火坦解毒通络汤对 H 型高血压大鼠的降压作用及机制

摘要

在这里，我们提出了一种诱导 H 型高血压的方案，并评估了胃内给药的火坦解毒通络汤 （HTJDTLD） 的抗高血压效果。在 H 型高血压大鼠中，HTJDTLD 具有有效的降压作用，可能与抑制内质网 （ER） 应激诱导的细胞凋亡通路激活有关。

摘要

H 型高血压是一种以血浆同型半胱氨酸 （Hcy） 水平升高为特征的特殊高血压，已成为全球面临的重大公共卫生挑战。本研究探讨了常用于治疗血管狭窄的高效中药方剂火坦解毒通络汤 （HTJDTLD） 的降压作用和潜在机制。蛋氨酸诱导大鼠 H 型高血压，HTJDTLD 经胃内给药。然后，通过无创大鼠尾部测压法测量大鼠尾动脉的收缩压和舒张压。通过苏木精-伊红 （HE） 染色进行主动脉的组织学评估。采用酶联免疫吸附试验 （ELISA） 检测 Hcy 水平，定量逆转录酶聚合酶链反应 （qRT-PCR） 和蛋白质印迹法测定葡萄糖调节蛋白 78 （GRP78） 、肿瘤坏死因子 （TNF） 受体相关因子 2 （TRAF2） 、c-Jun N 末端激酶 （JNK） 和 caspase-3 的 mRNA 和蛋白水平。结果显示，蛋氨酸治疗后 HTJDTLD 可显著降低血压，减轻组织病理学病变，降低 Hcy 水平。此外，HTJDTLD 显著抑制 GRP78 、 JNK 、 TRAF2 和 caspase 3 的基因和蛋白表达，这些基因主要参与内质网 （ER） 应激诱导的细胞凋亡途径。总体而言，结果表明 HTJDTLD 对 H 型高血压大鼠具有有效的降压作用，并揭示了与抑制 ER 应激诱导的细胞凋亡通路激活相关的降压机制。

引言

高血压是心脏病发作、中风和肾功能衰竭的主要风险因素，已成为影响全球 10 亿人的重大公共卫生挑战¹。同型半胱氨酸 （Hcy） 是一种含硫醇基团的氨基酸，是蛋氨酸代谢的重要代谢中介。血浆 Hcy 水平升高的高血压定义为 H 型高血压，这可能是中风等心脑血管疾病发生和复发的重要危险因素 ^2,3。最近的研究报告指出，H 型高血压共存可能会加重心脑血管疾病的副作用⁴。值得注意的是，中国 75% 的 H 型高血压患者患有原发性高血压，严重影响生活质量⁵。目前，H型高血压的治疗主要包括西医。但可能会引起一定的不良反应和依从性差，不能再满足H型高血压综合管理的需要。

中医 （TCM） 在中国是一种独特的资源，已有 2,000 多年的历史。由于西医对高血压控制的需求未得到满足，临床医生已经开始考虑中医在预防和治疗 H 型高血压中的潜在作用⁶。火坛解毒通络汤 （HTJDTLD） 是由邓悦教授根据其广泛的临床专业知识配制的中药配方⁷.经过 20 多年的临床应用，HTJDTLD 在治疗心脑血管疾病方面显示出显著的疗效

研究方案

所有动物实验均经长春中医药大学机构动物护理和使用委员会 （IACUC） 批准。材料表列出了这些材料。

1. 动物和治疗

1. 将总共 50 只成年自发性高血压大鼠 （SHR） （雄性，50 天龄） 随机分为 5 组，包括对照组 （CON）、蛋氨酸 （MET）、MET + HTJDTLD + 马来酸依那普利 （EM）、MET + EM 和 MET + HTJDTLD 组。
   注意：实验大鼠被安置在受控环境中，旨在确保它们的舒适和福祉。该设施的温控室设置为恒定 22 °C，相对湿度为 40-60%。笼子由透明聚碳酸酯制成，为每只大鼠提供了充足的自由活动空间。照明计划遵循 12 小时的光照/暗周期，模拟自然日光条件。为大鼠提供足够的食物和水。
2. 为大鼠提供以下饮食 28 天。
   1. 给 MET 组大鼠 3% 蛋氨酸饮食 28 天以诱导 H 型高血压。
   2. 当大鼠除 3% 蛋氨酸饮食外，以 1 mL/kg 的剂量用 HTJDTLD （1.633 g/mL） 和 EM （0.2 mg/mL） 灌胃给予 MET + HTJDTLD + EM 组中的大鼠。
   3. 除了 3% 蛋氨酸饮食外，还通过管饲法分别用 HTJDTLD 或 EM 给 MET +EM 和 MET + HTJDTLD 组中的大鼠施用。
      注：HTJDTLD 由 毛

讨论

高血压是最常见的心血管疾病之一，影响三分之一的成年人口，并增加中风、冠心病以及心肾衰竭的风险⁸。H 型高血压是一种特殊类型的高血压，是指原发性高血压和同型半胱氨酸水平升高同时发生，多年来引起了广泛关注⁹。近年来，口服 EM 联合降压药在控制血压和降低血液 Hcy 水平方面显示出更好的疗效，但仍存在许多禁忌症、副作用、耐药性以及头痛、头.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B