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Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

We have developed a chip-based cell culture system for the three-dimensional cultivation of cells. The chip is typically manufactured from ...

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Microfabrication of Chip-sized Scaffolds for Three-dimensional Cell cultivation

Using microfabrication technologies is a prerequisite to create scaffolds of reproducible geometry and constant quality for three-dimensional cell ...

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Interview: Bioreactors and Surfaced-Modified 3D-Scaffolds for Stem Cell Research

A Nature Editorial in 2003 asked the question  "Good-bye, flat biology?"  What does this question imply? In the past, many in vitro culture systems,  ...

Forschungszentrum Karlsruhe

Karlsruhe Research Centre

Karlsruhe Institute of Technology

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&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x652F;&#x67B6;&#x7684;&#x9AD8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x809D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x6587;&#x5316;: &#x7EC4;&#x7EC7;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

Very high cell densities and optimal vascularization characterize among others organs and tissues in vivo. In order to study organ-specific functions in vitro or to make use of them in medical devices/treatments in the future, this natural architecture should be rebuilt. An important aspect in this context is the appropriate ratio of medium to cell volume being so far not optimally reestablished in most of the currently available in vitro systems. To improve such culture conditions, we constructed a microstructure to culture hepatocytes and (without any addition of extracellular matrix material) characterized liver tissue in the form of evenly sized aggregates. The liver-specific differentiation status of such aggregates was monitored by their ability to perform CYP450 dependent xenobiotic metabolism along with the measurement of albumin secretion. Freshly isolated adult rat hepatocytes show an initial loss of total CYP450 content and of associated activities (mixed function oxidases). However, in the aggregate system, this level did not decrease further but remained stable or even increased throughout the culture period of 10-13 days. The CYP450 dependent metabolism of the hepatocytes is able to respond to classic inducing agents. The described culture efficiently supports liver-specific functions of adult rat hepatocytes and seems to be suited not only for use in an extracorporeal liver device but also for the formation of evenly sized small aggregates to be of use in transplantation of differentiated liver tissue. Moreover, after design variations, the microstructure can be applied for functional analysis of metabolically active hepatocytes as well as for toxicological and pharmacological validation.

Microstructured scaffolds for liver tissue cultures of high cell density: morphological and biochemical characterization of tissue aggregates.

Densit&#xE9;s cellulaires tr&#xE8;s &#xE9;lev&#xE9;es et la vascularisation optimale entre les organes de caract&#xE9;riser d&#x26;#39;autres tissus et in vivo. Pour &#xE9;tudier l&#x26;#39;orgue fonctions sp&#xE9;cifiques in vitro ou de faire usage d&#x26;#39;entre eux dans les dispositifs m&#xE9;dicaux ou des traitements &#xE0; l&#x26;#39;avenir, cette architecture naturelle devrait &#xEA;tre reconstruit. Un aspect important dans ce contexte est le ratio appropri&#xE9; de la moyenne &#xE0; volume de la cellule &#xE9;tant pour l&#x26;#39;instant pas de mani&#xE8;re optimale r&#xE9;tabli dans la plupart des syst&#xE8;mes actuellement disponibles dans in vitro. Pour am&#xE9;liorer les conditions de culture telles, nous avons construit une microstructure pour les h&#xE9;patocytes de la culture et (sans aucun ajout de mat&#xE9;riau de la matrice extracellulaire) caract&#xE9;ris&#xE9; les tissus du foie sous la forme d&#x26;#39;agr&#xE9;gats de taille &#xE9;gale. Le statut de diff&#xE9;renciation sp&#xE9;cifique du foie de ces agr&#xE9;gats a &#xE9;t&#xE9; suivie par leur capacit&#xE9; &#xE0; effectuer des CYP450 m&#xE9;tabolisme des x&#xE9;nobiotiques d&#xE9;pendante avec la mesure de la s&#xE9;cr&#xE9;tion de l&#x26;#39;albumine. Fra&#xEE;chement isol&#xE9;es des h&#xE9;patocytes de rats adultes montrent une perte initiale de contenu CYP450 totale et des activit&#xE9;s associ&#xE9;es (oxydases &#xE0; fonction mixte). Toutefois, dans le syst&#xE8;me global, ce niveau n&#x26;#39;a pas diminu&#xE9; davantage, mais est rest&#xE9; stable ou a m&#xEA;me augment&#xE9; tout au long de la p&#xE9;riode de culture de 10-13 jours. Le m&#xE9;tabolisme du CYP450 d&#xE9;pend des h&#xE9;patocytes est capable de r&#xE9;pondre &#xE0; des agents inducteurs classiques. La culture d&#xE9;crit soutient efficacement le foie des fonctions sp&#xE9;cifiques des h&#xE9;patocytes de rats adultes et semble &#xEA;tre adapt&#xE9; non seulement pour une utilisation dans un dispositif du foie extracorporelle, mais aussi pour la formation de petits agr&#xE9;gats de taille &#xE9;gale pour &#xEA;tre d&#x26;#39;utilisation dans la transplantation de tissu h&#xE9;patique diff&#xE9;renci&#xE9;e. En outre, apr&#xE8;s les variations de conception, de la microstructure peut &#xEA;tre appliqu&#xE9;e pour l&#x26;#39;analyse fonctionnelle des h&#xE9;patocytes m&#xE9;taboliquement actifs, ainsi que pour la validation toxicologiques et pharmacologiques.

&#xC9;chafaudages microstructur&#xE9;es pour cultures de tissus h&#xE9;patiques de haute densit&#xE9; cellulaire: caract&#xE9;risation morphologique et biochimique des tissus Granulats

Mikrostrukturierte Ger&#xFC;ste f&#xFC;r Lebergewebe Kulturen hoher Zelldichte: morphologische und biochemische Charakterisierung von Gewebe-Aggregate.

Cella molto alta densit&agrave; e vascolarizzazione ottimale caratterizzano tra gli altri organi e tessuti in vivo. Al fine di studiare le funzioni di organo-specifiche in vitro o a fare uso di loro in dispositivi/trattamenti medici in futuro, questa architettura naturale dovrebbe essere ricostruita. Un aspetto importante in questo contesto &egrave; il rapporto appropriato di medio volume cella finora essere ristabilita in modo non ottimale nella maggior parte dei sistemi in vitro attualmente disponibili. Per migliorare tali condizioni di cultura, abbiamo costruito un microstruttura di epatociti di cultura e (senza alcuna aggiunta di materiale extracellulare) caratterizzato tessuto epatico sotto forma di aggregati in modo uniforme dimensioni. Dalla loro capacit&agrave; di eseguire CYP450 dipendente dal metabolismo xenobiotico insieme con la misurazione della secrezione di albumina &egrave; stato monitorato lo stato specifico del fegato differenziazione di tali aggregati. Epatociti di ratto adulto appena isolato mostrano una perdita iniziale del contenuto totale di CYP450 e delle attivit&agrave; connesse (miscelati ossidasi a funzione). Tuttavia, nell&#39;aggregato sistema, questo livello non ha fatto diminuire ulteriormente ma &egrave; rimasto stabile o addirittura aumentato per tutto il periodo della cultura di 10-13 giorni. Il CYP450 dipendente dal metabolismo degli epatociti &egrave; in grado di rispondere agli agenti di induzione classici. La cultura descritta in modo efficiente supporta le funzioni specifiche del fegato di epatociti di ratto adulto e sembra di essere adatto non solo per l&#39;uso in un dispositivo epatico extracorporeo, ma anche per la formazione di uniformemente dimensioni piccole aggregazioni per essere di uso nel trapianto del tessuto epatico differenziato. Inoltre, dopo variazioni di design, la microstruttura pu&ograve; essere applicata per l&#39;analisi funzionale di epatociti metabolicamente attivi anche per quanto riguarda la convalida tossicologica e farmacologica.

Microstrutturate ponteggi per fegato culture di tessuto della densit&agrave; delle cellule ad alta: caratterizzazione morfologica e biochimica degli aggregati di tessuto.

