柱层析法

1.硅胶浆

1. 硅凝胶倒入锥形瓶。包装材料的重量应该是大约 50 x 被分离的样品。如果被分离的化合物有很相似的R_f值，它可能需要使用更大数额的每个样品，在此示例中是二氧化硅。
   1. 白炭黑在锥形瓶，因为 50 毫克的样品 （45 毫克的芴酮和四苯基卟啉 5mg） 被隔离的地方 10 克。
2. 添加溶剂体系 (正己烷/二氯甲烷，70%: 30%) 到锥形瓶含硅凝胶。添加足够的溶剂，以确保所有的硅胶是很好的溶剂。硅不会解散，但混合物将是明显的视觉时溶剂化。一旦已添加溶剂漩涡锥形瓶，以确保所有的白炭黑是很好的溶剂。

2.柱的制备

1. 选择适当大小的列。通常列应填充硅胶浆的一半左右。被净化的较大样本、 较大所需的列。
2. 插头用一块玻璃羊毛栏的底部。使用长杆，确保羊毛牢牢嵌入在上方旋塞阀栏的底部。
3. 一旦羊毛坚定地到位，在玻璃羊毛适用一层薄薄的沙子。
   注:如果列配备玻璃熔块以上旋塞阀，应省略这一步。
4. 夹紧中环站的垂直位置的列。
5. 轻轻地用一个漏斗，倒入列对硅胶在准备好的浆料。您可能需要添加额外的溶剂要的料浆输送从锥形瓶到的列。使用吸管，洗下来任何列的双方坚持的硅胶。
   1. 随着硅凝胶沉淀在列中，轻轻地敲列的两侧以确保硅胶包紧紧，排除了任何的气泡。
6. 打开旋塞阀和允许溶剂排入清洁的锥形瓶才匆匆硅胶和溶剂的前面见面。硅凝胶，绝不应干燥过程完成之前。
7. 放一层薄薄的沙子硅胶 (图 1)。使用吸管，洗下来可能会有一些粘列的任何砂。
8. 直到沙子是干的但不是到硅胶层流失任何额外的溶剂。

图 1。柱层析的适当设置实验前样品的加法。

3.向列添加示例

1. 溶解样品溶剂可能 （使用相同的溶剂，被用来制造硅胶浆） 的最小金额。
2. 轻轻地用移液管，将示例添加到列的顶部。
3. 一旦样品已应用于列的顶部，打开旋塞阀和允许溶剂排出的砂层但不是硅胶层。使用非常少量的溶剂冲洗任何可能有紧紧抓住列的两侧的样品。排水砂层以及通过这额外的溶剂。

4.洗脱样品通过列

1. 使用吸管，非常温柔地以不打扰的砂层的方式添加 4 — — 5 毫升的溶剂。
2. 在列的顶部放置一个漏斗，慢慢地，轻轻地用溶剂填充列的其余部分。
3. 打开旋塞阀和允许溶剂排出的列。
4. 开始收集流动相，因为它从列流入试管。
   1. 试管应放在试管架以连续的方式。
5. 列的顶部添加额外的溶剂，直到所有所需的化合物有从柱上洗脱。

5.回收成分

1. 如果有色化合物，，我想他们可以直观地标识。然而，如果化合物都是无色的他们将不得不使用 ulta 可见 (UV) 光 （如果化合物含有共轭） 来标识或与适当的污点。可以用薄层色谱法验证化合物的纯度。
2. 确定包含所需的 ④ 的试管。
3. 合并所有包含所需的孤立的 ④ 进预先称量的圆底 (RB) 烧瓶的分数。为每个化合物做这。
4. 通过将 RB 瓶放置在旋转蒸发器蒸发掉的溶剂。
5. 一旦所有的溶剂已被删除，权衡与干燥后的产品 RB 和减去初始重量的 RB 来获得收益。