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Techniques for Imaging Ca<sup>2+</sup> Signaling in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

University of Birmingham

No &#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x5408;&#x9176; (NOS) &#x7684;&#x4E00;&#x4EE3;&#x88AB;&#x5377;&#x5165;&#x914D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x53D7;&#x7CBE;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x63A5;&#x89E6;&#x9020;&#x6210;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x52A8;&#x5458;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x9E1F;&#x82F7;&#x9178;&#x73AF;&#x5316;&#x9176;&#xFF0C;&#x4F46;&#x88AB;&#x6A21;&#x4EFF;&#x7684;&#x8C37;&#x80F1;&#x7518; S-&#x4E9A;&#x785D;&#x57FA;-&#x80BD; &#xFF08;GSNO &#xFF1B; S nitrosylating &#x4EE3;&#x7406;&#xFF09;&#x3002;&#x5E94;&#x7528;&#x9187;&#x5904;&#x7406;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-SNO &#x7FA4;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FC5;&#x901F;&#x626D;&#x8F6C;&#x7684;&#x65E0;&#x884C;&#x52A8;&#x548C; GSNO &#x4E0A; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x4E0D;&#x662F;&#xFF0C;GSNO &#x548C;&#x9187;&#x5904;&#x7406;&#x5BF9;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D; S nitrosylation&#xFF0C;&#x5229;&#x7528;&#x751F;&#x7269;&#x7D20;&#x5F00;&#x5173;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x4F3C;&#x5176;&#x884C;&#x52A8;&#x5BF9; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x900F;&#x9732;&#x672C;&#x6784;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B; NOS &#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x548C;&#x79EF; &#xFF08;&#x6295;&#x8D44;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C42;&#xFF09;&#x3002;4&#xFF0C;5-diaminofluorescein &#xFF08;DAF&#xFF09; &#x67D3;&#x8272;&#x8868;&#x660E; no &#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x5B75;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4E0E;&#x8F93;&#x5375;&#x7BA1;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28; S nitrosylation &#x7C7B;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6350;&#x52A9;&#x8005;&#x548C; GSNO &#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x5B55;&#x916E; &#xFF08;&#x5375;&#x4E18;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#xFF09; &#x8FD8;&#x7B79;&#x96C6;&#x5B58;&#x50A8;&#x7684;&#x7ECF;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x9884;&#x5904;&#x7406;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x6CA1;&#x6709;&#x5927;&#x5927;&#x589E;&#x5F3A;&#x5B55;&#x6FC0;&#x7D20;&#x5F71;&#x54CD; [Ca(2+)](i)&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x97AD;&#x6BDB;&#x6E38;&#x89C8;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x8FD9;&#x6837;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x4E0D;&#x89C4;&#x8303;&#x52A8;&#x5458;&#x5B58;&#x50A8;&#x7ECF;&#x4EBA;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D; S-nitrosylation&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x884C;&#x52A8;&#x662F;&#x534F;&#x540C;&#x4E0E;&#x5B55;&#x916E;&#xFF0C;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6B64;&#x589E;&#x6548;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x53D7;&#x7CBE;&#x914D;&#x5B50;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E2D;&#x53EF;&#x80FD;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x610F;&#x4E49;&#x3002;

Ca2 + &#x5546;&#x5E97;&#x53CA;&#x7531; S nitrosylation &#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x97AD;&#x6BDB;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x52A8;&#x5458;&#xFF1A; NO &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x5973;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x9053;&#x5408;&#x6210;&#x3002;

