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Preparing Individual <em>Drosophila</em> Egg Chambers for Live Imaging

Live cell imaging is an important technique applied to a number of Drosophila tissues used as models to investigate topics such as axis specification, ...

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Imaging Calcium in <em>Drosophila</em> at Egg Activation

Egg activation is a universal process that includes a series of events to allow the fertilized egg to complete meiosis and initiate embryonic development. ...

University of Oxford 

University of Cambridge

Localization of bicoid mRNA to the anterior of the Drosophila oocyte is essential to produce the Bicoid protein gradient that patterns the anterior-posterior axis of the embryo. Previous studies have characterized a microtubule-dependent pathway for bicoid mRNA localization during midoogenesis, when bicoid first accumulates at the anterior. We show that the majority of bicoid is actually localized later in oogenesis, when the only known mechanism for mRNA localization is based on passive trapping. Through live imaging of fluorescently tagged endogenous bicoid mRNA, we identify a temporally distinct pathway for bicoid localization in late oocytes that utilizes a specialized subpopulation of anterior microtubules and dynein. The directional movement of bicoid RNA particles within the oocyte observed here is consistent with dynein-mediated transport. Furthermore, our results indicate that association of bicoid with the anterior oocyte cortex is dynamic and support a model for maintenance of bicoid localization by continual active transport on microtubules.

Localization of bicoid mRNA in late oocytes is maintained by continual active transport.

Bicoid &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5230;&#x524D;&#x8DEF;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; mRNA &#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x6A21;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x524D;&#x540E;&#x8F74; Bicoid &#x86CB;&#x767D;&#x68AF;&#x5EA6;&#x3002;Bicoid &#x9996;&#x5148;&#x79EF;&#x7D2F;&#x5728;&#x773C;&#x524D;&#x65F6;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x8FC7;&#x7A0B; midoogenesis&#xFF0C;bicoid mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; mRNA &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x552F;&#x4E00;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x57FA;&#x4E8E;&#x88AB;&#x52A8;&#x9677;&#x5370;&#x65F6; bicoid &#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x5176;&#x5B9E;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x5728;&#x540E;&#x9762;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x65F6;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; bicoid mRNA&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x627E;&#x51FA;&#x665A;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; bicoid &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5229;&#x7528;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x524D;&#x8DEF;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x548C;&#x808C;&#x6682;&#x65F6;&#x4E0D;&#x540C;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;Bicoid RNA &#x7C92;&#x5B50;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x5B9A;&#x5411;&#x8FD0;&#x52A8;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x8FD9;&#x91CC;&#x662F;&#x7B26;&#x5408;&#x808C;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; bicoid &#x4E0E;&#x524D;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76AE;&#x8D28;&#x534F;&#x4F1A;&#x662F;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5BF9;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x7EF4;&#x4FEE; bicoid &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x652F;&#x6301;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Bicoid &#x5728;&#x540E;&#x671F;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; mRNA &#x7531;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;

Localisation de bicoid ARNm &agrave; la partie ant&eacute;rieure de l&#39;ovocyte de drosophile est essentiel pour obtenir le gradient de prot&eacute;ine Bicoid que les patrons de l&#39;axe ant&eacute;ro-post&eacute;rieur de l&#39;embryon. Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures ont caract&eacute;ris&eacute; une voie de microtubule-d&eacute;pendante pour la localisation d&#39;ARNm bicoid pendant midoogenesis, lorsque bicoid s&#39;accumule tout d&#39;abord &agrave; la partie ant&eacute;rieure. Nous montrons que la majorit&eacute; des bicoid est localis&eacute;e en fait plus loin dans l&#39;ovogen&egrave;se, lorsque le seul m&eacute;canisme connu pour la localisation de l&#39;ARNm est bas&eacute; sur le pi&eacute;geage passif. Vivre gr&acirc;ce &agrave; l&#39;imagerie de fluorescent &eacute;tiquet&eacute; bicoid endog&egrave;ne ARNm, nous identifions une voie distincte dans le temps pour la localisation de bicoid dans des ovocytes de fin qui utilise une sous-population sp&eacute;cialis&eacute;e de microtubules ant&eacute;rieurs et la dyn&eacute;ine. Le mouvement directionnel de particules RNA bicoid dans l&#39;ovocyte observ&eacute; ici est conforme aux transports m&eacute;di&eacute;e par dyn&eacute;ine. En outre, nos r&eacute;sultats indiquent que la liaison de bicoid avec le cortex ant&eacute;rieur ovocyte est dynamique et supportent un mod&egrave;le pour l&#39;entretien de la localisation bicoid par le transport actif continu sur les microtubules.

Localisation de bicoid Qu&#39;arnm dans des ovocytes de fin est maintenue par la continuel de transport actif.

Lokalisierung von Bicoid mRNA an der vorderen von der Drosophila-Eizelle unbedingt den Bicoid-Protein-Farbverlauf erzeugen, der Muster die anterior-Posterior-Achse des Embryos. Fr&uuml;here Studien haben Microtubule-abh&auml;ngigen Weg f&uuml;r Bicoid mRNA Lokalisierung w&auml;hrend der Midoogenesis, gepr&auml;gt, wenn Bicoid zuerst an der vorderen ansammelt. Wir zeigen, dass die Mehrheit der Bicoid eigentlich sp&auml;ter in Oogenese, lokalisiert wird, wenn der einzige bekannte Mechanismus f&uuml;r die mRNA Lokalisierung auf passive &Uuml;berf&uuml;llung basiert. Leben durch Bildgebung der Leuchtstoff markierte endogene Bicoid mRNA, identifizieren wir eine zeitlich unterschiedliche Wegbereiter f&uuml;r Bicoid-Lokalisierung in sp&auml;ten Eizellen, die eine spezialisierte Teilgesamtheit anterior Mikrotubuli und Dynein nutzt. Die gerichtete Bewegung der Bicoid RNA Partikel innerhalb der Eizelle beobachtet, hier steht im Einklang mit Dynein-vermittelten Transport. Dar&uuml;ber hinaus deuten unsere Ergebnisse, dass Vereinigung der Bicoid der vorderen Eizelle Cortex ist dynamisch und ein Modell f&uuml;r die Wartung von Bicoid Lokalisierung zu unterst&uuml;tzen, indem st&auml;ndig aktiven Transport auf Mikrotubuli.

Lokalisierung von Bicoid, die mRNA in sp&auml;ten Eizellen durch kontinuierliche aktiven Transport aufrechterhalten wird.

Localizzazione di bicoid mRNA per l&#39;anteriore dell&#39;ovocita drosofila &egrave; essenziale per produrre il gradiente della proteina Bicoid che modelli l&#39;asse antero-posteriore dell&#39;embrione. Studi precedenti hanno caratterizzato una via microtubule-dipendente per la localizzazione di mRNA di bicoid durante midoogenesis, quando bicoid si accumula prima presso l&#39;anteriore. Mostriamo che la maggior parte di bicoid &egrave; effettivamente localizzata pi&ugrave; tardi nell&#39;ovogenesi, quando l&#39;unico meccanismo noto per la localizzazione di mRNA &egrave; basato sull&#39;abbondanza passiva. Attraverso live imaging di bicoid endogeno fluorescente contrassegnati mRNA, identifichiamo un percorso temporalmente distinto per la localizzazione di bicoid nel tardi ovociti che utilizza una sottopopolazione specializzata di microtubuli anteriori e dineina. Il movimento direzionale di bicoid particelle di RNA all&#39;interno dell&#39;ovocita osservato qui &egrave; coerente con il trasporto mediato dineina. Inoltre, i nostri risultati indicano che associazione di bicoid con la corteccia anteriore ovocita &egrave; dinamico e supportare un modello per la manutenzione di bicoid localizzazione di continuo trasporto attivo sui microtubuli.

Localizzazione di bicoid che mRNA nel tardi ovociti &egrave; mantenuto dal continuo trasporto attivo.

&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; bicoid &#x306E; mRNA &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x65B9;&#x306B;&#x306F;&#x80DA;&#x306E;&#x524D;&#x5F8C;&#x8EF8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3; Bicoid &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Bicoid &#x3092;&#x307E;&#x305A;&#x524D;&#x65B9;&#x306B;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76; midoogenesis&#x3001;bicoid mRNA &#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x7279;&#x5FB4;&#x304C;&#x3042;&#x308B;.MRNA &#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x53D7;&#x52D5;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408; bicoid &#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x306F;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F8C;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x30BF;&#x30B0;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; bicoid &#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6; mRNA&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x524D;&#x65B9;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3068;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5C02;&#x9580;&#x7684;&#x306A;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3066; bicoid &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F8C;&#x534A;&#x306E;&#x5375;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; bicoid RNA &#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x524D;&#x65B9;&#x5375;&#x5B50;&#x76AE;&#x8CEA;&#x3068; bicoid &#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x306F;&#x52D5;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x80FD;&#x52D5;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301; bicoid &#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5F8C;&#x534A;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mRNA &#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x80FD;&#x52D5;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x308B; bicoid &#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;