&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x6700;&#x9069;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x4ED6;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3002; in vitro&#x3067;&#x306E;&#x81D3;&#x5668;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5C06;&#x6765;&#x7684;&#x306B;&#x533B;&#x7642;&#x6A5F;&#x5668;/&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3092;&#x4F5C;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30AD;&#x30C6;&#x30AF;&#x30C1;&#x30E3;&#x3092;&#x518D;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6587;&#x8108;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x306A;in vitro&#x7CFB;&#x3067;&#x73FE;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3067;&#x518D;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x5A92;&#x4F53;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6BD4;&#x7387;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#xFF08;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6750;&#x6599;&#x306E;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x6DFB;&#x52A0;&#x306A;&#x3057;&#xFF09;&#x5747;&#x7B49;&#x306B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x3067;&#x809D;&#x81D3;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D6;&#x30DF;&#x30F3;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x3001;CYP450&#x4F9D;&#x5B58;&#x751F;&#x4F53;&#x7570;&#x7269;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x65B0;&#x305F;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x4F53;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x7DCF;CY&#x200B;&#x200B;P450&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30F3;&#x30C4;&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6D3B;&#x52D5;&#xFF08;&#x6DF7;&#x5408;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x96C6;&#x7D04;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x7684;&#x306B;&#x63A8;&#x79FB;&#x3057;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;10&#x304B;&#x3089;13&#x65E5;&#x9593;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;CYP450&#x4F9D;&#x5B58;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x306F;&#x3001;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x306A;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5264;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8A18;&#x8F09;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3092;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x4F53;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x809D;&#x81D3;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x4F53;&#x5916;&#x809D;&#x81D3;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3082;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x809D;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x79FB;&#x690D;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5747;&#x7B49;&#x306B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x51DD;&#x96C6;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x3001;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x6BD2;&#x6027;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x85AC;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x691C;&#x8A3C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x809D;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x7528;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x8DB3;&#x5834;&#xFF1A;&#x7D44;&#x7E54;&#x96C6;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;

&#xC7A5;&#xAE30;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xB4F1; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB192;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC00;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; vascularization &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xC7A5;&#xAE30; &#xBCC4; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC5D0;&#xC774; &#xC790;&#xC5F0; &#xAC74;&#xCD95; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC791;&#xC131; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7F0;&#xC774; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC740; &#xC140; &#xBCFC;&#xB968; &#xC5C6;&#xB294; &#xCD5C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCCB4; &#xC678; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xB418; &#xACE0; &#xC911;&#xAC04;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBE44;&#xC728;. &#xAC19;&#xC740; &#xBB38;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADE0;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xD06C;&#xAE30;&#xC758; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; &#xBBF8;&#xC138; &#xBB38;&#xD654; hepatocytes &#xACE0; (&#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC7AC;&#xB8CC;&#xC758; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xCD94;&#xAC00;) &#xC5C6;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC74;&#xC124;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9D1;&#xACC4;&#xC758; &#xAC04; &#xBCC4; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB294; &#xC54C; &#xBD80; &#xBBFC; &#xBD84; &#xBE44; &#xCE21;&#xC815; &#xD568;&#xAED8; CYP450 &#xC885;&#xC18D; xenobiotic &#xC2E0;&#xC9C4; &#xB300;&#xC0AC;&#xB97C; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC13; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC131;&#xC778; &#xC950; hepatocytes&#xC758; &#xCD1D; CYP450 &#xCF58;&#xD150;&#xCE20; &#xBC0F; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD65C;&#xB3D9; (&#xD63C;&#xD569; &#xD568;&#xC218; oxidases)&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xACC4; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;,&#xC774; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xB354; &#xC774;&#xC0C1; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC548;&#xC815; &#xB610;&#xB294; &#xC2EC;&#xC9C0;&#xC5B4; 10 &#xC6D4; 13 &#xC77C; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xAC04;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. Hepatocytes &#xC885;&#xC18D; CYP450 &#xB300;&#xC0AC; &#xD074;&#xB798;&#xC2DD; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xC751;&#xB2F5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC124;&#xBA85;&#xB41C; &#xBB38;&#xD654; &#xC131;&#xC778; &#xC950; hepatocytes&#xC758; &#xAC04; &#xAD00;&#xB828; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558; &#xACE0; &#xADE0;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xACFC;&#xD559;&#xAE30;&#xC220;&#xCC98; &#xAC04; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C;&#xC758; &#xD615;&#xC131; &#xC801;&#xD569; &#xB420; &#xD06C;&#xAE30; &#xC791;&#xC740; &#xC9D1;&#xACC4;&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBCC0;&#xD615; &#xD6C4;&#xB294; &#xBBF8;&#xC138; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; &#xC57D;&#xB9AC; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; metabolically &#xD65C;&#xC131; hepatocytes&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xAC04; &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC74;&#xC124; &#xAE30;&#xACC4;&#xB294; microstructured &#xC784;&#xB300;: &#xC9C1;&#xBB3C;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

Densidades celulares muy altas y vascularizaci&#xF3;n &#xF3;ptima caracterizar entre otros &#xF3;rganos y tejidos in vivo. Con el fin de estudiar &#xF3;rgano las funciones espec&#xED;ficas in vitro o de hacer uso de ellos en los dispositivos m&#xE9;dicos y tratamientos en el futuro, esta arquitectura natural debe ser reconstruido. Un aspecto importante en este contexto es la relaci&#xF3;n apropiada de medio a volumen celular estar tan lejos no &#xF3;ptimamente restablecido en la mayor parte de la actualmente disponible en sistemas in vitro. Para mejorar estas condiciones de cultivo, se construy&#xF3; una microestructura de hepatocitos de cultivo y (sin ninguna adici&#xF3;n de material de la matriz extracelular) caracterizado tejido hep&#xE1;tico, en forma de agregados de tama&#xF1;o uniforme. El estado de diferenciaci&#xF3;n espec&#xED;fica del h&#xED;gado de tales agregados se control&#xF3; por su capacidad para realizar CYP450 metabolismo de xenobi&#xF3;ticos dependiente junto con la medici&#xF3;n de la secreci&#xF3;n de la alb&#xFA;mina. Reci&#xE9;n aisladas de hepatocitos de rata adulta muestran una p&#xE9;rdida inicial de contenidos CYP450 total y de las actividades asociadas (oxidasas de funci&#xF3;n mixta). Sin embargo, en el sistema total, este nivel no disminuya a&#xFA;n m&#xE1;s, pero se mantuvo estable o incluso aumentado en todo el per&#xED;odo de cultivo de 10-13 d&#xED;as. El metabolismo del CYP450 dependiente de los hepatocitos es capaz de responder a agentes inductores cl&#xE1;sicos. El cultivo se describe de manera eficiente apoya h&#xED;gado funciones espec&#xED;ficas de hepatocitos de rata adulta y parece ser adecuado no s&#xF3;lo para su uso en un dispositivo extracorp&#xF3;reo h&#xED;gado, sino tambi&#xE9;n para la formaci&#xF3;n de agregados peque&#xF1;os de tama&#xF1;o uniforme a ser de uso en el trasplante de tejido hep&#xE1;tico diferenciada. Adem&#xE1;s, despu&#xE9;s de variaciones de dise&#xF1;o, la microestructura se puede aplicar para el an&#xE1;lisis funcional de metab&#xF3;licamente activas hepatocitos, as&#xED; como para la validaci&#xF3;n toxicol&#xF3;gico y farmacol&#xF3;gico.

Andamios microestructurados de las Culturas tejido hep&#xE1;tico de alta densidad celular: Caracterizaci&#xF3;n morfol&#xF3;gica y bioqu&#xED;mica de los agregados de tejido

&#x636E;&#x62A5;&#x78C1;&#x573A;&#x4E2D;&#x7684;&#x78C1;&#x901A;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x4ECE; microT &#x5230;&#x5C71;&#x8005;&#x80FD;&#x591F;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;HSP72 mRNA &#x6216;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x540E;&#x6CBB;&#x7597;&#x8BA1;&#x5212;&#x4F7F;&#x7528;&#x5E26;&#x6709; flux density &#x7684; 2 &#x5230; 4 mT microT&#xFF0C;&#x9891;&#x7387;&#x4E3A; 50 &#x8D6B;&#x5179;&#x548C;&#x66DD;&#x5149;&#x65F6;&#x95F4;&#x4ECE; 15 &#x5230; 30 &#x5206;&#x949F;&#x7684;&#x7535;&#x78C1;&#x573A; HSP72 mRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x6C34;&#x5E73;&#x5728;&#x4E09;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C; (HL 60&#x3001; H9c2 &#x548C;&#x5409;&#x62C9;&#x5C14;&#x8FEA;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF09; &#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x682A; (HL-60 &#x548C;&#x5409;&#x62C9;&#x5C14;&#x8FEA;&#x5FC3;&#x810F;&#x7EC6;&#x80DE;) &#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684; HSP72 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x542B;&#x91CF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6216;&#x65B9;&#x5F0F;&#x663E;&#x793A; HSP72 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x4EFB;&#x4F55;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x867D;&#x7136; HSP72 mRNA &#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x67D0;&#x79CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x4E2A;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x4E2D;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x3002;&#x5F88;&#x660E;&#x663E;&#xFF0C;HSP72 mRNA &#x8F6C;&#x5F55;&#x548C;&#x7FFB;&#x8BD1;&#x90FD;&#x4E0D;&#x4E00;&#x5B9A;&#x8026;&#x5408;&#x4E2D;&#x7684;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5BF9; HSP72 mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x7535;&#x78C1;&#x573A;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E0D;&#x6307;&#x793A;&#x5BF9;&#x4E0B;&#x6E38;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x9664;&#x975E;&#x589E;&#x52A0;&#x7684; mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E0E;&#x589E;&#x52A0; HSP72 &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6C34;&#x5E73;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA;&#x3002;

HSP72 &#x7684;&#x4E09;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x4E2D;&#x7684;&#x6781;&#x4F4E;&#x9891;&#x7535;&#x78C1;&#x573A;&#x66B4;&#x9732;&#x540E;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3002;

It has been reported that magnetic fields with flux densities ranging from microT to mT are able to induce heat shock factor, HSP72 mRNA or heat shock proteins in various cells. In this study we investigated changes in the HSP72 mRNA transcription level in three cell lines (HL-60, H9c2, and Girardi heart cells) and in the intracellular HSP72 protein content in two cell lines (HL-60 and Girardi heart cells) after treatment schemes using electromagnetic fields with a flux density of 2 microT to 4 mT, a frequency of 50 Hz and exposure times from 15 to 30 min. None of the treatments or modalities showed any significant effect on the HSP72 protein level, although HSP72 mRNA could be induced, at least to some extent, with one of the parameter combinations in all cell lines tested. Obviously, HSP72 mRNA transcription and translation are not necessarily coupled in certain cells. This leads to the conclusion that electromagnetic field effects on HSP72 mRNA levels are not indicative for downstream effects unless increased mRNA levels can be correlated with increased HSP72 protein levels as well.