Generation of NO by nitric oxide synthase (NOS) is implicated in gamete interaction and fertilisation. Exposure of human spermatozoa to NO donors caused mobilisation of stored Ca(2+) by a mechanism that did not require activation of guanylate cyclase but was mimicked by S-nitroso-glutathione (GSNO; an S-nitrosylating agent). Application of dithiothreitol, to reduce protein -SNO groups, rapidly reversed the actions of NO and GSNO on [Ca(2+)](i). The effects of NO, GSNO and dithiothreitol on sperm protein S-nitrosylation, assessed using the biotin switch method, closely paralleled their actions on [Ca(2+)](i). Immunofluorescent staining revealed constitutive and inducible NOS in human oviduct and cumulus (the cellular layer investing the oocyte). 4,5-diaminofluorescein (DAF) staining demonstrated production of NO by these tissues. Incubation of human sperm with oviduct explants induced sperm protein S-nitrosylation resembling that induced by NO donors and GSNO. Progesterone (a product of cumulus cells) also mobilises stored Ca(2+) in human sperm. Pre-treatment of sperm with NO greatly enhanced the effect of progesterone on [Ca(2+)](i), resulting in a prolonged increase in flagellar excursion. We conclude that NO regulates mobilisation of stored Ca(2+) in human sperm by protein S-nitrosylation, that this action is synergistic with that of progesterone and that this synergism is potentially highly significant in gamete interactions leading to fertilisation.

Mobilisation of Ca2+ stores and flagellar regulation in human sperm by S-nitrosylation: a role for NO synthesised in the female reproductive tract.

G&eacute;n&eacute;ration de NO par l&#39;oxyde nitrique synthase (NOS) est impliqu&eacute;e dans la fertilisation et l&#39;interaction de gam&egrave;tes. L&#39;exposition des spermatozo&iuml;des humains &agrave; aucun donateurs provoqu&eacute; mobilisation de Ca(2+) stock&eacute;es par un m&eacute;canisme qui ne n&eacute;cessitait pas d&#39;activation de la guanylate cyclase, mais a &eacute;t&eacute; imit&eacute; par le S-nitroso-glutathion (GNSO ; un agent S-nitrosylating). Application de dithiothr&eacute;itol, pour r&eacute;duire les groupes SNO - prot&eacute;ine, invers&eacute;e rapidement les actions du non et le GNSO sur [Ca(2+)](i). Les effets de NO, le GNSO et le dithiothr&eacute;itol sur la prot&eacute;ine S-nitrosylation, &eacute;valu&eacute;e &agrave; l&#39;aide de la m&eacute;thode de commutateur de biotine, de sperme parall&egrave;lement &eacute;troitement leurs actions sur [Ca(2+)](i). Immunofluorescence a r&eacute;v&eacute;l&eacute; NOS constitutives et inductibles dans l&#39;oviducte humaine et cumulus (la couche cellulaire investir l&#39;ovocyte). 4, 5-diaminofluoresc&eacute;ine (DAF) coloration a d&eacute;montr&eacute; la production de NO par ces tissus. L&#39;incubation de sperme humain avec des explants oviducte induite par la prot&eacute;ine S-nitrosylation ressemblant &agrave; celle induite par aucun des donateurs et le GNSO de sperme. Progest&eacute;rone (un produit de cellules du cumulus) mobilise &eacute;galement Ca(2+) stock&eacute;e dans le sperme humain. Pr&eacute;traitement du sperme non a grandement am&eacute;lior&eacute; l&#39;effet de la progest&eacute;rone sur [Ca(2+)](i), r&eacute;sultant en une augmentation prolong&eacute;e des excursion flagellaire. Nous concluons que non r&eacute;glemente la mobilisation de Ca(2+) stock&eacute;e dans le sperme humain par la prot&eacute;ine S-nitrosylation, que cette action est synergique avec celui de la progest&eacute;rone et que cette synergie est potentiellement tr&egrave;s important dans les interactions de gam&egrave;tes conduisant &agrave; la f&eacute;condation.

Mobilisation des r&eacute;serves de Ca2 + et r&egrave;glement flagellaire dans le sperme humain par S-nitrosylation : un r&ocirc;le pour non synth&eacute;tis&eacute;e dans l&#39;appareil reproducteur f&eacute;minin.

