A &#946;-glucuronidase (GUS) Based Cell Death Assay

We have developed a novel transient plant expression system that simultaneously expresses the reporter gene, &beta;-glucuronidase (GUS), with putative ...

Texas A&M University

&#x756A;&#x8304; (&#x767D;&#x6BDB; lycopersicum&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x91CE;&#x706B;&#x6297;&#x6027;&#x5149;&#x4F0F;&#x3002;&#x756A;&#x8304;&#x88AB;&#x8BF1;&#x53D1;&#x4E0E;&#x75C5;&#x539F;&#x6548;&#x5E94;&#x86CB;&#x767D; AvrPto&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5404;&#x79CD;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x5305;&#x62EC;&#x5C40;&#x90E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x79F0;&#x4E3A;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x53D6;&#x529B;&#x5668;&#x6FC0;&#x9176;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;AGC &#x6FC0;&#x9176; Adi3 &#x51FD;&#x6570;&#x6765;&#x6291;&#x5236;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x548C;&#x53EA;&#x5B58;&#x5728; AvrPto &#x53D6;&#x529B;&#x5668;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1; (CD) &#x6291;&#x5236;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684; Adi3 &#x9700;&#x8981;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x6240;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x78F7;&#x8102;&#x9170;&#x808C;&#x9187;-3 &#x6FC0;&#x9176; 1 (Pdk1) &#x548C; Adi3 &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x4E27;&#x5931;&#x662F;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684; Pto/AvrPto &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x8FC7;&#x654F;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x7814;&#x7A76; Adi3 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x548C;&#x5176; CD &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;Adi3 &#x662F;&#x4E00;&#x6838;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6B64;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7531;&#x5728; Adi3 T &#x5FAA;&#x73AF;&#x6269;&#x5C55;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5927;&#x7EA6; 80 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x63D2;&#x5165;&#x5230; T-&#x5FAA;&#x73AF;&#x540E;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6216;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5FAA;&#x73AF;&#xFF0C;&#x78F7;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;Adi3 &#x6838;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x4E3A;&#x5176; CD &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E22;&#x5931;&#x9020;&#x6210;&#x7684; Adi3 CD &#x6D3B;&#x52A8;&#x6D88;&#x9664;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;Adi3 &#x6B64;&#x6838;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7531; Pdk1 Ser 539 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x548C;&#x975E;&#x6838; Adi3 &#x89C1;&#x4E8E;&#x6613;&#x8D1D;&#x7ED3;&#x6784;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D; Pdk1 &#x78F7;&#x9178;&#x5316; Adi3 &#x6307;&#x793A;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684; CD &#x548C; Adi3 &#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x4E2D;&#x65AD;&#x53EF;&#x80FD;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7B49;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x53D6;&#x529B;&#x5668;/AvrPto &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x756A;&#x8304;&#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x9176; AvrPto &#x4F9D;&#x8D56;&#x53D6;&#x529B;&#x5668;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x86CB;&#x767D; 3 &#xFF08;Adi3&#xFF09; &#x7684; T &#x73AF;&#x6269;&#x5C55;&#x540D;&#x6307;&#x793A;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E3A;&#x6291;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3002;

In tomato (Solanum lycopersicum), resistance to Pseudomonas syringae pv. tomato is elicited by the interaction of the host Pto kinase with the pathogen effector protein AvrPto, which leads to various immune responses including localized cell death termed the hypersensitive response. The AGC kinase Adi3 functions to suppress host cell death and interacts with Pto only in the presence of AvrPto. The cell death suppression (CDS) activity of Adi3 requires phosphorylation by 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (Pdk1) and loss of Adi3 function is associated with the hypersensitive response cell death initiated by the Pto/AvrPto interaction. Here we studied the relationship between Adi3 cellular localization and its CDS activity. Adi3 is a nuclear-localized protein, and this localization is dictated by a nuclear localization signal found in the Adi3 T-loop extension, an approximately 80 amino acid insertion into the T-loop, or activation loop, which is phosphorylated for kinase activation. Nuclear localization of Adi3 is required for its CDS activity and loss of nuclear localization causes elimination of Adi3 CDS activity and induction of cell death. This nuclear localization of Adi3 is dependent on Ser-539 phosphorylation by Pdk1 and non-nuclear Adi3 is found in punctate structures throughout the cell. Our data support a model in which Pdk1 phosphorylation of Adi3 directs nuclear localization for CDS and that disruption of Adi3 nuclear localization may be a mechanism for induction of cell death such as that during the Pto/AvrPto interaction.