Expression of HSP72 after ELF-EMF exposure in three cell lines.

Il a &#xE9;t&#xE9; rapport&#xE9; que les champs magn&#xE9;tiques avec des densit&#xE9;s de flux allant de microT &#xE0; mT sont capables d&#x26;#39;induire facteur de choc thermique, HSP72 ARNm ou de prot&#xE9;ines de choc thermique dans diverses cellules. Dans cette &#xE9;tude, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; les variations du niveau de transcription ARNm HSP72 dans trois lign&#xE9;es cellulaires (HL-60, H9c2, et les cellules cardiaques Girardi) et dans le intracellulaire HSP72 teneur en prot&#xE9;ines dans deux lign&#xE9;es cellulaires (HL-60 et des cellules cardiaques Girardi) apr&#xE8;s le traitement syst&#xE8;mes utilisant des champs &#xE9;lectromagn&#xE9;tiques avec une densit&#xE9; de flux de 2 &#xE0; 4 microT mT, une fr&#xE9;quence de 50 Hz et temps d&#x26;#39;exposition de 15 &#xE0; 30 min. Aucun des traitements ou des modalit&#xE9;s montr&#xE9; aucun effet significatif sur le niveau HSP72 prot&#xE9;ines, bien que HSP72 ARNm peut &#xEA;tre induite, au moins dans une certaine mesure, avec l&#x26;#39;une des combinaisons de param&#xE8;tres dans toutes les lign&#xE9;es cellulaires test&#xE9;es. De toute &#xE9;vidence, HSP72 transcription de l&#x26;#39;ARNm et la traduction ne sont pas n&#xE9;cessairement coupl&#xE9;e dans certaines cellules. Cela conduit &#xE0; la conclusion que les effets des champs &#xE9;lectromagn&#xE9;tiques sur les niveaux d&#x26;#39;ARNm HSP72 ne sont pas indicatifs des effets en aval, sauf les niveaux d&#x26;#39;ARNm augmentation peut &#xEA;tre corr&#xE9;l&#xE9;e avec l&#x26;#39;augmentation des taux de prot&#xE9;ines HSP72 ainsi.

L&#x26;#39;expression de HSP72 Apr&#xE8;s ELF-EMF exposition dans trois lign&#xE9;es cellulaires

Es wurde berichtet, dass Magnetfelder mit Flux dichten von MicroT bis hin zu mT Hitzeschock induzieren k&ouml;nnen Faktor, HSP72-mRNA oder Hitze-Schock-Proteine in verschiedenen Zellen. In dieser Studie untersuchten wir Ver&auml;nderungen des HSP72 mRNA Transkription in drei Zelllinien (HL-60, H9c2 und Girardi Herzzellen) und die intrazellul&auml;re HSP72 Protein-Inhalt in beiden Zelllinien (HL-60 und Girardi Herzzellen) nach Behandlung-Systeme verwenden elektromagnetische Felder mit einer Flux density von 2 MicroT bis 4 Meter, eine Frequenz von 50 Hz und Belichtungszeiten von 15 bis 30 min. Keine der Behandlungen oder Modalit&auml;ten zeigten keine wesentlichen Auswirkungen auf der Ebene der HSP72 Protein, obwohl HSP72 mRNA konnte, zumindest teilweise induziert werden, getestet mit einem des Parameters Kombinationen in allen Zelllinien. Nat&uuml;rlich sind HSP72 mRNA-Transkription und &Uuml;bersetzung m&ouml;glicherweise nicht in bestimmten Zellen unbedingt gekoppelt. Dies f&uuml;hrt zu dem Schluss, dass elektromagnetische Feld Auswirkungen auf HSP72 mRNA-Stufen nicht indikativ f&uuml;r nachgelagerte Effekte sind, sofern nicht mit erh&ouml;hten HSP72 Protein-Ebene sowie erh&ouml;hte mRNA-Konzentration korreliert werden k&ouml;nnen.

Ausdruck von HSP72 nach ELF-EMF-Exposition in drei Zelllinien.

&Egrave; stato riferito che i campi magnetici con densit&agrave; di flusso che vanno da microT a mT sono in grado di indurre la scossa di calore di fattore, le proteine di scossa mRNA o calore di HSP72 in varie cellule. In questo studio abbiamo valutato cambiamenti nel livello di trascrizione di mRNA HSP72 in tre linee di cellule (cellule HL-60, H9c2 e Girardi del cuore) e il contenuto di proteine intracellulare HSP72 in due linee cellulari (cellule HL-60 e Girardi del cuore) dopo i regimi di trattamento utilizzando campi elettromagnetici con un flux density di microT 2 a 4 mT, una frequenza di 50 Hz e tempi di esposizione da 15 a 30 min. Nessuno dei trattamenti o modalit&agrave; ha mostrato alcun effetto significativo sul livello di proteina HSP72, sebbene HSP72 mRNA potrebbe essere indotta, almeno in una certa misura, con uno del parametro combinazioni in tutte le linee cellulari testate. Ovviamente, traduzione e trascrizione di mRNA HSP72 non sono necessariamente accoppiati in alcune cellule. Questo porta alla conclusione che gli effetti del campo elettromagnetico sui livelli di mRNA di HSP72 non sono indicativi per gli effetti a valle a meno che aumentati livelli di mRNA possono essere correlati con aumentati livelli di proteina HSP72 pure.

Espressione dell&#39;HSP72 dopo esposizione ELF-EMF in tre linee cellulari.

&#x305D;&#x308C;&#x306F;microT&#x304B;&#x3089;MT&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x78C1;&#x675F;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x78C1;&#x754C;&#x306F;&#x3001;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;HSP72 mRNA&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#xFF08;HL-60&#x3001;H9C2&#x3001;&#x3068;&#x30B8;&#x30E9;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HSP72&#x306E;mRNA&#x8EE2;&#x5199;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;HSP72&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x542B;&#x91CF;&#xFF08;HL-60&#x3068;&#x30B8;&#x30E9;&#x30EB;&#x30C7;&#x30A3;&#x5FC3;&#x81D3;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF09;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;15&#x301C;30&#x5206;&#x301C;2 microT&#x301C;4 mT&#x306E;&#x78C1;&#x675F;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x96FB;&#x78C1;&#x754C;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30B9;&#x30AD;&#x30FC;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;50 Hz&#x3068;&#x9732;&#x51FA;&#x306E;&#x983B;&#x5EA6;&#x306F;&#x500D;&#x3002; HSP72 mRNA&#x306F;&#x8A66;&#x9A13;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x3042;&#x308B;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x304C;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x3084;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x3082;&#x3001;HSP72&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3001;HSP72 mRNA&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x3068;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306F;&#x3001;&#x5FC5;&#x305A;&#x3057;&#x3082;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;HSP72&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x9650;&#x308A;&#x3001;HSP72&#x306E;mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x96FB;&#x78C1;&#x754C;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x4E0B;&#x6D41;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x7D50;&#x8AD6;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

3&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;ELF-EMF&#x66DD;&#x9732;&#x5F8C;&#x306E;HSP72&#x306E;&#x767A;&#x73FE;

Microt&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B0;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xB294; &#xC790; &#xC18D; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC640; &#xC790;&#xAE30;&#xC7A5; &#xC720;&#xB3C4; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC694;&#xC18C;, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; HSP72 mRNA &#xB610;&#xB294; &#xC5F4; &#xCDA9;&#xACA9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; 4 &#xC0B0;&#xC744; 2 Microt&#xC758; flux density, 50hz &#xBC0F; &#xB178;&#xCD9C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0;&#xC11C; 15-30 &#xBD84;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC804;&#xC790;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACC4;&#xD68D; &#xD6C4; HSP72 mRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xB808;&#xBCA8; 3 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; (HL-60, H9c2, &#xBC0F; Girardi &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC640; &#xB450; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; (HL-60 Girardi &#xC2EC;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;)&#xC5D0; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD568;&#xB7C9;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCE58;&#xB8CC; &#xB610;&#xB294; modalities &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xD070; &#xC601;&#xD5A5; HSP72 mRNA &#xC218; &#xC720;&#xB3C4; &#xB420;, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC5B4;&#xB290; &#xC815;&#xB3C4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC911; &#xD558; &#xB098;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xBB3C;&#xB860;, HSP72 mRNA &#xC804;&#xC0AC; &#xBC0F; &#xBC88;&#xC5ED; &#xD558;&#xC9C0; &#xBC18;&#xB4DC;&#xC2DC; &#xACB0;&#xD569; &#xD558;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xC99D;&#xAC00; HSP72 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC5F0;&#xAD00;&#xC73C;&#xB85C; mRNA &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xD55C; HSP72 mRNA &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC804;&#xC790;&#xAE30;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB2E4;&#xC6B4;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xD45C;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;&#xC744;&#xC774; &#xB048;&#xB2E4;.

