isolation-sensory-neurons-aplysia-californica-for-patch-clamp

Isolation of Sensory Neurons of <em>Aplysia californica</em> for Patch Clamp Recordings of Glutamatergic Currents

The marine gastropod mollusk Aplysia californica has a venerable  history as a model of nervous system function, with particular significance in  studies ...

University of Miami

Damselfish neurofibromatosis (DNF) is a neoplastic disease affecting bicolor damselfish (Stegastes partitus Poey) on Florida reefs. Previous studies have demonstrated high densities of eosinophilic granule containing cells (EGC), the proposed equivalent of mast cells in fishes, in neurofibromas and malignant peripheral nerve sheath tumors (mpnst) in DNF. These lesions are similar to those in the disease neurofibromatosis type 1 (NF1) in humans, which contain large numbers of mast cells. In the present study, experiments were conducted to measure the response of EGC in these tumors as well as in the submucosa of the digestive tract to the mast cell degranulating agent compound 48/80. Degranulation of these cells was visible by light microscopy and characterized by conspicuous swelling of granules and often by the presence of free granules adjacent to the EGC. Degranulation occurred by release of intact granules (diacytosis), as reported in other fishes, rather than by fusion of granules with the cell membrane (exocytosis) as reported in mast cells in mammals. Baseline levels of EGC exhibiting degranulation ranged from 20-26% in the submucosa to 30% in tumors. Within 1-2h of exposure to compound 48/80, significant increases in average levels of degranulation were observed, to 67% in the gut and 72% in tumors. Degranulation was significantly more extensive in the tumors than in the gut. The outermost edges of the tumors contained significantly higher densities of EGC but these cells exhibited lower rates of degranulation than those in the inner regions of tumors. These observations support the hypothesis that the EGC present in neurofibromas and mpnst in DNF are equivalent to the mast cell component in neurofibromas in NF1.

Degranulation of eosinophilic granule cells in neurofibromas and gastrointestinal tract in the bicolor damselfish.

Neurofibromatose demoiselle (DNF) est une maladie n&eacute;oplasique affectant les poissons demoiselles bicolor (Stegastes partitus Poey) sur les r&eacute;cifs de Floride. &Eacute;tudes ant&eacute;rieures ont d&eacute;montr&eacute; les fortes densit&eacute;s de granules &eacute;osinophiles contenant des cellules (EGC), l&#39;&eacute;quivalent propos&eacute; des mastocytes dans les poissons, neurofibromes et tumeurs de gaine de nerf p&eacute;riph&eacute;rique malignes (mpnst) en DNF. Ces l&eacute;sions sont semblables &agrave; ceux de la maladie neurofibromatose de type 1 (NF1) chez l&#39;humain, qui contiennent un grand nombre de mastocytes. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, les exp&eacute;riences ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;es pour mesurer la r&eacute;ponse de l&#39;EGC dans ces tumeurs comme ainsi que dans la sous-muqueuse du tube digestif &agrave; la cellule de m&acirc;t degranulating agent compos&eacute; 48/80. D&eacute;granulation de ces cellules &eacute;tait visible au microscope photonique et caract&eacute;ris&eacute;e par un gonflement bien visible des granules et souvent par la pr&eacute;sence de granules gratuits adjacents &agrave; l&#39;EGC. D&eacute;granulation est produite par la lib&eacute;ration de granules intacts (diacytose), tel que rapport&eacute; chez d&#39;autres poissons, plut&ocirc;t que par la fusion de granules avec la membrane cellulaire (exocytose) comme indiqu&eacute; dans les mastocytes chez les mammif&egrave;res. Niveaux de r&eacute;f&eacute;rence de l&#39;EGC pr&eacute;sentant la d&eacute;granulation varie entre 20 et 26 % dans la sous-muqueuse et 30 % dans les tumeurs. Dans 1-2h d&#39;exposition au compos&eacute; 48/80, niveau moyen de la d&eacute;granulation des augmentations significatives ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es, &agrave; 67 % dans le tube digestif et 72 % dans les tumeurs. D&eacute;granulation &eacute;tait sensiblement plus &eacute;tendue dans les tumeurs que dans le tube digestif. Les bords ext&eacute;rieurs des tumeurs contenaient des densit&eacute;s significativement plus &eacute;lev&eacute;es de l&#39;EGC, mais ces cellules pr&eacute;sentaient des taux plus faibles de d&eacute;granulation que ceux dans les r&eacute;gions int&eacute;rieures des tumeurs. Ces observations confirment l&#39;hypoth&egrave;se que l&#39;EGC pr&eacute;sente dans les neurofibromes et mpnst en DNF sont &eacute;quivalents au composant des mastocytes de neurofibromes en NF1.

D&eacute;granulation des cellules de granules &eacute;osinophiles dans neurofibromes et tractus gastro-intestinal chez la demoiselle bicolor.

Neurofibromatosi Castagnole (DNF) sono una malattia neoplastica che interessano Castagnole bicolore (Stegastes partitus Poey) sulle barriere coralline in Florida. Studi precedenti hanno dimostrato alte densit&agrave; di cellule contenenti granuli eosinofili (EGC), l&#39;equivalente proposto di mastociti in pesci, neurofibromi e i di tumori maligni dei nervi periferici (maligno) in DNF guaina. Queste lesioni sono simili a quelli della malattia neurofibromatosi di tipo 1 (NF1) negli esseri umani, che contengono un gran numero di mastociti. Nel presente studio, sono stati condotti esperimenti per misurare la risposta di EGC in questi tumori come bene come nella sottomucosa del tratto digestivo per il mast cell degranulating agente composto 48/80. Degranulazione di queste cellule &egrave; stata visibile da microscopia chiara e caratterizzata da gonfiore cospicua dei granuli e spesso dalla presenza di granuli gratuiti adiacente l&#39;EGC. Degranulazione si &egrave; verificato dal rilascio di granuli intatti (diacytosis), come riportato in altri pesci, piuttosto che dalla fusione dei granuli con la membrana della cellula (esocitosi) come riportato in mastociti nei mammiferi. Livelli basali di EGC espositrici degranulazione variava da 20-26% nella sottomucosa al 30% nei tumori. Entro 1-2 ore di esposizione a composti 48/80, sono stati osservati aumenti significativi nei livelli medi di degranulazione, al 67% nell&#39;intestino e 72% nei tumori. Degranulazione era significativamente pi&ugrave; ampia in tumori pi&ugrave; nell&#39;intestino. I bordi pi&ugrave; esterno dei tumori contenevano significativamente pi&ugrave; alta densit&agrave; di EGC ma queste cellule esposte tassi pi&ugrave; bassi di degranulazione rispetto a quelle nelle regioni interne di tumori. Queste osservazioni supportano l&#39;ipotesi che l&#39;EGC presenti in neurofibromi e maligno in DNF sono equivalenti al componente mastociti neurofibromi in NF1.