The T-loop extension of the tomato protein kinase AvrPto-dependent Pto-interacting protein 3 (Adi3) directs nuclear localization for suppression of plant cell death.

Dans la tomate (Solanum lycopersicum), la r&#xE9;sistance &#xE0; Pseudomonas syringae pv. tomate est provoqu&#xE9;e par l&#x26;#39;interaction de la kinase h&#xF4;te avec prise de force avec l&#x26;#39;agent pathog&#xE8;ne de prot&#xE9;ine effectrice AvrPto, ce qui conduit &#xE0; diff&#xE9;rents r&#xE9;ponses immunitaires, y compris la mort cellulaire localis&#xE9;e dite r&#xE9;ponse hypersensible. Les fonctions AGC kinase ADI3 pour supprimer la mort cellulaire h&#xF4;te et interagit avec prise de force uniquement en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;AvrPto. La suppression mort cellulaire (CDS) d&#x26;#39;activit&#xE9; ADI3 n&#xE9;cessite une phosphorylation par la prot&#xE9;ine kinase 3-phosphoinositide-d&#xE9;pendante 1 (PDK1) et la perte de fonction ADI3 est associ&#xE9; &#xE0; la mort cellulaire r&#xE9;ponse hypersensible initi&#xE9;e par l&#x26;#39;interaction avec prise de force / AvrPto. Ici, nous avons &#xE9;tudi&#xE9; la relation entre ADI3 localisation cellulaire et son activit&#xE9; CDS. ADI3 est une prot&#xE9;ine nucl&#xE9;aire-localis&#xE9;, et cette localisation est dict&#xE9;e par un signal de localisation nucl&#xE9;aire dans la ADI3 T-boucle d&#x26;#39;extension, une insertion d&#x26;#39;acide amin&#xE9; 80 &#xE0; environ dans le t-boucle, ou une boucle d&#x26;#39;activation, qui est phosphoryl&#xE9; pour activation de la kinase. La localisation nucl&#xE9;aire de ADI3 est n&#xE9;cessaire pour son activit&#xE9; CDS et la perte de localisation nucl&#xE9;aire provoque l&#x26;#39;&#xE9;limination de l&#x26;#39;activit&#xE9; ADI3 CDS et l&#x26;#39;induction de la mort cellulaire. Cette localisation nucl&#xE9;aire de ADI3 d&#xE9;pend Ser-539 phosphorylation par PDK1 et non-nucl&#xE9;aire ADI3 se trouve dans les structures ponctu&#xE9;es dans toute la cellule. Nos donn&#xE9;es appuient un mod&#xE8;le dans lequel la phosphorylation de la PDK1 ADI3 dirige localisation nucl&#xE9;aire de la CDS et que les perturbations de ADI3 localisation nucl&#xE9;aire peut &#xEA;tre un m&#xE9;canisme pour l&#x26;#39;induction de la mort cellulaire, telle que celle au cours de l&#x26;#39;interaction Pto / AvrPto.

L&#x26;#39;extension T-boucle de la prot&#xE9;ine kinase d&#xE9;pendante de tomate AvrPto Pto-interacting protein 3 (ADI3) Diriger localisation nucl&#xE9;aire pour la r&#xE9;pression de la mort cellulaire des v&#xE9;g&#xE9;taux