3 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5D8; &#xD504; EMF &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; hsp72&#xC758; &#xD45C;&#xD604;.

Se ha informado de que los campos magn&#xE9;ticos con densidades de flujo que van desde microT a MT son capaces de inducir factor de choque t&#xE9;rmico, el ARNm HSP72 o prote&#xED;nas de choque t&#xE9;rmico en diversas c&#xE9;lulas. En este estudio se investigaron los cambios en el nivel de ARNm de transcripci&#xF3;n HSP72 en tres l&#xED;neas celulares (HL-60, H9c2, y las c&#xE9;lulas del coraz&#xF3;n Girardi) y en el contenido intracelular de prote&#xED;nas HSP72 en dos l&#xED;neas celulares (HL-60 y las c&#xE9;lulas del coraz&#xF3;n Girardi) despu&#xE9;s del tratamiento esquemas que utilizan campos electromagn&#xE9;ticos con una densidad de flujo de 2 a 4 microT mT, una frecuencia de 50 Hz y tiempos de exposici&#xF3;n de 15 a 30 min. Ninguno de los tratamientos o modalidades mostr&#xF3; ning&#xFA;n efecto significativo en el nivel de prote&#xED;na HSP72, aunque HSP72 mRNA puede ser inducida, al menos en cierta medida, con una de las combinaciones de par&#xE1;metros en todas las l&#xED;neas celulares ensayadas. Obviamente, HSP72 transcripci&#xF3;n y la traducci&#xF3;n de ARNm no est&#xE1;n necesariamente acoplado en ciertas c&#xE9;lulas. Esto conduce a la conclusi&#xF3;n de que los efectos del campo electromagn&#xE9;tico en HSP72 niveles de mRNA no son indicativas de efectos aguas abajo a menos que el aumento de los niveles de mRNA se puede correlacionar con el aumento de los niveles de prote&#xED;na HSP72 tambi&#xE9;n.

La expresi&#xF3;n de HSP72 despu&#xE9;s de la exposici&#xF3;n los CEM-ELF en tres l&#xED;neas celulares

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4E09;&#x7EF4;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;&#x8BE5;&#x8BBE;&#x5907;&#x662F;&#x82AF;&#x7247;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x5177;&#x6709; 1-2 cm(2) &#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x9886;&#x57DF;&#x3002;&#x82AF;&#x7247;&#x6784;&#x9020;&#x4E3A;&#x7F51;&#x683C;&#x7684;&#x5FAE;&#x578B;&#x5BB9;&#x5668;&#x6D4B;&#x91CF; 120 300 x 300 x 300 microm (h x l x w&#xFF09;&#xFF0C;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6570;&#x7EC4;&#x7684;&#x5706;&#x5F62;&#x51F9;&#x69FD; 300 microm &#x6DF1; 300 microm &#x76F4;&#x5F84;&#xFF09;&#x3002;&#x5FAE;&#x5BB9;&#x5668;&#x53EF;&#x80FD;&#x5355;&#x72EC;&#x914D;&#x5907;&#x53EF;&#x5BFB;&#x5740; 3D-&#x5FAE;&#x7535;&#x6781;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5141;&#x8BB8;&#x53EF;&#x5174;&#x594B;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x523A;&#x6FC0;&#x548C;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x8BBF;&#x95EE;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x73B0;&#x573A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x9002;&#x7528;&#x4E8E;&#x9AD8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x8FBE; 8 x 10(6) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57F9;&#x517B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x7531;&#x4E8E;&#x77E9;&#x5F62;&#x7F51;&#x683C;&#x5E03;&#x5C40;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5141;&#x8BB8;&#x8015;&#x5730;&#x7EC6;&#x80DE;&#x81EA;&#x52A8;&#x663E;&#x5FAE;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8D85;&#x8FC7; 1000&#x5E74;&#x5FAE;&#x5BB9;&#x5668;&#x542F;&#x7528;&#x5E76;&#x884C;&#x5206;&#x6790; superfusion/&#x704C;&#x6CE8;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x5404;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x7EC4;&#x5408;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x7269;&#x82AF;&#x7247;&#x8BC1;&#x660E;&#x7EC4;&#x57F9;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x4E3B;&#x8981;&#x9002;&#x5408;&#x3002;&#x5C0F;&#x5B66;&#x548C;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x884C;&#x6210;&#x529F;&#x683D;&#x57F9;&#x548C;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7279;&#x6027;&#x3002;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x4E2D;&#x975E;&#x704C;&#x6D41;&#x82AF;&#x7247;&#x65F6;&#xFF0C;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6307;&#x793A;&#x9700;&#x8981;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x704C;&#x6CE8;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x8FD8;&#x7533;&#x8BF7;&#x591A;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x9002;&#x5408;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5DE2;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

&#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x6210;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

We describe a multi-purpose platform for the three-dimensional cultivation of tissues. The device is composed of polymer chips featuring a microstructured area of 1-2 cm(2). The chip is constructed either as a grid of micro-containers measuring 120-300 x 300 x 300 microm (h x l x w), or as an array of round recesses (300 microm diameter, 300 microm deep). The micro-containers may be separately equipped with addressable 3D-micro-electrodes, which allow for electrical stimulation of excitable cells and on-site measurements of electrochemically accessible parameters. The system is applicable for the cultivation of high cell densities of up to 8 x 10(6) cells and, because of the rectangular grid layout, allows the automated microscopical analysis of cultivated cells. More than 1000 micro-containers enable the parallel analysis of different parameters under superfusion/perfusion conditions. Using different polymer chips in combination with various types of bioreactors we demonstrated the principal suitability of the chip-based bioreactor for tissue culture applications. Primary and established cell lines have been successfully cultivated and analysed for functional properties. When cells were cultured in non-perfused chips, over time a considerable degree of apoptosis could be observed indicating the need for an active perfusion. The system presented here has also been applied for the differentiation analysis of pluripotent embryonic stem cells and may be suitable for the analysis of the stem cell niche.

A chip-based platform for the in vitro generation of tissues in three-dimensional organization.

On d&#xE9;crit une plateforme &#xE0; usages multiples pour la culture tridimensionnelle des tissus. Le dispositif est compos&#xE9; de copeaux de polym&#xE8;res pr&#xE9;sentant une zone microstructur&#xE9;e de 1-2 cm (2). La puce est r&#xE9;alis&#xE9;e soit par une grille de micro-r&#xE9;cipients de mesure de 120 &#xE0; 300 x 300 x 300 microm&#xE8;tre (HxLxP), ou en tant que tableau d&#x26;#39;&#xE9;videments ronds (300 diam&#xE8;tre microm&#xE8;tre, 300 microm&#xE8;tre profonde). Les micro-conteneurs peuvent &#xEA;tre s&#xE9;par&#xE9;ment &#xE9;quip&#xE9; adressables 3D-micro-&#xE9;lectrodes, qui permettent pour la stimulation &#xE9;lectrique des cellules excitables et sur place de mesures des param&#xE8;tres accessibles par voie &#xE9;lectrochimique. Le syst&#xE8;me est applicable pour la culture de fortes densit&#xE9;s cellulaires pouvant aller jusqu&#x26;#39;&#xE0; 8 x 10 (6) cellules et, en raison de la pr&#xE9;sentation de la grille rectangulaire, permet l&#x26;#39;analyse automatis&#xE9;e de microscopie des cellules cultiv&#xE9;es. Plus de 1000 micro-conteneurs permettre l&#x26;#39;analyse parall&#xE8;le de diff&#xE9;rents param&#xE8;tres en vertu de surfusion / conditions de perfusion. Utilisation de polym&#xE8;res diff&#xE9;rents jetons en combinaison avec diff&#xE9;rents types de bior&#xE9;acteurs on a d&#xE9;montr&#xE9; l&#x26;#39;aptitude principale du bior&#xE9;acteur puce-base pour des applications de culture de tissus. Lign&#xE9;es de cellules primaires et &#xE9;tabli ont &#xE9;t&#xE9; cultiv&#xE9;es avec succ&#xE8;s et analys&#xE9;s pour les propri&#xE9;t&#xE9;s fonctionnelles. Lorsque les cellules ont &#xE9;t&#xE9; cultiv&#xE9;es dans la non-perfus&#xE9;s puces, au fil du temps un degr&#xE9; consid&#xE9;rable de l&#x26;#39;apoptose pourrait &#xEA;tre observ&#xE9;e, indiquant la n&#xE9;cessit&#xE9; d&#x26;#39;une perfusion active. Le syst&#xE8;me pr&#xE9;sent&#xE9; ici a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; appliqu&#xE9;e pour l&#x26;#39;analyse de la diff&#xE9;renciation des cellules souches pluripotentes embryonnaires et peut &#xEA;tre adapt&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;analyse de la niche de cellules souches.