Degranulazione delle cellule granulo eosinofila in neurofibromi e tratto gastrointestinale nelle Castagnole bicolore.

Despite the progress made in our understanding of the biology of neurofibromatosis (NF), the long-term clinical outcome for affected patients has not changed significantly in the past decades, and both NF1 and NF2 are still associated with a significant morbidity and a decreased life span. A number of NF1 and NF2 murine models have been generated to aid in the study of NF tumor biology and in the development of targeted therapies for NF patients. A single, universal pathological classification of the lesions generated in these murine models is essential for the validation of the models, for their analysis and comparison with other models, and for their future effective use in preclinical treatment trials. For the formulation of a pathological classification of these lesions, the WHO classification of human tumors was used as a reference. However, it was not adopted for the classification of the GEM lesions because of some important differences between the human and murine lesions. A novel classification scheme for peripheral nerve sheath tumors in murine models was therefore devised.

Comparative pathology of nerve sheath tumors in mouse models and humans.

Malgr&eacute; les progr&egrave;s r&eacute;alis&eacute;s dans la compr&eacute;hension de la biologie de la neurofibromatose (NF), les r&eacute;sultats cliniques &agrave; long terme pour les patients atteints n&#39;a pas beaucoup chang&eacute; au cours des derni&egrave;res d&eacute;cennies, et la NF1 et NF2 sont toujours associ&eacute;e &agrave; une morbidit&eacute; significative et une dur&eacute;e de vie r&eacute;duite. Un certain nombre de mod&egrave;les murins de NF1 et NF2 ont &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;r&eacute; pour aider dans l&#39;&eacute;tude de la biologie tumorale NF et dans le d&eacute;veloppement de th&eacute;rapies cibl&eacute;es pour les patients de NF. Une classification pathologique unique et universelle des l&eacute;sions g&eacute;n&eacute;r&eacute;es dans ces mod&egrave;les murins est indispensable pour la validation des mod&egrave;les, pour leur analyse et la comparaison avec d&#39;autres mod&egrave;les et pour leur future utilisation efficace dans les essais pr&eacute;cliniques de traitement. Pour l&#39;&eacute;laboration d&#39;une classification pathologique de ces l&eacute;sions, la classification OMS des tumeurs humaines a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e comme r&eacute;f&eacute;rence. Toutefois, il n&#39;a pas &eacute;t&eacute; adopt&eacute;e pour la classification des l&eacute;sions GEM &agrave; cause de certaines diff&eacute;rences importantes entre les l&eacute;sions humaines et murines. Un sch&eacute;ma de classification nouvelle pour les tumeurs de gaine de nerf p&eacute;riph&eacute;rique dans les mod&egrave;les murins a donc &eacute;labor&eacute;.

Pathologie comparative des tumeurs de gaine de nerf dans les mod&egrave;les murins et humains.

Nonostante i progressi nella nostra comprensione della biologia di neurofibromatosi (NF), l&#39;esito clinico a lungo termine per i pazienti non &egrave; cambiata significativamente negli ultimi decenni, e sia NF1 e NF2 sono ancora associate con una significativa morbidit&agrave; e una ridotta durata di vita. Un certo numero di modelli murini di NF1 e NF2 &egrave; stato generato per aiutare nello studio della biologia dei sistemi tumorali NF e nello sviluppo di terapie mirate per i pazienti NF. Un&#39;unica, universale classificazione patologica delle lesioni generate in questi modelli murini &egrave; essenziale per la validazione dei modelli, per la loro analisi e confronto con altri modelli e per il loro futuro uso efficacia in studi preclinici di trattamento. Per la formulazione di una classificazione patologica di queste lesioni, la classificazione del WHO dei tumori umani &egrave; stata usata come riferimento. Tuttavia, non fu adottato per la classificazione delle lesioni GEM a causa di alcune differenze importanti tra le lesioni umane e murine. Pertanto &egrave; stato ideato un sistema di classificazione romanzo per tumori guaina dei nervi periferici in modelli murini.

Patologia comparata dei tumori guaina nervosa in modelli murini e nell&#39;uomo.

Many cnidarians display vivid fluorescence under proper lighting conditions. In general, these colors are due to the presence of fluorescent proteins similar to the green fluorescent protein (GFP) originally isolated from the hydrozoan medusa Aequorea victoria (Cnidaria: Hydrozoa). To optimize the search for new fluorescent proteins (FPs), a technique was developed that allows for the rapid cloning and screening of FP genes without the need for a prior knowledge of gene sequence. Using this method, four new FP genes were cloned, a green from Montastraea cavernosa (Anthozoa: Scleractinia: Faviidae), a cyan from Pocillopora damicornis (Anthozoa: Scleractinia: Pocilloporidae), a cyan from Discosoma striata (Anthozoa: Corallimorpharia), and a red from a second Discosoma species. Two additional green FPs were cloned, one from M. cavernosa and one from its congener Montastraea faveolata, from purified cDNA using PCR primers designed for the first M. cavernosa green FP. Each FP has recognizable amino acid sequence motifs that place them conclusively in the GFP protein family. Mutation of these products using a low-stringency PCR protocol followed by screening of large numbers of bacterial colonies allowed rapid creation of mutants with a variety of characteristics, including changes in color, maturation time, and brightness. An enhanced version of the new red FP, DspR1+, matures faster at 30 degrees C than the commercially available DsRed but matures slower than DsRed at 37 degrees C. One of the M. cavernosa green FPs, McaG2, is highly resistant to photobleaching and has a fluorescence quantum yield approximately twice that of EGFP-1.

Cloning of anthozoan fluorescent protein genes.