In Tomate (Solanum Lycopersicum) Widerstand gegen Pseudomonas Syringae pv. Tomate ist durch das Zusammenspiel von der Host-Pto-Kinase mit dem Erreger-Effektor-Protein AvrPto, l&ouml;ste die zu verschiedenen Immunantworten einschlie&szlig;lich lokalisierte Zelltod bezeichnet die &uuml;berempfindlichen Reaktion f&uuml;hrt. Das AGC-Kinase Adi3 Funktionen zum Host Zelltod zu unterdr&uuml;cken und interagiert mit Zapfwelle nur in Gegenwart von AvrPto. Die Zelle Tod Unterdr&uuml;ckung (CDS) Aktivit&auml;t der Adi3 erfordert Phosphorylierung von 3-Phosphoinositid-abh&auml;ngigen Proteinkinase 1 (Pdk1) und Verlust der Adi3-Funktion ist im Zusammenhang mit den Zelltod &uuml;berempfindlichen Reaktion durch die Zapfwelle/AvrPto Interaktion initiiert. Hier studierte wir die Beziehung zwischen Adi3 zellul&auml;re Lokalisation und seine CDS-Aktivit&auml;t. Adi3 ist ein Protein, das nukleare lokalisiert und Lokalisierung ist durch eine nukleare Lokalisierung-Signal gefunden in der Adi3 T-Schleife-Erweiterung, eine etwa 80 Aminos&auml;ure-Einf&uuml;gung in die T-Schleife, diktiert oder Aktivierung-Schleife, die f&uuml;r die Aktivierung der Kinase phosphoryliert ist. Nukleare Lokalisierung von Adi3 ist f&uuml;r seine CDS-Aktivit&auml;t erforderlich und Verlust der nuklearen Lokalisierung verursacht, Beseitigung von Adi3 CDS-Aktivit&auml;t und Zelltod Induktion. Diese nukleare Lokalisierung des Adi3 ist abh&auml;ngig von Ser-539 Phosphorylierung durch Pdk1 und nicht-nuklearen Adi3 findet sich in punktierte Strukturen in der Zelle. Unsere Daten unterst&uuml;tzen eine Modell in dem Pdk1 Phosphorylierung von Adi3 leitet nukleare Lokalisierung f&uuml;r CDS und die Unterbrechung der Adi3 nukleare Lokalisierung m&ouml;glicherweise einen Mechanismus zur Induktion des Zelle Todes wie w&auml;hrend der Zapfwelle/AvrPto-Interaktion.

Die T-Schleife-Erweiterung der Tomaten-Proteinkinase AvrPto-abh&auml;ngige Pto-Interaktion Protein 3 (Adi3) leitet die nukleare Lokalisierung f&uuml;r Unterdr&uuml;ckung der pflanzlichen Zellentod.

In pomodoro (Solanum lycopersicum), resistenza a Pseudomonas syringae pv. pomodoro &egrave; provocata dall&#39;interazione di chinasi di Pto l&#39;host con la proteina AvrPto, che conduce a diverse risposte immunitarie, compresa la morte delle cellule localizzate definito la risposta ipersensibile patogeno. La chinasi AGC Adi3 funzioni per sopprimere la morte della cellula ospite e interagisce con presa di forza solo in presenza di AvrPto. L&#39;attivit&agrave; di soppressione (CDS) morte delle cellule di Adi3 richiede la fosforilazione da 3-fosfoinositide-dependent protein kinase 1 (Pdk1) e perdita della funzione Adi3 &egrave; associata con la morte delle cellule di risposta ipersensibile avviata dall&#39;interazione Pto/AvrPto. Qui abbiamo studiato la relazione tra la localizzazione cellulare Adi3 e la sua attivit&agrave; di CD. Adi3 &egrave; una proteina nucleare localizzato, e questa localizzazione &egrave; dettata da un segnale di localizzazione nucleare trovato nell&#39;estensione Adi3 T-loop, un inserimento di circa 80 aminoacidi nel T-loop, o ciclo di attivazione, viene fosforilato per l&#39;attivazione della chinasi. Localizzazione nucleare di Adi3 &egrave; richiesto per la sua attivit&agrave; CDS e perdita di localizzazione nucleare provoca l&#39;eliminazione di attivit&agrave; Adi3 CD e induzione della morte cellulare. Questa localizzazione nucleare di Adi3 dipende dal Ser-539 fosforilazione da Pdk1 e Adi3 non-nucleare &egrave; trovato in strutture punctati tutta la cella. I nostri dati supportano un modello in cui Pdk1 fosforilazione della Adi3 dirige la localizzazione nucleare per i CD e che perturbazioni di localizzazione nucleare Adi3 possono essere un meccanismo per l&#39;induzione della morte cellulare come quello durante l&#39;interazione Pto/AvrPto.

L&#39;estensione del T-loop della chinasi di proteina di pomodoro AvrPto-dipendente Pto-interacting protein 3 (Adi3) dirige la localizzazione nucleare per la soppressione della morte delle cellule vegetali.

