mount de las transcripciones de mRNA puede aplicarse con &eacute;xito a X. tropicalis sin alteraci&oacute;n. Adem&aacute;s, X. laevis sondas a menudo trabajan en X. tropicalis--aliviar el inmediato es necesario clonar los ort&oacute;logos tropicalis X. antes de iniciar los estudios del desarrollo. Anticuerpos que reaccionan contra las prote&iacute;nas X. laevis efectivamente pueden detectar la prote&iacute;na X. tropicalis utilizando procedimientos establecidos de la inmunohistoqu&iacute;mica. Oligonucle&oacute;tidos antisentido Morfolino (MOs) ofrecen una nueva alternativa para estudiar la p&eacute;rdida de actividad de los genes durante el desarrollo. Mostramos esa funci&oacute;n de MOs en X. tropicalis. Finalmente, X. tropicalis ofrece la posibilidad de avance gen&eacute;tica y an&aacute;lisis gen&oacute;mico.

T&eacute;cnicas y sondas para el estudio del desarrollo de Xenopus tropicalis.

Transplanted Spemann's organizer induces dorsal embryonic cell fates such as the nervous system and somites, but in normal development, elimination of individual organizer signals (such as the bone morphogenetic protein [BMP] antagonists) has surprisingly modest effects on these tissues. Thus, the role of BMP antagonists may be limited to fine tuning the size of the dorsal domain. However, at least five BMP antagonists are specifically expressed in the organizer, and all can mimic aspects of organizer function, suggesting overlapping functions. Here, we deplete the function of three BMP antagonists, chordin, noggin, and follistatin, in Xenopus tropicalis. We demonstrate that this results in catastrophic failure of dorsal development and expansion of ventral and posterior fates. We conclude that BMP antagonists are required for formation of the neural plate and dorsal mesoderm. In addition, our results show that neural specification requires the continuous activity of BMP antagonists from blastula through gastrula stages.

Depletion of three BMP antagonists from Spemann's organizer leads to a catastrophic loss of dorsal structures.

Do medical professionalism and medical education involve commitments to political advocacy?

Postinfectious gastroparesis (PIGP) is a subgroup of idiopathic gastroparesis rarely reported in adolescents. This study describes 3 adolescent females with severe PIGP, who each underwent extensive workup prior to referral to a pediatric gastroenterologist. PIGP may be an underrecognized disorder in pediatrics, particularly in adolescents, and if untreated, can lead to significant morbidity.

Joanna Yeh

Cancer and Inflammation Program

National Cancer Institute

Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis

Joanna Yeh

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Cancer and Inflammation Program

National Cancer Institute

Protein Purification-free Method of Binding Affinity Determination by Microscale Thermophoresis

Cancer and Inflammation Program