Bicoid &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Drosophila oocyte &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; mRNA &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xD6C4;&#xBD80; &#xCD95; &#xD328;&#xD134; Bicoid &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; bicoid &#xCC98;&#xC74C;&#xC5D0; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801; &#xB420; &#xB54C; midoogenesis, &#xB3D9;&#xC548; bicoid mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; microtubule &#xC885;&#xC18D; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB54C; mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xAE30;&#xBC18; &#xC218;&#xB3D9; &#xD2B8;&#xB798;&#xD551;&#xC73C;&#xB85C; oogenesis, &#xB4B7;&#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; bicoid &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1B5;&#xD574; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xD0DC;&#xADF8; &#xC0DD; bicoid &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; mRNA, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; microtubules &#xBC0F; &#xD68C; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; subpopulation &#xD65C;&#xC6A9; &#xB2A6;&#xC740; oocytes bicoid &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xBCC4;&#xAC1C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bicoid RNA&#xB294; oocyte &#xB0B4;&#xC758; &#xC785;&#xC790;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC5EC;&#xAE30; &#xC804;&#xC1A1; &#xD68C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC774;&#xC804; oocyte &#xD53C; &#xC9C8; bicoid &#xC5F0;&#xAD00; &#xB3D9;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; microtubules&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131; &#xAD50;&#xD1B5; bicoid &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; bicoid mRNA &#xB2A6;&#xC740; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Localizaci&oacute;n de bicoid mRNA a la parte anterior del &oacute;vulo de Drosophila es esencial para producir el gradiente de prote&iacute;na Bicoid que patrones el eje antero-posterior del embri&oacute;n. Estudios previos han caracterizado una v&iacute;a dependiente de microt&uacute;bulos para localizaci&oacute;n de MARN bicoid durante midoogenesis, cuando bicoid primero se acumula en la parte anterior. Demostramos que la mayor&iacute;a de bicoid realmente se localiza m&aacute;s adelante en la ovog&eacute;nesis, cuando el &uacute;nico mecanismo conocido para la localizaci&oacute;n de mRNA se basa en la captura pasivo. Viven con im&aacute;genes de fluorescencia de etiquetado bicoid end&oacute;geno mRNA, identificamos una v&iacute;a temporal distinta para la localizaci&oacute;n de la bicoid en ovocitos finales que utiliza una subpoblaci&oacute;n especializada de microt&uacute;bulos anteriores y dine&iacute;na. El movimiento direccional de bicoid RNA part&iacute;culas dentro del &oacute;vulo observado aqu&iacute; es consistente con transporte mediada por dine&iacute;na. Adem&aacute;s, nuestros resultados indican que la Asociaci&oacute;n de bicoid con la corteza anterior del ovocito es din&aacute;mica y apoyar un modelo para el mantenimiento de la localizaci&oacute;n de bicoid continuo transporte activo en los microt&uacute;bulos.

Localizaci&oacute;n de bicoid que mRNA en ovocitos de finales se mantiene por el continuo transporte activo.

&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; gurken &#xFF08;grk&#xFF09; mRNA &#x5BFC;&#x81F4;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8F74;&#x6781;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x3002;&#x5728;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x3001; grk mRNA &#x53D1;&#x73B0;&#x540E;&#x90E8;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x800C;&#x5728;&#x7A0D;&#x540E;&#x9636;&#x6BB5; grk mRNA &#x4F4D;&#x4E8E;&#x80CC;&#x524D;&#x89D2;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x4EE5;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x7684;&#x5B9E;&#x65F6;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x548C;&#x7887;&#x6CCA;&#x5904;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; grk mRNA &#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709;&#x5229;&#x7528; MS2 MCP &#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x95ED;&#x5408;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; MCP GFP &#x6807;&#x8BB0;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; grk mRNA &#x5728;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6B63;&#x786E;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x540E;&#x7684;&#x672C;&#x5730;&#x5316; grk (&#x8131;&#x8272;) &#x6F02;&#x767D;&#x5B9E;&#x9A8C; mRNA &#x5728;&#x86CB;&#x5206;&#x5EAD;&#x4E2D;&#x7684;&#x63ED;&#x793A;&#x7684; grk &#x4E4B;&#x95F4;&#x5E74;&#x8F7B;&#x4EBA;&#x548C;&#x8001;&#x5E74;&#x4EBA;&#x7684; mRNA &#x86CB;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5206;&#x5EAD;&#x3002;grk mRNA &#x7C92;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x7A33;&#x6B65;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x968F;&#x7740;&#x5931;&#x53BB;&#x5176;&#x52A8;&#x6001;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;&#x8FD9;&#x6837; mislocalized &#x7684; grk &#x5728;&#x8F83;&#x65E9;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684; mRNA &#x662F;&#x66F4;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x63A7;&#x4EF6;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x662F; K10 &#x548C; sqd(1) &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x5F31;&#x6BD2;&#x75AB;&#x82D7;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x82CD;&#x8747;&#x4E0E;&#x53D7;&#x635F;&#x7684;&#x808C;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6B63;&#x786E;&#x672C;&#x5730;&#x5316; grk mRNA &#x662F;&#x9759;&#x6001;&#x7684;&#x5F97;&#x591A;&#x3002;&#x7EFC;&#x4E0A;&#x6240;&#x8FF0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x770B;&#x5230;&#x672C;&#x5730;&#x5316; grk mRNA &#x6D3B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5176;&#x7EF4;&#x62A4;&#x66F4;&#x6539;&#x4ECE;&#x52A8;&#x6001;&#x5230;&#x9759;&#x6001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x968F;&#x7740;&#x7684;&#x6027;&#x8D28;&#x3002;

&#x52A8;&#x6001;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7269;&#x8D28;&#x6807;&#x8BB0;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; gurken mRNA &#x5728;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x7684;&#x3002;

During Drosophila oogenesis, the targeted localization of gurken (grk) mRNA leads to the establishment of the axis polarity of the egg. In early stages of oogenesis, grk mRNA is found at the posterior of the oocyte, whereas in the later stages grk mRNA is positioned at the dorsal anterior corner of the oocyte. In order to visualize the real-time localization and anchorage of endogenous grk mRNA in living oocytes, we have utilized the MS2-MCP system. We show that MCP-GFP-tagged endogenous grk mRNA localizes properly within wild-type oocytes and behaves aberrantly in mutant backgrounds. Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) experiments of localized grk mRNA in egg chambers reveal a difference in the dynamics of grk mRNA between young and older egg chambers. grk mRNA particles, as a population, are highly dynamic molecules that steadily lose their dynamic nature as oogenesis progresses. This difference in dynamics is attenuated in K10 and sqd(1) mutants such that mislocalized grk mRNA in older stages is much more dynamic compared with that in wild-type controls. By contrast, in flies with compromised dynein activity, properly localized grk mRNA is much more static. Taken together, we have observed the nature of localized grk mRNA in live oocytes and propose that its maintenance changes from a dynamic to a static process as oogenesis progresses.

The dynamics of fluorescently labeled endogenous gurken mRNA in Drosophila.

Au cours de l&#39;ovogen&egrave;se drosophile, la localisation cibl&eacute;e de gurken (grk) ARNm entra&icirc;ne la mise en place de la polarit&eacute; de l&#39;axe de le &oelig;uf. Dans les premiers stades de l&#39;ovogen&egrave;se, grk ARNm se trouve &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; post&eacute;rieure de l&#39;ovocyte, tandis que dans le grk &eacute;tapes ult&eacute;rieur ARNm est positionn&eacute; &agrave; l&#39;angle ant&eacute;rieur dorsal de l&#39;ovocyte. Afin de visualiser la localisation en temps r&eacute;el et l&#39;ancrage de grk endog&egrave;ne ARNm dans les ovocytes de la vie, nous avons utilis&eacute; le syst&egrave;me MS2-MCP. Nous montrons que le MCP-GFP-tag endog&egrave;ne grk ARNm se localise correctement dans les ovocytes de type sauvage et se comporte aberrantly en milieux mutant. R&eacute;cup&eacute;ration de fluorescence apr&egrave;s photoblanchiment (FRAP) exp&eacute;riences de grk localis&eacute;e ARNm dans les chambres de le &oelig;uf r&eacute;v&egrave;lent une diff&eacute;rence dans la dynamique de grk ARNm entre jeunes et plus &acirc;g&eacute;s oeuf chambres. particules d&#39;ARNm GRK, comme une population, sont des mol&eacute;cules tr&egrave;s dynamiques qui progressivement perdent leur nature dynamique &agrave; mesure que progresse l&#39;ovogen&egrave;se. Cette diff&eacute;rence de dynamique est att&eacute;nu&eacute;e chez les mutants K10 et sqd(1) telle que mal grk Qu&#39;arnm dans les stades plus &acirc;g&eacute;s est beaucoup plus dynamique compar&eacute;e &agrave; des contr&ocirc;les de type sauvage. En revanche, chez les mouches avec activit&eacute; de dyn&eacute;ine compromise, correctement localis&eacute; grk ARNm est beaucoup plus statique. Ensemble, nous avons observ&eacute; la nature des grk localis&eacute;e ARNm en ovocytes en direct et proposer que son entretien varie d&#39;une dynamique &agrave; un processus statique &agrave; mesure que progresse l&#39;ovogen&egrave;se.

La dynamique de fluorescent &eacute;tiquet&eacute; gurken endog&egrave;ne ARNm chez la drosophile.

W&auml;hrend Drosophila Oogenese f&uuml;hrt die gezielte Lokalisierung von Gurken (Grk) mRNA zur Errichtung der Achse Polarit&auml;t des Eies. In fr&uuml;hen Stadien der Oogenese, Grk, die mRNA an die Posterior von der Eizelle gefunden wird, w&auml;hrend in den sp&auml;teren Stadien Grk mRNA dorsale anteriore oben an der Eizelle positioniert ist. Um die Echtzeit-Lokalisierung und die Verankerung der endogenen Grk visualisieren mRNA in lebenden Eizellen, haben wir das MS2-MCP-System genutzt. Wir zeigen, dass MCP-GFP-markiert endogene Grk mRNA lokalisiert richtig innerhalb Wildtyp Eizellen und verh&auml;lt sich abnorm mutant Hintergr&uuml;nde. Fluoreszenz-Wiederherstellung nach Photobleaching (FRAP) Experimente der lokalisierten Grk mRNA in ei Kammern offenbaren einen Unterschied in der Dynamik der Grk mRNA zwischen jungen und &auml;lteren Ei Kammern. GRK mRNA Teilchen, sind als Einwohner, hochdynamische Molek&uuml;le, die ihre Dynamik stetig Fortschreiten der Oogenese zu verlieren. Dieser Unterschied in der Dynamik ist in K10 und sqd(1) Mutanten abgeschw&auml;cht, so dass Grk mislocalized, die mRNA in &auml;lteren Stadien viel dynamischer im Vergleich zu Wildtyp Kontrollen ist. Hingegen in fliegen mit kompromittierten Dynein Aktivit&auml;t, richtig lokalisiert Grk mRNA ist viel mehr statisch. Zusammengenommen haben wir beobachtete die Natur lokalisierte Grk mRNA in Eizellen zu leben und schlage seine Wartung von einer dynamischen in statischer Prozess Oogenese Fortschreiten &auml;ndert.