Une plate-forme bas&#xE9;e sur puce pour la production in vitro de tissus dans l&#x26;#39;organisation tridimensionnelle

Wir beschreiben eine Mehrzweck-Plattform f&uuml;r den dreidimensionalen Anbau von Geweben. Das Ger&auml;t besteht aus Polymer-Chips mit eine mikrostrukturierte Gegend von 1-2 cm(2). Der Chip wird erstellt, entweder als ein Raster von Mikro-Beh&auml;lter 120-300 X 300 X 300 Microm Messen (h x l x b), oder als Array von Runde Aussparungen (300 Microm Durchmesser, Tiefe 300 Microm). Mikro-Beh&auml;lter k&ouml;nnen separat mit adressierbaren 3D-Mikro-Elektroden, die elektrische Stimulation von excitable Zellen und vor-Ort-Messung elektrochemisch zug&auml;ngliche Parameter erm&ouml;glichen, ausger&uuml;stet sein. Das System gilt f&uuml;r den Anbau von hohen Zelldichten von bis zu 8 X 10 6 Zellen und aufgrund des rechteckigen Raster-Layouts, erm&ouml;glicht die automatisierte mikroskopische Analyse der kultivierten Zellen. Mehr als 1000 Mikro-Beh&auml;lter erm&ouml;glichen die parallele Analyse verschiedener Parameter unter Superfusion/Perfusion Bedingungen. Mit verschiedenen Polymer-Chips in Kombination mit verschiedenen Arten von Bioreaktoren zeigten wir die wichtigste Eignung der Chip-basierten Bioreaktor f&uuml;r Gewebekultur-Anwendungen. Prim&auml;r- und etablierte Zelllinien wurden erfolgreich kultiviert und funktionellen Eigenschaften untersucht. Wenn Zellen in nicht-perfused Chips kultiviert wurden, konnte im Laufe der Zeit ein betr&auml;chtliches Ma&szlig; an Apoptose beobachtet werden, die Notwendigkeit einer aktiven Perfusion angibt. Das hier vorgestellte System ist auch f&uuml;r die Analyse der Differenzierung von pluripotenten embryonalen Stammzellen angewendet wurde und geeignet f&uuml;r die Analyse der Stammzelle Nische.

Eine Chip-basierte Plattform zur in-vitro-Erzeugung von Geweben in dreidimensionalen Organisation.

Descriviamo una piattaforma polivalente per la coltura tridimensionale dei tessuti. Il dispositivo &egrave; composto da polimeri chip dotato di un&#39;area di 1-2 cm(2) microstrutturata. Il chip &egrave; costruito come una griglia di micro-contenitori di misura 120-300 x 300 x 300 microm (h x l x w), o come una matrice di rientranze rotonde (300 microm di diametro, profondo 300 microm). I micro-contenitori possono essere separatamente dotati indirizzabili 3D-micro-elettrodi, che consentono la stimolazione elettrica delle cellule eccitabili e misurazioni in loco dei parametri elettrochimicamente accessibile. Il sistema &egrave; applicabile per la coltivazione delle densit&agrave; alta cella di fino a 8 cellule di 10 x e, a causa del layout di griglia rettangolare, permette l&#39;analisi microscopica automatizzato delle cellule coltivate. Pi&ugrave; di 1000 micro-contenitori consentono l&#39;analisi parallela di diversi parametri in condizioni superfusion/perfusione. Utilizzando polimeri diversi chip in combinazione con vari tipi di bioreattori abbiamo dimostrato l&#39;idoneit&agrave; principale del bioreattore chip-based per applicazioni di coltura del tessuto. Linee cellulari primarie e stabilito sono stati coltivati con successo e analizzati per le propriet&agrave; funzionali. Quando le cellule sono state coltivate in fiches non perfuso, nel corso del tempo un notevole grado di apoptosi potrebbe essere osservato che indica la necessit&agrave; di un&#39;attiva perfusione. Il sistema qui presentato &egrave; stato applicato anche per l&#39;analisi di differenziazione delle cellule staminali embrionali pluripotenti e pu&ograve; essere adatto per l&#39;analisi della nicchia delle cellule staminali.

Una piattaforma basata su chip per la generazione in vitro di tessuti nell&#39;organizzazione tridimensionale.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x591A;&#x76EE;&#x7684;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306F;1-2&#x30BB;&#x30F3;&#x30C1;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB;&#xFF08;2&#xFF09;&#x306E;&#x5FAE;&#x7D30;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x304C;120&#x304B;&#x3089;300&#xD7;300&#xD7;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#xFF08;hxlxw&#xFF09;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30E9;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C9;&#x51F9;&#x90E8;&#xFF08;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x306E;&#x76F4;&#x5F84;&#x306F;&#x3001;300&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30E2;&#x30EB;&#x6DF1;&#x3044;&#xFF09;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x5225;&#x306B;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x8208;&#x596E;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x523A;&#x6FC0;&#x3068;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B9;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x30AA;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30C9;&#x30EC;&#x30B9;&#x6307;&#x5B9A;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;3&#x6B21;&#x5143;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x96FB;&#x6975;&#x3092;&#x88C5;&#x5099;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x6700;&#x5927;8&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x9AD8;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x683D;&#x57F9;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x306A;&#x305C;&#x306A;&#x3089;&#x3001;&#x9577;&#x65B9;&#x5F62;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30C3;&#x30C9;&#x30EC;&#x30A4;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x52D5;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 1000&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x306F;&#x3001;&#x704C;&#x6D41;/&#x704C;&#x6D41;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x4E26;&#x5217;&#x89E3;&#x6790;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30DD;&#x30EA;&#x30DE;&#x30FC;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x7D44;&#x7E54;&#x57F9;&#x990A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x9069;&#x5408;&#x6027;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x683D;&#x57F9;&#x3057;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x975E;&#x704C;&#x6D41;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306A;&#x704C;&#x6D41;&#x306E;&#x5FC5;&#x8981;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x5FDC;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x9069;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x4E09;&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;in vitro&#x3067;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC30;&#xC591;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB2E4;&#xBAA9;&#xC801; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC; &#xAE30;&#xC220;. &#xC7A5;&#xCE58; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xCE69; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC73C;&#xB85C; 1-2 cm(2) microstructured &#xC601;&#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE69; &#xAD6C;&#xC131; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; 120-300 x 300 x 300 microm &#xCE21;&#xC815; &#xB208;&#xAE08;&#xC73C;&#xB85C; (h l x w x), &#xB77C;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xD734;&#xC2DD; (300 microm &#xC9C0;&#xB984;, &#xAE4A;&#xC774; 300 microm)&#xC758; &#xBC30;&#xC5F4; &#xB610;&#xB294;. &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; &#xC8FC;&#xC18C; &#xC9C0;&#xC815;&#xC774; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; 3D-&#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC804;&#xADF9;, &#xACE0;&#xB974;&#xAE30;&#xAC00; &#xC140;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xC790;&#xADF9; &#xBC0F; &#xD604;&#xC7A5; &#xCE21;&#xC815; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xC561;&#xC138;&#xC2A4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; &#xAC16;&#xCDB0;&#xC9C8; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300; 8 x &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC801;&#xC6A9; &#xBC0F; &#xC0AC;&#xAC01;&#xD615; &#xBAA8;&#xB208; &#xB808;&#xC774;&#xC544;&#xC6C3; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xBC30; &#xC140;&#xC758; &#xC790;&#xB3D9;&#xB41C; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9;. 1000 &#xAC1C; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xCEE8;&#xD14C;&#xC774;&#xB108; superfusion/&#xAD00;&#xB958; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC758; &#xBCD1;&#xB82C; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC870;&#xC9C1; &#xBB38;&#xD654; &#xC560;&#xD50C;&#xB9AC;&#xCF00;&#xC774;&#xC158;&#xC6A9; &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC8FC; &#xC801;&#xD569;&#xC131; &#xC99D;&#xBA85; bioreactors&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD3F4;&#xB9AC;&#xBA38; &#xCE69;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. &#xAE30;&#xBCF8; &#xBC0F; &#xC124;&#xB9BD; &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7AC;&#xBC30; &#xACE0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC18D;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC140; &#xCE69; &#xBE44; &#xB07C;&#xC5B9;&#xB294;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC791; &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC815;&#xB3C4;&#xC758; apoptosis &#xAD00;&#xCC30; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xD65C;&#xC131; &#xAD00;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBD84;&#xD654; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xACE0; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xCCB4; &#xC678; &#xC138;&#xB300; &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;.