Cnidaires nombreux affichent une fluorescence vive sous un bon &eacute;clairage. En g&eacute;n&eacute;ral, ces couleurs sont dues &agrave; la pr&eacute;sence de prot&eacute;ines fluorescentes semblables &agrave; la prot&eacute;ine fluorescente verte (GFP), isol&eacute; &agrave; l&#39;origine de l&#39;Aequorea victoria de m&eacute;duse hydrozoaire (cnidaires : Hydrozoa). Pour optimiser la recherche de nouvelles prot&eacute;ines fluorescentes (FPs), a d&eacute;velopp&eacute; une technique qui permet le clonage rapide et le d&eacute;pistage des g&egrave;nes FP sans la n&eacute;cessit&eacute; d&#39;une connaissance pr&eacute;alable de la s&eacute;quence du g&egrave;ne. En utilisant cette m&eacute;thode, quatre nouveaux g&egrave;nes FP ont &eacute;t&eacute; clon&eacute;s, un vert de Montastraea caverneux (Anthozoa : Scleractinia : Faviidae), un cyan de Pocillopora damicornis (Anthozoa : Scleractinia : Pocilloporidae), un cyan de Duncanopsammia striata (Anthozoa : Corallimorpharia) et un rouge d&#39;une seconde esp&egrave;ce d&#39;Acropora. Deux autres vert FPs ont &eacute;t&eacute; clon&eacute;s, celle de M. cavernosa et celle de son cong&eacute;n&egrave;re Montastraea faveolata, du cDNA purifi&eacute;e &agrave; l&#39;aide d&#39;amorces PCR con&ccedil;u pour le premier cavernosa M. FP vert. Chaque FP a des motifs de s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s reconnaissable qui les exposent de fa&ccedil;on concluante dans la famille de prot&eacute;ine GFP. Mutation de ces produits &agrave; l&#39;aide d&#39;un protocole PCR de basse-rigueur suivi de la projection d&#39;un grand nombre de colonies bact&eacute;riennes a permis la cr&eacute;ation rapide de mutants avec une vari&eacute;t&eacute; de caract&eacute;ristiques, y compris les changements dans la couleur, le temps de maturation et luminosit&eacute;. Une version am&eacute;lior&eacute;e de la FP rouge nouveau, DspR1 +, m&ucirc;rit plus vite &agrave; 30 degr&eacute;s C que la DsRed disponible dans le commerce mais m&ucirc;rit plus lentement que la DsRed &agrave; 37 degr&eacute;s C. Un des M. cavernosa FPs vert, McaG2, est tr&egrave;s r&eacute;sistante au photoblanchiment et a un quantum de fluorescence produisent environ deux fois celle de EGFP-1.

Clonage des g&egrave;nes de prot&eacute;ine fluorescente spp.

Molti cnidari visualizzano vivido fluorescenza in condizioni di illuminazione adeguata. In generale, questi colori sono dovuti alla presenza di proteine fluorescenti simile alla proteina fluorescente verde (GFP) originariamente isolato da victoria hydrozoan medusa Aequorea (Cnidaria: Hydrozoa). Per ottimizzare la ricerca di nuove proteine fluorescenti (FPs), una tecnica &egrave; stata sviluppata che permette la clonazione rapida e lo screening di geni FP senza la necessit&agrave; di una preventiva conoscenza della sequenza genica. Utilizzando questo metodo, quattro nuovi geni FP sono stati clonati, un verde da Montastraea cavernosa (Anthozoa: cylindricus: Faviidae), un&#39; ciano da Pocillopora damicornis (Anthozoa: cylindricus: Pocilloporidae), un&#39; ciano da Discosoma striata (Anthozoa: Corallimorpharia) e un rosso da una seconda specie Discosoma. Due ulteriori verde FPs sono stati clonati, uno da M. cavernosa e uno dal suo congenere Montastraea faveolata, da cDNA purificato usando gli iniettori di PCR ideato per i corpi cavernosi M. primo verde FP. Ogni FP ha motivi di sequenza dell&#39;amminoacido riconoscibile che metterli definitivamente nella famiglia della proteina GFP. Mutazione di questi prodotti utilizzando un protocollo PCR bassa stringenza seguito dalla proiezione di un gran numero di colonie batteriche permise la rapida creazione di mutanti con una variet&agrave; di caratteristiche, compresi i cambiamenti di colore, tempo di maturazione e la luminosit&agrave;. Una versione migliorata di nuovo rosso FP, DspR1 +, fa maturare pi&ugrave; velocemente a 30 gradi C rispetto la DsRed commercialmente disponibile ma matura pi&ugrave; lentamente del DsRed a 37 gradi C. Uno dei corpi cavernosi M. verde FPs, McaG2, &egrave; altamente resistente al photobleaching e ha un quantum di fluorescenza rendimento circa due volte quella di EGFP-1.

Clonazione di geni di proteina fluorescente anthozoan.

Damselfish neurofibromatosis (DNF) is a transmissible disease characterized by peripheral nerve sheath and pigment cell tumors which occurs in bicolor damselfish (Stegastes partitus) on Florida reefs. The damselfish virus-like agent (DVLA) is associated with the development of DNF and contains a 2.4-kb DNA genome which was found at high levels in tumors and tumor-derived cell lines and at lower levels in non-tumor tissues of both spontaneously diseased fish (TF) and fish with experimentally induced tumors (EF). An analysis of transcription patterns revealed up to five DVLA derived RNAs ranging in size from 300 to 1400 bp in these cell types. DNA was the most commonly distributed DVLA component in TF and EF followed by RNA. Prevalence of transcripts varied by tissue type. The smallest transcripts were the most common in all cell types and the most complete patterns, which included the larger transcripts, were observed primarily in tumors. The presence of viral RNAs in addition to DNA in non-tumor tissues suggested these tissues were infected by DVLA and indicated a wide tissue tropism for this agent. The high levels of DVLA nucleic acids found in tumors suggest that replication is occurring there. However, the potential for DVLA replication in other tissues where only a limited range of transcripts were present is not known. The mechanism of tumorigenesis by this agent is unknown. However, the association of the larger transcripts with most tumor tissues and their absence in most non-tumor tissues suggests that these RNAs may be involved in tumor formation.

Patterns of transcription of a virus-like agent in tumor and non-tumor tissues in bicolor damselfish.