Die Dynamik der Leuchtstoff beschriftetem endogene Gurken mRNA in Drosophila.

Durante l&#39;ovogenesi Drosophila, la localizzazione mirata di gurken (grk) mRNA conduce all&#39;istituzione della polarit&agrave; asse dell&#39;uovo. Nelle prime fasi dell&#39;ovogenesi, grk mRNA si trova presso la parte posteriore dell&#39;ovocita, mentre nelle successive fasi grk mRNA &egrave; posizionata all&#39;angolo anteriore dorsale dell&#39;ovocita. Al fine di visualizzare la localizzazione in tempo reale e ancoraggio di grk endogeno mRNA in vita gli ovociti, abbiamo utilizzato il sistema MS2-MCP. Mostriamo che MCP-GFP-etichettato grk endogeno mRNA localizza correttamente all&#39;interno di ovociti wild-type e si comporta modo anomalo in sfondi mutanti. Recupero della fluorescenza dopo photobleaching (FRAP) esperimenti di grk localizzata mRNA negli alloggiamenti uovo rivelano una differenza nella dinamica della grk mRNA tra giovani e anziani uovo chambers. Grk mRNA particelle, come una popolazione, sono molecole altamente dinamiche che costantemente perdono la loro natura dinamica come progredisce ovogenesi. Questa differenza nella dinamica &egrave; attenuata in mutanti K10 e sqd(1) tale che mislocalized grk che mRNA nelle fasi precedenti &egrave; molto pi&ugrave; dinamico rispetto a quello in controlli di tipo selvatico. Al contrario, nelle mosche con attivit&agrave; compromessa dineina, correttamente localizzato grk mRNA &egrave; molto pi&ugrave; statico. Presi insieme, abbiamo osservato la natura di grk localizzata mRNA in diretta gli ovociti e proporre che la manutenzione cambia da una dinamica di un processo statico come progredisce ovogenesi.

La dinamica di fluorescente contrassegnati gurken endogeno mRNA in drosofila.

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D5E;&#x3063;&#x305F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; gurken (grk) &#x306E; mRNA &#x5375;&#x306E;&#x8EF8;&#x6975;&#x6027;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;mRNA &#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E; grk mRNA &#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x80CC;&#x5074;&#x524D;&#x65B9;&#x306E;&#x89D2;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F8C;&#x65B9;&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F; grk &#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306F;&#x3002;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; grk &#x5B9A;&#x7740;&#x53CA;&#x3073;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0; &#x30FB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x8996;&#x899A;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B; mRNA &#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EA;&#x30D3;&#x30F3;&#x30B0;&#x79C1;&#x9054; MS2 MCP &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F; mRNA &#x304C;&#x6B63;&#x3057;&#x304F;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3068;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x305D;&#x306E; MCP GFP &#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; grk &#x7570;&#x5E38;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; grk &#x30D5;&#x30A9;&#x30C8;&#x30D6;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B0; (FRAP) &#x5B9F;&#x9A13;&#x5F8C;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x5375;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E; mRNA &#x306F; grk &#x5375;&#x306E; mRNA &#x3068;&#x82E5;&#x3044;&#x9593;&#x306E;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30A7;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x30BA;&#x3002;grk mRNA &#x7C92;&#x5B50;&#x96C6;&#x56E3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7740;&#x5B9F;&#x306B;&#x5375;&#x5DE3;&#x304C;&#x9032;&#x3080;&#x306B;&#x3064;&#x308C;&#x3066;&#x305D;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x5931;&#x3046;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306E; K10 &#x3068; sqd(1) &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; grk &#x53E4;&#x3044;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mRNA &#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x3059;, &#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x4FB5;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30CF;&#x30A8;&#x3067;&#x6B63;&#x3057;&#x304F; grk &#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA; mRNA &#x306F;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9759;&#x7684;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;mRNA &#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x9759;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x52D5;&#x7684;&#x304B;&#x3089;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F; grk &#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x86CD;&#x5149;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5185;&#x5728;&#x6027; gurken &#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9; &#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mRNA&#x3002;

Drosophila oogenesis &#xC911; gurken (grk) &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; mRNA &#xB9AC;&#xB4DC; &#xACC4;&#xB780;&#xC758; &#xCD95; &#xADF9;&#xC131;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC5D0;. Oogenesis, grk &#xB098;&#xC911; &#xB2E8;&#xACC4; grk Mrna&#xB294; oocyte&#xC758; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xBAA8;&#xC11C;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; mRNA oocyte, &#xD6C4;&#xBD80;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xB2E8;&#xACC4;. &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; &#xC0DD; grk &#xC575;&#xCEE4;&#xB9AC;&#xC9C0;&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; mRNA &#xC0DD;&#xD65C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; MS2 MCP &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; aberrantly &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; MCP GFP &#xD0DC;&#xADF8; &#xC0DD; grk mRNA &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; localizes &#xBC0F; &#xB3D9;&#xC791; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; grk&#xC758; photobleaching (FRAP) &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD6C4; &#xD615;&#xAD11; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xADF8; &#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; mRNA &#xACF5;&#xAC1C; grk mRNA &#xC601; &#xC0AC;&#xC774; &#xC624;&#xB798; &#xB41C; &#xACC4;&#xB780;&#xC758; &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; &#xCC28;&#xC774; &#xC2E4;. grk mRNA &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xBAA8;&#xC9D1;&#xB2E8;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xB3D9;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC790; &#xAFB8;&#xC900;&#xD788; oogenesis &#xC9C4;&#xD589; &#xB418;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB3D9;&#xC801; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xC783;&#xAC8C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xCC28;&#xC774; &#xC774;&#xC804; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; Mrna&#xB294; &#xADF8; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xB3D9;&#xC801; grk mislocalized K10 &#xBC0F; sqd(1) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC1E0;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD0C0;&#xD611;&#xB41C; &#xD68C; &#xD65C;&#xB3D9;, &#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; grk &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Mrna&#xB294; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xC815;&#xC801;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; grk Mrna&#xC5D0; oocytes &#xC0DD;&#xD65C;&#xACFC; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB3D9;&#xC801; &#xC815;&#xC801; &#xACFC;&#xC815; oogenesis &#xC9C4;&#xD589; &#xB428;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC790;&#xC5F0; &#xAD00;&#xCC30;.

&#xB193;&#xC5EC;&#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC0DD; gurken &#xC5ED;&#xD559; mRNA &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C;.

Durante la oog&eacute;nesis en Drosophila, la localizaci&oacute;n espec&iacute;fica de gurken (grk) mRNA conduce al establecimiento de la polaridad del eje del huevo. En las primeras etapas de la ovog&eacute;nesis, grk mRNA se encuentra en la parte posterior del &oacute;vulo, mientras que en la posterior etapas grk mRNA se coloca en la esquina anterior dorsal de los ovocitos. Para visualizar la localizaci&oacute;n en tiempo real y anclaje de grk end&oacute;geno mRNA en ovocitos de vida, hemos utilizado el sistema MS2-MCP. Mostramos grk end&oacute;geno MCP-GFP-etiquetado mRNA se localiza correctamente en ovocitos de tipo salvaje y se comporta aberrantemente en fondos mutantes. Recuperaci&oacute;n de fluorescencia despu&eacute;s de photobleaching (FRAP) experimentos de grk localizada mRNA en c&aacute;maras de huevo revel&oacute; una diferencia en la din&aacute;mica del primer huevo de mRNA entre j&oacute;venes y mayores c&aacute;maras. GRK mRNA part&iacute;culas, como una poblaci&oacute;n, son mol&eacute;culas altamente din&aacute;micas que constantemente pierden su naturaleza din&aacute;mica como progresa oog&eacute;nesis. Esta diferencia en la din&aacute;mica se aten&uacute;a en mutantes K10 y sqd(1) que mislocalized grk que mRNA en etapas m&aacute;s viejas es mucho m&aacute;s din&aacute;mico con respecto a los controles de tipo salvaje. Por el contrario, en moscas con actividad de dine&iacute;na comprometido, debidamente localizados grk mRNA es mucho m&aacute;s est&aacute;tico. Tomados en conjunto, hemos observado la naturaleza de grk localizada mRNA en vivo de ovocitos y proponer que su mantenimiento cambia de una din&aacute;mica a un proceso est&aacute;tico como progresa oog&eacute;nesis.

La din&aacute;mica de fluorescencia etiquetada gurken end&oacute;geno mRNA en Drosophila.