Se describe una plataforma multi-prop&#xF3;sito para el cultivo tridimensional de los tejidos. El dispositivo se compone de chips de pol&#xED;mero que ofrecen un &#xE1;rea microestructurado de 1-2 cm (2). El chip se construye ya sea como una red de micro-contenedores de medici&#xF3;n 120-300 x 300 x 300 micras (hxlxw), o como una matriz de rebajes circulares (300 micras de di&#xE1;metro, 300 micras de profundidad). Los contenedores de micro-puede ser separado equipado con direccionables 3D micro-electrodos, que permiten la estimulaci&#xF3;n el&#xE9;ctrica de las c&#xE9;lulas excitables y mediciones in situ de par&#xE1;metros accesibles por v&#xED;a electroqu&#xED;mica. El sistema es aplicable para el cultivo de altas densidades de c&#xE9;lulas de hasta 8 x 10 (6) las c&#xE9;lulas y, debido a la disposici&#xF3;n de la rejilla rectangular, permite el an&#xE1;lisis automatizado microsc&#xF3;pico de las c&#xE9;lulas cultivadas. M&#xE1;s de 1000 micro-contenedores permitir el an&#xE1;lisis paralelo de diferentes par&#xE1;metros bajo superfusi&#xF3;n / condiciones de perfusi&#xF3;n. Utilizando chips de diferentes pol&#xED;meros en combinaci&#xF3;n con varios tipos de biorreactores hemos demostrado la idoneidad principal del biorreactor basado en chips para aplicaciones de cultivo de tejidos. L&#xED;neas celulares primarias y constantes han sido cultivado con &#xE9;xito y se analizaron las propiedades funcionales. Cuando las c&#xE9;lulas fueron cultivadas en no-perfundidos virutas, con el tiempo un grado considerable de la apoptosis se pudo observar que indica la necesidad de una perfusi&#xF3;n activo. El sistema que aqu&#xED; se presenta se ha aplicado tambi&#xE9;n para el an&#xE1;lisis de la diferenciaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre pluripotentes embrionarias y puede ser adecuado para el an&#xE1;lisis del nicho de c&#xE9;lulas madre.

Una plataforma basada en el chip para la generaci&#xF3;n in vitro de tejidos en tres dimensiones Organizaci&#xF3;n

&#x867D;&#x7136;&#x5E38;&#x89C4;&#x65CB;&#x8F6C;&#x57FA;&#x4E8E;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7403;&#x662F;&#x6700;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7814;&#x7A76; retinogenesis &#x4E0E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x57FA;&#x672C;&#x6D41;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x90FD;&#x4E0D;&#x592A;&#x9002;&#x5408; histotypic 3 &#x4E09;&#x7EF4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7403;&#xFF0C;&#x5C06;&#x4E3A;&#x672A;&#x6765;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x5DE5;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x66F4;&#x6362;&#x7684;&#x52A8;&#x7269;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x5BB9;&#x6613;&#x548C;&#x4F4E;&#x6210;&#x672C;&#x6279;&#x91CF;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E0E;&#x8BAE;&#x6848;&#x65E0;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x4E2D;&#x57F9;&#x517B;&#x65B0;&#x578B; microscaffold &#x7EC6;&#x80DE;&#x82AF;&#x7247; &#xFF08;&#x79F0;&#x4E3A; cf &#x82AF;&#x7247;&#xFF09; &#x4E0A;&#x7684;&#x7403;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4F20;&#x7EDF; reaggregated &#x7684;&#x7403;&#x62BD;&#x79BB;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE;&#x65B0;&#x751F;&#x9F20; (&#x957F;&#x722A;&#x6C99;&#x9F20;)&#x3002;&#x5728;&#x5934; 10 &#x5929;&#x4F53;&#x5916; &#xFF08;div&#xFF09; &#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x66F4;&#x52A8;&#x548C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5F62;&#x6210;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x589E;&#x6B96;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x5F15;&#x4EBA;&#x6CE8;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E2A; cf &#x82AF;&#x7247;&#x5FAE;&#x8154;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7403;&#x4F53;&#x5236;&#x5B9A;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6587;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x9886;&#x57DF;&#x89C4;&#x6A21;&#x548C;&#x6269;&#x6563;&#x7387;&#x662F;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5B8C;&#x5168;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x53EA;&#x662F;&#x5230; 5 div&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x6210;&#x4E3A; cf-&#x82AF;&#x7247;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FFD;&#x7565;&#x4E0D;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5B83;&#x5411;&#x4E0A;-&#x73AB;&#x7470;&#x518D;&#x6B21;&#x5728;&#x4F20;&#x7EDF;&#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x5316;&#x7279;&#x5F81;&#x53D1;&#x73B0;&#x5B58;&#x5728; M&uuml;ller &#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x3001; &#x65E0;&#x957F;&#x7A81;&#x3001; &#x4E24;&#x6781;&#x548C;&#x6A2A;&#x5411;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x5B89;&#x6392;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x5728;&#x4ECE; P3 &#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x8131;&#x79BB;&#x7403;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x82AF;&#x7247;&#x7684; 3D &#x7684;&#x597D;&#x5904;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x662F;&#x5728;&#x589E;&#x5F3A;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x3001; &#x57F9;&#x517B;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x7403;&#x4F53;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3001; &#x9AD8;&#x91CD;&#x590D;&#x6027;&#x548C;&#x57F9;&#x517B;&#x6761;&#x4EF6;&#x6613;&#x4E8E;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x6027;&#x7684;&#x53EF;&#x9760;&#x9886;&#x57DF;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x53D1;&#x5C55;&#x5E94;&#x8BE5;&#x5141;&#x8BB8;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x4E3A;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x4ED6;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684; histotypic &#x7403;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x9002;&#x5408;&#x4E8E;&#x73AF;&#x5883;&#x76D1;&#x6D4B;&#x548C;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x8BCA;&#x65AD;&#x3002;

&#x5728; 3D &#x7403;&#x4ECE;&#x9F20;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x7684;&#x8BAE;&#x6848;&#x514D;&#x8D39;&#x7684;&#x3001; &#x57FA;&#x4E8E;&#x751F;&#x7269;&#x53CD;&#x5E94;&#x5668;&#x7684;&#x5FAE;&#x89C2;&#x7ED3;&#x6784;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x91CD;&#x5EFA;&#x3002;

While conventional rotation culture-based retinal spheroids are most useful to study basic processes of retinogenesis and tissue regeneration, they are less appropriate for an easy and inexpensive mass production of histotypic 3-dimensional tissue spheroids, which will be of utmost importance for future bioengineering, e.g. for replacement of animal experimentation. Here we compared conventionally reaggregated spheroids derived from dissociated retinal cells from neonatal gerbils (Meriones unguiculatus) with spheroids cultured on a novel microscaffold cell chip (called cf-chip) in a motion-free bioreactor. Reaggregation and developmental processes leading to tissue formation, e.g. proliferation, apoptosis and differentiation were observed during the first 10 days in vitro (div). Remarkably, in each cf-chip micro-chamber, only one spheroid developed. In both culture systems, sphere sizes and proliferation rates were almost identical. However, apoptosis was only comparably high up to 5 div, but then became negligible in the cf-chip, while it up-rose again in the conventional culture. In both systems, immunohistochemical characterisation revealed the presence of MÃ¼ller glia cells, of ganglion, amacrine, bipolar and horizontal cells at a highly comparable arrangement. In both systems, photoreceptors were detected only in spheroids from P3 retinae. Benefits of the chip-based 3D cell culture were a reliable sphere production at enhanced viability, the feasibility of single sphere observation during cultivation time, a high reproducibility and easy control of culture conditions. Further development of this approach should allow high-throughput systems not only for retinal but also other types of histotypic spheroids, to become suitable for environmental monitoring and biomedical diagnostics.

Tissue reconstruction in 3D-spheroids from rodent retina in a motion-free, bioreactor-based microstructure.