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#xFF08;Solanum lycopersicum&#xFF09;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Pseudomonas syringae&#x306E;PV&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x3002;&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x904E;&#x654F;&#x611F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;AvrPto&#x6301;&#x3064;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;PTO&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; AGC&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;Adi3&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3060;&#x3051;AvrPto&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;PTO&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Adi3&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x6291;&#x5236;&#xFF08;CDS&#xFF09;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;3&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30A4;&#x30CE;&#x30B7;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;1&#xFF08;PDK1&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;Adi3&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x55AA;&#x5931;&#x306F;&#x3001;PTO / AvrPto&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x904E;&#x654F;&#x611F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Adi3&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;&#x305D;&#x306E;CDS&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002; Adi3&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306F;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Adi3 T-&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x5B50;&#x3001;T-&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x7D04;80&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x633F;&#x5165;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Adi3&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;CDS&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306E;&#x6D88;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;Adi3 CDS&#x6D3B;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x6392;&#x9664;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Adi3&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306F;&#x3001;Ser-539 PDK1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3068;&#x975E;&#x6838;&#x4FDD;&#x6709;Adi3&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5168;&#x4F53;&#x306B;&#x6591;&#x70B9;&#x72B6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x306F;&#x3001;PTO / AvrPto&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x6642;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;Adi3&#x306E;PDK1&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x304C;CDS&#x3068;Adi3&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x6DF7;&#x4E71;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C8;&#x30DE;&#x30C8;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;AvrPto&#x4F9D;&#x5B58;PTO-&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;3&#x306E;T-&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF08;Adi3&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x6B7B;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x6307;&#x793A;

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; (&#xAE4C; lycopersicum)&#xC5D0; &#xB179; syringae&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; pv. &#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xB294; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; effector &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; AvrPto &#xB418; &#xB098; &#xACFC;&#xBBFC; &#xBC18;&#xC751; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB9AC;&#xB4DC; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; Pto &#xB2C8; &#xC0C1;&#xD638;&#xB85C; elicited. AGC &#xB2C8; Adi3 &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; Avrpto&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB9CC; Pto&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;. Adi3&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5B5;&#xC81C; (CD) &#xD65C;&#xB3D9; 3 phosphoinositide &#xC885;&#xC18D; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; 1 (Pdk1)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; Adi3 &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; Pto/AvrPto &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2DC;&#xC791; &#xB41C; &#xACFC;&#xBBFC; &#xBC18;&#xC751; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; Adi3 &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; CD &#xD65C;&#xB3D9; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4;. Adi3 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xD575; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xBA70;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; T &#xB8E8;&#xD504;&#xC5D0; &#xC57D; 80 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC0BD;&#xC785; Adi3 T-&#xB8E8;&#xD504; &#xD655;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; phosphorylated &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC18;&#xBCF5;. Adi3&#xC758; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xAC00; &#xD544;&#xC694; &#xD55C; CD &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; Adi3 CD &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;. Adi3&#xC758; &#xD575;&#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Ser-539 pdk1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC774;&#xBA70; &#xBE44; &#xD575; Adi3 &#xC140;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; punctate &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; adi3&#xC758; Pdk1 &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; cd &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xACE0; Adi3 &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; Pto/AvrPto &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8; &#xAC19;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD1A0;&#xB9C8;&#xD1A0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; AvrPto &#xC885;&#xC18D; Pto &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 3 (Adi3) T &#xB8E8;&#xD504; &#xD655;&#xC7A5; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FD;&#xC74C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En tomate (Solanum lycopersicum), resistencia a Pseudomonas syringae pv. tomate se provoca por la interacci&#xF3;n de la quinasa anfitri&#xF3;n Pto. con el pat&#xF3;geno prote&#xED;na efectora AvrPto, lo que conduce a diversas respuestas inmunes, incluyendo la muerte celular localizada denomina la respuesta de hipersensibilidad. Los AGC quinasa funciones Adi3 para suprimir la muerte de la c&#xE9;lula hu&#xE9;sped e interact&#xFA;a con Pto. s&#xF3;lo en presencia de AvrPto. La supresi&#xF3;n de la muerte celular (CDS) actividad de Adi3 requiere la fosforilaci&#xF3;n por la prote&#xED;na quinasa 3-fosfoinositida dependiente de 1 (PDK1) y p&#xE9;rdida de funci&#xF3;n Adi3 se asocia con la muerte celular respuesta hipersensible iniciado por la interacci&#xF3;n PTO / AvrPto. Aqu&#xED; se estudia la relaci&#xF3;n entre Adi3 localizaci&#xF3;n celular y su actividad CDS. Adi3 es una prote&#xED;na nuclear-localizada, y esta localizaci&#xF3;n es dictada por una se&#xF1;al de localizaci&#xF3;n nuclear se encuentra en la Adi3 T-loop extensi&#xF3;n, una inserci&#xF3;n de aproximadamente 80 amino&#xE1;cidos en el T-loop, o bucle de activaci&#xF3;n, que es fosforilado para la activaci&#xF3;n quinasa. Localizaci&#xF3;n nuclear de Adi3 es necesaria para su actividad CDS y la p&#xE9;rdida de localizaci&#xF3;n nuclear provoca la eliminaci&#xF3;n de Adi3 actividad CDS y la inducci&#xF3;n de muerte celular. Esta localizaci&#xF3;n nuclear de Adi3 depende de Ser-539 fosforilaci&#xF3;n por PDK1 y no nuclear Adi3 se encuentra en estructuras puntiformes en toda la c&#xE9;lula. Nuestros datos apoyan un modelo en el que la fosforilaci&#xF3;n de PDK1 Adi3 dirige la localizaci&#xF3;n nuclear de CDS y que la interrupci&#xF3;n de Adi3 localizaci&#xF3;n nuclear puede ser un mecanismo para la inducci&#xF3;n de muerte celular, como que durante la interacci&#xF3;n Pto. / AvrPto.

