需要订阅 JoVE 才能查看此. 登录或开始免费试用。
Method Article
This video demonstrates a model to study the development of myointimal hyperplasia after venous interposition surgery in rats.
Bypass grafting is an established treatment method for coronary artery disease. Graft patency continues to be the Achilles heel of saphenous vein grafts. Research models for bypass graft failure are essential for a better understanding of pathobiological and pathophysiological processes during graft patency loss. Large animal models, such as pigs or sheep, resemble human anatomical structures but require special facilities and equipment. This video describes a rat vein interposition model to investigate vein graft patency loss. Rats are inexpensive and easy to handle. Compared to mouse models, the convenient size of rats permits better operability and enables a sufficient amount of material to be obtained for further diverse analysis. In brief, the inferior epigastric vein of a donor rat is harvested and used to replace a segment of the femoral artery. Anastomosis is conducted via single stitches and sealed with fibrin glue. Graft patency can be monitored non-invasively using duplex sonography. Myointimal hyperplasia, which is the main cause for graft patency loss, develops progressively over time and can be calculated from histological cross sections.
冠状动脉疾病及其并发症是世界范围内死亡的主要原因之一。当前的治疗策略集中在重新建立血流,或者通过扩张变窄容器或通过创建旁路。使用自体静脉冠状动脉旁路移植术(CABG)于1968年首次描述,并不断得到完善,多年来。除了左前的血运重建降支动脉,隐静脉导管是最常用的1。然而,移植通畅仍然隐静脉移植(SVG)的致命弱点。手术一年后,通畅率85%,下降幅度为61%,十年后2,3。因此揭幕SVG通畅损失的病理生理机制和原因的一项重要任务。
本视频演示了大鼠静脉插入模型,探讨静脉移植物损失。这种方法的总体目标是发掘潜在的病理生物学并在疾病进展和-physiological流程,制定药物或治疗方法测试一个合适的模型。通过移植的腹壁浅静脉进入动脉系统,这种模式密切模仿冠状动脉旁路移植术的临床设置。手术创伤,局部缺血,和壁应力是病理血管变化重要触发器和在所述的模型模仿。
不同型号和种类都可以探讨静脉移植通畅的损失。大动物模型,如猪4,羊5,狗6和猴7,类似于人类血管和解剖结构,从而使复杂的治疗策略,如旁路支架或新的外科技术,待测试8。然而,需要特殊的房屋,设备,人员和工作人员。此外,高的成本和手术过程中需要额外的麻醉师阻碍其更广泛的应用。钐所有的动物,包括老鼠,很容易处理,不需要特殊的住房,并有管理的成本。相比于小鼠模型9,10,大鼠模型具有较好的可操作性的成果优势,从而减少可变性。老鼠是生理和基因更类似于人类比老鼠11,12。此外,大多数的野生型小鼠仅开发有限myointima 13,其使小鼠模型容易发生II型误差。主小鼠静脉,如下腔静脉的组织学,只由几个细胞层的并呈现早期评估困难13。另一个缺点是可用于接枝恢复之后的后续分析的组织的量小。
在此视频描述的模型是可重复的,价格低廉,且容易执行,并且它可以快速而可靠地建立。它特别适合用于评估昂贵的实验治疗剂,如病毒载体用于基因疗法,以经济的方式。
动物遵照指南实验动物的原则,通过实验动物资源研究所编制和美国国立卫生研究院公布收到的人文关怀。所有动物方案是由主管地方当局("献给金额UND GESUNDHEIT Verbraucherschutz,Hansestadt(办公室健康与消费者保护)汉堡")的批准。
1.动物护理
2.捐助者大鼠的制备
3.收件人鼠的制备
4.多普勒超声
注:使用超声duxplex可视化血流非侵入性大鼠14。
5.组织病理学
注:嘉实和染色与马松染色的容器形态分析15。
6.生物发光成像(BLI)
注:移植术后通过测定生物发光信号1跟踪随着时间的推移在体内6。
大鼠静脉插入模型适用于研究myointima增生静脉移植失败的发展。动物从手术中恢复良好,显示出出色的身体条件后的操作。 图1示出了关键的手术步骤。沿着LINEA inguinalis切开皮肤后,上腹部浅静脉和股动脉被确定( 图1A)。应仔细进行接枝的收获,而不会损坏接枝( 图1B),因为这可能导致早期移植物衰竭和通畅损失。在受体动物( 图1C)定位?...