Bien que classiques de rotation de la culture &#xE0; base de sph&#xE9;ro&#xEF;des la r&#xE9;tine sont les plus utiles pour &#xE9;tudier les processus de base de retinogenesis et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des tissus, ils sont moins appropri&#xE9; pour une production de masse facile et peu co&#xFB;teux de histotypic sph&#xE9;ro&#xEF;des tissus en 3 dimensions, qui seront d&#x26;#39;une importance capitale pour la bio-ing&#xE9;nierie avenir, par exemple pour le remplacement de l&#x26;#39;exp&#xE9;rimentation animale. Ici nous avons compar&#xE9; sph&#xE9;ro&#xEF;des classiquement agr&#xE9;g&#xE9;s de nouveau d&#xE9;riv&#xE9;s de cellules r&#xE9;tiniennes dissoci&#xE9;es de gerbilles (Meriones unguiculatus n&#xE9;onatales) avec sph&#xE9;ro&#xEF;des cultiv&#xE9;s sur une puce microscaffold cellule roman (cf appel&#xE9; puce) dans un bior&#xE9;acteur de mouvement libre. R&#xE9;agr&#xE9;gation et les processus de d&#xE9;veloppement menant &#xE0; la formation des tissus, par exemple, la prolif&#xE9;ration, l&#x26;#39;apoptose et la diff&#xE9;renciation ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es pendant les 10 premiers jours in vitro (DIV). Remarquablement, dans chaque cf puce de micro-chambre, un seul sph&#xE9;ro&#xEF;de d&#xE9;velopp&#xE9;. Dans les deux syst&#xE8;mes de culture, les tailles et les taux de prolif&#xE9;ration sph&#xE8;re &#xE9;taient presque identiques. Cependant, l&#x26;#39;apoptose n&#x26;#39;est comparablement &#xE9;lev&#xE9; &#xE0; 5 div, mais devient alors n&#xE9;gligeable dans le CF-puce, alors qu&#x26;#39;il en-a de nouveau augment&#xE9; dans la culture classique. Dans les deux syst&#xE8;mes, la caract&#xE9;risation immunohistochimique a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; la pr&#xE9;sence de cellules gliales M&#xFC;ller, de ganglion, les amacrines, bipolaires et les cellules horizontales &#xE0; un arrangement tr&#xE8;s comparables. Dans les deux syst&#xE8;mes, les photor&#xE9;cepteurs ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;s seulement dans les sph&#xE9;ro&#xEF;des de r&#xE9;tines P3. Avantages de la culture de cellules sur puce 3D &#xE9;taient une production fiable &#xE0; la sph&#xE8;re viabilit&#xE9; accrue, la faisabilit&#xE9; de l&#x26;#39;observation seule sph&#xE8;re pendant le temps de la culture, une grande reproductibilit&#xE9; et un contr&#xF4;le ais&#xE9; des conditions de culture. Poursuite de l&#x26;#39;&#xE9;laboration de cette approche devrait permettre &#xE0; haut d&#xE9;bit des syst&#xE8;mes non seulement pour les types de la r&#xE9;tine, mais aussi d&#x26;#39;autres de sph&#xE9;ro&#xEF;des histotypic, pour devenir adapt&#xE9;s &#xE0; la surveillance de l&#x26;#39;environnement et diagnostics biom&#xE9;dicaux.

La reconstruction de tissus en 3D sph&#xE9;ro&#xEF;des de Retina contre les rongeurs dans une motion-libre, bior&#xE9;acteur &#xE0; base Microstructure

W&auml;hrend herk&ouml;mmliche Drehung kulturbasierte retinale Sph&auml;roide n&uuml;tzlichsten grundlegenden Prozesse des Retinogenese und Geweberegeneration zu studieren sind, sind sie weniger geeignet f&uuml;r eine einfache und kosteng&uuml;nstige Massenproduktion von Histotypic 3-dimensionale Gewebe Sph&auml;roide, die f&uuml;r k&uuml;nftige Biotechnik, z.B. f&uuml;r Ersatz von Tierversuchen von gr&ouml;&szlig;ter Bedeutung sein wird. Hier verglichen wir konventionell Kriegsverbrechertribunals Sph&auml;roide von getrennten retinalen Zellen von Neugeborenen Rennm&auml;use (Meriones Unguiculatus) abgeleitet, mit Sph&auml;roide kultiviert auf eine neuartige Microscaffold-Zelle-Chip (Cf-Chip genannt) in einem Bewegungs-frei-Bioreaktor. Reaggregation und Entwicklungsprozesse zu Bildung, z.B. Proliferation, Apoptose und Differenzierung wurden w&auml;hrend der ersten 10 Tage in-vitro (Div) beobachtet. Bemerkenswert ist, in jeder Cf-Chip Mikro-Kammer entwickelt nur ein Sph&auml;roid. In beiden Systemen Kultur waren Sph&auml;re Gr&ouml;&szlig;en und Verbreitung Preise fast identisch. Apoptose wurde nur bis 5 Div vergleichsweise hoch, jedoch wurde dann in der Cf-Chip, vernachl&auml;ssigbar, w&auml;hrend es oben-wieder in der herk&ouml;mmlichen Kultur Rose. In beiden Systemen offenbart immunhistochemische Charakterisierung die Anwesenheit von M&uuml;ller-Glia-Zellen, Ganglion, Amacrine, bipolar und horizontalen Zellen bei der h&ouml;chst vergleichbare Anordnung. In beiden Systemen wurden die Photorezeptoren nur bei Sph&auml;roide aus P3 Retinae festgestellt. Vorteile des Chip-basierten 3D Zellkultur eine zuverl&auml;ssige Kugel-Produktion in verbesserte Rentabilit&auml;t, die Machbarkeit der single sph&auml;re Beobachtung w&auml;hrend Anbau Zeit, eine hohe Reproduzierbarkeit und einfache Kontrolle der Kulturbedingungen wurden. Weiterentwicklung dieses Ansatzes sollte Hochdurchsatz-Systeme nicht nur f&uuml;r die Retina, sondern auch andere Arten von Histotypic Sph&auml;roide, geeignet f&uuml;r Umwelt&uuml;berwachung und biomedizinische Diagnostik zu erm&ouml;glichen.

Geweberekonstruktion in 3D-Sph&auml;roide von Nagetier Retina in ein Bewegungs-frei, Bioreaktor-basierte Gef&uuml;ge.

Mentre sferoidi retinica basata sulla cultura di rotazione convenzionale sono pi&ugrave; utili per studiare i processi di rigenerazione di tessuto e retinogenesis basic, sono meno appropriati per una produzione di massa facile e poco costosa di sferoidi 3-dimensionale dei tessuti histotypic, che sar&agrave; di fondamentale importanza per la futura bioingegneria, ad esempio per la sostituzione della sperimentazione animale. Qui abbiamo confrontato sferoidi convenzionalmente reaggregated derivate da cellule retiniche dissociate da neonatale gerbils (Meriones unguiculatus) con sferoidi coltivati su un chip cell microscaffold romanzo (chiamato cf-chip) in un bioreattore privo di movimento. Reaggregation e processi di sviluppo che conduce alla formazione del tessuto, per esempio proliferazione, apoptosi e differenziazione sono stati osservati durante i primi 10 giorni in vitro (div). Notevolmente, in ogni cf-chip micro-camera, solo uno sferoide sviluppato. In entrambi i sistemi di coltura, sfera dimensioni e tassi di proliferazione erano quasi identici. Tuttavia, apoptosis era solo comparabilmente alto fino a 5 div, ma poi &egrave; diventato trascurabile nel cf-chip, mentre up-rosa nuovamente nella cultura convenzionale. In entrambi i sistemi, caratterizzazione immunoistochimica ha rivelato la presenza di cellule di glia di M&uuml;ller, del ganglio, amacrine, cellule bipolari e orizzontali a una disposizione altamente paragonabile. In entrambi i sistemi, fotorecettori sono stati rilevati solo in sferoidi da P3 retinae. Vantaggi del 3D basato su chip cell cultura erano una produzione affidabile sfera a una maggiore redditivit&agrave;, la fattibilit&agrave; della sfera singola osservazione durante il tempo di coltivazione, un&#39;elevata riproducibilit&agrave; e facile controllo delle condizioni di coltura. Ulteriore sviluppo di questo approccio dovrebbe consentire sistemi di alto-rendimento non solo per la retina, ma anche altri tipi di sferoidi histotypic, per diventare adatto per il monitoraggio ambientale e Diagnostica biomedica.

Ricostruzione del tessuto in 3D-sferoidi da roditore retina in una movimento libero, basato su bioreattore microstruttura.