Generation Nr. von Stickstoffmonoxid-Synthase (NOS) ist in Gamet Interaktion und Befruchtung verwickelt. Gef&auml;hrdung der menschlichen Spermien keine Spender verursacht Mobilisierung der gespeicherten Ca(2+) durch einen Mechanismus, der Aktivierung der Guanylatcyclase nicht erforderlich aber von S-Nitroso-Glutathion (GSNO; ein S-Nitrosylating-Agent) nachgeahmt wurde. Anwendung von Dithiothreitol, Protein - SNO Gruppen reduzieren schnell umgekehrt die Aktionen von NO und GSNO auf [Ca(2+)](i). Die Auswirkungen von Nein, GSNO und Dithiothreitol auf Sperma Protein S-Nitrosylation, anhand der Biotin-Switch-Methode, eng parallel ihre Aktionen auf [Ca(2+)](i). Immunfluoreszenz-F&auml;rbung ergab konstitutiven und durch Induktion NOS in menschlichen Eileiter und Cumulus (der zellul&auml;ren Ebene der Eizelle zu investieren). 4,5-Diaminofluorescein (DAF) F&auml;rbung zeigte Produktion von NO durch diese Gewebe. Inkubation von menschlichen Samenzellen mit Legedarm Explantaten verursachte Sperma Protein S-Nitrosylation &auml;hnlich, die induziert durch keine Spender und GSNO. Progesteron (ein Produkt von Cumulus Zellen) mobilisiert auch gespeicherte Ca(2+) in den menschlichen Samenzellen. Vorbehandlung der Samenzellen mit Nr. verbessert erheblich die Wirkung von Progesteron auf [Ca(2+)](i), wodurch eine anhaltende Zunahme der Flimmerband Ausflug. Wir schlie&szlig;en, dass Nr. regelt die Mobilisierung der gespeicherten Ca(2+) in den menschlichen Samenzellen von Protein S-Nitrosylation, die diese Aktion mit der Progesteron synergistische ist und dass dieser Synergismus ist potenziell hoch signifikante Gamet Interaktionen zur Befruchtung.

Mobilisierung von Ca2 + L&auml;den und Flimmerband Verordnung in den menschlichen Samenzellen von S-Nitrosylation: eine Rolle f&uuml;r NO synthetisiert in der weiblichen Fortpflanzungsorgane.

Generazione di NO di ossido nitrico sintasi (NOS) &egrave; implicato nella fertilizzazione e l&#39;interazione di gameti. Esposizione degli spermatozoi umani di donatori di NO causato mobilitazione di Ca(2+) memorizzati da un meccanismo che non ha richiesto l&#39;attivazione della guanilato ciclasi ma fu imitato da S-nitroso-glutathione (elettroforesi; un agente S-nitrosylating). Applicazione di ditiotreitolo, per ridurre i gruppi di proteine - SNO, invertito rapidamente le azioni del NO ed elettroforesi su [Ca(2+)](i). Gli effetti del NO, elettroforesi e ditiotreitolo sulla proteina sperma S-nitrosilazione, valutata utilizzando il metodo di switch di biotina, strettamente parallelo le loro azioni su [Ca(2+)](i). Colorazione di immunofluorescenza ha rivelato NOS costitutivi e inducibili nell&#39;ovidotto umana e cumulus (lo strato cellulare investendo l&#39;ovocita). 4,5-diaminofluorescein (DAF) colorazione ha dimostrato la produzione di NO da questi tessuti. Incubazione di sperma umano con ovidotto espianti indotta da proteina S-nitrosilazione simile a quella indotta da NO elettroforesi e donatori di sperma. Progesterone (un prodotto di cellule cumulo) mobilita anche Ca(2+) stored in sperma umano. Pre-trattamento degli spermatozoi con NO notevolmente migliorato l&#39;effetto del progesterone sulla [Ca(2+)](i), con un aumento prolungato in escursione flagellari. Concludiamo che non regola la mobilitazione di Ca(2+) stored in sperma umano dalla proteina S-nitrosilazione, che questa azione &egrave; sinergica con quella di progesterone e che questa sinergia &egrave; potenzialmente altamente significativo nelle interazioni di gameti che portano alla fecondazione.

Mobilizzazione del Ca2 + negozi e flagellari regolamento in sperma umano da S-nitrosilazione: un ruolo per NO sintetizzato nel tratto riproduttivo femminile.