&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x5C06;&#x5B9A;&#x5411;&#x5230;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57DF;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x751F;&#x7269;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x6781;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x3002;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#xFF0C;bicoid (bcd) mRNA prelocalized &#x5728;&#x524D;&#x8DEF;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x540E;&#x65BD;&#x80A5;&#xFF0C;&#x8FD9; RNA &#x7FFB;&#x8BD1;&#x4EA7;&#x751F; Bcd &#x86CB;&#x767D;&#x6E10;&#x53D8;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x524D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x547D;&#x8FD0; [1] &#x548C; [2]&#x3002;&#x5206;&#x6790;&#x7684; bcd mRNA &#x7684;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x63D0;&#x51FA;&#x7A33;&#x6001; bcd &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x6A21;&#x578B;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8FD0;&#x8F93; [3]&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x4E0D;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA; bcd &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x675F;&#x6574;&#x4E2A;&#x7EF4;&#x4FEE;&#x65F6;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x751F; [4] &#x548C; [5]&#xFF0C;&#x51C6;&#x5907;&#x62C6;&#x5378;&#x6216;&#x6210;&#x719F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x51E0;&#x4E2A;&#x661F;&#x671F;&#x524D;&#x65BD;&#x80A5; [6] &#x53EF;&#x4EE5;&#x4FDD;&#x6301;&#x4F11;&#x7720;&#x524D;&#x8DEF;&#x7684; bcd &#x7559;&#x4F4F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6F84;&#x6E05;&#x7684;&#x8DEF;&#x5F84;&#x548C;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6301;&#x7EED; bcd mRNA &#x8FD0;&#x8F93;&#x76F4;&#x63A5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x751F;&#x6D3B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D; bcd RNA &#x7C92;&#x5B50;&#x6613;&#x4F4D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; bcd mRNA &#x4ECE;&#x8FDE;&#x7EED;&#x7684;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8FD0;&#x8F93;&#xFF0C;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x951A;&#x56FA;&#x672B;&#x5C3E;&#x7684;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x8F6C;&#x79FB;&#x3002;&#x86CB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x89E6;&#x53D1;&#x5668; bcd &#x91CA;&#x653E;&#x4ECE;&#x9002;&#x5F53;&#x90E8;&#x7F72;&#x4E2D;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x524D;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x4E00;&#x79CD;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x60CA;&#x8BB6;&#x7684;&#x5E73;&#x884C;&#x5173;&#x7CFB;&#x82CD;&#x8747;&#x548C;&#x9752;&#x86D9;&#xFF0C;&#x5982; cortically &#x6813;&#x7CFB;&#x975E;&#x6D32;&#x722A;&#x87FE; Vg1 mRNA &#x7ECF;&#x5386;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x5206;&#x914D;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x719F; [7]&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x4ECE;&#x800C;&#x7A81;&#x51FA;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x89C4;&#x7BA1; mRNA &#x951A;&#x5B9A;&#x548C;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FC7;&#x6E21;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x90E8;&#x7F72;&#x3002;

Bicoid mRNA &#x951A;&#x56FA;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x8FC7;&#x6E21;&#x671F;&#x95F4;&#x7A81;&#x51FA;&#x5B88;&#x6052;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Intracellular mRNA localization directs protein synthesis to particular subcellular domains to establish embryonic polarity in a variety of organisms. In Drosophila, bicoid (bcd) mRNA is prelocalized at the oocyte anterior. After fertilization, translation of this RNA produces a Bcd protein gradient that determines anterior cell fates [1] and [2]. Analysis of bcd mRNA during late stages of oogenesis suggested a model for steady-state bcd localization by continual active transport [3]. However, this mechanism cannot explain maintenance of bcd localization throughout the end of oogenesis, when microtubules disassemble in preparation for embryogenesis [4] and [5], or retention of bcd at the anterior in mature oocytes, which can remain dormant for weeks before fertilization [6]. Here, we elucidate the path and mechanism of sustained bcd mRNA transport by direct observation of bcd RNA particle translocation in living oocytes. We show that bcd mRNA shifts from continuous active transport to stable actin-dependent anchoring at the end of oogenesis. Egg activation triggers bcd release from the anterior cortex for proper deployment in the embryo, probably through reorganization of the actin cytoskeleton. These findings uncover a surprising parallel between flies and frogs, as cortically tethered Xenopus Vg1 mRNA undergoes a similar redistribution during oocyte maturation [7]. Our results thus highlight a conserved mechanism for regulating mRNA anchoring and redeployment during the oocyte-to-embryo transition.

Changes in bicoid mRNA anchoring highlight conserved mechanisms during the oocyte-to-embryo transition.

Localisation des ARNm intracellulaire dirige la synth&#xE8;se des prot&#xE9;ines &#xE0; domaines particuliers subcellulaires d&#x26;#39;&#xE9;tablir la polarit&#xE9; embryonnaire dans une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;organismes. Chez la drosophile, bicoid (bcd) ARNm est prelocalized &#xE0; la partie ant&#xE9;rieure ovocyte. Apr&#xE8;s la f&#xE9;condation, la traduction de cet ARN produit un gradient de prot&#xE9;ines Bcd qui d&#xE9;termine le destin des cellules ant&#xE9;rieures [1] et [2]. Analyse de l&#x26;#39;ARNm bcd cours des derniers stades de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se a propos&#xE9; un mod&#xE8;le pour la localisation bcd l&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre par transport actif continue [3]. Cependant, ce m&#xE9;canisme ne peut expliquer l&#x26;#39;entretien de la localisation bcd tout au long de la fin de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se, lorsque microtubules d&#xE9;monter en vue de l&#x26;#39;embryogen&#xE8;se [4] et [5], ou la r&#xE9;tention de bcd &#xE0; la partie ant&#xE9;rieure dans des ovocytes matures, qui peuvent rester en dormance pendant plusieurs semaines avant la f&#xE9;condation [6]. Ici, nous avons &#xE9;labor&#xE9; le chemin et le m&#xE9;canisme de transport bcd ARNm soutenue par l&#x26;#39;observation directe de la translocation de particules bcd ARN dans des ovocytes de vie. Nous montrons que les changements d&#x26;#39;ARNm bcd de transport actif continue &#xE0; stable actine-d&#xE9;pendante d&#x26;#39;ancrage &#xE0; la fin de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se. Activation d&#xE9;clenche la lib&#xE9;ration d&#x26;#39;oeufs bcd de la corticale ant&#xE9;rieure pour un d&#xE9;ploiement appropri&#xE9; dans l&#x26;#39;embryon, sans doute gr&#xE2;ce &#xE0; la r&#xE9;organisation du cytosquelette d&#x26;#39;actine. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;couvrir un surprenant parall&#xE8;le entre les mouches et de grenouilles, comme corticale attach&#xE9; Xenopus Vg1 ARNm subit une redistribution similaire au cours de la maturation ovocytaire [7]. Nos r&#xE9;sultats mettent ainsi en &#xE9;vidence un m&#xE9;canisme de r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;ARNm conserv&#xE9; ancrage et de red&#xE9;ploiement pendant la transition ovocyte &#xE0; l&#x26;#39;embryon.

Changements dans les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;ARNm bicoid en &#xE9;vidence d&#x26;#39;ancrage conserv&#xE9; au cours de la transition d&#x26;#39;ovocytes &#xE0; l&#x26;#39;embryon

Intrazellul&auml;rer mRNA Lokalisierung leitet die Proteinsynthese an bestimmten subzellulare Dom&auml;nen embryonalen Polarit&auml;t in einer Vielzahl von Organismen zu etablieren. Drosophila, Bicoid (bcd) mRNA ist an der vorderen Eizelle prelocalized. Nach der Befruchtung produziert die &Uuml;bersetzung dieser RNA einen Bcd-Protein-Verlauf, der vorderen Zelle Schicksale [1] und [2] bestimmt. Analyse von bcd mRNA w&auml;hrend der sp&auml;ten Stadien der Oogenese ein Modell f&uuml;r die station&auml;ren bcd Lokalisierung durch kontinuierliche aktiven Transport [3] vorgeschlagen. Jedoch dieser Mechanismus nicht erkl&auml;ren Wartung der bcd-Lokalisierung im gesamten Ende der Oogenese, wenn Mikrotubuli in Vorbereitung der Embryogenese [4] und [5], disassemblieren oder Aufbewahrung von bcd an der vorderen in Reife Eizellen, die f&uuml;r Wochen vor der Befruchtung [6] ruhen k&ouml;nnen. Hier erl&auml;utern wir den Pfad und den Mechanismus der nachhaltigen bcd mRNA-Transport durch direkte Beobachtung von bcd RNA Partikel Translokation in lebenden Eizellen. Wir zeigen, dass bcd mRNA von st&auml;ndigen aktiven Transport zu einer stabilen Aktin-abh&auml;ngige Verankerung am Ende der Oogenese verschiebt. Ei-Aktivierung l&ouml;st bcd-Freisetzung aus der vorderen Hirnrinde f&uuml;r die ordnungsgem&auml;&szlig;e Bereitstellung im Embryo, wahrscheinlich durch Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts. Diese Erkenntnisse decken eine &uuml;berraschende Parallele zwischen fliegen und Fr&ouml;sche, wie cortically gefesselte Xenopus Vg1-mRNA eine &auml;hnliche Umverteilung w&auml;hrend der Reifung der Eizelle [7 erf&auml;hrt]. Unsere Ergebnisse lenken daher einen konservierten Mechanismus zur Regulierung der mRNA zu verankern und Umschichtungen w&auml;hrend der Eizelle-Embryo-&Uuml;bergang.

&Auml;nderungen bei der Bicoid mRNA Verankerung hervorheben konservierte Mechanismen w&auml;hrend der Eizelle-Embryo-&Uuml;bergang.

Localizzazione intracellulare di mRNA dirige la sintesi proteica in particolari subcellulari domini per stabilire la polarit&agrave; embrionali in una variet&agrave; di organismi. In drosofila, bicoid (bcd) mRNA &egrave; prelocalized presso l&#39;ovocita anteriore. Dopo la fecondazione, la traduzione di questo RNA produce un gradiente della proteina Bcd che determina i destini di cella anteriore [1] e [2]. Analisi di bcd mRNA durante le ultime fasi dell&#39;ovogenesi ha suggerito un modello per la localizzazione di bcd steady-state di continuo trasporto attivo [3]. Tuttavia, questo meccanismo non pu&ograve; spiegare il mantenimento della localizzazione bcd per tutta la fine dell&#39;ovogenesi, quando microtubuli smontare in preparazione per l&#39;embriogenesi [4] e [5], o la ritenzione di bcd presso l&#39;anteriore in ovociti maturi, che possono rimanere latente per settimane prima della fecondazione [6]. Qui, noi delucidare il meccanismo di bcd sostenuta e percorso trasporto mRNA dall&#39;osservazione diretta della traslocazione particella bcd RNA in vita gli ovociti. Mostriamo che bcd mRNA si sposta dal trasporto attivo continua a stable actina-dipendente di ancoraggio alla fine della ovogenesi. Attivazione uovo innesca il rilascio bcd dalla corteccia anteriore per la corretta distribuzione in embrione, probabilmente attraverso la riorganizzazione del citoscheletro di actina. Queste scoperte scoprono un sorprendente parallelo tra mosche e rane, come nella corteccia tethered Xenopus Vg1 mRNA subisce una ridistribuzione simile durante la maturazione degli ovociti [7]. I nostri risultati evidenziano cos&igrave; un meccanismo per regolare l&#39;ancoraggio di mRNA e la ridistribuzione durante la transizione di ovociti-embrioni conservato.