&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x57F9;&#x990A;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x304C;retinogenesis&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x5B66;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x6700;&#x3082;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;histotypic 3&#x6B21;&#x5143;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3001;&#x7C21;&#x5358;&#x304B;&#x3064;&#x5B89;&#x4FA1;&#x306A;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x306F;&#x3042;&#x307E;&#x308A;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x52D5;&#x7269;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xB7;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;microscaffold&#x7D30;&#x80DE;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#xFF08;CF-&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#xFF09;&#x4E0A;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3057;&#x305F;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x65B0;&#x751F;&#x5150;&#x306E;&#x30B9;&#x30CA;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#xFF08;&#x30AF;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30C8;&#x30AC;&#x30EA;&#x30CD;&#x30BA;&#x30DF;&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x89E3;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x7DB2;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x5F93;&#x6765;reaggregated&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x518D;&#x51DD;&#x96C6;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x81F3;&#x308B;&#x767A;&#x751F;&#x904E;&#x7A0B;&#x3001;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x3092;in vitro&#xFF08;DIV&#xFF09;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;10&#x65E5;&#x9593;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9A5A;&#x304F;&#x3079;&#x304D;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x5404;CF-&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x5185;&#x3067;&#x3001;1&#x3064;&#x3060;&#x3051;&#x306E;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7403;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x5897;&#x6B96;&#x901F;&#x5EA6;&#x306F;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x4E00;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x304C;&#x6700;&#x5927;5 div&#x306B;&#x306E;&#x307F;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5F93;&#x6765;&#x306E;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x518D;&#x3073;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D0;&#x30E9;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;CF-&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x7121;&#x8996;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x7279;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x30DF;&#x30E5;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30A2;&#x30DE;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x53CC;&#x6975;&#x6027;&#x3068;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5339;&#x6575;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B8;&#x3067;&#x3001;&#x6C34;&#x5E73;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;P3&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30C1;&#x30C3;&#x30D7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;3D&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x304C;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3067;&#x4FE1;&#x983C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x7403;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3001;&#x683D;&#x57F9;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x5358;&#x7403;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x5B9F;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3001;&#x9AD8;&#x3044;&#x518D;&#x73FE;&#x6027;&#x3068;&#x57F9;&#x990A;&#x6761;&#x4EF6;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x304C;&#x5BB9;&#x6613;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x767A;&#x5C55;&#x306F;&#x3001;&#x74B0;&#x5883;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x533B;&#x5B66;&#x8A3A;&#x65AD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;histotypic&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30CF;&#x30A4;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30E2;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x3001;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x3052;&#x3063;&#x6B6F;&#x985E;&#x306E;&#x7DB2;&#x819C;&#x304B;&#x3089;&#x306E;3&#x6B21;&#x5143;&#x56DE;&#x8EE2;&#x6955;&#x5186;&#x4F53;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x518D;&#x69CB;&#x7BC9;

&#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xD68C;&#xC804; &#xBB38;&#xD654; &#xAE30;&#xBC18; &#xB9DD;&#xB9C9; spheroids retinogenesis &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xACF5;&#xC815;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC548;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xB35C; &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC758; &#xAD50;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBBF8;&#xB798;&#xC758; &#xC0DD;&#xBA85; &#xACF5;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; histotypic 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC870;&#xC9C1; spheroids&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xC800;&#xB834; &#xD558; &#xAC8C; &#xB300;&#xB7C9; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC804;&#xD1B5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; reaggregated spheroids &#xC2E0;&#xC0DD;&#xC544; gerbils (Meriones unguiculatus)&#xC5D0;&#xC11C; &#xB04A;&#xB41C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; spheroids &#xBAA8;&#xC158; &#xBB34;&#xB8CC; bioreactor&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD50;&#xC591; &#xC18C;&#xC124; microscaffold &#xC140; &#xCE69; (cf-&#xCE69; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xD568;)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;. Reaggregation &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xD615;&#xC131;, &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xBA74; &#xD655;&#xC0B0;, apoptosis&#xC640; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xB97C; &#xC120;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xCC98;&#xC74C; 10 &#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; &#xCCB4; &#xC678; (div) &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xAC01; cf-&#xCE69; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;-&#xCC54;&#xBC84;, &#xD558;&#xB098;&#xB9CC; &#xD33D;&#xCC3D;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xB450; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC601;&#xC5ED; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xD655;&#xC0B0; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAC70;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; apoptosis 5 div &#xCD5C;&#xB300; comparably &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;&#xB9CC; &#xB2E4;&#xC74C; cf &#xCE69;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBB34;&#xC2DC;&#xD560; &#xC218; &#xB41C; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xCD5C;&#xB300;-&#xB85C;&#xC988; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xAE30;&#xC874;&#xC758; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;. &#xB450; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; immunohistochemical &#xBB18;&#xC0AC;&#xAC00; &#xBB90;&#xB7EC; &#xBA85;&#xACFC; &#xC140;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808;, amacrine, &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xBC30;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774; &#xD3F4;&#xB77C; &#xBC0F; &#xAC00;&#xB85C; &#xC140;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB450; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xB1CC; P3 retinae&#xC5D0;&#xC11C; spheroids&#xC5D0;&#xB9CC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xCE69; &#xAE30;&#xBC18; 3d&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC744; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;, &#xC7AC;&#xBC30; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC601;&#xC5ED; &#xAD00;&#xCC30;, &#xB192;&#xC740; &#xC7AC;&#xD604;&#xC131; &#xBC0F; &#xBB38;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;&#xC758; &#xC26C;&#xC6B4; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC5D0; &#xC2E0;&#xB8B0;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xAD6C;&#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB9DD;&#xB9C9; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xD658;&#xACBD; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xACFC; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC758;&#xD559; &#xC9C4;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xB420; histotypic spheroids&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xC158; &#xBB34;&#xB8CC;, bioreactor &#xAE30;&#xBC18; &#xBBF8;&#xC138; &#xC950; &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; 3D-spheroids&#xC5D0;&#xC11C; &#xC870;&#xC9C1; &#xC7AC;&#xAC74;.

Mientras convencionales de rotaci&#xF3;n basados &#x200B;&#x200B;en la cultura esferoides la retina son m&#xE1;s &#xFA;tiles para estudiar los procesos b&#xE1;sicos de retinogenesis y regeneraci&#xF3;n de tejidos, que son menos apropiadas para una producci&#xF3;n en masa f&#xE1;cil y barata de histotypic esferoides tejido en 3 dimensiones, que ser&#xE1;n de suma importancia para el futuro de bioingenier&#xED;a, por ejemplo, para la sustituci&#xF3;n de la experimentaci&#xF3;n con animales. Aqu&#xED; comparamos esferoides reaggregated convencionalmente derivados de c&#xE9;lulas de la retina disociadas de jerbos neonatales (Meriones unguiculatus) con esferoides cultivadas en un chip de celular novela microscaffold (llamado CF-chip) en un biorreactor de movimiento libre. Reagregaci&#xF3;n y los procesos de desarrollo que conducen a la formaci&#xF3;n de tejido, la proliferaci&#xF3;n, por ejemplo, la apoptosis y la diferenciaci&#xF3;n se observaron durante los primeros 10 d&#xED;as in vitro (DIV). Cabe destacar que, en cada CF-chip micro-c&#xE1;mara, solo esferoide desarrollado. En ambos sistemas de cultivo, el tama&#xF1;o de la esfera y las tasas de proliferaci&#xF3;n fueron casi id&#xE9;nticos. Sin embargo, la apoptosis s&#xF3;lo era comparativamente elevado hasta el 5 div, pero luego se convirti&#xF3; en insignificante en el CF-chip, mientras que para arriba-se levant&#xF3; otra vez en el cultivo convencional. En ambos sistemas, la caracterizaci&#xF3;n inmunohistoqu&#xED;mica revel&#xF3; la presencia de c&#xE9;lulas gliales de M&#xFC;ller, de ganglionares, amacrinas, bipolares y c&#xE9;lulas horizontales en una disposici&#xF3;n muy similar. En ambos sistemas, los fotorreceptores se detectaron s&#xF3;lo en esferoides de retina P3. Los beneficios del cultivo de c&#xE9;lulas basada en el chip 3D eran una producci&#xF3;n fiable en la esfera mayor viabilidad, la factibilidad de la observaci&#xF3;n sola esfera durante el tiempo de cultivo, una alta reproducibilidad y f&#xE1;cil control de las condiciones de cultivo. Un mayor desarrollo de este enfoque deber&#xED;a permitir que los sistemas de alto rendimiento no s&#xF3;lo para los tipos de la retina, sino tambi&#xE9;n de otro tipo de esferoides histotypic, para convertirse en adecuado para la vigilancia ambiental y los diagn&#xF3;sticos biom&#xE9;dicos.

Karl-Friedrich Weibezahn

Institute for Biological Interfaces

Forschungszentrum Karlsruhe

Chip-based Three-dimensional Cell Culture in Perfused Micro-bioreactors

Microfabrication of Chip-sized Scaffolds for Three-dimensional Cell cultivation

Interview: Bioreactors and Surfaced-Modified 3D-Scaffolds for Stem Cell Research

Karl-Friedrich Weibezahn

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