&#x4E00;&#x9178;&#x5316;&#x7A92;&#x7D20;&#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20; (NOS) &#x306B;&#x3088;&#x308B; NO &#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306F;&#x3001;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3068;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306A;&#x3057;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x306B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30EB;&#x9178;&#x30B7;&#x30AF;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x304C;&#x3001;S-&#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30BD;-&#x30B0;&#x30EB;&#x30BF;&#x30C1;&#x30AA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; (GSNO; S nitrosylating &#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8;) &#x3092;&#x307E;&#x306D;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; - SNO &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x6E1B;&#x3089;&#x3059;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30C8;&#x30EC;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x9006;&#x8EE2;&#x306A;&#x3057;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068; GSNO &#x3092;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x5F71;&#x97FF;&#x306A;&#x3057;&#x306E; GSNO &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B8;&#x30C1;&#x30AA;&#x30C8;&#x30EC;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB; &#x30D3;&#x30AA;&#x30C1;&#x30F3; &#x30B9;&#x30A4;&#x30C3;&#x30C1; &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3001;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x4E26;&#x5217;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x8272;&#x69CB;&#x6210;&#x3068;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B; NOS &#x30D2;&#x30C8;&#x5375;&#x7BA1;&#x3068;&#x7A4D;&#x96F2; &#xFF08;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6295;&#x8CC7;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C64;&#xFF09; &#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;4, 5-diaminofluorescein (DAF) &#x67D3;&#x8272;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x3088;&#x308B; NO &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30E5;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5375;&#x7BA1;&#x5916;&#x690D;&#x4F53;&#x3068;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x30C9;&#x30CA;&#x30FC;&#x3068; GSNO &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3; (&#x5375;&#x4E18;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x88FD;&#x54C1;&#xFF09; &#x3082;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067; mobilises &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x524D;&#x51E6;&#x7406;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3001;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x9060;&#x8DB3;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306A;&#x3057;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB; &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x76F8;&#x4E57;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x76F8;&#x4E57;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x30B9;&#x30C8;&#x30A2;&#x30C9; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Ca 2 + &#x5E97;&#x8217;&#x3068;&#x306E; S &#x30CB;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B7;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3072;&#x3068;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3079;&#x3093;&#x6BDB;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x52D5;&#x54E1;: NO &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x5B98;&#x306E;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC0B0;&#xD654; &#xC9C8;&#xC18C; synthase (NOS) &#xD558; &#xC5EC; NO&#xC758; &#xC0DD;&#xC131;&#xC740; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8;. &#xC544;&#xBB34; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C; guanylate cyclase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; S-nitroso-glutathione (GSNO; S-nitrosylating &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC6A9; dithiothreitol, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-SNO &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC18;&#xC804; &#xC5C6;&#xC74C; &#xC791;&#xC5C5; &#xBC0F; GSNO&#xC5D0; [Ca(2+)](i). &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC74C;, GSNO &#xBC0F; dithiothreitol &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S-nitrosylation, biotin &#xC2A4;&#xC704;&#xCE58; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD3C9;&#xAC00;&#xC5D0; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; paralleled [ca(2+)](i)&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD589;&#xB3D9;. Immunofluorescent &#xC5BC;&#xB8E9; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB780; &#xACE0; &#xC801; &#xC6B4; (&#xD22C;&#xC790;&#xB294; oocyte &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; NOS &#xACF5;&#xAC1C;. 4, 5-diaminofluorescein (DAF) &#xC5BC;&#xB8E9;&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB780; explants&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xC778;&#xD050;&#xBCA0;&#xC774;&#xC158; &#xC815;&#xC790; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S nitrosylation &#xB2EE;&#xC740; &#xAE30;&#xC99D;&#xC790;&#xC640; GSNO&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xC720;&#xB3C4;. &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; (&#xC801; &#xC6B4; &#xC140; &#xC81C;&#xD488;)&#xB3C4; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; &#xC800;&#xC7A5;&#xB41C; Ca(2+) mobilises. &#xC804;&#xCC98;&#xB9AC; &#xC5C6;&#xC774; &#xC815;&#xC790;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; [flagellar &#xC5EC;&#xD589;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C;, ca(2+)](i)&#xC5D0; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACB0;&#xB860; &#xC544;&#xB2C8; &#xC870;&#xC808; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; S nitrosylation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790;&#xC5D0; &#xC800;&#xC7A5; &#xB41C; ca(2+)&#xC774;&#xC774; &#xC791;&#xC5C5;&#xC740; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC758; &#xC2DC;&#xB108;&#xC9C0;&#xC640;&#xC774; &#xC131;&#xBD84;&#xC774; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xCCB4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC815;&#xC758;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xC758; &#xD559;&#xC790;&#xC758;.

