标准加入的方法

1.制备试剂

1. 100 ppm 标准 Al^{3 +}溶液: 溶解 0.9151 g 硝酸铝 (Al (没有₃)₃•9H₂O) 用去离子水 1 L 容量瓶。
2. 1 M 醋酸 （2 %wt / 卷） 的 8HQ 解决方案: 将 2.0 g 8-羟基喹啉添加到 100 毫升的容量瓶。
3. 小心地 5.74 毫升冰醋酸加入 100 毫升烧瓶中，然后稀释至马克用去离子水。这允许 8-羟基喹啉，溶解在水相中。
4. 1 M NH₄⁺/NH₃缓冲区 (pH ~ 8): 将 20 g 的醋酸铵 (NH₄OAc) 添加到一瓶 100 毫升。
5. 到这瓶 100 毫升，添加 7 毫升 30%氢氧化铵和稀释至马克用去离子水。这有助于中和酸的 8HQ 解决方案结合时中。
6. 其他试剂包括无水硫酸钠 (Na₂等₄) 和氯仿 （规格等级）。

2.样品的制备

1. 溶液 1.00 ppm 标准 Al^{3 +} 1.0 毫升的 100 ppm 股票 Al^{3 +}解决方案与吸管加入 100 毫升的容量瓶。
2. 地点位于发动机罩的大环站在环上的六 125 毫升分液漏斗。他们应该被标记的含义如下: BL，0，1，2，3，4.确保所有玻璃器皿的认真清理，很难获得定量的结果，如果小珠子的氯仿贴到墙上的玻璃器皿。
3. 将 25.00 毫升的未知 Al^{3 +}解决方案添加到标记为 0，1，2，3，5 分液漏斗 & 4。在此示例中，未知的浓度是 0.110 ppm。
4. 添加 0、 1.00、 2.00、 3.00、 4.00 mL 1.00 ppm 标准 Al^{3 +}溶液，分别与 1 毫升吸管 5 漏斗。
5. 准备一张空白标记 BL.分液漏斗中加入 25.00 mL 的蒸馏水
6. 将 1.0 毫升的移液管 8-羟基喹啉溶液添加到每个六的解决方案。
7. 添加到每个六解决方案 3.0 mL 的缓冲溶液，用移液管。
8. 提取两次用氯仿，大力震动 1 分钟每次 10 毫升每个解决方案。记得偶尔发泄分液漏斗，以释放压力。(注: 良好的萃取只发生时大量的液-液接触阶段之间)。
9. 收集在干净、 干燥的 100 mL 标记烧杯中氯仿。氯仿有密度接近 1.5 g/c m³，所以它是更低的层。完整的萃取后的水相应该没有一丝的黄色左。
10. 他们各自的 25 毫升容量瓶转移合并的氯仿提取物每个烧杯和稀释至标记用氯仿。请确保将瓶塞放置在每个容量瓶，以防止任何氯仿蒸发。
11. 添加 ~ 1 g 的无水硫酸钠 (Na₂等₄) 到每个六个 100 毫升烧杯从步 2.9。硫酸钠帮助去除水中氯仿提取物可能存在的任何踪迹。
12. 将解决方案传送回他们受人尊敬的烧杯。旋流仔细便于脱水的任何样品中的水。
13. 醒酒氯仿提取进去的石英荧光计单元格 (注: 氯仿会溶解塑料聚苯乙烯单元格)。

3.选择激发波长

通过运行扫描，确定激发和发射波长然后只是读取和记录这些值的所有样品的荧光强度。激发和发射性能带宽预设在 5 毫微米。复合体吸收在近紫外，所以激发波长应该约 385 nm。最初，监视荧光在 500 毫微米发射分支中的。

1. 在荧光计，验证两个内部和外部冷却风扇在荧光计前通电氙弧灯开启。氙弧灯变得非常热，并且需要连续冷却。
2. 在高电压 (HV) 转至 400 V 的光电倍增管探测器。
3. 打开两个百叶窗。
4. 打开计算机上的数据采集程序，在这里它是"100nmFluorScan"。
5. 地方"样品 + 2 毫升补充说:"到要用来确定最佳的激发和发射波长的石英单元格 (2) 解决方案。
6. 与发射波长最初设在 500 毫微米，从 335 435 毫微米 2 nm/s 的扫描速度与运行励磁扫描。
7. 从产生的荧光情节，确定最大荧光激发波长(EXλ_max)，并将仪器设置为该值。

4.选择发射波长

1. 设置荧光计发射波长为 450 毫微米。
2. 设置发射波长范围从 450-550 nm 运行 100 nm 扫描。
3. 要开始扫描，请单击按荧光计的前面板上的"开始"按钮的同时在程序上的"开始审判"按钮。
4. 从产生的荧光情节，确定最大荧光发射波长 (EMλ_max)，并将仪器设置为该值 (图 2)。

图 2。确定最佳 EXλ 的_最大和 EMλ_max 波长。

5.测量样品的荧光

1. 所有的样品都是在 EMλ_最大和 EXλ_最大运行的。扫描不需要为每个样品，但只是在这些条件下的荧光值。开始与最稀的样本 （空白），地方在石英的单元格，然后在文书中。在实验室的笔记本上记录的荧光强度。
2. 对于所有其他样本重复。
3. 请记住，必须从每个解决方案之前创建校准图表相对强度减去空白的相对强度。

6.创建标准加入情节

1. 情节的荧光强度与 Al^{3 +}添加微克。
2. 确定生成的情节，最小二乘值并记录斜率和截距。
3. 确定的 Al^{3 +}中方程 µ g 的 Al^{3 +} ，未知样本 µ g =-b/m
4. 了解未知的铝有 25.0 mL 添加到每个样本的容量，确定未知中铝的浓度。