Modifiche in mRNA di bicoid ancoraggio evidenziano meccanismi conservati durante la transizione di ovociti-embrioni.

&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x80DA;&#x306E;&#x6975;&#x6027;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x3092;&#x6307;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x3001;bicoid&#xFF08;BCD&#xFF09;mRNA&#x306F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x3067;prelocalized&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x53D7;&#x7CBE;&#x5F8C;&#x3001;&#x3053;&#x306E;RNA&#x306E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x306F;&#x3001;[1]&#x3068;[2]&#x524D;&#x65B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;BCD&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x52FE;&#x914D;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x306E;BCD&#x306E;mRNA&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x80FD;&#x52D5;&#x8F38;&#x9001;[3]&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;BCD&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x7D42;&#x308F;&#x308A;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;BCD&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x306F;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x6E96;&#x5099;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;[4] [5]&#x3084;&#x3001;&#x53D7;&#x7CBE;&#x524D;&#x306B;&#x6570;&#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F11;&#x7720;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x3001;&#x3067;BCD&#x306E;&#x4FDD;&#x6301;[6]&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;BCD RNA&#x7C92;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x5EA7;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6301;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;BCD&#x306E;mRNA&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3078;&#x306E;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x80FD;&#x52D5;&#x8F38;&#x9001;&#x304B;&#x3089;BCD mRNA&#x306E;&#x30B7;&#x30D5;&#x30C8;&#x304C;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5375;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x518D;&#x7DE8;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x5C55;&#x958B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x524D;&#x90E8;&#x76AE;&#x8CEA;&#x304B;&#x3089;&#x306E;BCD&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x30CF;&#x30A8;&#x3084;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x610F;&#x5916;&#x306A;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30A2;&#x30D5;&#x30EA;&#x30AB;&#x30C4;&#x30E1;&#x30AC;&#x30A8;&#x30EB;VG1 mRNA&#x306F;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x719F;&#x6642;&#x306B;[7]&#x540C;&#x3058;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x518D;&#x5206;&#x914D;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x6642;&#x306B;&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;mRNA&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x518D;&#x914D;&#x7F6E;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5375;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x6642;&#x306B;Bicoid MRNA&#x30A2;&#x30F3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x4FDD;&#x5B58;&#x98DF;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x5909;&#x5316;

&#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xADF9;&#xC131;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xD2B9;&#xC815; subcellular &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;, bicoid (bcd)&#xC5D0;&#xC11C; mRNA oocyte &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; prelocalized. &#xC218;&#xC815;, &#xD6C4;&#xC774; RNA&#xC758; &#xBC88;&#xC5ED;&#xC740; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85; [1]&#xACFC; [2]&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; Bcd &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB798;&#xB514;&#xC5B8;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xC11D; oogenesis&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; &#xB2E8;&#xACC4; mRNA bcd&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131; &#xAD50;&#xD1B5; [3] &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; bcd &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378; &#xC81C;&#xC548;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; microtubules embryogenesis [4] [5]&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC900;&#xBE44;&#xC5D0; &#xBD84;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; oogenesis, &#xB05D;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; bcd &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xB610;&#xB294; &#xC218;&#xC815; [6] &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xC8FC; &#xB3D9;&#xC548; &#xD734;&#xBA74; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0;&#xC11C; bcd&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACBD;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778;&#xB41C; bcd&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xBA85;&#xB8CC; &#xC0DD;&#xD65C; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; bcd RNA &#xC785;&#xC790; &#xC804; &#xC88C;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; mRNA &#xC218;&#xC1A1;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; bcd mRNA &#xB9D0;&#xB77C; &#xC885;&#xC18D; &#xB05D;&#xC5D0; oogenesis &#xC815;&#xBC15; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xB3D9; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACC4;&#xB780; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC544;&#xB9C8; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xAC1C;&#xD3B8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xBC30;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; bcd &#xC11D;&#xBC29;&#xC744; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; cortically &#xD14C;&#xB354; Xenopus Vg1 mRNA oocyte &#xC131;&#xC219; [7] &#xB3D9;&#xC548; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC7AC;&#xBC30;&#xD3EC;&#xB97C; &#xACAA; &#xC2B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xD30C;&#xB9AC;&#xC640; &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC;, &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xD3C9;&#xD589;&#xC744; &#xD3ED;&#xB85C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; mRNA &#xACE0;&#xC815; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xBC30;&#xCE58; oocyte &#xBC30;&#xC544; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xAC15;&#xC870;.

&#xBCC0;&#xD654; bicoid mRNA &#xC815;&#xBC15; oocyte &#xBC30;&#xC544; &#xC804;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Localizaci&#xF3;n intracelular ARNm dirige la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas particulares de dominios subcelulares para establecer la polaridad embrionaria en una variedad de organismos. En Drosophila, bicoide (BCD) de ARNm se prelocalized en la parte anterior del oocito. Despu&#xE9;s de la fecundaci&#xF3;n, la traducci&#xF3;n de este ARN produce un gradiente de prote&#xED;nas Bcd que determina los destinos anteriores de c&#xE9;lulas [1] y [2]. An&#xE1;lisis de ARNm de BCD durante las &#xFA;ltimas etapas de la ovog&#xE9;nesis propuso un modelo para la localizaci&#xF3;n de BCD en estado estacionario en transporte continua activa [3]. Sin embargo, este mecanismo no puede explicar el mantenimiento de la localizaci&#xF3;n de BCD durante el final de la ovog&#xE9;nesis, cuando los microt&#xFA;bulos desarme en la preparaci&#xF3;n de la embriog&#xE9;nesis [4] y [5], o la retenci&#xF3;n de BCD en la parte anterior de ovocitos maduros, que pueden permanecer latentes durante semanas antes de la fertilizaci&#xF3;n [6]. En este sentido, aclarar el camino y el mecanismo de transporte de mRNA bcd sostenida por la observaci&#xF3;n directa de la translocaci&#xF3;n de part&#xED;culas de ARN bcd en los ovocitos de vida. Se demuestra que los cambios BCD mRNA de transporte activo continua estable a la actina dependiente de anclaje al final de la ovog&#xE9;nesis. La activaci&#xF3;n del huevo provoca la liberaci&#xF3;n de bcd de la corteza anterior para la correcta instalaci&#xF3;n en el embri&#xF3;n, probablemente a trav&#xE9;s de la reorganizaci&#xF3;n del citoesqueleto de actina. Estos hallazgos descubrir un paralelismo sorprendente entre las moscas y ranas, como cortical atado Xenopus mRNA Vg1 se somete a una redistribuci&#xF3;n similar durante la maduraci&#xF3;n de ovocitos [7]. Nuestros resultados destacan un mecanismo conservado para la regulaci&#xF3;n del ARNm de anclaje y la redistribuci&#xF3;n de ovocitos durante la transici&#xF3;n-a-embri&#xF3;n.

Los cambios en los mecanismos de anclaje Resaltar Bicoid mRNA de conservarse durante la transici&#xF3;n de ovocitos a embriones