La extensi&#xF3;n de T-loop de la prote&#xED;na quinasa dependiente de tomate AvrPto Pto. interacci&#xF3;n prote&#xED;na-3 (Adi3) Dirige la localizaci&#xF3;n nuclear para la represi&#xF3;n de la muerte de la c&#xE9;lula vegetal

Paf1C &#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4E00;&#x76F4;&#x5728;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x542F;&#x52A8;&#x3001; &#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x548C; RNA &#x52A0;&#x5DE5;&#x5404;&#x79CD;&#x8F6C;&#x5F55;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x662F;&#x53D1;&#x5C55;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x5728;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x65B9;&#x9762;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; Paf1C &#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x57FA;&#x56E0;&#x5185;&#x5BCC; H3K27me3 &#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#xFF0C;&#x9002;&#x5F53;&#x5730;&#x89C4;&#x7BA1;&#x548C;&#x4E00;&#x79CD;&#x540D;&#x4E3A; PHP &#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x8F85;&#x52A9;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684; Paf1C&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x6B64;&#x51FD;&#x6570;&#x3002;

&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; PHP &#x4F5C;&#x4E3A; PAF1 &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8F85;&#x52A9;&#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Paf1C is a transcriptional cofactor that has been implicated in various transcription-associated mechanisms spanning initiation, elongation and RNA processing, and is important for multiple aspects of development in Arabidopsis. Our recent studies suggest Arabidopsis Paf1C is crucial for proper regulation of genes within H3K27me3-enriched chromatin, and that a protein named PHP may act as an accessory subunit of Paf1C that promotes this function.

Potential role of Arabidopsis PHP as an accessory subunit of the PAF1 transcriptional cofactor.

Paf1C est un cofacteur de transcription qui a &eacute;t&eacute; impliqu&eacute; dans divers m&eacute;canismes de transcription associ&eacute;s s&#39;&eacute;tendant sur l&#39;initiation, l&#39;&eacute;longation et ARN et est important pour plusieurs aspects du d&eacute;veloppement chez Arabidopsis. Nos &eacute;tudes r&eacute;centes sugg&egrave;rent d&#39;Arabidopsis Paf1C est cruciale pour la bonne r&eacute;gulation des g&egrave;nes au sein de la chromatine enrichie en H3K27me3, et qu&#39;une prot&eacute;ine appel&eacute;e PHP peut agir comme une sous-unit&eacute; accessoire de Paf1C qui fait la promotion de cette fonction.

R&ocirc;le potentiel de l&#39;Arabidopsis PHP comme une sous-unit&eacute; accessoire le cofacteur transcriptionnel de PAF1.

