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无菌组织采集

Overview

来源: 凯斯图尔特, RVT, RLATG, CMAR;瓦莱丽. 施罗德, RVT, RLATG。圣母大学, 在

在 1959年, W.M.S. 和 r.l 托里·伯奇在他们的著作《人类实验技术原理》中介绍了3的 R 和 #39. 3 R 和 #39; s 是在研究中使用动物的替换、减少和提炼。 1 使用源自研究动物的细胞系和组织培养是一种替代技术, 因为它允许许多实验在体外进行 . 在细胞和组织培养中使用的收集组织和器官需要无菌技术来避免组织的污染。无菌收获对组织的蛋白质和 RNA 分析以及代谢剖面也有必要。本论文将讨论大鼠和小鼠的无菌器官收获过程.

Procedure

1. 准备

  1. 常用的材料包括: 在一个喷瓶中有70% 酒精、不育20-25 针、两包无菌的虹膜剪刀和拇指钳 (一个用于皮肤, 一个用于内部组织), 纸巾, 无菌外科手套, 无菌培养皿, 无菌培养基, 无菌生理盐水.
  2. 引擎盖风扇应在程序前至少运行15分钟, 并应使用70% 酒精进行消毒.
  3. 如果引擎盖装有紫外线杀菌灯, 则可用于进一步对工作表面进行消毒.
  4. 清洁手套是为遮光罩的设置而穿戴的。设备被装入引擎盖按他们将使用的顺序, 通常从左到右。这使得工作可以在单向工作流中进行, 防止脏项目污染干净的项目。这将保护所收获的组织或器官免受动物尸体的意外污染.
  5. 不育的仪器包打开, 尊重包装的无菌内部。为了保持不育, 包被放置在桌子的中心, 每个皮瓣是打开不越过无菌场或内部的包。菌的人打开第一个顶部皮瓣, 反映它远离他/她。侧襟翼然后打开使用两只手-一个在每个皮瓣-和拉他们远离包。最后的皮瓣, 然后拉向打开包的人, 小心避免触摸到包的内表面.
  6. 将纸巾放入引擎盖, 然后用酒精浸湿它们.

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Application and Summary

尽管许多无菌器官收获的程序与标准的尸检相似, 但使用无菌技术对于实验程序来说是必不可少的, 包括从切除的组织。如果不保持不育, 可以对组织中的 RNA 进行分析或收集.

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References
  1. Russel, W.M.S. and Burch, R.L. 1959. The Principles of Humane Experimental Technique. Methuen: London.
  2. Petucci, C., Rojas-Betancourt, S., and Gardell, S.J. 2012. Comparison of tissue harvest protocols for the quantitation of acylcarnitines in mouse heart and liver by mass spectrometry. Metabolomics. 8.784-792.
  3. Parkinson, C.M., O'Brien, A., Albers, T.M., Simon, M.A., Clifford, C.B., and Pritchett-Corning, K.R. 2011. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. 54. e2966. 1-7.
Tags
Sterile Tissue HarvestAseptic MethodLab AnimalsResearch ExperimentsSterile TechniqueLaminar Flow HoodSterilizationSterile EquipmentNon sterile TechnicianSterile Technician

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Overview

0:57

Prepping for Sterility: Space, Instruments, and Personnel

2:44

Harvesting Abdominal Organs

6:34

Harvesting Thoracic Organs

8:33

Harvesting Brain

10:19

Applications

11:52

Summary

此集合中的视频:

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