Neurofibromatose (DNF) de la demoiselle est une maladie transmissible, caract&eacute;ris&eacute;e par la gaine des nerfs p&eacute;riph&eacute;riques et les tumeurs de cellules pigmentaires qui se produit chez la demoiselle bicolor (Stegastes partitus) sur les r&eacute;cifs de Floride. L&#39;agent de viro&iuml;des demoiselle (DTAC) est associ&eacute;e au d&eacute;veloppement de la DNF et contient un g&eacute;nome d&#39;ADN de 2,4-Ko qui a trouv&eacute; des niveaux &eacute;lev&eacute;s de tumeurs et de lign&eacute;es cellulaires d&eacute;riv&eacute;es de tumeurs et &agrave; des niveaux inf&eacute;rieurs dans les tissus non-tumeur de poissons spontan&eacute;ment malades (TF) et poissons pr&eacute;sentant des tumeurs induites exp&eacute;rimentalement (EF). Une analyse des mod&egrave;les de transcription r&eacute;v&eacute;l&eacute; jusqu&#39;&agrave; cinq DTAC d&eacute;riv&eacute; RNAs allant de 300 &agrave; 1400 bp dans ces types de cellules. L&#39;ADN a &eacute;t&eacute; le plus souvent distributed component DTAC en TF et EF suivi par l&#39;ARN. Pr&eacute;valence des transcriptions varie selon le type de tissu. Les plus petites transcriptions &eacute;taient les plus fr&eacute;quentes dans tous les types de cellules et les patrons plus compl&egrave;tes, qui comprend les transcriptions de plus grandes, ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s principalement dans les tumeurs. La pr&eacute;sence de l&#39;ARN viral en plus de l&#39;ADN dans les tissus tumoraux-non sugg&eacute;r&eacute; ces tissus &eacute;taient infect&eacute;s par le DTAC et indiquent un tropisme tissulaire large pour cet agent. Les niveaux &eacute;lev&eacute;s d&#39;acides nucl&eacute;iques DVLA trouv&eacute;s dans les tumeurs semblent indiquer que la r&eacute;plication se produit l&agrave;. Toutefois, le potentiel de r&eacute;plication DTAC dans d&#39;autres tissus o&ugrave; se trouvaient les seuls un nombre limit&eacute; de transcriptions ne conna&icirc;t pas. On ne conna&icirc;t pas le m&eacute;canisme de la tumorigen&egrave;se par cet agent. Toutefois, l&#39;association des transcriptions plus grandes avec la plupart des tissus de tumeurs et de leur absence dans les tissus plus non-tumeur sugg&egrave;re que ces ARN peut-&ecirc;tre &ecirc;tre impliqu&eacute;s dans la formation de tumeurs.

Modes de transcription d&#39;un agent de type viral dans des tissus tumorales et non tumorales chez demoiselle bicolor.

Neurofibromatosi Castagnole (DNF) sono una malattia trasmissibile caratterizzata dalla guaina dei nervi periferici e tumori delle cellule del pigmento, che si verifica in Castagnole bicolore (Stegastes partitus) sulle barriere coralline in Florida. L&#39;agente di virus-simili di Castagnole (DVLA) &egrave; associata con lo sviluppo di RIT e contiene un genoma di DNA 2,4-kb che &egrave; stato trovato ad alti livelli nei tumori e linee cellulari derivate da tumore e a livelli pi&ugrave; bassi nei tessuti non tumorali di pesci malati spontaneamente (TF) e di pesce con i tumori indotti sperimentalmente (EF). Un&#39;analisi dei modelli di trascrizione ha rivelato fino a cinque DVLA derivato RNAs che variano nel formato da 300 a 1400 bp in questi tipi di cellule. Il DNA era il componente pi&ugrave; comunemente distribuito DVLA in TF ed EF seguita da RNA. Prevalenza delle trascrizioni variata dal tipo di tessuto. Le trascrizioni pi&ugrave; piccole erano pi&ugrave; comuni in tutti i tipi di cellule e i modelli pi&ugrave; completi, che comprendeva le trascrizioni pi&ugrave; grandi, sono stati osservati principalmente nei tumori. La presenza di RNA virale oltre al DNA nei tessuti tumorali non ha suggerito questi tessuti sono stati infettati da DVLA e indicato un trofismo tissutale ampia per questo agente. I livelli elevati di acidi nucleici DVLA trovati nei tumori suggeriscono che la replica &egrave; che si verificano l&igrave;. Tuttavia, non &egrave; noto il potenziale per la replica di DVLA in altri tessuti dove erano presenti solo una gamma limitata di trascrizioni. Il meccanismo della tumorigenesi da questo agente &egrave; sconosciuto. Tuttavia, l&#39;associazione delle trascrizioni pi&ugrave; grande con la maggior parte dei tessuti del tumore e la loro assenza in tessuti pi&ugrave; non-tumore suggerisce che questi RNAs pu&ograve; essere coinvolto nella formazione di tumori.

Modelli della trascrizione di un agente di virus-simili nei tessuti tumorali e non tumorali in Castagnole bicolore.

L&#39;embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio) est devenue un mod&egrave;le important du d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s. Par cons&eacute;quent, ce syst&egrave;me de mod&egrave;le est de trouver utilitaire dans l&#39;enqu&ecirc;te des agents toxiques qui inhibent ou interf&eacute;rer avec, processus de d&eacute;veloppement (p. ex., toxines du d&eacute;veloppement), y compris des compos&eacute;s qui pr&eacute;sentent un int&eacute;r&ecirc;t potentiel pour la sant&eacute; humaine et environnementale, tant que biom&eacute;decine. R&eacute;cemment, ce syst&egrave;me a &eacute;t&eacute; appliqu&eacute; de plus en plus &agrave; l&#39;&eacute;tude des toxines microbiennes et plus pr&eacute;cis&eacute;ment, comme mod&egrave;le animal aquatique, a &eacute;t&eacute; utilis&eacute; pour &eacute;tudier les toxines de microalgues marines et d&#39;eau douce, y compris ceux class&eacute;s parmi les soi-disant &laquo; harmful algal blooms &raquo; (tricolore). Nous avons d&eacute;velopp&eacute; ce syst&egrave;me d&#39;identification et de caract&eacute;risation des toxines de cyanobact&eacute;ries (c.-&agrave;-d. &laquo; algue bleu - vert &raquo;) isol&eacute;s &agrave; partir des Everglades de Floride et d&#39;autres sources d&#39;eau douce dans le sud et le centre de la Floride. Nous r&eacute;sumons ici l&#39;utilisation de ce syst&egrave;me car il a &eacute;t&eacute; g&eacute;n&eacute;ralement appliqu&eacute; &agrave; l&#39;&eacute;tude des toxines de microalgues marines et d&#39;eau douce et illustrer cet utilitaire que nous avons appliqu&eacute;e &agrave; la d&eacute;tection, guid&eacute;e par bioessai fractionnement et caract&eacute;risation ult&eacute;rieure des toxines du d&eacute;veloppement de cyanobact&eacute;ries d&#39;eau douce.

L&#39;embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio) comme un syst&egrave;me mod&egrave;le pour l&#39;identification et la caract&eacute;risation des toxines du d&eacute;veloppement de microalgues marines et d&#39;eau douce.