&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; bicoid &#x5230;&#x524D;&#x8DEF;&#x7684;&#x679C;&#x8747;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; mRNA &#x7684;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x524D;&#x540E;&#x4F53;&#x8F74;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;bicoid mRNA &#x672C;&#x571F;&#x5316;&#x6D89;&#x53CA;&#x4EA4;&#x6613;&#x56E0;&#x7D20;&#x3001; &#x5206;&#x5B50;&#x9A6C;&#x8FBE;&#x548C; mRNA &#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x5185;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x6539;&#x578B;&#x7684;&#x9AA8;&#x67B6;&#x6210;&#x5206;&#x590D;&#x6742;&#x591A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x71D5;&#x5B50;&#x548C; Staufen&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x8981;&#x6C42;&#x5DF2;&#x786E;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x548C;&#x5B83;&#x4EEC;&#x4E0E; bicoid mRNA &#x8FD0;&#x8F93;&#x7C92;&#x5B50;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x4ECD;&#x672A;&#x5F97;&#x5230;&#x89E3;&#x51B3;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6210;&#x50CF;&#xFF0C;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x5728;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7535;&#x955C;&#x6280;&#x672F;&#x5BF9;&#x8D85;&#x8584;&#x51B0;&#x51BB;&#x5207;&#x7247;&#x4EE5;&#x71D5;&#x5B50;&#x3001; Staufen&#x3001; &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E; bicoid &#x7684;&#x5206;&#x5E03;&#x7814;&#x7A76;&#x665A;&#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x71D5;&#x5B50;&#x548C; bicoid mRNA &#x72EC;&#x7ACB;&#x8FD0;&#x5E76;&#x4E0D; colocalized &#x5728;&#x5176;&#x6700;&#x7EC8;&#x76EE;&#x7684;&#x5730;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x71D5;&#x5B50;&#x4E0D; bicoid &#x4F20;&#x8F93;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;&#x71D5;&#x5B50;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x5BF9;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#xFF0C;&#x5728;&#x9760;&#x8FD1;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#xFF0C;&#x800C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#xFF0C;&#x71D5;&#x5B50;&#x51FD;&#x6570; bicoid &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x901A;&#x8FC7;&#x8C03;&#x8282;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x3002;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Staufen&#xFF0C;&#x808C;&#x548C; bicoid mRNA &#x7A97;&#x4F53; nonmembranous&#xFF0C;&#x7535;&#x5B50;&#x81F4;&#x5BC6;&#x9897;&#x7C92;&#x4E2D;&#x5728;&#x524D;&#x8DEF;&#x7684;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5728;&#x94FE;&#x63A5;&#x4E2D; bicoid &#x6392;&#x9664;&#x4E3A;&#x71D5;&#x5B50;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x5BF9;&#x808C;&#x7535;&#x673A; mRNA&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6A21;&#x578B; bicoid mRNA &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x71D5;&#x5B50;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E58;&#x5750;&#x808C;&#x548C;&#x95F4;&#x63A5;&#x52A9;&#x957F; bicoid mRNA &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#xFF0C;&#x800C; Staufen &#x808C;&#x4F9D;&#x8D56; bicoid mRNA &#x8FD0;&#x8F93;&#x4E2D;&#x8D77;&#x7740;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x533A;&#x5206;&#x76F4;&#x63A5;&#x4ECE; bicoid mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x95F4;&#x63A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Localization of bicoid mRNA to the anterior of the Drosophila oocyte is essential for patterning the anteroposterior body axis in the early embryo. bicoid mRNA localizes in a complex multistep process involving transacting factors, molecular motors and cytoskeletal components that remodel extensively during the lifetime of the mRNA. Genetic requirements for several localization factors, including Swallow and Staufen, are well established, but the precise roles of these factors and their relationship to bicoid mRNA transport particles remains unresolved. Here we use live cell imaging, super-resolution microscopy in fixed cells and immunoelectron microscopy on ultrathin frozen sections to study the distribution of Swallow, Staufen, actin and dynein relative to bicoid mRNA during late oogenesis. We show that Swallow and bicoid mRNA are transported independently and are not colocalized at their final destination. Furthermore, Swallow is not required for bicoid transport. Instead, Swallow localizes to the oocyte plasma membrane, in close proximity to actin filaments, and we present evidence that Swallow functions during the late phase of bicoid localization by regulating the actin cytoskeleton. In contrast, Staufen, dynein and bicoid mRNA form nonmembranous, electron dense particles at the oocyte anterior. Our results exclude a role for Swallow in linking bicoid mRNA to the dynein motor. Instead we propose a model for bicoid mRNA localization in which Swallow is transported independently by dynein and contributes indirectly to bicoid mRNA localization by organizing the cytoskeleton, whereas Staufen plays a direct role in dynein-dependent bicoid mRNA transport.

Distinguishing direct from indirect roles for bicoid mRNA localization factors.

La localisation des ARNm bicoid &#xE0; la partie ant&#xE9;rieure de l&#x26;#39;ovocyte chez la drosophile est essentiel pour la mod&#xE9;lisation de l&#x26;#39;axe ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieur du corps dans l&#x26;#39;embryon pr&#xE9;coce. ARNm bicoid se localise dans un processus multi-&#xE9;tapes complexe impliquant des facteurs qui transigent, les moteurs mol&#xE9;culaires et composants du cytosquelette que de remodeler intensivement pendant la dur&#xE9;e de vie de l&#x26;#39;ARNm. Exigences g&#xE9;n&#xE9;tiques pour plusieurs facteurs de localisation, y compris Swallow et Staufen, sont bien &#xE9;tablis, mais les r&#xF4;les pr&#xE9;cis de ces facteurs et leur relation &#xE0; bicoid particules de transport d&#x26;#39;ARNm n&#x26;#39;est toujours pas r&#xE9;solue. Ici, nous utilisons l&#x26;#39;imagerie des cellules vivantes, la microscopie de super-r&#xE9;solution dans les cellules fixes et immuno&#xE9;lectromicroscopie sur coupes ultrafines congel&#xE9;es pour &#xE9;tudier la distribution de Swallow, Staufen, l&#x26;#39;actine et la dyn&#xE9;ine par rapport &#xE0; l&#x26;#39;ARNm bicoid cours de l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se tardive. Nous montrons que Swallow et ARNm bicoid sont transport&#xE9;s de fa&#xE7;on ind&#xE9;pendante et ne sont pas colocalis&#xE9;s &#xE0; leur destination finale. En outre, Avale n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour le transport bicoid. Au lieu de cela, Avale localise &#xE0; la membrane plasmique des ovocytes, &#xE0; proximit&#xE9; de filaments d&#x26;#39;actine, et nous pr&#xE9;senter des preuves que les fonctions de Swallow au cours de la phase tardive de la localisation bicoid en r&#xE9;gulant le cytosquelette d&#x26;#39;actine. En revanche, Staufen, la dyn&#xE9;ine et bicoid nonmembranous forme d&#x26;#39;ARNm, d&#x26;#39;&#xE9;lectrons particules denses &#xE0; la partie ant&#xE9;rieure ovocyte. Nos r&#xE9;sultats excluent un r&#xF4;le pour Swallow &#xE0; lier l&#x26;#39;ARNm bicoid au moteur dyn&#xE9;ine. Au lieu de cela nous proposons un mod&#xE8;le pour la localisation d&#x26;#39;ARNm bicoid dans lequel Swallow est transport&#xE9;e de fa&#xE7;on ind&#xE9;pendante par la dyn&#xE9;ine et contribue indirectement &#xE0; la localisation d&#x26;#39;ARNm bicoid en organisant le cytosquelette, tandis que Staufen joue un r&#xF4;le direct dans la dyn&#xE9;ine transport d&#xE9;pendant ARNm bicoid.

Distinguer direct de R&#xF4;les indirects pour bicoid Facteurs localisation des ARNm

Lokalisierung von Bicoid unbedingt mRNA an der vorderen von der Drosophila-Eizelle Musterung der anteroposterioren K&ouml;rperachse im fr&uuml;hen Embryo. Bicoid lokalisiert mRNA in ein komplexer Vorgang mit Abwicklung Faktoren, molekulare Motoren und Zytoskelett-Komponenten, die w&auml;hrend der Lebensdauer des mRNA ausgiebig umgestalten. Genetische Voraussetzungen f&uuml;r mehrere Lokalisierung Faktoren, einschlie&szlig;lich Swallow und Staufen, sind gut geschaffen, aber die pr&auml;zisen Rollen dieser Faktoren und ihre Beziehung zur Bicoid mRNA Transport Teilchen bleibt ungel&ouml;st. Hier verwenden wir live Cell imaging, superaufl&ouml;sende Mikroskopie in &ouml;rtlich festgelegten Zellen und Immunoelectron Mikroskopie auf ultrad&uuml;nnen gefrorenen Abschnitte, die Verteilung der Swallow, Staufen, Aktin und Dynein relativ Bicoid studieren mRNA w&auml;hrend der sp&auml;ten Oogenese. Wir zeigen, dass Swallow und Bicoid mRNA sind unabh&auml;ngig voneinander und sind nicht am Zielort colocalized. Swallow ist dar&uuml;ber hinaus nicht f&uuml;r Bicoid-Transport erforderlich. Stattdessen Swallow lokalisiert an der Plasmamembran der Eizelle, in unmittelbarer N&auml;he zum Aktin-Filamente, und wir pr&auml;sentieren Beweise, Swallow-Funktionen w&auml;hrend der sp&auml;ten Phase der Bicoid-Lokalisierung durch Regulierung des Aktin-Zytoskeletts. In Kontrast, Staufen, Dynein und Bicoid mRNA Form nonmembranous, Elektron Dichte Teilchen bei der Eizelle anterior. Unsere Ergebnisse eine Rolle bei der Verkn&uuml;pfung von Bicoid f&uuml;r Swallow ausschlie&szlig;en mRNA an den Dynein-Motor. Stattdessen schlagen wir ein Modell f&uuml;r die Bicoid mRNA Lokalisierung in dem Swallow ist unabh&auml;ngig von Dynein transportiert und tr&auml;gt indirekt zur Bicoid mRNA Lokalisierung durch die Organisation des Zytoskeletts, w&auml;hrend Staufen eine direkte Rolle in Dynein-abh&auml;ngige Bicoid-mRNA-Transport spielt.

Kennzeichen direkt von indirekten Rollen f&uuml;r Bicoid mRNA Lokalisierung Faktoren.

Localizzazione di bicoid mRNA per l&#39;anteriore dell&#39;ovocita drosofila &egrave; essenziale per la creazione dell&#39;asse anteroposteriore corpo nell&#39;embrione precoce. bicoid mRNA si localizza in un complesso processo multifasico che coinvolgono transazioni fattori, motori molecolari e componenti citoscheletriche che ritoccano estesamente durante la vita del mRNA. Requisiti genetici per diversi fattori di localizzazione, tra cui rondine e Staufen, sono ben consolidate, ma i ruoli precisi di questi fattori e loro relazione con particelle di trasporto mRNA bicoid rimane irrisolta. Qui usiamo live cell imaging, Super-risoluzione microscopia in celle fisse e immunoelectron microscopy su sezioni congelate ultrasottile per studiare la distribuzione della rondine, Staufen, actina e dineina rispetto bicoid mRNA durante il tardo ovogenesi. Mostriamo che Swallow e bicoid mRNA vengono trasportati in modo indipendente e non sono colocalized alla loro destinazione finale. Inoltre, rondine non &egrave; richiesto per il trasporto di bicoid. Invece, rondine si localizza alla membrana plasmatica degli ovociti, in prossimit&agrave; di filamenti di actina, e vi presentiamo prove che funzioni rondine durante la fine della fase di localizzazione bicoid regolando il citoscheletro di actina. In contrasto, Staufen, dineina e bicoid mRNA forma nonmembranous, elettrone particelle dense all&#39;ovocita anteriore. I nostri risultati escludono un ruolo per Swallow nel collegamento bicoid mRNA al motore dineina. Invece vi proponiamo un modello per la localizzazione di mRNA di bicoid che Swallow &egrave; trasportato in modo indipendente da dineina e contribuisce indirettamente alla localizzazione di mRNA di bicoid con l&#39;organizzazione del citoscheletro, mentre Staufen ricopre un ruolo diretto nel trasporto di mRNA di bicoid dineina dipendente.