Ca2 + &#xC0C1;&#xC810; &#xBC0F; S nitrosylation&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; flagellar &#xADDC;&#xC815;&#xC758; &#xB3D9;&#xC6D0;: &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0; synthesised &#xC5C6;&#xC74C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;.

Generaci&oacute;n de NO por &oacute;xido n&iacute;trico sintasa (NOS) est&aacute; implicada en la fecundaci&oacute;n y la interacci&oacute;n de los gametos. Exposici&oacute;n de espermatozoides humanos a NO donantes caus&oacute; movilizaci&oacute;n de CA almacenado por un mecanismo que no requieren activaci&oacute;n de la guanilato ciclasa pero fue imitado por S-nitroso-glutati&oacute;n (GSNO; agente S-nitrosylating). Aplicaci&oacute;n de Ditiotreitol, para reducir los grupos SNO - prote&iacute;na, invirti&oacute; r&aacute;pidamente las acciones de NO y GSNO en [Ca(2+)](i). Los efectos de NO, GSNO y Ditiotreitol en prote&iacute;na de esperma S-nitrosilaci&oacute;n, evaluada mediante el m&eacute;todo de interruptor de biotina, estrechamente en paralelo sus acciones en [Ca(2+)](i). Tinci&oacute;n inmunofluorescente revel&oacute; NOS constitutivas e inducibles en oviducto humana y c&uacute;mulos (la capa celular invertir el ovocito). la coloraci&oacute;n de 4,5-diaminofluorescein (DAF) demostr&oacute; la producci&oacute;n de NO por estos tejidos. Incubaci&oacute;n de los espermatozoides humanos con explantes de oviducto inducida por prote&iacute;na de esperma S-nitrosilaci&oacute;n parecido inducida por los donantes ni GSNO. Progesterona (un producto de c&eacute;lulas del c&uacute;mulo) tambi&eacute;n moviliza CA almacenados en espermatozoides humanos. Pre-tratamiento de esperma con NO ha mejorado considerablemente el efecto de la progesterona en [Ca(2+)](i), resultando en un incremento prolongado en excursi&oacute;n flagelar. Concluimos que NO regula la movilizaci&oacute;n de CA almacenados en espermatozoides humanos por prote&iacute;na S-nitrosilaci&oacute;n, que esta acci&oacute;n es sin&eacute;rgica con la de la progesterona y que este sinergismo es potencialmente muy importante en las interacciones de gametos que conduce a la fertilizaci&oacute;n.

Movilizaci&oacute;n de Ca2 + tiendas y regulaci&oacute;n flagelar en espermatozoides humanos por S-nitrosilaci&oacute;n: un papel para NO sintetizado en el tracto reproductor femenino.