L&#39;embrione di zebrafish (Danio rerio) &egrave; emerso come un importante modello di sviluppo vertebrato. Come tale, questo modello del sistema &egrave; trovare utilit&agrave; nelle indagini di agenti tossici che inibiscono o altrimenti interferire con, processi di sviluppo (cio&egrave; lo sviluppo delle tossine), compresi i composti che hanno rilevanza potenziale sia di salute umana e ambientale, nonch&eacute; biomedicina. Recentemente, questo sistema &egrave; stato applicato sempre pi&ugrave; allo studio delle tossine microbiche e pi&ugrave; in particolare, come un modello animale acquatico, &egrave; stato impiegato per indagare le tossine da microalghe marine e d&#39;acqua dolce, compresi quelli classificati tra le cosiddette &quot;fioriture algali nocive&quot; (HABs). Abbiamo sviluppato questo sistema di identificazione e caratterizzazione di tossine da cianobatteri (cio&egrave; &quot;alghe blu - verdi&quot;) isolati da Everglades della Florida e di altre fonti d&#39;acqua dolce nel sud e la Florida centrale. Qui esaminiamo l&#39;uso di questo sistema &egrave; stato applicato generalmente alle indagini di tossine da microalghe marine e d&#39;acqua dolce, e illustrare questa utility come abbiamo applicato alla rilevazione, analisi biologica-guidate frazionamento e successiva caratterizzazione di tossine dello sviluppo da cianobatteri d&#39;acqua dolce.

L&#39;embrione di zebrafish (Danio rerio) come sistema di modello per identificazione e caratterizzazione delle tossine dello sviluppo da microalghe marine e d&#39;acqua dolce.

The zebrafish (Danio rerio) embryo has emerged as an important model of vertebrate development. As such, this model system is finding utility in the investigation of toxic agents that inhibit, or otherwise interfere with, developmental processes (i.e. developmental toxins), including compounds that have potential relevance to both human and environmental health, as well as biomedicine. Recently, this system has been applied increasingly to the study of microbial toxins, and more specifically, as an aquatic animal model, has been employed to investigate toxins from marine and freshwater microalgae, including those classified among the so-called "harmful algal blooms" (HABs). We have developed this system for identification and characterization of toxins from cyanobacteria (i.e. "blue-green algae") isolated from the Florida Everglades and other freshwater sources in South and Central Florida. Here we review the use of this system as it has been applied generally to the investigation of toxins from marine and freshwater microalgae, and illustrate this utility as we have applied it to the detection, bioassay-guided fractionation and subsequent characterization of developmental toxins from freshwater cyanobacteria.

The zebrafish (Danio rerio) embryo as a model system for identification and characterization of developmental toxins from marine and freshwater microalgae.

Mod&egrave;les animaux aquatiques des maladies humaines.

Modelli animali acquatici delle malattie umane.

Aquatic animal models of human disease.

Over the last three decades, the California sea hare, Aplysia californica, has played an increasingly important role as a model organism in the neurosciences. Since 1995, the National Resource for Aplysia has supported a growing research community by providing a consistent supply of laboratory-reared individuals of known age, reproductive status, and environmental history. The purpose of the present study was to resolve the key biological factors necessary for successful culture of large numbers of high quality larval Aplysia. Data from a sequence of five experiments demonstrated that algal diet, food concentration, and veliger density significantly affected growth, attainment of metamorphic competency, and survival of Aplysia larvae. The highest growth and survival were achieved with a mixed algal diet of 1:1 Isochrysis sp (TISO) and Chaetoceros muelleri (CHGRA) at a total concentration of 250 x 10(3) cells/mL and a larval density of 0.5-1.0 per mL. Rapid growth was always correlated with faster attainment of developmental milestones and increased survival, indicating that the more rapidly growing larvae were healthier. Trials conducted with our improved protocol resulted in larval growth rates of >14 microm/day, which yielded metamorphically competent animals within 21 days with survival rates in excess of 90%. These data indicate the important effects of biotic factors on the critical larval growth period in the laboratory and show the advantages of developing optimized protocols for culture of such marine invertebrates.

Larval growth, development, and survival of laboratory-reared Aplysia californica: effects of diet and veliger density.

Au cours des trois derni&egrave;res d&eacute;cennies, le li&egrave;vre de mer de Californie, Aplysia californica, a jou&eacute; un r&ocirc;le de plus en plus important comme un organisme mod&egrave;le dans les neurosciences. Depuis 1995, la ressource nationale pour Aplysia soutient une communaut&eacute; croissante de la recherche en fournissant un approvisionnement constant d&#39;individus &eacute;lev&eacute;s en laboratoire d&#39;&acirc;ge connu, statut reproductif et histoire de l&#39;environnement. La pr&eacute;sente &eacute;tude visait &agrave; r&eacute;soudre les principaux facteurs biologiques n&eacute;cessaires pour une culture r&eacute;ussie d&#39;un grand nombre de haute qualit&eacute; Aplysia larvaire. Donn&eacute;es &agrave; partir d&#39;une s&eacute;quence de cinq exp&eacute;riences ont d&eacute;montr&eacute; cette r&eacute;alisation diet, concentration dans la nourriture et la croissance affect&eacute;e de fa&ccedil;on significative la densit&eacute; v&eacute;lig&egrave;re, algue de comp&eacute;tence m&eacute;tamorphique et la survie des larves Aplysia. La croissance et la survie plus &eacute;lev&eacute;s ont &eacute;t&eacute; obtenus avec un r&eacute;gime mixte d&#39;algues de 1:1 Isochrysis sp (TISO) et Chaetoceros muelleri (CHGRA) &agrave; une concentration totale de 250 x 10 3 cellules/mL et une densit&eacute; de larve de 0,5 &agrave; 1,0 par mL. Croissance rapide &eacute;tait toujours corr&eacute;l&eacute;e avec une r&eacute;alisation plus rapide des &eacute;tapes importantes d&eacute;veloppementales et augmentation de la survie, ce qui indique que les larves plus rapidement croissantes &eacute;taient en meilleure sant&eacute;s. Essais r&eacute;alis&eacute;s avec notre meilleur protocole entra&icirc;ne des taux de croissance des larves de &gt; 14 microm/jour, ce qui a donn&eacute; les animaux ils comp&eacute;tentes dans les 21 jours avec le taux de survie sup&eacute;rieurs &agrave; 90 %. Ces donn&eacute;es indiquent les effets importants des facteurs biotiques sur la p&eacute;riode critique de la croissance larvaire en laboratoire et montrent les avantages du d&eacute;veloppement des protocoles optimis&eacute;s pour la culture de ces invert&eacute;br&eacute;s marins.