Distintivo diretta da ruoli indiretti per i fattori di localizzazione mRNA bicoid.

&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x65B9;&#x306B;bicoid mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x524D;&#x5F8C;&#x4F53;&#x8EF8;&#x304C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002; bicoid mRNA&#x306F;&#x3001;&#x53D6;&#x5F15;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x6210;&#x5206;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x591A;&#x6BB5;&#x968E;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;mRNA&#x306E;&#x5B58;&#x7D9A;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x6539;&#x9020;&#x3002;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x3068;&#x30B7;&#x30E5;&#x30BF;&#x30A6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8981;&#x4EF6;&#x3092;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;bicoid mRNA&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x7C92;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x672A;&#x89E3;&#x6C7A;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x534A;&#x306B;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x9593;&#x306B;bicoid mRNA&#x306B;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x3001;&#x30B7;&#x30E5;&#x30BF;&#x30A6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8584;&#x51CD;&#x7D50;&#x5207;&#x7247;&#x3092;&#x56FA;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x514D;&#x75AB;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3067;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30BB;&#x30EB;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x8D85;&#x89E3;&#x50CF;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x3068;bicoid mRNA&#x304C;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x8F38;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A;&#x5B9B;&#x5148;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x306F;bicoid&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x8FD1;&#x63A5;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;bicoid&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x5F8C;&#x671F;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x305D;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30B7;&#x30E5;&#x30BF;&#x30A6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;bicoid mRNA&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;nonmembranous&#x3001;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x524D;&#x3067;&#x306E;&#x96FB;&#x5B50;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7C92;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;bicoid mRNA&#x3092;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306B;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x9664;&#x5916;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30C4;&#x30D0;&#x30E1;&#x304C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x904B;&#x3070;&#x308C;&#x3001;&#x30B7;&#x30E5;&#x30BF;&#x30A6;&#x30D5;&#x30A7;&#x30F3;&#x304C;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CB;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;bicoid mRNA&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306B;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3057;bicoid mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x9593;&#x63A5;&#x7684;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;bicoid mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

Bicoid mRNA&#x5C40;&#x5728;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x9593;&#x63A5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x76F4;&#x63A5;&#x533A;&#x5225;&#x3059;&#x308B;

Bicoid &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; Drosophila oocyte &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; mRNA &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; anteroposterior &#xBAB8; &#xCD95; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. bicoid mRNA &#xBD84;&#xC790; &#xBAA8;&#xD130; &#xC694;&#xC778;&#xACFC; cytoskeletal &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; Mrna&#xC758; &#xC218;&#xBA85; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC1C;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xAC70;&#xB798;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB2E8;&#xACC4; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; localizes. &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xB4E4;&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30;&#xC640; &#xBCA8;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xB4F1; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC694;&#xAD6C; &#xC0AC;&#xD56D;&#xC744; &#xC798; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418; &#xACE0; &#xAD00;&#xACC4; bicoid mRNA &#xC804;&#xC1A1; &#xC785;&#xC790;&#xB97C; &#xD655;&#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5;, &#xACE0;&#xC815; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC288;&#xD37C; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xACFC; &#xC81C;&#xBE44;, &#xBCA8;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; &#xD68C; bicoid &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xD3EC; &#xC5F0;&#xAD6C; ultrathin &#xB0C9;&#xB3D9;&#xB41C; &#xC139;&#xC158;&#xC5D0; immunoelectron &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; mRNA &#xB2A6;&#xC740; oogenesis &#xB3D9;&#xC548;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC81C;&#xBE44;, bicoid Mrna&#xB294; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC1A1;&#xC744; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xBAA9;&#xC801;&#xC9C0;&#xC5D0; colocalized &#xD558;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30; bicoid &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30; localizes oocyte &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC81C;&#xC2DC; &#xC99D;&#xAC70; &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xAE30;&#xB2A5; &#xD558; bicoid &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xD6C4;&#xBC18; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC870;&#xC808; &#xD558; &#xC5EC;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCA8;&#xAE30;&#xC5D0;, &#xD68C;&#xC640; bicoid mRNA &#xC591;&#xC2DD; nonmembranous, &#xC804;&#xC790; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC785;&#xC790; oocyte &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; bicoid &#xC5F0;&#xACB0; &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC81C;&#xC678; mRNA &#xD68C; &#xBAA8;&#xD130;. &#xB300;&#xC2E0; &#xC0BC;&#xD0A4;&#xAE30; &#xD68C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC1A1; &#xB418; &#xACE0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC9C1;&#xC811; bicoid mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; cytoskeleton, &#xC870;&#xC9C1; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCA8;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD68C; &#xC885;&#xC18D; bicoid mRNA &#xC804;&#xC1A1;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; bicoid mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD55C;&#xB2E4;.

&#xAD6C;&#xBCC4; &#xC9C1;&#xC811; bicoid mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0;&#xC11C;.

Localizaci&#xF3;n de los ARNm bicoide a la anterior del ovocito Drosophila es esencial para la morfog&#xE9;nesis del eje anteroposterior del cuerpo en el embri&#xF3;n temprano. ARNm bicoide se localiza en un proceso de m&#xFA;ltiples complejo que involucra factores que realizan transacciones, motores moleculares y componentes del citoesqueleto que remodelan ampliamente durante la vida &#xFA;til del ARNm. Requisitos gen&#xE9;ticos para la localizaci&#xF3;n de varios factores, entre ellos, la golondrina y Staufen est&#xE1;n bien establecidos, pero las funciones precisas de estos factores y su relaci&#xF3;n con bicoides part&#xED;culas de mRNA de transporte sigue sin resolverse. Aqu&#xED; usamos im&#xE1;genes de c&#xE9;lulas vivas, super-resoluci&#xF3;n de la microscop&#xED;a en las c&#xE9;lulas fijas y inmunomicroscop&#xED;a en cortes ultrafinos congelados para estudiar la distribuci&#xF3;n de la Golondrina, Staufen, la actina y la dine&#xED;na en relaci&#xF3;n con ARNm bicoide durante la ovog&#xE9;nesis tarde. Se demuestra que Swallow y ARNm bicoide se transportan de forma independiente y no se colocalized a su destino final. Por otra parte, toma no es necesario para el transporte bicoide. En su lugar, Swallow se localiza en la membrana plasm&#xE1;tica de ovocitos, en las proximidades de los filamentos de actina, y presentamos pruebas de que las funciones del trago durante la fase tard&#xED;a de la localizaci&#xF3;n bicoide mediante la regulaci&#xF3;n del citoesqueleto de actina. Por el contrario, Staufen, dine&#xED;na y nonmembranous bicoide ARNm forma, part&#xED;culas densas de electrones en la parte anterior del oocito. Nuestros resultados no incluyen el papel de golondrina en la vinculaci&#xF3;n de ARNm bicoide al motor dine&#xED;na. En su lugar se propone un modelo para la localizaci&#xF3;n del mRNA bicoide en el que se transporta Swallow de forma independiente por la dine&#xED;na y contribuye indirectamente a la localizaci&#xF3;n bicoide ARNm por la organizaci&#xF3;n del citoesqueleto, mientras que Staufen juega un papel directo en la dine&#xED;na transporte dependiente del ARNm bicoide.

La distinci&#xF3;n directa de las funciones indirectas de mRNA de los factores de localizaci&#xF3;n Bicoid

&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684; mRNA &#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x7A7A;&#x95F4;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22;&#x673A;&#x5236;&#x5728;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x65B0;&#x7684;&#x548C;&#x6539;&#x8FDB;&#x7684;&#x53EF;&#x89C6;&#x5316;&#x8868;&#x8FBE;&#x65B9;&#x6CD5;&#x82B1;&#x4E86;&#x6D89;&#x53CA;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x52AA;&#x529B;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x5982;&#x4F55;&#x6269;&#x5C55;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185; mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x5728;&#x751F;&#x7269;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x589E;&#x5F3A;&#x6613;&#x7528;&#x6027;&#x548C;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x73B0;&#x5728;&#x542F;&#x7528; mRNA &#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x7535;&#x955C;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E00;&#x7EA7;&#x7684;&#x8003;&#x8BD5;&#x3002;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x73B0;&#x5728;&#x4E4B;&#x540E;&#x7684; mRNA &#x5728;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x79FB;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x88AB;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x91C7;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x63AA;&#x65BD;&#x5305;&#x62EC;&#x6807;&#x8BB0;&#x8A8A;&#x672C;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x663E;&#x5FAE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6839;&#x636E;&#x6742;&#x4EA4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6807;&#x8BB0;&#x4F7F;&#x7528;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x5206;&#x6CCC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x53CD;&#x4E49;&#x63A2;&#x9488;&#x548C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x4E92;&#x8865;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6280;&#x672F;&#x521B;&#x65B0;&#x90FD;&#x88AB;&#x52A0;&#x4E0A;&#x73B0;&#x5728;&#x8D85;&#x5206;&#x8FA8;&#x5149;&#x955C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x627F;&#x8BFA;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x6211;&#x4EEC;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x590D;&#x6742;&#x6027;&#x7684; mRNA &#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x53D1;&#x751F;&#x9769;&#x547D;&#x6027;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

&#x6E05;&#x9664;&#x90AE;&#x4EF6;&#xFF1A; &#x53EF;&#x89C6;&#x5316; mRNA &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;

Localized mRNA provides spatial and temporal protein expression essential to cell development and physiology. To explore the mechanisms involved, considerable effort has been spent in establishing new and improved methods for visualizing mRNA. Here, we discuss how these techniques have extended our understanding of intracellular mRNA localization in a variety of organisms. In addition to increased ease and specificity of detection in fixed tissue, in situ hybridization methods now enable examination of mRNA distribution at the ultrastructural level with electron microscopy. Most significantly, methods for following the movement of mRNA in living cells are now in widespread use. These include the introduction of labeled transcripts by microinjection, hybridization based methods using labeled antisense probes and complementary transgenic methods for tagging endogenous mRNAs using bacteriophage components. These technical innovations are now being coupled with super-resolution light microscopy methods and promise to revolutionize our understanding of the dynamics and complexity of the molecular mechanism of mRNA localization.