&#x7CBE;&#x5B50;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x6307;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E1C;&#x65B9;&#x5230;&#x5375;&#x5B50;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;Picomolar &#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x68AF;&#x5EA6;&#x7684;&#x5B55;&#x916E; (P)&#xFF0C;&#x73AF;&#x7ED5;&#xFF0C;&#x9E21;&#x86CB;&#x7684;&#x5375;&#x4E18;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x6210;&#x5206;&#x5438;&#x5F15;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4ECB;&#x5BFC; P &#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x7ED3;&#x5408;&#x4E0D;&#x540C;&#x7B56;&#x7565;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#xFF1A; &#x836F;&#x7406;&#x4F5C;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x7684;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x8D8B;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x7275;&#x8FDE;&#x4E00;&#x5927;&#x6279;&#x7ECF;&#x5178;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x54CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x4E8B;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x51E1;&#x9EA6;&#x8FEA;-&#x8425;-PKA &#x901A;&#x8DEF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7B2C;&#x4E00;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x5316; &#xFF08;&#x8D64;&#x9053;&#x4E50;&#x961F;&#x548C;&#x97AD;&#x6BDB;&#xFF09; &#x548C; &#xFF08;&#x901A;&#x8FC7; IP &#xFF08;3&#xFF09; R &#x548C; SOC &#x6E20;&#x9053;&#xFF09;&#xFF0C;&#x9499;&#x52A8;&#x5458; sGC cGMP PKG &#x7EA7;&#x8054;&#xFF0C;&#x800C;&#x7A0D;&#x540E;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7CBE;&#x5B50;&#x53D6;&#x5411;&#x8D8B;&#x5316;&#x7684;&#x6E90;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x53D1;&#x73B0;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7406;&#x89E3;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x5BFC;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5B55;&#x916E;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Sperm chemotaxis is a chemical guiding mechanism that may orient spermatozoa to the egg surface. A picomolar concentration gradient of Progesterone (P), the main steroidal component secreted by the cumulus cells that surround the egg, attracts human spermatozoa. In order to elucidate the molecular mechanism of sperm chemotaxis mediated by P, we combine the application of different strategies: pharmacological inhibition of signaling molecules, measurements of the concentrations of second messengers and activation of the chemotactic signaling. Our data implicate a number of classic signal transduction pathways in the response and provide a model for the sequence of events, where the tmAC-cAMP-PKA pathway is activated first, followed by protein tyrosine phosphorylation (equatorial band and flagellum) and calcium mobilization (through IP(3)R and SOC channels), whereas the sGC-cGMP-PKG cascade, is activated later. These events lead to sperm orientation towards the source of the chemoattractant. The finding proposes a molecular mechanism which contributes to the understanding of the signal transduction pathway that takes place in a physiological process as chemotaxis.

Molecular mechanism for human sperm chemotaxis mediated by progesterone.

Chimiotactisme des spermatozo&#xEF;des est un m&#xE9;canisme chimique de guidage qui peut orienter les spermatozo&#xEF;des &#xE0; la surface de l&#x26;#39;&#x153;uf. Un gradient de concentration picomolaire de progest&#xE9;rone (P), la principale composante st&#xE9;ro&#xEF;dien s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;e par les cellules du cumulus qui entourent l&#x26;#39;&#x153;uf, attire les spermatozo&#xEF;des humains. Afin d&#x26;#39;&#xE9;lucider le m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire de la chimiotaxie sperme m&#xE9;di&#xE9;es par P, nous combinons l&#x26;#39;application de diff&#xE9;rentes strat&#xE9;gies: l&#x26;#39;inhibition pharmacologique de mol&#xE9;cules de signalisation, les mesures des concentrations de seconds messagers et l&#x26;#39;activation de la signalisation chimiotactique. Nos donn&#xE9;es impliquent un certain nombre de classiques des voies de transduction du signal dans la r&#xE9;ponse et fournir un mod&#xE8;le pour la s&#xE9;quence des &#xE9;v&#xE9;nements, o&#xF9; la voie AMPc-TMAC-PKA est activ&#xE9; en premier, suivis par la phosphorylation sur tyrosine de prot&#xE9;ines (&#xE9;quatorial bande et le flagelle) et la mobilisation du calcium ( via IP (3) R et les canaux SOC), alors que la cascade sGC-cGMP-PKG, est activ&#xE9; plus tard. Ces &#xE9;v&#xE9;nements conduisent &#xE0; l&#x26;#39;orientation du sperme vers la source de l&#x26;#39;agent chimiotactique. La conclusion propose un m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire qui contribue &#xE0; la compr&#xE9;hension de la voie de transduction du signal qui a lieu dans un processus physiologique comme chimiotactisme.