La croissance des larves, le d&eacute;veloppement et la survie des &eacute;lev&eacute;s en laboratoire Aplysia californica : effets de la densit&eacute; de di&egrave;te et v&eacute;lig&egrave;re.

Negli ultimi tre decenni, la lepre di mare California, Aplysia californica, ha giocato un ruolo sempre pi&ugrave; importante come un organismo modello nelle neuroscienze. Dal 1995, la risorsa nazionale per Aplysia ha sostenuto una crescente comunit&agrave; di ricerca fornendo un rifornimento costante di individui allevati in laboratorio di et&agrave; noto, lo stato riproduttivo e la storia ambientale. Lo scopo del presente studio &egrave; stato quello di risolvere i principali fattori biologici necessari per coltura riuscita di un gran numero di alta qualit&agrave; larvale Aplysia. Dati da una sequenza di cinque esperimenti hanno dimostrato che algale dieta, concentrazione di cibo e la crescita di densit&agrave; significativamente influenzato veliger, raggiungimento di competenza metamorfica e sopravvivenza delle larve di Aplysia. La pi&ugrave; alta crescita e sopravvivenza sono stati raggiunti con una dieta mista algale di 1:1 Isochrysis sp (TISO) e periodicamente muelleri (CHGRA) a una concentrazione totale di 250 x 10 cellule/mL e una densit&agrave; larvale di 0,5-1,0 / mL. Rapida crescita &egrave; stata sempre correlata con pi&ugrave; veloce raggiungimento delle pietre miliari dello sviluppo e sopravvivenza aumentata, che indica che la pi&ugrave; rapida crescite larve erano pi&ugrave; sane. Studi condotti con il nostro migliore protocollo ha portato i tassi di crescita delle larve di &amp;gt; 14 microm/giorno, che ha reso gli animali metamorphically competenti entro 21 giorni, con tassi di sopravvivenza superiori al 90%. Questi dati indicano gli importanti effetti di fattori biotici sul periodo critico di sviluppo larvale in laboratorio e mostrano i vantaggi di sviluppo protocolli ottimizzati per la cultura di questi invertebrati marini.

Crescita delle larve, sviluppo e sopravvivenza di allevati in laboratorio Aplysia californica: effetti della dieta e veliger densit&agrave;.

Les cyanobact&eacute;ries produisent une grande diversit&eacute; de compos&eacute;s toxiques ou autrement bioactifs qui constituent des menaces croissantes pour la sant&eacute; humaine et l&#39;environnementale. Nous avons utilis&eacute; l&#39;embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio), comme un mod&egrave;le de d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s, d&#39;enqu&ecirc;ter sur l&#39;inhibition des voies de d&eacute;veloppement (p. ex. la toxicit&eacute; d&eacute;veloppementale) par les toxines cyanobact&eacute;riennes, cylindrospermopsine (CYN), ainsi que des extraits de diff&eacute;rents isolats de Cylindrospermopsis raciborskii et Aphanizomenon ovalisporum. CYN &eacute;tait toxique seulement lorsqu&#39;il est inject&eacute; directement dans des embryons, mais non par immersion directe &agrave; des doses allant jusqu&#39;&agrave; 50mug/ml. Malgr&eacute; la d&eacute;pendance de dose de toxicit&eacute; observ&eacute;e apr&egrave;s l&#39;injection de CYN, aucune tendance coh&eacute;rente des anomalies du d&eacute;veloppement ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es, ce qui sugg&egrave;re que les effets toxiques de CYN peuvent cibler pas des voies de d&eacute;veloppement sp&eacute;cifiques. En revanche, une immersion directe d&#39;embryons dans tous les extraits a entra&icirc;n&eacute; une mortalit&eacute; accrue et de dysfonctionnements du d&eacute;veloppement, coh&eacute;rentes et reproductibles. Fait int&eacute;ressant, il y n&#39;avait aucune corr&eacute;lation entre la toxicit&eacute; observ&eacute;e pour ces extraits avec la pr&eacute;sence de CYN ou toxicit&eacute; rapport&eacute;e ant&eacute;rieurement pour ces souches. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que CYN est mortel pour les embryons de poisson-z&egrave;bre, mais n&#39;inhibe apparemment aucun cheminement sp&eacute;cifique, tandis que les autres m&eacute;tabolites apparents de raciborskii c. et a. ovalisporum semblent de fa&ccedil;on reproductible inhibent le d&eacute;veloppement dans le mod&egrave;le de poisson-z&egrave;bre. Enqu&ecirc;te continue de ces m&eacute;tabolites apparents, inconnus est n&eacute;cessaire.

Toxicit&eacute; des cylindrospermopsine et d&#39;autres m&eacute;tabolites apparents de Cylindrospermopsis raciborskii et ovalisporum de l&#39;Aphanizomenon, &agrave; l&#39;embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio).

Cyanobacteria produce a diverse array of toxic or otherwise bioactive compounds that pose growing threats to human and environmental health. We utilized the zebrafish (Danio rerio) embryo, as a model of vertebrate development, to investigate the inhibition of development pathways (i.e. developmental toxicity) by the cyanobacterial toxin, cylindrospermopsin (CYN), as well as extracts from various isolates of Cylindrospermopsis raciborskii and Aphanizomenon ovalisporum. CYN was toxic only when injected directly into embryos, but not by direct immersion at doses up to 50mug/ml. Despite the dose dependency of toxicity observed following injection of CYN, no consistent patterns of developmental defects were observed, suggesting that toxic effects of CYN may not target specific developmental pathways. In contrast, direct immersion of embryos in all of the extracts resulted in both increased mortality and reproducible, consistent, developmental dysfunctions. Interestingly, there was no correlation of developmental toxicity observed for these extracts with the presence of CYN or with previously reported toxicity for these strains. These results suggest that CYN is lethal to zebrafish embryos, but apparently inhibits no specific developmental pathways, whereas other apparent metabolites from C. raciborskii and A. ovalisporum seem to reproducibly inhibit development in the zebrafish model. Continued investigation of these apparent, unknown metabolites is needed.

Toxicity of cylindrospermopsin, and other apparent metabolites from Cylindrospermopsis raciborskii and Aphanizomenon ovalisporum, to the zebrafish (Danio rerio) embryo.