Making the message clear: visualizing mRNA localization.

ARNm localis&#xE9; fournit l&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines spatiale et temporelle essentielle au d&#xE9;veloppement et physiologie cellulaire. Pour explorer les m&#xE9;canismes impliqu&#xE9;s, des efforts consid&#xE9;rables ont &#xE9;t&#xE9; consacr&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tablissement de m&#xE9;thodes nouvelles et am&#xE9;lior&#xE9;es pour visualiser l&#x26;#39;ARNm. Ici, nous discutons de la fa&#xE7;on dont ces techniques ont am&#xE9;lior&#xE9; notre compr&#xE9;hension de la localisation intracellulaire d&#x26;#39;ARNm dans une vari&#xE9;t&#xE9; d&#x26;#39;organismes. En plus de la facilit&#xE9; accrue et la sp&#xE9;cificit&#xE9; de la d&#xE9;tection dans les tissus fixe, dans les m&#xE9;thodes d&#x26;#39;hybridation in situ permettent maintenant l&#x26;#39;examen de la distribution d&#x26;#39;ARNm au niveau ultrastructural en microscopie &#xE9;lectronique. Plus important encore, les m&#xE9;thodes pour la suite du mouvement de l&#x26;#39;ARNm dans les cellules vivantes sont maintenant largement utilis&#xE9;s. Il s&#x26;#39;agit notamment de l&#x26;#39;introduction de transcrits marqu&#xE9;s par des m&#xE9;thodes bas&#xE9;es sur la micro-injection d&#x26;#39;hybridation, en utilisant des sondes antisens marqu&#xE9;s et compl&#xE9;mentaires des m&#xE9;thodes transg&#xE9;niques pour ARNm endog&#xE8;nes marquage utilisant des composants bact&#xE9;riophages. Ces innovations techniques sont maintenant coupl&#xE9; avec un super-r&#xE9;solution des m&#xE9;thodes de microscopie optique et la promesse de r&#xE9;volutionner notre compr&#xE9;hension de la dynamique et la complexit&#xE9; du m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire de la localisation des ARNm.

Rendre le message est clair: Visualisation localisation des ARNm

Lokalisierte mRNA stellt r&auml;umliche und zeitliche Proteinexpression Zelle Entwicklung und Physiologie. Um die Mechanismen zu erforschen sind beteiligt, erhebliche Anstrengungen bei der Schaffung neuer und verbesserter Methoden zur Visualisierung von mRNA ausgegeben worden. Hier diskutieren wir, wie diese Techniken unser Verst&auml;ndnis von intrazellul&auml;rer mRNA Lokalisierung in einer Vielzahl von Organismen erweitert haben. Neben erh&ouml;hter Bedienkomfort und Spezifit&auml;t der Erkennung im festen Gewebe erm&ouml;glichen in situ Hybridisierung Methoden jetzt Pr&uuml;fung der mRNA Distribution ultrastrukturelle Ebene mit Elektronenmikroskopie. Am wichtigsten sind die Methoden f&uuml;r die Bewegung der mRNA in lebenden Zellen folgende jetzt weit verbreitet. Dazu geh&ouml;ren die Einf&uuml;hrung von beschrifteten Abschriften durch Mikroinjektion, Hybridisierung basierte Methoden mit beschrifteten antisense Sonden und erg&auml;nzende transgene Methoden f&uuml;r tagging endogene mRNAs Bakteriophage Komponenten. Diese technischen Innovationen sind jetzt mit superaufl&ouml;sende Lichtmikroskopie Methoden und Versprechen zu revolutionieren unser Verst&auml;ndnis der Dynamik und Komplexit&auml;t des molekularen Mechanismus der mRNA Lokalisierung gekoppelt wird.

Machen die Botschaft klar: mRNA Lokalisierung zu visualisieren.

MRNA localizzata fornisce l&#39;espressione della proteina spaziali e temporali essenziale per la fisiologia e lo sviluppo delle cellule. Per esplorare i meccanismi coinvolto, notevole sforzo &egrave; stato speso nella creazione di metodi nuovi e migliorati per la visualizzazione di mRNA. Qui, si discute di come queste tecniche hanno ampliato la nostra comprensione della localizzazione intracellulare di mRNA in una variet&agrave; di organismi. Oltre alla maggiore facilit&agrave; e specificit&agrave; di rilevazione in tessuto fisso, metodi di ibridazione in situ consentono ora verifica della distribuzione di mRNA a livello ultrastrutturale con microscopia elettronica. Pi&ugrave; significativamente, metodi per seguendo il movimento del mRNA in cellule viventi sono ora in uso diffuso. Questi includono l&#39;introduzione delle trascrizioni etichette dal microinjection, metodi di ibridazione basata utilizzando sonde antisense etichette e metodi complementari transgenici per il tagging mRNAs endogeno utilizzando componenti del batteriofago. Queste innovazioni tecniche sono ora essere accoppiate con metodi di Super-risoluzione microscopia chiara e la promessa di rivoluzionare la nostra comprensione delle dinamiche e la complessit&agrave; del meccanismo molecolare della localizzazione di mRNA.

Rendendo il messaggio chiaro: visualizzare la localizzazione di mRNA.

&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;mRNA&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x3068;&#x751F;&#x7406;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x52AA;&#x529B;&#x304C;mRNA&#x3092;&#x53EF;&#x8996;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6539;&#x826F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x8CBB;&#x3084;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x4F7F;&#x3044;&#x3084;&#x3059;&#x3055;&#x3068;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8D85;&#x5FAE;&#x7D30;&#x69CB;&#x9020;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x691C;&#x67FB;&#x3092;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x3092;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6A19;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x3001;&#x30D0;&#x30AF;&#x30C6;&#x30EA;&#x30AA;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;mRNA&#x306E;&#x30BF;&#x30AE;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6A19;&#x8B58;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x3068;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x9769;&#x65B0;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x8D85;&#x89E3;&#x50CF;&#x5149;&#x5B66;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3068;mRNA&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x3055;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x9769;&#x547D;&#x3092;&#x7D04;&#x675F;&#x3057;&#x3066;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; mRNA &#xC804;&#xC9C0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; Mrna&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB86D;&#xACE0; &#xAC1C;&#xC120; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC218;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;, &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xB178;&#xB825; &#xC9C0;&#xCD9C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220;&#xC744; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xB17C;&#xC758; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC99D;&#xAC00; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xC640; &#xC870;&#xC815;&#xB41C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0D0;&#xC9C0;&#xC758; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;, &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC9C0;&#xAE08; &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; ultrastructural &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; mRNA &#xBD84;&#xD3EC;&#xC758; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xD06C;&#xAC8C;, &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; Mrna&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBC29;&#xBC95; &#xC0DD; mRNAs &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC624;&#xD30C;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD0DC;&#xADF8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC788;&#xB294; &#xC13C;&#xC2A4; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C;&#xC640; &#xBCF4;&#xC644; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; microinjection&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB808;&#xC774;&#xBE14;&#xC774; &#xC9C0;&#xC815; &#xB41C; &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C;&#xC758; &#xB3C4;&#xC785; &#xD3EC;&#xD568;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xC220; &#xD601;&#xC2E0;&#xC740; &#xC774;&#xC81C; &#xC288;&#xD37C; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC95; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xC57D;&#xC18D; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; mRNA &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC758; &#xD601;&#xBA85;&#xC744; &#xACB0;&#xD569; &#xB418; &#xACE0;.

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MRNA localizada proporciona la expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas espacial y temporal esencial para el desarrollo celular y la fisiolog&#xED;a. Para explorar los mecanismos involucrados, un esfuerzo considerable se ha invertido en el establecimiento de nuevos y mejores m&#xE9;todos para la visualizaci&#xF3;n de ARNm. En este caso, se discute c&#xF3;mo estas t&#xE9;cnicas han ampliado nuestra comprensi&#xF3;n de la localizaci&#xF3;n intracelular del ARNm en una variedad de organismos. Adem&#xE1;s de una mayor facilidad y especificidad de la detecci&#xF3;n en el tejido fijo, en los m&#xE9;todos de hibridaci&#xF3;n in situ ahora permitir el examen de la distribuci&#xF3;n del mRNA en el nivel ultraestructural con microscop&#xED;a electr&#xF3;nica. M&#xE1;s significativamente, los m&#xE9;todos para seguir el movimiento de ARNm en las c&#xE9;lulas vivas est&#xE1;n ahora en uso generalizado. Estas incluyen la introducci&#xF3;n de las transcripciones etiquetadas por m&#xE9;todos basados &#x200B;&#x200B;en la hibridaci&#xF3;n, microinyecci&#xF3;n usando sondas antisentido y complementarios m&#xE9;todos transg&#xE9;nicos para ARNm end&#xF3;genos de marcado que utilizan componentes de bacteri&#xF3;fagos. Estas innovaciones t&#xE9;cnicas est&#xE1;n siendo, junto con super-resoluci&#xF3;n m&#xE9;todos de microscop&#xED;a de luz y la promesa de revolucionar nuestra comprensi&#xF3;n de la din&#xE1;mica y la complejidad de los mecanismos moleculares de la localizaci&#xF3;n del mRNA.

Timothy T. Weil

Department of Biochemistry

University of Oxford

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Imaging Calcium in Drosophila at Egg Activation

Timothy T. Weil

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University of Oxford

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Imaging Calcium in Drosophila at Egg Activation

Department of Biochemistry