Paf1C ist ein transkriptionelle Kofaktor, der hat in verschiedenen Transkription-assoziierte Mechanismen, die &uuml;bergreifende Einleitung, Dehnung und RNA Verarbeitung verwickelt wurde, und ist wichtig f&uuml;r mehrere Aspekte der Entwicklung in Arabidopsis. Unsere neuere Studien legen nahe, Arabidopsis Paf1C entscheidend f&uuml;r die richtige Regulierung der Gene im H3K27me3 angereicherten Chromatin ist, und dass ein Protein namens PHP als ein Zubeh&ouml;r-Untereinheit des Paf1C fungieren kann, die diese Funktion f&ouml;rdert.

Potenzielle Rolle von Arabidopsis PHP als ein Zubeh&ouml;r-Untereinheit des die PAF1 transkriptionelle Cofaktor.

Paf1C &egrave; un cofattore trascrizionale che &egrave; stato implicato in vari meccanismi di trascrizione associati che abbracciano l&#39;iniziazione, di allungamento e di elaborazione di RNA ed &egrave; importante per molteplici aspetti dello sviluppo in Arabidopsis. Nostri studi recenti suggeriscono Arabidopsis Paf1C &egrave; fondamentale per la corretta regolazione dei geni all&#39;interno della cromatina arricchita di H3K27me3, e che una proteina denominata PHP pu&ograve; agire come un accessorio subunit&agrave; di Paf1C che promuove questa funzione.

Ruolo potenziale di Arabidopsis PHP come un accessorio subunit&agrave; del cofattore transcriptional PAF1.

Paf1C &#x306F;&#x3001;&#x958B;&#x59CB;&#x3001;&#x4F38;&#x9577;&#x3001;RNA &#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x304C;&#x308B;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x95A2;&#x9023;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA; Paf1C &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; H3K27me3 &#x6FC3;&#x7E2E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x5185;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3057;&#x3001;PHP &#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x540D;&#x524D;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B5;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B; Paf1C &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30BB;&#x30B5;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; PAF1 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA; PHP &#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Paf1C &#xAC1C;&#xC2DC;, &#xC2E0;&#xC7A5; &#xBC0F; RNA &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC804;&#xC1A1; &#xAD00;&#xB828; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB2E4; &#xACE0; Arabidopsis&#xC758; &#xBC1C;&#xC804;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; transcriptional &#xACF5;&#xB3D9; &#xC778;&#xC790; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; Arabidopsis Paf1C H3K27me3 &#xB18D;&#xCD95; chromatin &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; PHP &#xB77C;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774;&#xC774; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; paf1c&#xC758; &#xC561;&#xC138;&#xC11C;&#xB9AC; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB3C4; &#xD589;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PAF1 transcriptional cofactor&#xC758; &#xC561;&#xC138;&#xC11C;&#xB9AC; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; Arabidopsis PHP&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;.

Paf1C es un cofactor transcripcional que se ha implicado en diversos mecanismos asociados de transcripci&oacute;n que abarcan iniciaci&oacute;n, elongaci&oacute;n y proceso del ARN y es importante para los m&uacute;ltiples aspectos del desarrollo en Arabidopsis. Nuestros estudios recientes sugieren Arabidopsis Paf1C es crucial para la adecuada regulaci&oacute;n de genes dentro de cromatina enriquecida con H3K27me3, y que una prote&iacute;na llamada PHP puede actuar como una subunidad accesoria de Paf1C que promueve esta funci&oacute;n.

Maria Ek-Ramos

Department of Plant Pathology and Microbiology,
Institute for Plant Genomics and Biotechnology,
Department of Plant Pathology and Microbiology, Institute for Plant Genomics and Biotechnology

Texas A&M University

A β-glucuronidase (GUS) Based Cell Death Assay

Maria Ek-Ramos

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Plant Pathology and Microbiology,Institute for Plant Genomics and Biotechnology,Department of Plant Pathology and Microbiology, Institute for Plant Genomics and Biotechnology

Texas A&M University

A β-glucuronidase (GUS) Based Cell Death Assay

Department of Plant Pathology and Microbiology,
Institute for Plant Genomics and Biotechnology,
Department of Plant Pathology and Microbiology, Institute for Plant Genomics and Biotechnology