Cianobatteri producono una vasta gamma di composti tossici o altrimenti bioattivi che pongono le crescenti minacce per la salute umana e ambientale. Abbiamo utilizzato l&#39;embrione di zebrafish (Danio rerio), come un modello di sviluppo vertebrato, per indagare l&#39;inibizione dei percorsi di sviluppo (cio&egrave; tossicit&agrave;) dalla tossina cianobatterica, cylindrospermopsin (CYN), cos&igrave; come estratti da vari isolati di Cylindrospermopsis raciborskii e Aphanizomenon ovalisporum. CYN era tossico solo quando viene iniettato direttamente negli embrioni, ma non da immersione diretta a dosi fino a 50mug/ml. Nonostante la dipendenza della dose di tossicit&agrave; osservati nell&#39;iniezione di CYN, nessun pattern coerente dei difetti di sviluppo sono stati osservati, suggerendo che gli effetti tossici di CYN non possono target specifici percorsi di sviluppo. In contrasto, immersione diretta degli embrioni in tutti gli estratti causato aumento della mortalit&agrave; sia riproducibile, coerente, dello sviluppo di disfunzioni. &Egrave; interessante notare, non c&#39;era alcuna correlazione di tossicit&agrave; osservate per questi estratti con la presenza di CYN o precedentemente riportata sulla tossicit&agrave; di questi ceppi. Questi risultati suggeriscono che CYN &egrave; letale per gli embrioni di zebrafish, ma apparentemente non inibisce percorsi specifici dello sviluppo, mentre altri metaboliti apparenti da raciborskii c. e a. ovalisporum sembrano riproducibile inibire lo sviluppo del modello zebrafish. &Egrave; necessario continua investigazione di questi metaboliti apparenti, sconosciuti.

Tossicit&agrave; di cylindrospermopsin e altri metaboliti apparenti da Cylindrospermopsis raciborskii e Aphanizomenon ovalisporum, per l&#39;embrione di zebrafish (Danio rerio).

Aquatic animal models of human disease: selected papers and recommendations from the 4th Conference.

Des mod&egrave;les animaux aquatiques des maladies humaines : documents et recommandations tir&eacute;es de la 4e Conf&eacute;rence.

Modelli animali acquatici delle malattie umane: documenti e raccomandazioni selezionati dalla quarta conferenza.

D-Aspartate (D-Asp) can substitute for L-glutamate (L-Glu) at excitatory Glu receptors, and occurs as free D-Asp in the mammalian brain. D-Asp electrophysiological responses were studied as a potential correlate of aging in the California sea hare, Aplysia californica. Whole cell voltage- and current clamp measurements were made from primary neuron cultures of the pleural ganglion (PVC) and buccal ganglion S cluster (BSC) in 3 egg cohorts at sexual maturity and senescence. D-Asp activated an inward current at the hyperpolarized voltage of -70 mV, where molluscan NMDA receptors open free of constitutive block by Mg(2+). Half of the cells responded to both D-Asp and L-Glu while the remainder responded only to D-Asp or L-Glu, suggesting that D-Asp activated non-Glu channels in a subpopulation of these cells. The frequency of D-Asp-induced currents and their density were significantly decreased in senescent PVC cells but not in senescent BSC cells. These changes in sensory neurons of the tail predict functional deficits that may contribute to an overall decline in reflexive movement in aged Aplysia.

Changes in D-aspartate ion currents in the Aplysia nervous system with aging.

D-Aspartate (D-Asp) peut remplacer L-glutamate (Glu-L) au niveau des r&eacute;cepteurs excitateurs Glu et se produit comme gratuit D-Asp dans le cerveau des mammif&egrave;res. D-Asp r&eacute;ponses &eacute;lectrophysiologiques ont &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;s comme indicateur potentiel de vieillissement chez le li&egrave;vre de mer de Californie, Aplysia californica. Tension de cellules enti&egrave;res - et mesures de pince de courant ont &eacute;t&eacute; faites de cultures primaires de neurones du ganglion pleurale (PVC) et cluster de ganglion vestibulaire S (BSC) en 3 cohortes d&#39;oeuf &agrave; la s&eacute;nescence et la maturit&eacute; sexuelle. D-Asp activ&eacute; un courant entrant &agrave; la tension hyperpolaris&eacute;e de -70 mV, o&ugrave; les r&eacute;cepteurs NMDA mollusques ouverts sans bloc constitutif de Mg(2+). La moiti&eacute; des cellules a r&eacute;pondu &agrave; la fois D-Asp et Glu-L tandis que le reste a r&eacute;pondu qu&#39;aux D-Asp ou L-Glu, ce qui laisse supposer que le D-Asp activ&eacute; canaux non-Glu dans une sous-population de ces cellules. La fr&eacute;quence des courants induits par D-Asp et leur densit&eacute; ont consid&eacute;rablement diminu&eacute; dans les cellules s&eacute;nescentes de PVC mais pas dans les cellules s&eacute;nescentes de BSC. Ces changements dans les neurones sensoriels de la queue pr&eacute;disent des d&eacute;ficits fonctionnels qui peuvent contribuer &agrave; une diminution globale de mouvement r&eacute;flexif de l&#39;aplysie &acirc;g&eacute;.

Changements dans les courants ioniques D-aspartate dans le syst&egrave;me nerveux Aplysia avec le vieillissement.

D-aspartato (D-Asp) pu&ograve; sostituire L-glutammato (L-Glu) presso eccitatori Glu recettori e si verifica come libero D-Asp nel cervello dei mammiferi. D-Asp risposte elettrofisiologiche sono state studiate come un correlato potenziale di invecchiamento nella lepre di mare California, Aplysia californica. Cella intera tensione - e le misure di corrente morsetto sono state fatte da culture primarie neurone del ganglio pleurico (PVC) e cluster di ganglio vestibolare S (BSC) in 3 coorti di uovo a senescenza e maturit&agrave; sessuale. D-Asp attivato un perfezionamento attivo corrente alla tensione hyperpolarized di -70 mV, dove cotti i recettori NMDA aperti privo di blocco costitutivo di Mg(2+). Met&agrave; delle cellule ha risposto sia D-Asp e L-Glu, mentre il resto ha risposto solo a D-Asp o L-Glu, suggerendo che il D-Asp attivato canali non-Glu in una sottopopolazione di queste cellule. La frequenza delle correnti D-Asp-indotta e la loro densit&agrave; erano significativamente diminuiti in celle senescenti in PVC, ma non in celle senescenti BSC. Questi cambiamenti nei neuroni sensoriali della coda prevedono deficit funzionali che possono contribuire a un generale declino nel movimento riflessivo in Aplysia invecchiato.

Cambiamenti nelle correnti dello ione D-aspartato Aplysia del sistema nervoso con l&#39;invecchiamento.