M&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire de la chimiotaxie de sperme de l&#x26;#39;homme M&#xE9;diation par la progest&#xE9;rone

Sperma Chemotaxis ist ein chemischer leitende Mechanismus, der Spermien, die Ei-Oberfl&auml;che orientieren kann. Ein pikolomaren Konzentrationsgradienten von Progesteron (P), steroidale Hauptbestandteil abgesondert durch die Cumulus-Zellen, die die Eizelle umgeben zieht menschliche Samenzellen. Um die molekulare Mechanismen der Spermien Chemotaxis von P vermittelt zu erhellen, kombinieren wir die Anwendung verschiedener Strategien: pharmakologische Hemmung Molek&uuml;le, Messungen der Konzentrationen der zweiten boten und Aktivierung von die chemotaktische Signalisierung zu signalisieren. Unsere Daten implizieren eine Reihe von klassischen Signaltransduktion Wege in der Antwort und ein Modell f&uuml;r die Abfolge der Ereignisse, wo der TmAC-cAMP-PKA-Stoffwechselweg zuerst aktiviert wird, von Protein-Tyrosin-Phosphorylierung (&Auml;quatorial Band und Flagellen gefolgt) und Kalzium Mobilisierung (&uuml;ber IP (3) R und SOC-Kan&auml;le), w&auml;hrend die sGC-cGMP-PKG cascade, sp&auml;ter aktiviert. Diese Ereignisse f&uuml;hren zu Spermien Ausrichtung auf die Quelle f&uuml;r die Chemoattractant. Die Feststellung schl&auml;gt eine molekulare Mechanismen und tr&auml;gt zum Verst&auml;ndnis des Signal-Transduktion-Weges, der in einem physiologischen Prozess als Chemotaxis stattfindet.

Molekulare Mechanismen f&uuml;r menschliche Spermien Chemotaxis von Progesteron vermittelt.

Sperma chemiotassi &egrave; un meccanismo chimico di guida che possa orientare gli spermatozoi sulla superficie dell&#39;uovo. Un gradiente di concentrazione picomolar di Progesterone (P), il principale componente steroideo secernuto dalle cellule del cumulo che circondano l&#39;uovo, attira gli spermatozoi umani. Al fine di chiarire il meccanismo molecolare della chemiotassi sperma mediata da P, combiniamo l&#39;applicazione di diverse strategie: inibizione farmacologica delle molecole, le misurazioni di concentrazioni di seconda messaggeri e attivazione del segnale chemiotattico di segnalazione. I nostri dati implicano un certo numero di vie di trasduzione del segnale classico nella risposta e forniscono un modello per la sequenza di eventi, dove il sentiero tmAC-cAMP-PKA &egrave; attivato in primo luogo, seguito da fosforilazione della tirosina della proteina (banda equatoriale e flagello) e mobilizzazione di calcio (attraverso canali SOC e IP (3) R), considerando che il sGC-cGMP-PKG a cascata, &egrave; attivato successivamente. Questi eventi portano a orientamento di sperma verso la fonte della chemoattractant. La ricerca propone un meccanismo molecolare che contribuisce alla comprensione del pathway di trasduzione del segnale che si svolge in un processo fisiologico come la chemiotassi.

Meccanismo molecolare per chemiotassi di sperma umano mediata dal progesterone.

&#x7CBE;&#x5B50;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306F;&#x3001;5&#x6708;&#x306E;&#x5411;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x5375;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x5316;&#x5B66;&#x7269;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30D4;&#x30B3;&#x30E2;&#x30EB;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x52FE;&#x914D;&#xFF08;P&#xFF09;&#x3001;&#x5375;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x56F2;&#x3080;&#x5375;&#x4E18;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x6210;&#x5206;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;&#x7CBE;&#x5B50;&#x3092;&#x96C6;&#x3081;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x3001;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;&#x3068;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#xFF1A;P&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x7CBE;&#x5B50;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;TMAC-cAMP&#x4F9D;&#x5B58;PKA&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#xFF08;&#x8D64;&#x9053;&#x5E2F;&#x3068;&#x97AD;&#x6BDB;&#xFF09;&#x3068;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#xFF08;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x8D77;&#x52D5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x6570;&#x3092;&#x5DFB;&#x304D;&#x8FBC;&#x3080;&#x3001;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;IP&#xFF08;3&#xFF09;R&#x3068;SOC&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#xFF09;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;SGC-cGMP&#x306E;-PKG&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x5F8C;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5316;&#x5B66;&#x8A98;&#x5F15;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x6E90;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x7CBE;&#x5B50;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30B2;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x7CBE;&#x5B50;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;