本视频演示了大鼠静脉插入模型,探讨静脉移植的损失,并允许潜在的病理过程的探索和新的药物和治疗方案的测试。
麻醉的手术过程中的一个关键方面。建议连续吸入性麻醉系统,因为这是一种安全,简便的方法,尤其是在长时间的操作。这可以在训练阶段期间,当操作的时间超过1小时,是非常重要的。
相对于手术过程,重要的是不向收获及植入...
The authors have nothing to disclose.
作者感谢克里斯蒂安Pahrmann她的技术援助。这项研究是由德国妇儿基金会资助Herzforschung(F / 28/14)。 DW是由来自国际社会旅游奖心脏和肺移植的支持。 TD从否则-克朗 - 费森尤斯基金会(2012_EKES.04)收到否则克朗卓越助学金。 SS收到研究经费来自德意志研究联合会(DFG; DE2133 / 2-1,TD和SCHR992 / 3- 1,SCHR992 / 4-1,SS)。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Rat LEW/Crl | Charles River | Stock number 004 | |
Rat LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1 luc)11Jmsk | Institute of laboratory animals, Kyoto University, Japan | NBPR rat number 0299 | http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/ |
PFA 4% | Electron Microscopy Sciences | #157135S | 20% |
hair clipper | WAHL | 8786-451A ARCO SE | |
Forene | AbbVie | PZN 10182054 Art.Nr.: B506 | Isoflurane |
microsurgical clamp | Fine Science Tools | 18055-04 | Micro-Serrefine - 4 mm |
clamp applicator | Fine Science Tools | 18056-14 | |
hair removal creme | Rufin cosmetic | 27618 | |
Povidone-Iodine | Betadine Purdue Pharma | NDC:67618-152 | |
10-0 Ethilon suture | Ethicon | 2814G | |
5-0 prolene suture | Ethicon | EH7229H | |
Rimadyl | Pfizer | 400684.00.00 | Carprofen |
Novaminsulfon | Ratiopharm | PZN 03530402 | Metamizole |
Heparin | Rotexmedica | PZN: 3862340 | 25.000 I.E./ ml |
Xylocain 1% | AstraZeneca | PZN: 1137907 | Lidocain |
EVICEL | J&J Med.Ethicon Biosur | PZN 7349697 Art. Nr.:EVK01DE | fibrin glue |
NaCl 0.9% | B.Braun | PZN 06063042 Art. Nr.: 3570160 | |
Vevo 770 high-resolution in vivo micro-imaging system | VisualSonics | duplex sonography | |
Ecogel 100 ultrasound gel | Eco-med | 30GB | |
D-Luciferin Firefly, potassium salt | Biosynth | L-8220 | |
PBS pH 7.4 | Gibco | 10010023 | |
Xenogen Ivis 200 | Perkin Elmer | bioluminescence imaging | |
Weigerts iron hematoxylin Kit | Merck | 1.15973.0002 | Trichrome staining |
Resorcine-Fuchsine Weigert | Waldeck | 2.00E-30 | Trichrome staining |
Acid Fuchsin | Sigma-Aldrich | F8129-25G | Trichrome staining |
Ponceau S solution | Serva Electrophoresis | 33427 | Trichrome staining |
Azophloxin | Waldeck | 1B-103 | Trichrome staining |
Molybdatophosphoric acid hydrate | Merck | 1.00532.0100 | Trichrome staining |
Orange G | Waldeck | 1B-221 | Trichrome staining |
Light Green SF | Waldeck | 1B-211 | Trichrome staining |
Vitro-Clud | Langenbrinck | 04-0001 | |
Glacial Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 537020 | |
37% HCl | Sigma-Aldrich | H1758 | |
Xylene | Th. Geyer | 3410 | |
Paraffin | Leica biosystems | REF 39602004 | |
Ethanol absolute | Th. Geyer | 2246 | |
Ethanol 96% | Th. Geyer | 2295 | |
Ethanol 70% | Th. Geyer | 2270 | |
Slide Rack | Ted Pella | 21057 | |
Staining dish | Ted Pella | 21075 | |
Bepanthen Eye and Nose ointment | Bayer | 1578675 | Eye ointment |
请求许可使用此 JoVE 文章的文本或图形
请求许可This article has been published
Video Coming Soon
版权所属 © 2025 MyJoVE 公司版权所有,本公司不涉及任何医疗业务和医疗服务。