Cyanobacteria are recognized producers of a wide array of toxic or otherwise bioactive secondary metabolites. The present study utilized the zebrafish (Danio rerio) embryo as an aquatic animal model of vertebrate development to identify, purify and characterize lipophilic inhibitors of development (i.e., developmental toxins) from an isolate of the freshwater cyanobacterial species, Aphanizomenon ovalisporum.Bioassay-guided fractionation led to the purification, and subsequent chemical characterization, of an apparent homologous series of isotactic polymethoxy-1-alkenes (1-6), including three congeners (4-6) previously identified from the strain, and two variants previously identified from other species (2 and 3), as well as one apparently novel member of the series (1). Five of the PMAs in the series (1-5) were purified in sufficient quantity for comparative toxicological characterization, and toxicity in the zebrafish embryo model was found to generally correlate with relative chain length and/or methoxylation. Moreover, exposure of embryos to a combination of variants indicates an apparent synergistic interaction between the congeners. Although PMAs have been identified previously in cyanobacteria, this is the first report of their apparent toxicity. These results, along with the previously reported presence of the PMAs from several cyanobacterial species, suggest a possibly widespread distribution of the PMAs as toxic secondary metabolites and warrants further chemical and toxicological investigation.

Polymethoxy-1-alkenes from Aphanizomenon ovalisporum inhibit vertebrate development in the zebrafish (Danio rerio) embryo model.

Les cyanobact&eacute;ries sont des producteurs reconnus d&#39;une vaste gamme de m&eacute;tabolites secondaires bioactifs toxiques ou non. La pr&eacute;sente &eacute;tude a utilis&eacute; l&#39;embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio) comme mod&egrave;le animal aquatique du d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s pour identifier, purifier et caract&eacute;riser les lipophiles inhibiteurs de d&eacute;veloppement (c.-&agrave;-d. les toxines du d&eacute;veloppement) d&#39;une souche de l&#39;esp&egrave;ce de cyanobact&eacute;ries d&#39;eau douce, Aphanizomenon ovalisporum.Fractionnement guid&eacute;e par essai biologique conduit &agrave; la purification et ult&eacute;rieure caract&eacute;risation chimique, d&#39;une s&eacute;rie homologue apparente d&#39;isotactique polymethoxy-1-alc&egrave;nes (1-6), y compris trois cong&eacute;n&egrave;res (4-6) pr&eacute;c&eacute;demment identifi&eacute;s de la souche et deux variantes pr&eacute;c&eacute;demment identifi&eacute;s d&#39;autres esp&egrave;ces (2 et 3), ainsi qu&#39;un membre apparemment roman de la s&eacute;rie (1). Cinq de l&#39;EGR dans la s&eacute;rie (1-5) ont &eacute;t&eacute; purifi&eacute;es en quantit&eacute; suffisante pour la caract&eacute;risation toxicologique comparative, et toxicit&eacute; dans le mod&egrave;le d&#39;embryon de poisson z&egrave;bre s&#39;est av&eacute;r&eacute;e g&eacute;n&eacute;ralement mettre en corr&eacute;lation avec la longueur de la cha&icirc;ne relative et/ou m&eacute;thoxylation. En outre, l&#39;exposition des embryons &agrave; un ensemble de variantes indique une apparente interaction synergique entre les cong&eacute;n&egrave;res. Bien que l&#39;EGR ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es pr&eacute;c&eacute;demment chez les cyanobact&eacute;ries, il s&#39;agit du premier rapport de leur toxicit&eacute; apparente. Ces r&eacute;sultats, ainsi que la pr&eacute;sence a d&eacute;j&agrave; &eacute;t&eacute; indiqu&eacute;e de l&#39;EGR de plusieurs esp&egrave;ces de cyanobact&eacute;ries, sugg&egrave;rent une distribution &eacute;ventuellement r&eacute;pandue de l&#39;EGR sous forme de m&eacute;tabolites secondaires toxiques et garantit plus d&#39;investigations chimiques et toxicologiques.

Alc&egrave;nes-1-Polymethoxy d&#39;ovalisporum de l&#39;Aphanizomenon inhibent le d&eacute;veloppement des vert&eacute;br&eacute;s dans le mod&egrave;le embryon de poisson z&egrave;bre (Danio rerio).

Cianobatteri sono riconosciuti produttori di una vasta gamma di metaboliti secondari bioattivi tossiche o altrimenti. Il presente studio utilizzate l&#39;embrione di zebrafish (Danio rerio) come un modello animale acquatico di vertebrato sviluppo per identificare, purificare e caratterizzare lipofilici inibitori dello sviluppo (cio&egrave;, dello sviluppo tossine) da un isolato della specie d&#39;acqua dolce cianobatterica, Aphanizomenon ovalisporum.Frazionamento analisi biologica-guidato ha condotto per la purificazione e la successiva caratterizzazione chimica, di un&#39;apparente serie omologa di isotattico polymethoxy-1-alcheni (1-6), tra cui tre congeneri (4-6), precedentemente identificati dal ceppo e due varianti precedentemente identificati da altre specie (2 e 3), cos&igrave; come un membro apparentemente romanzo della serie (1). Cinque di svolgere nella serie (1-5) sono stati purificati in quantit&agrave; sufficiente per la caratterizzazione tossicologica comparativa e tossicit&agrave; del modello di embrione di zebrafish &egrave; stata trovata per correlare in genere con lunghezza relativa catena e/o metossilazione. Inoltre, l&#39;esposizione degli embrioni a una combinazione di varianti indica un&#39;apparente interazione sinergica tra i congeneri. Sebbene svolgere sono state identificate in precedenza nei cianobatteri, questo &egrave; il primo rapporto della loro tossicit&agrave; apparente. Questi risultati, insieme con la presenza precedentemente segnalato di svolgere da diverse specie di cianobatterica suggeriscono una possibilmente diffusa distribuzione di svolgere come metaboliti secondari tossici e merita ulteriori indagini chimiche e tossicologiche.

Michael C. Schmale

Division of Marine Biology and Fisheries,
Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences,
Division of Marine Biology and Fisheries, Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences

University of Miami

Isolation of Sensory Neurons of Aplysia californica for Patch Clamp Recordings of Glutamatergic Currents

Michael C. Schmale

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Division of Marine Biology and Fisheries,Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences,Division of Marine Biology and Fisheries, Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences

University of Miami

Isolation of Sensory Neurons of Aplysia californica for Patch Clamp Recordings of Glutamatergic Currents

Division of Marine Biology and Fisheries,
Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences,
Division of Marine Biology and Fisheries, Rosenstiel School of Marine and Atmospheric Sciences