&#xC815;&#xC790; chemotaxis &#xC815;&#xC790; &#xB09C; &#xC790; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC801; &#xC6C5; &#xC2DC;&#xD0A4;&#xB2E4; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD654;&#xD559; &#xC9C0;&#xB3C4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Picomolar &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC628; &#xBCC0;&#xD654;&#xB3C4;&#xC758; &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; (P), &#xC8FC;&#xC694; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xB2EC;&#xAC40;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xC801; &#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBD84; &#xBE44; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xBD84;&#xC2E0;&#xC744; &#xB048;&#xB2E4;. &#xC815;&#xC790; chemotaxis P &#xC911;&#xC7AC;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xACB0;&#xD569;: &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xD608; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC800;&#xD574;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC804;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xD638; &#xBCC0;&#xD658; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC62D; &#xC544; &#xB9E4;&#xAE30; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; (&#xC801;&#xB3C4; &#xBC34;&#xB4DC; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xC124;) &#xD558; &#xC5EC; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB514;&#xC5D0; tmAC &#xCEA0;&#xD504; PKA &#xD1B5;&#xB85C; &#xBA3C;&#xC800; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xB3D9;&#xC6D0; (IP (3) &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; SOC &#xCC44;&#xB110;)&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; sGC cGMP PKG &#xACC4;&#xB2E8;&#xC2DD; &#xBC18;&#xBA74; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xC911;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8;&#xB294; chemoattractant&#xC758; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xD5A5;&#xD574; &#xC815;&#xC790; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C8;. &#xCC3E;&#xB294; chemotaxis&#xB85C; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xC804;&#xB2EC; &#xACBD;&#xB85C;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC815;&#xC790; chemotaxis &#xD669; &#xCCB4; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;.

Quimiotaxis esperm&#xE1;tica es un mecanismo qu&#xED;mico de gu&#xED;a que puede orientar a los espermatozoides a la superficie del huevo. Un gradiente de concentraci&#xF3;n picomolar de progesterona (P), el principal componente esteroide secretada por las c&#xE9;lulas del cumulus que rodean el huevo, atrae espermatozoides humanos. Con el fin de dilucidar el mecanismo molecular de la quimiotaxis de los espermatozoides mediada por P, que combinan la aplicaci&#xF3;n de diferentes estrategias: la inhibici&#xF3;n farmacol&#xF3;gica de mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, las mediciones de las concentraciones de segundos mensajeros y la activaci&#xF3;n de la se&#xF1;alizaci&#xF3;n quimiot&#xE1;ctica. Nuestros datos implican una serie de cl&#xE1;sicos de las v&#xED;as de transducci&#xF3;n de se&#xF1;ales en la respuesta y proporcionar un modelo para la secuencia de eventos, donde se activa la v&#xED;a TMAC-AMPc-PKA primero, seguido por la fosforilaci&#xF3;n de la prote&#xED;na tirosina (ecuatorial banda y flagelo) y la movilizaci&#xF3;n de calcio ( a trav&#xE9;s de IP (3) R y canales SOC), mientras que la cascada de GCs-GMPc-PKG, se activa despu&#xE9;s. Estos acontecimientos conducen a la orientaci&#xF3;n de los espermatozoides hacia la fuente de la chemoattractant. El hallazgo propone un mecanismo molecular que contribuye a la comprensi&#xF3;n de la v&#xED;a de transducci&#xF3;n de se&#xF1;al que tiene lugar en un proceso fisiol&#xF3;gico como quimiotaxis.

Aduen Morales-Garcia

School of Biosciences

University of Birmingham

Techniques for Imaging Ca²⁺ Signaling in Human Sperm

Aduen Morales-Garcia

School of Biosciences

University of Birmingham

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca²⁺ Signaling in Human Sperm